芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應用的製作方法

2023-06-01 08:52:51 1

專利名稱：芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於醫藥應用領域，具體涉及芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應用。
背景技術：
芪參益氣滴丸(縮寫為QSYQ)是天士力集團獨家研製的治療心血管疾病的現代中藥，目前已經上市。芪參益氣滴丸是以現代科技提取黃芪、丹參、三七、降香中的有效成分精製而成的滴丸製劑，是中醫傳統理論和現在製劑技術結合的結晶。芪參益氣滴丸能夠顯著改善心肌損傷、心功能減退的各種症狀，具有劑量小、服用方便、溶出速度快、可直接經黏膜吸收入血、生物利用度高、療效高及無胃腸刺激、無明顯毒副作用的特點，適用於慢性心功能不全、心肌炎及後遺症、心肌梗塞恢復期、心肌纖維化。臨床前藥效學試驗表明，芪參益氣滴丸可以使心肌梗塞犬的梗塞範圍縮小，缺血性心電圖改善，血清酶CK和LDH活性降低，血漿ET和TXB2水平降低，6-Keto-PGFl α活性和6-Keto-PGFl α /ΤΧΒ2比值升高；可使心肌缺血再灌注損傷大鼠的梗塞範圍縮小，SOD活性增加。本品可使大鼠體外血栓長度縮短，重量減輕，並可使血漿及全血粘度降低；可使高脂血症家兔的TC、TG、LDL-C、VLDL-C水平降低，HDL-C水平升高，使主動脈TC含量和肝臟 TG及MDA含量降低；並可使花生四烯酸和膠原誘導的血小板聚集率降低；犬血流動力學試驗表明，本品可通過擴張冠脈血管使冠脈流量增加，使心肌耗氧指數降低；在不增加左室做功情況下，使心搏出量和心輸出量增加等。心肌肥厚是心肌細胞對持續性負荷增加的一種適應性反應。初期的心肌肥大有一定代償意義，但心肌肥大引起的心肌肥厚及心肌重構最終可導致心力衰竭，並已成為引起心血管疾病發病率和死亡率顯著升高的獨立危險因素。心肌纖維化是心肌重構的主要表現之一。心肌組織由心肌細胞和間質細胞構成， 而間質細胞主要是成纖維細胞，它能夠合成膠原，可以重新進入細胞周期，進行有絲分裂。 心肌內膠原主要由心臟成纖維細胞合成，成纖維細胞同時分泌膠原酶，心臟組織中膠原代謝非常活躍。因而，膠原合成和分解代謝的失衡會造成心臟結構和功能的異常。心肌重塑的關鍵是與心肌過載和損傷相關分子的激活，以往證據證明轉化生長因子(transforming growth factor beta, TGF-β )是與組織修復和心肌纖維化發展有關的一個重要的細胞因子，在哺乳動物體內，它有3種亞型，TGF-β 1，TGF-β 2，andTGF-β 3。 TGF-β 1可被血管緊張素II上調，TGF-β 1誘導產生心肌纖維化。在心肌纖維化發生、發展過程中具有促進肌性成纖維細胞的轉化，促進膠原基因表達，促進細胞外基質合成與沉積等作用。此外，在心肌肥厚和心衰的心肌內TGF-βΙ的表達是增強的。因此，TGF-βΙ有可能直接參與了導致心衰的心臟重塑過程。小鼠心臟在壓力過負荷的情況下發生了一過性炎症反應，伴隨有細胞因子與趨化因子的上調和巨噬細胞的聚集。炎性因子的上調刺激了 TGF-β上調，而TGF-β 1可促進心肌纖維化的形成。以往的研究表明，黃芪的有效成分對心肌纖維化還具有一定抑制作用，其作用可能與抑制TGF-β 1表達相關。而丹參主要活性成分對心肌肥厚具有顯著的改善作用。另外， 還有研究顯示，丹參和三七都能夠抑制大鼠肝纖維化。在左心室肥厚發生後，芪參益氣滴丸是否可以改善心肌纖維化等尚不清楚。本研究用壓力超負荷建立大鼠心肌肥厚模型，觀察QSYQ後給藥對心肌纖維化的改善作用。在縮窄大鼠升主動脈(Ascending aortic stenosis, AAS)後第4周末，用超聲心動圖檢測左心室壁厚度，取左心室壁厚度超過假手術組20%的大鼠，分別灌胃給予生理鹽水(AAS+NS， 4ml/kg/d)或 QSYQ (AAS+QSYQ，4ml/kg/d,含 QSYQ 0. 8g/kg/d)，連續給藥 4 周。假手術組分別灌胃給予等量的生理鹽水(Sham+NS)或QSYQ (Sham+QSYQ)，連續給藥4周。在第8周末， 用雷射都卜勒血流量掃描儀測量心臟表面血流量；測量心臟體重指數；測量心肌組織學和超微結構的變化；用天狼猩紅膠原染色法測量膠原含量；進行CD68和心肌細胞中轉化生長因子-1 (Transforming growth factor beta 1,TGF-β 1)的免疫組化染色。在壓力負荷引起的大鼠左心室肥厚發生後(第4周)，QSYQ可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數的增加，增加左心室射血分數和縮短分數，減少心肌纖維化範圍。同時，QSYQ 還可以抑制大鼠心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達。本研究發現，在壓力負荷引起的大鼠左心室肥厚發生後，QSYQ的後給藥可以抑制心肌的進一步肥大，改善心肌纖維化。

發明內容
本發明的目的在於提供芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化的藥物中的應用。本發明還提供芪參益氣滴丸在製備抑制心肌的進一步肥大的藥物中的應用。本發明所述應用是在左心室肥厚發生後，芪參益氣滴丸可以改善心肌纖維化。本發明所述應用是在左心室肥厚發生後，可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數的增加，增加左心室射血分數和縮短分數，減少心肌纖維化範圍。本發明所述應用是芪參益氣滴丸可以抑制大鼠心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達。本發明所述應用是在壓力負荷引起的左心室肥厚發生後，芪參益氣滴丸的後給藥可以抑制心肌的進一步肥大，改善心肌纖維化。本發明所述芪參益氣滴丸，可以根據現有技術製備，也可以從市場上購買，符合藥用標準即可。本發明的應用，可以通過口服芪參益氣滴丸應用，口服時可以日服三次，每次1-20 粒。本發明的應用，對於慢性心功能不全、心肌炎及後遺症、心肌梗塞恢復期、心肌纖維化的病人，可以改善症狀，延緩病情的進一步發展，通過體質的恢復逐漸緩解和改善病情，從而使疾病得到有效的治療。本發明的應用，可以通過口服芪參益氣滴丸應用，口服時一個療程可以是20 天-30天，優選4周為一療程，通過每天服用1. 5g完成。本發明提供了以下試驗，用以說明芪參益氣滴丸的應用。
材料與方法1.藥品和試劑QSYQ (天津天士力製藥股份有限公司提供，批號090108)，常溫下保存。於試驗前用生理鹽水配成適當濃度(200mg/ml)，用於灌胃給藥。QSYQ的生產嚴格按照現代化的標準，有標準化的質量控質體系控制產品的質量。複合麻醉劑配製水合氯醛4. 25g(北京東方龍順化學合成技術開發中心， XKB-OO1-0101-002 II )，硫酸鎂2. 12g(科密歐試劑，分析純，XKB-201-00129)，溶於 51. 95ml 蒸餾水中，備用。再將886mg戊巴比妥鈉(北京鼎國生物技術有限責任公司，Lot :77A10201) 溶於14. 25ml無水乙醇(北京化工廠，批號20090826)之中，然後加入前溶液，充分混勻， 再加入33.8ml 1，2-丙二醇(北京化工廠，批號20080629)，混勻製成複合麻醉劑。用量 3ml/kg。2.實驗儀器超聲心動圖檢測儀VEV0770，多倫多，加拿大；雷射都卜勒血流量灌注成像系統雷射都卜勒血流量儀，PeriScan, PERIMED，瑞士 ；顯示器，LXM-LI508，聯想，中國；小動物呼吸機:ALC_V8，上海奧利特生物科技有限公司，中國；
冷光源SJ8038HA2，SANJUN,中國；電子分析天平CP64，Startorius，德國；透射電鏡JEM-1230，JEOLLtd.，日本；體視顯微鏡XTL_500，南京盛光光電醫療儀器有限責任公司，中國；Digitalsight :DS-5M_U1，NIKON,日本；手術器械及消耗品大直剪、小直剪、彎鑷、直鑷、3-0絲線、銀夾、擴胸器、3/8彎針、一次性注射器。3.動物實驗中所有動物研究均經北京大學醫學部倫理委員會同意並依據有關規定執行。選擇雄性SD大鼠，體重95-105g，由北京大學醫學部實驗動物中心提供，合格證號 SCXK (京)2006-0001。置於相對清潔、22°C恆溫環境中，通風、通光良好，分籠飼養，給予標準飼料，實驗前禁食12小時，自由飲用水。4.心肌肥厚模型的建立SD大鼠，複合麻醉劑(3ml/kg)腹腔注射麻醉，仰臥固定於手術臺，行氣管插管。插管另一端連於小動物呼吸機行加壓呼吸(呼吸比1 1，呼吸頻率75次/min，潮氣量12mL/ kg)。電推剪胸部去毛，皮膚消毒，胸正中切口，打開胸腔。在胸腺下方分離升主動脈，將升主動脈用內徑為0. 9mm的銀夾使該部位動脈形成環形狹窄，然後逐層縫合胸部切口，縫合皮部。假手術組除不用銀夾狹窄升主動脈外，其餘操作步驟相同[81]。術後大鼠飼養於清潔級動物實驗室內，連續3日腹腔內注射20萬單位青黴素。5.分組及給藥方法5. 1 分組手術後第4周末，手術組和假手術組大鼠經超聲心動圖檢測，左心室室壁厚度與同期假手術組相比厚度增加20%以上視為造模成功，隨後將造模成功的31隻大鼠隨機分
5為手術+生理鹽水組(AAS+NS，η = 16)，手術+QSYQ組(AAS+QSYQ，η = 15)。假手術組隨機分為假手術+生理鹽水組(Sham+NS, η = 10)，假手術+QSYQ組(Sham+QSYQ, η = 10)。 8周後，在存活的大鼠中各組隨機選取9隻動物用於其他參數的測量。見表1。
表1各組參數檢測中使用動物數目
權利要求
1.芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化的藥物中的應用。
2.芪參益氣滴丸在製備抑制心肌的進一步肥大的藥物中的應用。
3.芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化同時抑制心肌的進一步肥大的藥物中的應用。
4.權利要求1-3任何一項的應用，其特徵在於，所述應用是在左心室肥厚發生後，改善心肌纖維化。
5.權利要求1-3任何一項的應用，其特徵在於，所述應用是在左心室肥厚發生後，抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數的增加，
6.權利要求1-3任何一項的應用，其特徵在於，所述應用是在左心室肥厚發生後，增加左心室射血分數和縮短分數。
7.權利要求1-3任何一項的應用，其特徵在於，所述應用是芪參益氣滴丸通過抑制心肌組織中⑶68和TGF-β 1的表達進行的。
8.權利要求1-3任何一項的應用，其特徵在於，所述應用是在壓力負荷引起的左心室肥厚發生後，芪參益氣滴丸的後給藥抑制心肌的進一步肥大，改善心肌纖維化。
全文摘要
本發明涉及芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化和心肌肥厚的藥物中的應用，芪參益氣滴丸是以現代科技提取黃芪、丹參、三七、降香中的有效成分精製而成的滴丸製劑，本發明的目的在於提供芪參益氣滴丸在製備改善心肌纖維化，抑制心肌的進一步肥大的藥物中的應用的藥物中的應用，本發明所述應用是在左心室肥厚發生後，芪參益氣滴丸可以改善心肌纖維化，本發明所述應用是在左心室肥厚發生後，可以顯著地抑制左心室舒張末期室壁厚度和心臟體重指數的增加，增加左心室射血分數和縮短分數，減少心肌纖維化範圍。
文檔編號A61K36/537GK102370699SQ20101025062
公開日2012年3月14日 申請日期2010年8月11日 優先權日2010年8月11日
發明者劉育英, 常昕, 李彥川, 胡白和, 韓晶巖 申請人:天津天士力製藥股份有限公司