萬年蒿提取物在製備抗肝損傷藥物中的應用的製作方法

2023-06-26 06:13:01 2

專利名稱：萬年蒿提取物在製備抗肝損傷藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及朝藥萬年蒿的提取物，具體涉及從朝藥萬年蒿中分離得到的抗肝損傷的單體化合物。
背景技術：
肝損傷是多種肝臟疾病共有的一種特點突出的病理狀態，嚴重威脅著人類健康。 各種有害因素諸如藥物、病毒、酒精、生物等可能致使肝功能有不同程度的損害，從而使肝臟的解毒、排洩功能及貯備和再生能力降低，肝血流量減少，代謝負荷加重，從而發生內環境紊亂，肝細胞壞死和凋亡，進而造成肝損傷。各種有害因素導致的肝損傷主要有藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷、免疫性肝損傷等類型，全世界有數十億人曾經或正忍受著肝損傷的痛苦。以病毒性肝損傷病因中的B型肝炎病毒為例，全世界有20億人感染過B型肝炎病毒(HBV)，其中3. 78億人轉化成慢性感染，0. 5-1. 2億人死於肝硬化、肝衰竭、肝癌等。藥物性肝損傷、酒精性肝損傷患者也同樣不計其數。肝損傷的長期存在往往會導致肝纖維化，是進而誘發肝硬化，肝功能衰竭，甚至肝癌的重要始動因素。因此預防和治療肝細胞損傷是臨床上肝病治療的重要環節之一，是抑制肝纖維化、肝壞死、脂肪肝、膽汁鬱積、 肝硬化以及肝癌等疾病發生和發展的基礎。治療和預防肝損傷，在臨床上沒有特別好的辦法。因此目前臨床上對療效明確、副作用低的抗肝損傷藥物的需求十分強烈。雖然現有技術中有一些中草藥的提取物具有抗肝損傷的作用，但從中草藥中提取得到具有治療作用的化合物單體相比於提取物至少具有以下幾個方面的優勢單體化合物作為活性成分更加容易控制質量，特別是對於注射劑而言， 使用單體化合物作為活性成分更加安全；提取物中有效成分含量通常較少，單體化合物作為活性成分時其來源並不僅僅局限於提取。因此，如何從中草藥中提取得到具有活性成分的單體一直是現代中藥領域具有挑戰性的研究。

發明內容
本發明的目的是製備一種具有治療肝損傷的藥物。為了實現本發明的目的，本發明採用如下的技術方案本發明涉及化合物1-3在製備治療肝損傷藥物中的應用，其中所述的化合物1是 2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0- β -D葡萄糖苷； 化合物3是6-甲氧基-槲皮萬壽菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。在本發明的一個優選實施方式中，所述的藥物包括化合物1-3中的一種、兩種或三種作為活性成分。在本發明的一個實施方式中，所述的化合物1-3是從萬年蒿提取分離或者通過化學合成的方法或者通過從其它中草藥中提取分離得到。在本發明的一個優選實施方式中，所述的藥物是將所述的化合物以及藥學上可接受的藥物製成藥學上可接受的劑型，所述的劑型包括但不限於丸劑、片劑、膠囊劑、口服液、散劑、注射劑。在本發明的一個優選實施方式中，本發明的藥物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝損傷的活性成分。在本發明的一個優選實施方式中，本發明的藥物還包括其它西藥活性成分。在本發明的一個優選實施方式中，本發明的所述的肝損傷是藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷和/或免疫性肝損傷。本發明得到的藥物的活性成分是從萬年蒿提取得到，其來源廣泛，對肝損傷具有顯著的療效。
具體實施例方式1.單體化合物的分離取1500g萬年蒿中加入水浸泡池後加熱池，過濾得到濾液I，殘渣中加水再加熱 lh，得到濾液II，合併濾液I和II，得到萬年蒿水提液。預處理過的大孔吸附樹脂柱中加入萬年蒿水提液，依次用蒸餾水、50%乙醇、95%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，濃縮後冷凍乾燥至幹，將其中的萬年蒿50%乙醇洗脫物用水溶解，依次用二氯甲烷、乙酸乙酯萃取， 得到二氯甲烷萃取物，乙酸乙酯萃取物及剩餘水溶解部分。取其中剩餘水溶解部分適量上樣於預處理的反相矽膠柱中，甲醇-水系統梯度洗脫。以薄層層析原理為依據觀察、判斷， 25%和50%甲醇洗脫液洗脫部分分別上樣於反相矽膠柱層析柱、葡聚糖凝膠柱(kphadex LH-20)層析柱，分別得到單體化合物1和2。通過波譜解析和文獻對照，確定其化學結構為分別為2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷，和苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷。取乙酸乙酯萃取物適量，用甲醇溶解、過濾後溼法上樣於反相矽膠層析柱，甲醇-水系統洗脫，其中一部分上樣於葡聚糖凝膠(S^hadex LH-20)層析柱，甲醇-水系統反覆洗脫，得到少量樣品，再經製備型高效液相色譜法確定流動相為甲醇-水5 5的混合液，保持柱溫為室溫，檢測波長為2Mnm，流速為lml/min，進樣量為300uL/次，得到一個單體化合物3，通過波譜解析和文獻對照，確定其化學結構為6-甲氧基-槲皮萬壽菊素-7-0-β-D-葡萄糖苷。化合物1，2，3的波譜數據分別如下化合物1 :2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷1H-WR (300MHz，PYRIDINE-d5) δ ppm :14. 30 (1H，s，2-0H)，6. 68(lH，d，J = 2. OOHz, H-3)，6· 34 (1H, d, J = 2. OOHz, H_5)，5. 72 (1H, d, J = 6. 72，m, H-I' )，3. 67 (3H, s, OCH3)， 2. 50 (3H, s, COCH3).13C-NMR (75MHz, CD3OD) δ ppm :107. 89 (C-1) , 163. 27 (C-2) ,96. 40 (C-3), 164. 08 (C-4), 91. 43 (C-5), 166. 23 (C-6), 99. 98 (C-l ' ),73. 31 (C-2 ' ), 76. 49 (C-3 ')， 69. 92(C-4 ' ) ,77. 04 (C-5 ' ) ,61. 06 (C-6 ' ), 203. 49 (C = 0), 31. 81 (COCH3), 54. 92 (-OCH3).化合物2 :苯乙酮-4-0- β -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz,，D2O) 7. 78 (2Η, d, J = 8. 32Hz，H-2，6)，7. 00 (2H, d, J = 8. 34Hz, H-3, 5)，2. 42 (3H, s, COCH3)，5. 06 (1H, d, J = 6. 36Hz, H-I' )，3. 21-3. 82 (m-sugar-H)。13C-NMR (75MHz，，D2O) 107. 7 (C-I) , 131. 11 (C-2, 6) , 116. 12 (C-3, 5)，160. 92(C-4) ,99. 48 (C-l ' ), 72. 90 (C-2 ' ) ,75. 58 (C-3 ' ) ,69. 46 (C-4 ')， 76. 29 (C-5' ) ,60. 61 (C_6' ),202. 51 (C = 0),26. 03 (COCH3)。化合物3 :6-甲氧基-槲皮萬壽菊素-7-0- ^ -D-葡萄糖苷1H-WrGOOMHz, (CD3)2CO) 8 ppm 12. 42 (1H, s，5-0H)，6. 47 (1H，s，8-H)，3. 75 (3H， s，6-0CH3)，7. 89(lH，d，J = 2. OlHz, 2' -H), 6. 82(lH，d，J = 8. 40Hz,5' -H)，7. 46(lH，dd， J = 2. 01,8. 40Hz，6' -H), 5. 12 (1H, d, J = 7. 26Hz, H-I " )，3. 24-3. 75 (m, sugar-H).13C-NMR (75MHz, DMS0_d6) 8 ppm :145. 26 (C-2)，133. 43 (C-3)，178. 11 (C-4)， 156. 72 (C-5)，131. 70 (C_6)，157. 95 (C_7)，94. 22 (C_8)，152. 84 (C_9)，104. 76 (C-IO)， 122. 06 (C-l ' ), 116. 64 (C-2 ' ), 151. 98 (C-3 ' ),148. 91 (C-4 ' ), 115. 65 (C-5 ')， 121. 67(C-6 ' ),101. 31 (C-l 「 ),74.55 (C-2 「 ), 76. 96 (C-3 「 ),70. 41 (C-4 「)， 78. 02 (C-5 〃 )，61.45(C-6" ), 60. 43 (-OCH3).化合物1，2，3的結構式分別如下
權利要求
1.化合物1-3在製備治療肝損傷藥物中的應用，其中所述的化合物1是2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-0-β -D-葡萄糖苷；化合物2是苯乙酮-4-0-β -D葡萄糖苷；化合物3是 6-甲氧基-槲皮萬壽菊素-7-0- β -D-葡萄糖苷。
2.根據權利要求1所述的應用，所述的藥物包括化合物1-3中的一種、兩種或三種作為活性成分。
3.根據權利要求1所述的應用，所述的化合物1-3是從萬年蒿提取分離或者通過化學合成的方法或者通過從其它中草藥中提取分離得到。
4.根據權利要求1-3任意一項所述的應用，所述的藥物是將所述的化合物以及藥學上可接受的藥物製成藥學上可接受的劑型。
5.根據權利要求4所述的應用，所述的劑型選自丸劑、片劑、膠囊劑、口服液、散劑、注射劑中的一種。
6.根據權利要求1所述的應用，所述的藥物不包括除化合物1-3以外的其它抗肝損傷的活性成分。
7.根據權利要求1所述的應用，所述的藥物還包括其它西藥活性成分。
8.根據權利要求1所述的應用，其特徵在於所述的肝損傷是藥物性肝損傷、病毒性肝損傷、酒精性肝損傷和/或免疫性肝損傷。
全文摘要
本發明公開了萬年蒿提取分離得到的2-羥基-6-甲氧基苯乙酮-4-O-β-D-葡萄糖苷；苯乙酮-4-O-β-D葡萄糖苷和6-甲氧基-槲皮萬壽菊素-7-O-β-D-葡萄糖苷在製備抗肝損傷藥物中的應用。本發明得到的藥物的活性成分是從萬年蒿中提取分離得到，其來源廣泛，對肝損傷具有顯著的療效。
文檔編號A61K31/7048GK102379889SQ20111024473
公開日2012年3月21日 申請日期2011年8月25日 優先權日2011年8月25日
發明者元海丹, 樸光春 申請人:樸光春