紫葉酢漿草組培快繁方法
2023-06-06 02:40:41
專利名稱：紫葉酢漿草組培快繁方法
技術領域：
本發明涉及一種組織培養快速繁殖技術，尤其是指涉及紫葉酢漿草組培快繁方法。
背景技術：
紫葉酢漿草(Oxalis regnellii)是酢漿草科酢漿草屬多年生草本，原產於熱帶美洲，花為淡紫色，葉呈三角形且長年紫紅色，具有很大的觀賞價值。它的繁殖一般都採用切分塊莖的方法，但這樣的繁殖速度慢，遠遠不能滿足市場的需要。利用組培技術可以建立起一套快速簡便的工廠化繁殖方法，此方法增殖速度快、增值倍數高且又操作簡便，適用於大規模工廠化生產，具有很大的經濟價值。
發明內容
本發明目在於提供一種紫葉酢漿草組培快繁方法，用組培技術建立起一套快速簡便的工廠化繁殖方法，以適用於大規模工廠化生產。
本發明目的通過下述方案實現一種紫葉酢漿草組培快繁方法，步驟依序為第一，採集外植體、消毒、建立無菌苗；第二，建立一套試管苗的快速繁殖循環體系；第三，煉苗移栽，其中，所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段後接種在初代培養基上，把葉片切成小塊後接種到同樣培養基上，在培養溫度為22-26℃，光照時間12-14小時/天，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養28-30天後就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快速繁殖循環體系以葉柄為起始材料，誘導分化出小芽，再進行芽增殖培養，最後從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，餘下的芽團切分成單株後進行生根培養。
本發明的優越性在於用組培技術建立起了一套快速簡便的工廠化繁殖方法，具有繁殖、增殖快，比例可達每45天增殖45-60倍，生根率高，可達100％。適用於大規模工廠化生產。
具體實施例方式
1，外植體消毒和無菌苗的建立取紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，用洗潔精清洗後用流水衝洗乾淨，用75％酒精浸洗3-5秒，無菌水衝洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，無菌水衝洗4-6次。將葉柄切成0.5cm左右小段後接種在初代培養基上，初代培養基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L上，把葉片切成小塊後接種到同樣培養基上。拓培養溫度為22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養28-30天後就分化出無菌的再生植株。
2 試管苗的快速增值紫葉酢漿草的增殖是以葉柄為起始材料，誘導分化出小芽，再進行芽增殖培養，最後從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，餘下的芽團切分成單株後進行生根培養，增殖比例可達每45天增殖45-60倍，這樣就建立了一完整的快速繁殖循環體系。
(1)葉柄誘導分化從芽團上切下高5cm以上的葉柄並切分為長0.5cm左右小段，接到誘導分化培養基Ms+NAA0.5-0.7mg/L上培養28天，分化出的芽高1cm左右，分化率達93.3％。培養條件為溫度22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux。
(2)芽增殖培養把剛分化出的芽轉移到芽增殖培養基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L上，培養12-15天，可獲得均勻一致的苗高達5cm左右，芽個數增殖3-5倍。培養條件同上。每個芽團上切下2-3根葉柄，約15-20小段，進行繼續繁殖。
(3)生根培養餘下的芽團按鱗球切分為單株接到生根培養基Ms+NAA0-0.05mg/L上進行生根培養，切分比例為1∶3-5，培養7-9天後開始生根，生根率達100％，21天後根系發達，鱗球變大，芽也變粗壯，苗高達6-8cm。
3 煉苗移栽當苗在生根培養基上培養21天後，將瓶口打開，煉苗3-5天後移栽到帶營養土容器中，營養土成分為農田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。移栽初期，即前7天，保持環境溫度在15-30℃，溼度50％以上，移栽的成活率達100％。
權利要求
1.一種紫葉酢漿草組培快繁方法，步驟依序為第一，採集外植體、消毒、建立無菌苗；第二，建立一套試管苗的快速繁殖循環體系；第三，煉苗移栽，其中，所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段後接種在初代培養基上，把葉片切成小塊後接種到同樣培養基上，在培養溫度為22-26℃，光照時間12-14小時/天，光照強度為2000-3000Lux的條件下培養28-30天後就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快速繁殖循環體系以葉柄為起始材料，誘導分化出小芽，再進行芽增殖培養，最後從芽團上切下一部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，餘下的芽團切分成單株後進行生根培養。
2.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述初代培養基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
3.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述對外植體的消毒用洗潔精清洗後用流水衝洗乾淨，用75％酒精浸洗3-5秒，無菌水衝洗2-3遍，再用0.1％HgCl2溶液浸泡3min，無菌水衝洗4-6次。
4.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述葉柄誘導分化是從芽團上切下高5cm以上的葉柄並切分為長0.5cm左右小段，接到誘導分化培養基中(Ms+NAA0.5-0.7mg/L)培養28天，分化出的芽高1cm左右，分化率達93.3％。培養條件為溫度22-26℃，光照時間12-14h/d，光照強度為2000-3000Lux。
5.根據權利要求4所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述誘導分化培養基為Ms+NAA0.5-0.7mg/L。
6.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述的芽增殖培養是把剛分化出的芽轉移到芽增殖培養基上培養12-15天，獲得均勻一致的苗高達5cm左右，芽個數增殖3-5倍；培養條件相同，從每個芽團上切下2-3根葉柄，15-20小段，進行繼續繁殖。
7.根據權利要求6所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述芽增殖培養基Ms+6-BA0.4-0.6mg/L。
8.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述生根培養是將餘下的芽團按鱗球切分為單株接到生根培養基上進行生根培養，切分比例為1∶3-5，培養7-9天後開始生根，21天後根系發達，生根培養基為Ms+NAA0-0.05mg/L。
9.根據權利要求1所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述煉苗移栽系當苗在生根培養基上培養21天後，將瓶口打開，煉苗3-5天後，移栽到帶營養土容器中，移栽前7天，保持環境溫度在15-30℃，溼度50％以上。
10.根據權利要求10所述的紫葉酢漿草組培快繁方法，其特徵在於所述營養土成分為農田土∶泥碳土∶砂子＝4∶3∶3。
全文摘要
本發明涉及一種紫葉酢漿草組培快繁方法。本發明步驟依序為採集外植體、消毒、建立無菌苗；建立一套試管苗的快速繁殖循環體系；煉苗移栽。所述外植體取自紫葉酢漿草新抽出的葉片與葉柄，將葉柄切成0.5cm左右小段後接種在初代培養基上，把葉片切成小塊後接種到同樣培養基上，在培養溫度為22－26℃，光照時間12－14小時/天，光照強度為2000－3000Lux的條件下，培養28－30天後就分化出無菌的再生植株；所述試管苗的快繁循環體系以葉柄為起始材料，誘導分化出小芽，再進行芽增殖培養，最後從芽團上切下部分芽的葉柄作為繁殖起始材料，餘下的芽團切分成單株後進行生根培養。
文檔編號A01H4/00GK1586170SQ200410053518
公開日2005年3月2日 申請日期2004年8月6日 優先權日2004年8月6日
發明者宋學孟, 龐瑞華, 王凌健, 樓文阜, 董舉文, 何燕紅 申請人:上海光兆植物速生技術有限公司