具有保溼和抗皺紋性質的透明質酸級分的製作方法
2023-06-12 17:52:46
專利名稱：：具有保溼和抗皺紋性質的透明質酸級分的製作方法具有保溼和抗皺紋性質的透明質酸級分發明領域本發明涉及包含透明質酸或其鹽的保溼、化妝或抗皺紋產品，其中透明質酸或其鹽的平均分子量範圍是0.7-0.9MDa,還涉及包含這種產品的組合物，以及所述產品和組合物的用途，例如在皮膚或透皮施用(application)中的用途和用於化妝乳膏或洗液的用途，其中HA級分兼具保溼和抗皺紋的性質。發明背景體內最豐富的雜多糖是糖胺聚糖。糖胺聚糖是無分枝(unbranched)的糖類聚合物，由重複的二糖單元組成(僅硫酸角質素在糖的核心區域是分枝的)。二糖單元通常包含兩種修飾糖——N-乙醯半乳糖胺(GalNAc)或N-乙醯葡糖胺(GlcNAc)——中的任一種作為第一糖單元。第二單元通常為糖醛酸，例如葡萄糖醛酸(GlcUA)或艾杜糖醛S吏(iduronate)。糖胺聚糖為帶負電分子，具有伸展的構象，該構象在溶液中可提供高粘度。糖胺聚糖主要位於細胞表面上或細胞外基質中。糖胺聚糖還在溶液中具有較低的壓縮性，因此是理想的生理潤滑液，例如在關節。糖胺聚糖的剛性提供了細胞結構的完整性，並提供細胞之間的通路以供細胞遷移。生理上最重要的糖胺聚糖是透明質酸(hyaluronan)、硫酸軟骨素、肝素、硫酸乙醯肝素、硫酸皮膚素和硫酸角質素。大多數糖胺聚糖通過特定的寡糖結構共價結合於蛋白聚糖核心蛋白。透明質酸與特定的蛋白聚糖形成大的聚集物，但這是一個例外，因為游離糖鏈與蛋白多糖形成非共價複合物。已經確認了透明質酸在體內的多種作用(參見，LaurentT.C.和Fraser丄R.E.，1992，FASEBJ.6:2397-2404;及TooleB.P,，1991,"Proteoglycansandhyaluronaninmorphogenesisanddifferentiation."於CellBiologyoftheExtracellularMatrix,pp.305-341，HayE.D.編，Plenum,NewYork)。透明質酸存在於透明軟骨、滑膜關節液和皮膚組織，真皮和表皮均有。透明質酸同樣可能在許多生理機能中具有作用，例如粘附(adhesion)、發育、細胞運動、癌症、血管發生和傷口癒合。由於透明質酸獨特的物理和生理特性，人們在眼科和關節手術中應用它，並正在評估其在其他醫療程序中的用途。文獻中使用術語"透明質酸"(hyaluronicacid)來意指具有不同分子量，由D-葡糖醛酸和N-乙醯-D-葡糖胺酸殘基構成的酸性多糖，其天然存在於細胞表面，脊推動物結締組織的細胞外基質，關節的滑膜液，眼球內液，人類臍帶組織和雞冠中。術語"透明質酸(hyaluronicacid)"事實上通常被用來描述包含交替的D-葡糖醛酸和N-乙醯-D-葡糖胺酸殘基、具有不同分子量的一整系列的多糖，或甚至其降解的級分，因此使用其複數術語"透明質酸(hyaluronicacids)"更加正確。然而，在該說明書中同樣可使用單數術語；此外，將經常用縮寫"HA"代替該集合性術語。HA在生物體中起著重要作用，作為許多組織，例如皮膚、腱、肌肉和軟骨的細胞的機械支撐，它是細胞間基質的主要組成部分。HA同樣在生物過程中起著重要作用，例如組織的溼潤和潤滑。HA可由上述天然組織中提取，但現今優選通過微生物學方法來製備它，以將轉移傳染物的潛在危險降至最低，並增加產品的均勻性、質量和可用性(WO03/0175902,Novozymes)。HA及其各種分子量的級分(fractions)和它們各自的鹽已經用作藥物，特別是在治療關節病中，用作天然器官和組織的輔助物和/或替代物，特別是在眼科和美容手術中，並用作化妝製品中的作用劑。還開發了用於整形外科、風溼病和皮膚病的透明質酸產品。HA還可作為用於衛生和手術用品的各種聚合物，例如聚氨酯、聚酯等的添加劑，具有使得這些材料具有生物相容性的作用。在EP0161887Bl中公開一種交聯HA或其鹽的製品，它是通過用多官能環氧化合物交聯HA而製備的。在US4,957,744中公開了HA與脂族醇所成的交聯全酯或偏酯，以及這種偏酯與無才幾或有機石威形成的鹽。US6673919B2(ChissoCorp.公布日期06/01/2004)涉及一種通過O畫乙醯化、烷氧基化、或交聯由透明質酸或其鹽構成的複合物和陽離子化合物溶液，來化學修飾透明質酸或其鹽的方法。FR2707653(Vetoquino1)涉及生物相容性和生物可降解聚合物與分子之間，特別是包含活動氫(mobilehydrogen)的生物活性分子之間的偶聯物；用於製備它的方法；和包含該偶聯物的藥物組合物。已經公知，平均分子量為大約1-大約1.5MDa的HA高分子量級分可以在化妝品組合物，例如洗液和乳膏中提供優良的保溼性質。HA的低分子量級分，通常具有大約0.02-大約0.4MDa的平均分子量，已經有報導稱其顯示抗皺紋性質，據稱是由於這些級分能夠滲透皮膚屏障。保溼和抗皺紋性質在許多應用中都是非常理想的，而且同時顯示兩種性質的單一化合物具有巨大的商業利益。發明概述本發明人最近生產了平均分子量為大約0.7-大約0.9MDa的HA級分，並評估了這些級分的保溼和抗皺紋作用。令人驚訝的是，發現平均分子量位於該範圍內的HA級分同時顯示保溼和抗皺紋的性質。因此，本發明的第一個方面涉及保溼、化妝或抗皺紋產品，其包含透明質酸或其鹽，其中透明質酸或其鹽的平均分子量範圍是0.7-0.9MDa。在第二個方面中，本發明涉及一種組合物，其包含第一個方面定義的產品和活性成分，該活性成分優選是藥理活性劑。本發明的第三個方面涉及一種藥物組合物，其包含有效量的第一個方面定義的產品，以及藥學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。第四個方面涉及一種藥物組合物，其包含有效量的第一個方面定義的產品作為媒介物，以及藥理活性劑。第五個方面涉及一種化妝品，其包含有效量的如第一個方面定義的產品作為活性成分。在第六個方面中，本發明涉及一種衛生、醫療或手術用品，其包含第一個方面定義的產品，優選所述產品是手術海綿、傷口癒合海綿，或者急救繃帶(bandaid)或其他傷口包紮(wounddressing)材料中包含的部分。一個重要的方面涉及藥物膠嚢或微膠嚢，其包含如第一個方面定義的本發明的最後諸方面涉及在眼科、骨關節炎或癌症治療、傷口處理中執行程序的方法，藥理活性劑的皮膚或透皮施用方法，或化妝品皮膚施用方法中的改進，所述改進包括使用第一個方面中定義的產品，或第二、第三或第四個方面中定義的組合物。有多個方面涉及第一個方面中定義的產品或前述任一方面中定義的組合物在製造治療骨關節炎、癌症的藥物，製造用於眼科治療的藥物，製造用於處理傷口的藥物，製造用於血管發生的藥物，或製造保溼液中的用途。定義核酸構建體此處"核酸構建體"定義為這樣的單鏈或雙鏈的核酸分子它自天然存置的核酸片段。當核酸構建體含有表達編碼序列所需的所有控制序列時，術語核酸構建體可與術語表達盒同義。此處的術語"編碼序列"定義為一種序列，當其被置於下述控制序列的控制之下時，被轉錄為mRNA並翻譯為目標酶。編碼序列的界限通常由位於mRNA5'末端開放閱讀框緊鄰上遊的核糖體結合位點和位於mRNA3，末端開放閱讀框架緊鄰下遊的轉錄終止序列決定。編碼序列包括，但不限於，DNA、cDNA和重組核酸序列。用於分離或克隆編碼多肽的核酸序列的技術是本領域公知的，包括，例如，從基因組DNA分離，從cDNA製備，或其組合。由這種基因組DNA克隆核酸序列可以通過，例如，使用抗體篩選表達文庫以檢測帶有共同結構特徵的克隆DNA片段，或公知的聚合酶鏈反應(PCR)來實現。參見，例如，Innis等，1990，PCRprotocols:AGuidetoMethodsandApplication,AcademicPress,NewYork。可使用其他核酸擴增程序，例如連接酶鏈式反應、連接活化轉錄(ligatedactivatedtranscription)和基於核酸序列的擴增。克隆程序可包括切出和分離含有編碼多肽的核酸序列的所需核酸片段，將該片段插入載體分子，並使該重組載體摻入芽孢桿菌(Bacillus)細胞，核酸序列的克隆將在該細胞中複製。核酸序列可以是基因組來源、cDNA來源、RNA來源、半合成來源、合成來源或其任意組合。可用多種方法對編碼酶的分離核酸序列進行操作，以為酶的表達提供條件。在插入構建體或載體之前操作核酸序列可能是理想的或者是必需的，柄-嚙合部分，和設置在所述手柄-嚙合和遠側部分之間的中間部分，該中間部分被定向成相對於它們各自的遠側部分成斜角。所述固定器械可以進一步包括張力限制組件，其包括具有第一端和第二端的可伸長張拉元件，該第一端可以在第一位置可釋放地附著在第一手5柄，該第二端可以可釋放地附著在第一夾持臂；其中第一夾持臂與第一手柄可樞轉地聯接。第一夾持臂和第一手柄可以通過柩軸接頭連接，其中所述可伸長張拉元件的第一端和第二端嚙合第一手柄和第一夾持臂以允許所述手柄和臂相對於彼此圍繞所述樞軸接頭沿第一方向樞轉和阻止圍繞所述樞軸接頭沿相10反方向樞轉。所述顱片夾具的至少一部分可以由生物可再吸收材料組成。所述張拉元件可以阻止所述手柄和臂沿第一方向樞轉直到大約15N通過使用所述手柄施加到所述抓握臂和張拉臂的遠側部分之間。當大約15N施加到所述抓握臂和張拉臂的遠側部分之間時，所述手柄15進一步靠攏在一起可以導致所述張拉元件拉伸，基本上沒有額外的力傳遞到所述顱片夾具。當大於大約15N的力通過所述手柄施加到所述抓握臂和張拉臂的遠側部分之間時，所述張拉元件可以拉伸以允許所述手柄和臂沿第一方向樞轉。所述顱片夾具的至少一部分可以由金屬組成，並且所述金屬可以是鈦。20所述張力限制組件可以進一步包括具有第一端和第二端的第二張4立元件，每一端具有附件，其中第一端可附著在第一手柄，第二端可附著在第一夾持臂。也公開了一種用於將顱片夾具安裝到患者中的方法，其包括以下步驟步驟"是指所述基因的表達蛋白在下述物質的形成中有活性N-乙醯葡糖胺，或D-葡糖醛酸，或作為N-乙醯葡糖胺和D-葡糖醛酸之一的前體的糖。在一個優選的提供前體糖的方法中，提供構建體來改善具有透明質酸合酶的宿主細胞的透明質酸產出，其通過下迷手段實現培養具有重組構建體的宿主細胞，所述重組構建體中異源啟動子區可操作連接於編碼基因的核酸序列，所述基因指導透明質酸前體糖合成途徑中的步驟。在一個優選方法中，宿主細胞還包含這樣的重組構建體它具有啟動子區，該啟動子區可操作地連接於透明質酸合酶，該合酶可與N-乙醯葡糖胺生物合成所涉及的合酶的核酸序列使用相同或不同的啟動子區域。在一個更優選的實施方案中，宿主細胞可具有這樣的重組構建體其中啟動子區域可操作地連接於不同的核酸序列，這些核酸序列編碼涉及透明質酸前體糖合成的第二基因。因此，本發明還涉及用於改善透明質酸產出的構建體，其中通過使用這樣的構建體改善透明質酸產出它具有編碼指導透明質酸前體糖合成途徑中的步驟的基因的核酸序列。所述前體糖的核酸序列和編碼所述透明質酸合酶的核酸序列可以從相同的或不同的啟動子表達。產生透明質酸前體糖的生物合成涉及的基因包括下列UDP-葡萄糖6-脫氫酶基因、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因、UDP-N-乙醯葡糖胺焦磷酸化酶基因、葡萄糖-6-磷酸異構酶基因、己糖激酶基因、葡糖磷酸變位酶基因、醯胺轉移酶基因、變位酶基因和乙醯轉移酶基因。在含有透明質酸合酶的細胞中，可以表達下述基因中的任一個，或兩個或多個的組合，以增加透明質酸合酶可用的前體糖庫hasB、hasC和hasD，或它們的同源物，分別例如枯草芽孢桿菌(Sac/〃wwZ^7/s)tuaD、gtaB和gcaD,以及hasE。枯草芽孢桿菌基因組描述於Kunst等，Nature,390，249-256,"ThecompletegenomesequenceoftheGram-positivebacterium5a"'〃ws(1997年11月20日)。在某些情況下，例如宿主細胞沒有天然透明質酸合酶活性時，構建體可包括hasA基因。編碼生物合酶的核酸序列可以是宿主細胞天然具備的，而在其他情況下可利用異源序列。如果表達了兩種或更多基因，它們可以是在天然操縱子中彼此伴隨的基因，例如似馬鏈球菌HAS操縱子的基因，該操縱子包括hasA、hasB、hasC和hasD。在另一種情況下，可能希望使用前體基因序列的某些組合而並不包括操縱子的全部元件。在另一些情況下，可能還優選使用一些宿主細胞的天然基因和一些外源基因。如何選擇取決於下列因素給定宿主細胞中可利用的糖庫，細胞容納過量生產而不影響宿主細胞其他例如，根據細胞的代謝需要和生長條件，以及可利用的前體糖庫，通過表達編碼UDP-N-乙醯葡糖胺焦磷酸化酶的核酸序列(例如hasD基因、芽孢桿菌gcaD基因及其同源物)來增加N-乙醯-葡糖胺的產量可能是理想的做法。或者，前體糖可以是D-葡糖醛酸。在一個這樣的實施方案中，核酸序列編碼UDP-葡萄糖6-脫氫酶。這樣的核酸序列包括芽孢桿菌tuaD基因、鏈球菌(&"/tococcws)hasB基因及其同源物。核酸序列還可編碼UDP-葡萄糖焦磷酸化酶，例如在芽孢桿菌gtaB基因、鏈球菌hasC基因及其同源物中。在本發明的方法中，UDP-葡萄糖6-脫氫酶基因可以是hasB基因或tuaD基因，或其同源物。本發明中認為透明質酸合酶基因和編碼前體糖的一種或多種基因受同一啟動子的控制。作為選擇，編碼前體糖的一種或多種基因受同一啟動子控制，但驅動透明質酸合酶基因的是不同的啟動子。另一選擇是，透明質酸合酶基因和編碼前體糖的每一基因均受不同啟動子控制。在一個優選實施方案中，透明質酸合酶基因和編碼前體糖的一種或多種基因受同一啟動子控制。本發明還涉及一種核酸構建體，其包括編碼透明質酸合酶操縱子的分離的核酸序列，該操縱子包括透明質酸合酶基因和UDP-葡糖6-脫氫酶基因，以及任選的一種或多種選自下組的基因UDP-葡萄糖焦磷酸化酶基因、UDP-N-乙醯葡糖胺焦磷酸化酶基因和葡萄糖-6-磷酸異構酶基因。在某些情況下，宿主細胞具有這樣的重組構建體，其中異源啟動子區可操作地連接於編碼基因的核酸序列，所述基因指導透明質酸的前體糖的合成途徑中的步驟，該步驟可以與透明質酸合酶從重組構建體的表達協同。透明質酸合酶可以從與編碼前體生物合成涉及的酶的核酸序列相同或不同的啟動子區表達。在另一優選實施方案中，宿主細胞可具有重組構建體，其中啟動子區可操作地連接到一不同的核酸序列，該序列編碼透明質酸前體糖合成涉及的另一基因。編碼前體糖生物合成中涉及的酶的核酸序列和編碼透明質酸合酶的核酸序列可以從相同或不同的啟動子表達。在前一種意義下，即構建成"人工操縱子(artificialoperons)"，其可能模仿似馬鏈球菌操縱子，具有hasA、hasB、hasC和hasD的每一個或其同源物，也可以使用似馬鏈5求菌操縱子中不到全部的成員。"人工操縱子"還可包括葡萄糖-6-磷酸異構酶基因(hasE)和一種或多種選自下組的基因己糖激酶基因、磷酸葡糖變位酶基因、醯胺轉移酶基因、變位酶基因和乙醯轉移酶基因。在人工操縱子中，至少一個元件與另一元件是異源的，例如啟動子區域與編碼序列異源。在一個優選實施方案中，核酸構建體包含hasA、tuaD和gtaB。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA、tuaD、gtaB和gcaD。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA和tuaD。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA、tuaD、gtaB、gcaD和hasE。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA、hasB、hasC和hasD。在另一優選實施方案中，核酸構建體包含hasA、hasB、hasC、hasD和hasE。基於以上優選實施方案，提到的基因可用其同源物代替。在本發明的方法中，核酸構建體含有透明質酸合酶編碼序列，其可操作地連接於對透明質酸合酶編碼序列外源的啟動子序列。啟動子序列可能是，例如，單個的啟動子或串聯的啟動子。此處"啟動子"定義為參與RNA聚合酶的結合而引發基因轉錄的核酸序列。此處"串聯啟動子"定義為兩個或更多啟動子序列，其中每一序列可操作地連接於編碼序列，並介導該編碼序列轉錄為mRNA。此處"可操作地連才妄"定義為這樣的構造，其中控制序列，例如啟動子序列，被置於相對編碼序列的適當位置，使該控制序列指導所述編碼序列所編碼的多肽的生成。如先前指出的，此處的"編碼序列"定義為這樣的核酸序列，其當被置於適當的控制序列控制之下時，被轉錄為mRNA並翻譯為多肽。編碼序列的邊界通常由位於mRNA的5'末端的開放閱讀框緊鄰上遊的核糖體結合位點和位於mRNA的3'末端的開放閱讀框緊鄰下遊的轉錄終止子序列來決定。編碼序列可包括但不限於基因組DNA、cDNA、半合成、合成和重組核酸序列。在一個優選實施方案中，啟動子可從細菌來源獲得。在一個更優選的實施方案中，啟動子獲自革蘭氏陽性細菌，如芽孢桿菌菌抹，例如Bac/〃wagar"(ier/2em1、p耆石威芽孑包4幹菌(Sa"7/wsfl汰"/o//2Z/w》、解5定鬥分芽孑包4幹菌(5ac/〃ws咖c/e"力、短芽孑包軒菌(5""7/wj6wW力、環狀芽孑包軒菌(6""'〃mczVcw/a"s)、5a"7/wsc/aww7、凝結芽孑包4幹菌(5ac/〃wscoagw/am1)、堅強芽孑包才幹菌(S腦'〃ms,扁力、杣爛芽孢桿菌(5腦.to/aw加)、遲緩芽孑包桿菌(6腦'〃ws/ewfw"、i也衣芽孑包斥幹菌(Bac/〃ws//c/7emybrm^)、巨大芽孑包4幹菌(5ac/〃wswegafeWwm)、#豆小芽孑包4幹菌(5acz7/ws;wwz7m力、口耆-A月旨肪芽孑包斥幹菌(Bac/〃wsstearaf/zermo//n7w力、才古草芽孑包斥幹菌或蘇雲金芽孑包4幹菌(5flc/〃"5"^mr/wg7'g"s^)糹田月包；或鏈黴菌屬(6V/7towyces)菌才朱，例如淺青紫鏈黴菌(5^e;tomycas//Wfib"力或鼠灰《連黴菌(5^e/tomyc&smw〃'"w";或獲自革蘭氏陰性糹田菌例如大腸桿菌(￡.//)或假單胞菌屬的菌種(屍"Mcfomo"ww.)。得的啟動子大腸斥幹菌lac4喿糹從子、天藍色《連黴菌(6^印towyc&scoe//co/w)瓊脂酶基因(dafA)、遲緩芽孢桿菌或醜ac/〃wsc/aw//鹼性蛋白酶基因(aprH)、地衣芽孢桿菌鹼性蛋白酶基因(枯草桿菌蛋白酶Carlsberg(sutilisinCarlsberg)基因)、枯草芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶基因(sacB)、枯草芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyE)、地衣芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyL)、嗜熱脂肪芽孢桿菌生麥芽糖澱粉酶基因(amyM)、解澱粉芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyQ)、地衣芽孢桿菌青黴素酶基因(penP)、枯草芽孢桿菌xylA和xy舊基因、蘇雲金芽孢桿菌粉蟲亞種(S"c/〃w//2,."g/e顯、subsp.teweZ^/ow/j")CryIIIA基因(cryIIIA)或其邵分，和原核卩-內醯胺酶基因(Villa-Kamaroff等，1978,ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA75:3727-3731)。其他啟動子實例為spol細菌p藍菌體的啟動子和tac啟動子(DeBoer等，1983，ProceedingsoftheNationalAcademyofSciencesUSA80:21-25)。此外的啟動子描述於"Usefulproteinsfromrecombinantbacteria",ScientificAmerican,1980，242:74-94,和Sambrook、Fritsch和Maniatus,1989，MolecularCloning,ALaboratoryManual,第2版,ColdSpringHarbor,NewYork。啟動子還可以是"共有，，(consensus)啟動子，具有TTGACA的"-35"區序列和TATAAT的"-lO，，區序列。共有啟動子可從能在芽孢桿菌宿主細胞中起功能的任何啟動子獲得。"共有"啟動子可以這樣構建通過定點誘變產生更完美地符合已確立的枯草芽孢桿菌營養生長"oA型"啟動子"-10"和"-35"區共有序歹'J(Voskuil等，1995,MolecularMicrobiology17:271-279)的啟動子。在一個優選實施方案中，"共有"啟動子是從得自下列來源的啟動子獲得的大腸桿菌lac操縱子、天藍色鏈黴菌瓊脂酶基因(dagA)、S""'〃wc/m/W或遲緩芽孢桿菌鹼性蛋白酶基因(aprH)、地衣芽孢桿菌鹼性蛋白酶基因(枯草桿菌蛋白酶Carlsberg基因)、枯草芽孢桿菌果聚糖蔗糖酶基因(sacB)、枯草芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyE)、地衣芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyL)、嗜熱脂肪芽孢桿菌生麥芽糖澱粉酶基因(amyM)、解澱粉芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyQ)、地衣芽孢桿菌青黴素酶基因(penP)、枯草芽孢桿菌xylA和xy舊基因、蘇雲金芽孢桿菌粉蟲亞種(subsp.tenebrionis)CryIIIA基因(cryIIIA)或其部分，或原核|3-內醯胺酶基因spol細菌噬菌體啟動子。在一個更加優選的實施方案中，"共有"啟動子獲自解澱粉芽孢桿菌a澱粉酶基因(amyQ)。Widner等，美國專利號6,255,076和5,955,310，描述了用於在芽孢桿菌細胞中的表達的串聯啟動子和構建體及方法，包括短的共有amyQ啟動子(也稱scBAN)。所述文獻中還描述了cryIIIA穩定子(stabilizer)序列和使用該序列的構建體用於改善芽孢桿菌中的生產的用途。串聯啟動子的每一啟動子序列可以是在所選擇的芽孢桿菌細胞中顯示轉錄活性的任意核酸序列，包括突變、截短和雜合的啟動子，並且可以從編碼與該芽孢桿菌細胞同源或異源的細胞外或細胞內多肽的基因獲得。每一啟動子序列對於所述編碼多肽的核酸序列可以是天然的或外來的，並且對於所述芽孢桿菌細胞可以是天然的或外來的。這些啟動子序列可以是相同的啟動子序列或不同的啟動子序列。串聯啟動子中的兩個或更多啟動子序列可同時促進核酸序列的轉錄。或者，串聯啟動子中的一個或更多啟動子序列可在芽孢桿菌細胞的不同生長階^1促進核酸序列的轉錄。在一個優選的實施方案中，串聯啟動子至少包含解澱粉芽孢桿菌a澱粉酶基因中的amyQ啟動子。在另一優選實施方案中，串聯啟動子至少包含具有TTGACA序列的"-35"區和TATAAT序列的"-10"區的"共有"啟動子。在另一優選實施方案中，串聯啟動子至少包含地衣芽孢桿菌a澱粉酶基因的amyL啟動子。在另一優選實施方案中，串聯啟動子至少包含cryIIIA啟動子或其部分(Agaisse和Lereclus,1994,MolecularMicrobiology13:97-107)。在一個更優選的實施方案中，串l^關啟動子至少包含amyL啟動子和cryIIIA啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串聯啟動子至少包含amyQ啟動子和cryIIIA啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串4關啟動子至少包含具有TTGACA序列的"-35"區和TATAAT序列的"-10"區的"共有"啟動子和cryIIIA啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串聯啟動子包含至少兩個拷貝的amyL啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串聯啟動子包含至少兩個拷貝的amyQ啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串聯啟動子包含至少兩個拷貝的具有"-35"區的TTGACA和"-10"區的TATAAT序列的"共有"啟動子。在另一個更優選的實施方案中，串聯啟動子包含至少兩個拷貝的cryIIIA啟動子。此處的"mRNA加工/穩定序列"定義為如下所述的序列其位於一個或多個啟動子序列的下遊及與該一個或多個啟動子序列中的每一個可操作連接的編碼序列的上遊，使得從每一啟動子序列合成的所有mRNA均可^皮加工生成5'末端具有穩定子序列的mRNA轉錄本。該穩定子序列在mRNA轉錄本5'末端的存在增加了這些轉錄本的半衰期(Agaisse和Lereclus,1994，前文，Hue等，1995，Jow"a/。/Sa"enWogy177:3465-3471)。mRNA加工/穩定序列與細菌的16S核糖體RNA的3'末端互補。在一個優選實施方案中，mRNA加工/穩定序列產生基本上單一大小的、含有位於轉錄本5，末端的穩定子序列的轉錄本。mRNA加工/穩定序列優選為一個與細菌的16S核糖體RNA3，端互補的序列。參見美國專利Nos.6,255,076和5,955,310。在一個更優選的實施方案中，mRNA加工/穩定序列為公開於WO94/25612和Agaisse和Lereclus,1994,前文的蘇雲金芽孢桿菌cryIIIAmRNA加工/穩定序列，或其保持mRNA加工/穩定功能的部分。在一個更優選的實施方案中，mRNA加工/穩定序列為公開於Hue等，1995,前文的枯草芽孢桿菌SP82mRNA加工/穩定序列，或其保持mRNA加工/穩定功能的部分。當本發明的方法中應用所述cryIIIA啟動子和其mRNA加工/穩定序列時，可以使用這樣的DNA片段它含有WO94/25612和Agaisse和Lereclus,1994(同上)中所公開的序列，或其保留啟動子功能和mRNA加工/穩定功能的片段。進一步地，可以使用本領域熟知的方法製備僅含有ciyIIIA啟動子或僅含有cryIIIAmRNA加工/穩定序列的DNA片段，以構建多種串聯啟動子與mRNA加工/穩定序列的組合。在這個實施方案中，所述cryIIIA啟動子和其mRNA加工/穩定序列優選被置於組成該串聯啟動子的另外一個或多個啟動子序列的下遊，及目的基因編碼序列的上遊。然後，可以對編碼涉及透明質酸生產的目標酶的分離核酸序列作進一步的操作，改善該核酸序列的表達。"表達"應當理解為包括多肽生產中涉及的任何步驟，包括但不限於轉錄、轉錄後修飾、翻譯、翻譯後修飾，和分泌。利用克隆方法來修飾核酸序列的技術在本領域是公知的。包含編碼酶的核酸序列的核酸構建體可以與一種或多種控制序列可操作地連接，其中該控制序列可以指導編碼序列在與該控制序列相容的條件下在芽孢桿菌細胞中表達。術語"控制序列"在本文中定義為包括所有對於核酸序列的編碼序列的表達而言是必需或有利的組分。每一控制序列對於所述編碼酶的核酸序列而言可以是天然的或外來的。除了上述的啟動子序列以外，這樣的控制序列還包括但不限於，前導序列、信號序列和轉錄終止子。至少，控制序列包含啟動子和轉錄和翻"^終止信號。控制序列可以具有接頭，用於導入特定的限制位點，以促進控制序列與所述編碼酶的核酸序列的編碼區的連接。控制序列也可以是適當的轉錄終止子序列，即由芽孢桿菌細胞識別來終止轉錄的序列。終止子序列可操作地連接於編碼所述酶或操縱子的最後一個酶的核酸序列的3'末端。在所選擇的芽孢桿菌細胞中起作用的任何終止子都可用於本發明。控制序列還可以是適當的前導序列，即對芽孢桿菌細胞翻譯重要的mRNA非翻譯區。前導序列可操作地連接於編碼所述酶的核酸序列的5，末端。在所選擇的芽孢桿菌細胞中起作用的任何前導序列都可用於本發明。控制序列還可以是信號肽編碼區，它編碼連接於多肽的氨基末端的胺基酸序列，該胺基酸序列可指導表達的多肽進入細胞的分泌途徑。信號肽編碼區域可以是對該多肽而言天然的，也可以從外部來源獲得。核酸序列的編碼序列的5'末端可固有地包含信號肽編碼區，它與編碼分泌多肽的編碼區片段天然地共翻譯閱讀框連接。或者，編碼序列的5'末端可以包含對編碼序列的編碼分泌多肽的部分而言是外來的信號肽編碼區。如果編碼序列通常不含有信號肽編碼區，則可能需要外來的信號肽編碼區。或者，外來的信號肽編碼區可直接替換天然信號肽編碼區，以使多肽分泌相對於通常於所述編碼序列相關的天然信號肽編碼區得到"l是高。該信號肽編碼區可以從來自芽孢桿菌屬菌種的澱粉酶或蛋白酶基因獲得。但能夠指導表達的多肽進入所選#^的芽孢桿菌細胞分泌途徑的任何信號肽編碼區均可用於本發明。對於芽孢桿菌細胞，有效的信號肽編碼區是從芽孢桿菌NCIB11837的生麥芽糖澱粉酶基因、嗜熱脂肪芽孢桿菌的a-澱粉酶基因、地衣芽孢桿菌的枯草桿菌蛋白酶基因、地衣芽孢桿菌的(3-內醯胺酶基因、嗜熱脂肪芽孢桿菌的中性蛋白酶基因(nprT、nprS、nprM)和枯草芽孢桿菌的prsA基因獲得的信號肽編碼區。Simo顧和Palva,1993，MicrobiologicalReviews57:109-137中描述了更多的信號肽。控制序列還可以是前肽編碼區，其編碼位於多肽氨基末端的胺基酸序列。所得到的多肽稱為酶原(proenzyme)或多肽原(有時稱作酶原(zymogen))。多肽原通常是無活性的，並可以通過催化或自主催化將前肽從多肽原中切割除去，而被轉化為成熟的活性多肽。前肽編碼區可獲自枯草芽孢桿菌鹼性蛋白酶基因(aprE)和枯草芽孢桿菌中性蛋白酶基因(nprT)。當信號肽和前肽區都存在於多肽的氨基末端時，前肽區位於靠近多肽氨基末端的位置，而信號肽區位於靠近前肽區的氨基末端位置。添加可允許相對於宿主細胞的生長調節多肽表達的調節序列，也可能是理想的。調節系統的實例是能響應化學或物理刺激，包括調節化合物的存在，而引起基因表達的開啟或關閉的那些系統。在原核系統中，調節系統包括lac、tac和trp操縱基因系統。生產在本發明的方法中，利用本領域眾所周知的方法在適於產生透明質酸的營養培養基中培養宿主細胞。例如，所述細胞可以通過搖瓶培養、小規模或大規模發酵(包括連續的、分批的、補料-分批、或固態發酵)來培養，上述培養在實驗室或工業發酵罐中，於適當的培養基中，並在使得透明質酸合成中涉及的酶可以被表達且透明質酸可以被分離的條件下進行。培養在含有碳和氮源以及無機鹽的合適營養培養基中使用本領域已知的程序進行。適宜的培養基可從商業供應商獲得，或者可根據已公布的組成來製備(例如美國典型培養物保藏中心的目錄中)。被分泌的透明質酸可以直接從培養基中回收。所得透明質酸可通過本領域已知的方法分離。例如，透明質酸可通過常規方法，包括但不限於離心、過濾、萃取、噴霧乾燥、蒸發或沉澱，從營養培養基中分離。分離的透明質酸可以通過本領域已知的多種方法進一步純化，包括但不限於層析(例如離子交換、親和、疏水、層析聚焦、和大小排阻)、電泳方法(例如製備性等電聚焦)、溶解度差異(例如碌u酸銨沉澱)、或萃取(例如參見ProteinPurification,J,C.Janson和LarsRyden編，VCHPublishers,NewYork,1989)。附1:水化作用的短期評估。在所有時刻，活性乳膏均導致皮膚水化作用的平均基本值產生高度顯著的變化。圖2:水化作用的長期評估。處理8周後，記錄到水化作用顯著提高了7%。圖3:單次施用後，透表皮水分損失(transepidermalwaterloss,TEWL)的短期變化。施用活性乳膏60、90、120、180分鐘後TEWL的平均基本值產生了顯著變化。圖4:施用8周後的整體彈性。觀察到整體彈性(R2)顯著提高了27%。發明詳述"透明質酸，，在本文中定義為非硫酸化的糖胺聚糖，其由重複的N-乙醯葡糖胺(GlcNAc)和葡糖醛酸(GlcUA)二糖單位組成，這些二糖單位由交^,的p—l，4和卩_1,34唐普4建連4妄到一起。透明質酸又被稱為hyaluronan,hyaluronate，或HA。在本文中術語hyaluronan和hyaluronicacid可以互換使用。雄雞雞冠是透明質酸的重要商業來源。微生物是另一可選來源。美國專利No.4,801,539公開了一種製備透明質酸的發酵方法，其涉及一種獸瘟4連3求菌(Streptococcuszooepidemicus)菌才朱，報導的產率為每升大約3.6g透明質酸。歐洲專利No.EP0694616公開了使用改進的獸瘟鏈球菌菌抹的發酵方法，報導的產率為大約每升3.5g透明質酸。如WO03/054163(Novozymes)所公開的(其以全文併入本文)，透明質酸或其鹽可以重組生產，例如在革蘭氏陽性的芽孢桿菌宿主中重組生產。已經描述了來自脊稚動物、細菌病原體和藻類病毒的透明質酸合酶(DeAngelis,P.L.,1999，Cell.Mol.LifeSci.56:670-682)。WO99/23227公開了來自似馬鏈球菌的第I組透明質酸合酶。WO99/51265和WO00/27437描述了來自多殺巴斯德氏菌的第II組透明質酸合酶。Ferretti等人公開了釀膿鏈球菌的透明質酸合酶操縱子，其由hasA、hasB和hasC三個基因組成，這三個基因分別編碼透明質酸合酶、UDP葡萄糖脫氫酶和UDP-葡萄糖焦磷酸化酶(Proc.Natl.Acad.Sci.USA.98，4658-4663,2001)。WO99/51265描述了具有似馬鏈球菌透明質酸合酶的編碼區的核酸區段。由於重組芽孢桿菌細胞的透明質酸被直接表達到培養基中，可以利用筒單的方法來從培養基分離該透明質酸。首先，從培養基中物理地去除芽孢桿菌細胞和細胞碎片。如果需要，可以先稀釋該培養基以降低其粘度。本領域的技術人員知道很多從培養基中去除細胞的方法，例如離心或樣i濾。然後如果需要，可以過濾剩下的上清，例如通過超濾，來濃縮該透明質酸並從其中去除小分子的汙染物。去除細胞和細胞碎片後，利用已知的方法將透明質酸從培養基中簡單地沉澱下來。可以用鹽、醇或鹽和醇的組合來從濾液中沉澱透明質酸。透明質酸一旦變為沉澱，就可以通過物理手革殳容易地將其從溶液中分離出來。可以通過本領域已知的蒸發技術，例如冷凍乾燥或噴霧乾燥，從濾過溶液中乾燥或濃縮透明質酸。本發明的第一個方面涉及包含透明質酸或其鹽的保溼、化妝或抗皺紋產品，其中透明質酸或其鹽的平均分子量範圍是0.7-0.9MDa。宿主細胞一個優選的實施方案涉及第一個方面的產品，其中透明質酸或其鹽是重組生產的，優選通過革蘭氏陽性細菌或宿主細胞，更優選通過芽孢桿菌屬的細菌重組生產。所述宿主細胞可以是任何適於透明質酸的重組生產的芽孢桿菌細月包。該芽孢桿菌細胞可以是野生型的芽孢桿菌細胞或其突變體。在本發明的實踐中有用的芽孢桿菌細胞包括但不限於，ag"racfer/^"5、嗜石威芽孢桿菌、解澱粉芽孢桿菌、短芽孢桿菌、環狀芽孢桿菌、fiac/〃wc/做i、凝結芽孢桿菌、堅強芽孢桿菌、燦爛芽孢桿菌、遲緩芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、短小芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌和蘇雲金芽孢桿菌細胞。WO98/22598描述了被特別改造以適於重組表達的突變枯草芽孢桿菌細胞。不產莢膜的(non-encapsulating)芽孢桿菌細胞在本發明中特別有用。在一個優選的實施方案中，所述芽孢桿菌宿主細胞是解澱粉芽孢桿菌、Sacz7/wsc/aw/"遲緩芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌或枯草芽孢桿菌細胞。在一個更優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是解澱粉芽孢桿菌細胞。在另一個更優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是S""7/wc/aww7細胞。在另一個更優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是遲緩芽孢桿菌細胞。在另一個更優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是地衣芽孢桿菌細胞。在另一個更優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是枯草芽孢桿菌細胞。在最優選的實施方案中，所述芽孢桿菌細胞是枯草芽孢桿菌A164A5(參見美國專利No.5,891,701)或枯草芽孢桿菌168A4。用本發明的核酸構建體轉化芽孢桿菌宿主細胞可以通過例如下列手教二實現原生質體轉化(參見例如Chang和Cohen,1979，MolecularGeneralGenetics168:111-115)，使用感受態細胞(參見例如Young和Spizizen，1961，JournalofBacteriology81:823-829，或Dub賺和Davidoff誦Abelson,1971，JournalofMolecularBiology56:209-221)、電穿孔(參見如Shigekawa和Dower,1988，Biotechniques6:742-751)、或接合(參見如Koehler和Thome，1987,JournalofBacteriology169:5271-5278)。分子量透明質酸的水平可以才艮據^奮改的口卡峻法(Bitter和Muir，1962,AnalBiochem.4:330-334)來確定。另外，透明質酸的平均分子量可以使用本領域的標準方法來確定，例如Ueno等，1988，Oze肌戶/arm.Bw〃.36，4971-4975;Wyatt,1993,勘a/.C/z/w.勿a272:1-40;和WyattTechnologies,1999，"LightScatteringUniversityDAWNCourseManual"和"DAWNEOSManual"WyattTechnologyCorporation,SantaBarbara,California所描述的那些方法。鹽和交S關HA優選的實施方案涉及第一個方面的產品，其包括透明質酸的無機鹽，優選透明質酸鈉，透明質酸鉀，透明質酸銨，透明質酸鉤，透明質酸4美，透明質酸鋅，或透明質酸鈷。已經發現，透明質酸鈉與聚乳酸單/雙醯基氯反應可產生連接的或交寫關的HA-PLA或HA-PLA-HA產物，其在IR光譜上與未經處理的HA或PLA的標準光譜相比，在1736cm-l處顯示有增強的峰，其對應於連4妻的HA-PLA產物中新形成的聚乳酸酯的存在。因此，優選的實施方案涉及第一個方面的產物，其中透明質酸或其鹽包含聚合a羥基酸的酯，優選聚乳酸或乙醇酸的酯。還發現，用硼酸處理透明質酸鈉溶液可產生交:f關的HA-硼酸(HA-borate)水凝膠，其在FT-IR光譜上與未經處理的Na-HA的標準光譜相比，於1200和945cm-l處顯示有新峰，對應於交聯的HA-硼酸水凝膠中新形成的硼酸酯的存在。因此，一個優選的實施方案涉及第一個方面的產物，其中透明質酸或其鹽包含硼酸酯。在第一個方面產物的另一個優選實施方案中，透明質酸或其鹽與二乙烯基碸(DVS)完全或部分交聯。保溼和抗皺紋作用如下面的實施例所示，第一個方面的產物具有皮膚保溼的作用，在優選的實施方案中，當按照下文實施例中的定義測量時，在8周的時間裡，皮膚保溼作用至少為3%，優選至少5%,更優選至少7%。另外，第一個方面的產物能夠提高整體皮膚彈性R2，在優選的實施方案中，當按照下文實施例中所定義的測量時，在8周的時間裡，R2提高了至少10%,優選至少15%,更優選至少20%。其他成分在優選實施方案中，本發明的產品還可以包含其他成分，優選一種或多種活性成分，優選一種或多種藥理活性物質，還優選水溶性賦形劑，例如乳糖。在另一個優選實施方案中，本發明的產品還可包括一種或多種酶，優選連接酶、轉移酶、氧化還原酶、水解酶、裂合酶和/或異構酶；更優選澱粉分解酶、脂肪分解酶、蛋白水解酶、纖維素分解酶(cellulyticenzymes)、氧化還原酶或植物細胞壁降解酶，更優選具有選自下組的活性的酶氨肽酶、澱粉酶、澱粉葡萄糖苷酶、糖酶、羧肽酶、過氧化氫酶、纖維素酶、幾丁質酶、角質酶、環糊精糖基轉移酶、脫氧核糖核酸酶、酯酶、半乳糖苷酶、|3—半乳糖苷酶、葡糖澱粉酶、葡萄糖氧化酶、葡萄糖苷酶、面素過氧化物酶(haloperoxidase)、半纖維素酶、轉化酶、異構酶、漆酶、連接酶、月旨肪酶、裂合酶、甘露糖香酶、氧化酶、果膠酶、過氧化物酶、肌醇六磷酸酶、酚氧化酶、多酚氧化酶、蛋白酶、核糖核酸酶、轉移酶、轉穀氨醯胺酶或木聚糖酶。可用於本發明的活性成分或藥理活性物質的非限制性例子包括蛋白質和/或肽藥物，例如人生長激素，牛生長激素，豬生長激素，生長激素釋放激素/肽，粒細胞集落刺激因子，粒細胞巨噬細胞集落刺激因子，巨噬細胞集落刺激因子，紅細胞生成素，成骨蛋白，幹擾素或其衍生物，胰島素或其衍生物，心房肽(atriopeptin)III，單克隆抗體，腫瘤壞死因子，巨噬細胞活化因子，白介素，腫瘤變性因子，胰島素樣生長因子，表皮生長因子，組織纖維蛋白溶酶原激活劑，因子IIV,因子mv，和尿激酶。用了穩定所述活性成分，可以包含水溶性的賦形劑，這樣的賦形劑可以包含蛋白質，例如白蛋白或明膠；胺基酸，例如甘氨酸、丙氨酸、穀氨酸、精氨酸、賴氨酸和其鹽；糖類例如葡萄糖、乳糖、木糖、半乳糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、葡聚糖、甘露醇、山梨糖醇、海藻糖和硫酸軟骨素；無機鹽例如磷酸鹽；表面活性劑例如TWEEN(ICI)，聚乙二醇，和其混合物。所述賦形劑或穩定劑可以以所述產品重量的0.001-99%的量使用。本發明的一些方面涉及多種組合物和藥物，它們除了其他組分以外，還包含有效量的如所述第一個方面定義的產品和活性成分，優選該活性成分是藥理活性劑；藥學上可接受的載體，賦形劑或稀釋劑，優選為水溶性的賦形劑，最優選為乳糖。另外，本發明的一些方面涉及這樣的物品，其包含如所述第一個方面定義的產品或如上述方面和實施方案所定義的組合物，例如化妝品、衛生用品、醫療或手術用品。本發明的最後一個方面涉及藥物膠嚢或微膠嚢，其包含如第一個方面定義的產品或本發明其他方面和實施方案中定義的組合物。產品或組合物的使用方法本發明的多個方面涉及使用所述第一個方面的產品或使用本發明的組合物執行治療程序，例如在醫療領域中執行治療程序的方法。一個方面涉及眼科中執行程序的方法，其包括使用如所述第一個方面所定義的產品或本發明的組合物。另一個方面涉及骨關節炎的治療中執行程序的方法，其包括使用如所述第一個方面所定義的產品或本發明的組合物。另一個方面涉及癌症治療中執行程序的方法，其包括-使用如第一個方面所定義的產品或本發明的組合物。一個方面是涉及藥理活性劑透皮或皮膚施用的執行方法，其包括-使用如第一個方面定義的產品或本發明的組合物。另一個方面涉及進行化妝品皮膚施用的執行方法，其包括使用本發明的產品或組合物。實施例使用稱為"活性乳膏，，的下述配方的組合物來進行HA在化妝品製劑中的效能測試。tableseeoriginaldocumentpage23安慰劑乳膏"由相同成分構成，但沒有HA。實施例1.保溼效果(水化作用)利用皮膚溼度測定(corneometry)來評估受測試者的皮膚表面水化作用，由此確定角質層(stratumcomeum,SC)的電容，其精確地反映相對SC溼度。使用皮膚溼度儀(Corneometer):CombiCM825(Courage&Khazaka)進4亍測量。水化作用的研究如下述進行將乳膏施用在12位志願者(女性，平均年齡38歲)的前臂上，然後比較由於施用活性乳膏和安慰劑乳膏導致的水化作用與未處理區域的水化作用。在施用乳膏後較短的期間內(直到180min)評估水化作用；通過比4交8周內的結果來評估較長期的水化作用。短期水化作用的測量結果如圖1所示。在所有時刻，活性乳膏均明顯地引起皮膚水化作用的平均基本值發生了非常顯著的變化。長期評估結果如圖2所示。在活性乳膏處理8周內，記錄到水化作用顯著提高了7%。實施例2.透皮水分損失(TEWL)透皮水分損失(TEWL)是用於評估對水化作用或保溼作用(moisturization)而言的皮膚屏障效率的重要參數。TEWL根據Fick擴散公式測量由皮膚表面釋放的水蒸氣。用於測量該參數的設備是TewameterTM210(Courage&Khazaka)。在施用活性乳膏(0.1%HA)和安慰劑乳膏之後，對12位志願受測試者進行測量，並對未處理的皮膚區域進行測量。圖3顯示了單次施用後TEWL的短期變化。活性乳膏在施用後60、90、120和180min引起TEWL的平均基本值顯著降低。實施例3.抗皺紋效果(彈性)抗皺紋研究如下進行使用12位人類志願受試者(女性，平均年齡46歲)，每天在面部施用乳膏兩次，經過8周。所有的測試均在24。C和50。/。相對溼度CRH)的生物氣候室內進行。使用CutometerSEM575(Courage&Khazaka)測量受試者的皮膚彈性。Cutometer測量皮膚#皮吸入測量糹笨頭的開口中時的垂直變形(verticaldeformation)。這一方法提供了與皮膚彈性有關的如下變形參數R0(最大變形)，R2(整體彈性)和R6(粘彈性比)。在用活性乳膏(包含0.1。/。HA)和安慰劑乳膏處理的8周時間裡，在每次面部施用乳膏之後均進行彈性測試。結果如圖4所示。施用8周之後，觀察到整體彈性(R2)顯著提高了27%。實施例4.皮膚形態(skintopography)通過皮膚表面複製品和圖象分析來評估皮膚表面的形態。測試的原理是通過施加快速硬化的合成聚合物(SILFLO-FlexicoLtd.UK.)來獲得皮膚表面的負印記(negativeimprint)。然後通過圖象數位化對複製品進行分析。從該圖象計算標準粗糙度參數Ra(平均粗糙度)和Rz(深皺紋的最大粗糙度)。測試如下進行每天用活性乳膏處理面部2次經8周，並與使用安慰劑乳膏進行比較。在用活性產品處理的區域中，在處理8周之後，平均最大粗糙度(Rz)值顯著降低了10%。安慰劑處理的區域的Rz值沒有顯示出任何變化。權利要求1.保溼、化妝或抗皺紋產品，其包含透明質酸或其鹽，其中透明質酸或其鹽的平均分子量範圍是0.7-0.9MDa。2.根據權利要求l的產品，其中透明質酸或其鹽是重組產生的，優選由革蘭氏陽性細菌，更優選由芽孢桿菌屬的細菌產生。3.根據權利要求1或2的產品，其包含透明質酸的無機鹽，優選透明質酸鈉、透明質酸鉀、透明質酸4妄、透明質酸鈣、透明質酸4美、透明質酸鋅或透明質酸鈷。4.根據權利要求1-3中任一項的產品，其在如本文所定義地進行測量時，經過8周的時間具有至少3%的皮膚保溼作用，優選至少5%，更優選至少7%的皮膚保溼作用。5.根據權利要求1-4中任一項的產品，其在如本文所定義地進行測量時，經過8周的時間能夠將整體皮膚彈性R2^^是高至少10%，優選至少15%，更優選至少20%。6.根據權利要求1-5中任一項的產品，其中透明質酸或其鹽包括硼酸和/或聚合a輕基酸的酯，優選聚乳酸或乙醇酸的酯。7.根據權利要求1-6中任一項的產品，其中透明質酸或其鹽與二乙烯基碸(DVS)完全或部分交聯。8.根據權利要求1-7中任一項的產品，其還包括活性成分，優選藥理活性物質。9.根據權利要求1-8中任一項的產品，其還包括水溶性賦形劑，優選乳糖。10.組合物，其包括如權利要求1-9中任一項定義的產品和活性成分，優選地，該活性成分是藥理活性劑。11.根據權利要求10的組合物，其還包括水溶性賦形劑，優選乳糖。12.藥物組合物，其包括有效量的如權利要求1-9中任一項定義的產品，以及藥學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑。13.藥物組合物，其包括有效量的如權利要求1-9中任一項定義的產品作為媒介物，以及藥理活性劑。14.化妝品，其包括有效量的如權利要求1-9中任一項定義的產品作為活性成分。15.衛生、醫療或手術用品，其包括如權利要求1-9中任一項定義的產品；優選所述用品是手術海綿、傷口癒合海綿，或者急救繃帶或其它傷口包紮材料中包含的部分。16.藥物膠嚢或微膠嚢，其包括如權利要求1-9中任一項定義的產品。17.眼科中執行程序的方法中的改進，包括使用如權利要求1-9中任一項定義的產品，或如權利要求10-13中任一項定義的組合物。18.骨關節炎治療中執行程序的方法中的改進，其包括使用權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物。19.癌症治療中執行程序的方法中的改進，其包括使用權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物。20.進行藥理活性劑的透皮施用的方法中的改進，其包括使用權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物。21.進行藥理活性劑的皮膚施用的方法中的改進，其包括使用權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物。22.進行化妝品的皮膚施用的方法中的改進，其包括使用權利要求l-9中任一項定義的產品，或4又利要求10-13中任一項定義的組合物。23.—種眼科方法，其使用如權利要求1-9中任一項定義的產品，或如權利要求10-13中任一項定義的組合物。24.—種治療骨關節炎的方法，其包括對哺乳動物施用有效量的權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物，優選該施用是皮膚施用、透皮施用、口力l施用或通過注射。25.—種處理傷口的方法，其包括對哺乳動物施用有效量的權利要求1_9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物。26.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造治療骨關節炎的藥物中的用途。27.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造用於眼科治療的藥物中的用途。28.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造用於治療癌症的藥物中的用途。29.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造用於傷口處理的藥物中的用途。30.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造用於血管發生的藥物中的用途。31.權利要求1-9中任一項定義的產品或權利要求10-13中任一項定義的組合物在製造保溼劑中的用途。全文摘要保溼、化妝或抗皺紋產品包含透明質酸或其鹽，其中透明質酸或其鹽的平均分子量範圍是0.7-0.9MDa，包含所述產品的組合物，以及所述產品的用途。文檔編號A61L15/16GK101123942SQ200580045848公開日2008年2月13日申請日期2005年12月22日優先權日2005年1月3日發明者卡迪賈·施瓦切-阿布-德拉維,索倫·霍爾拜伊申請人:諾維信生物聚合物公司