一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法
2023-06-01 09:01:21
專利名稱：一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法
技術領域：
本發明涉及一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法，屬天然植物有效成 分分離純化領域。
背景技術：
酪醇是橄欖多酚中的一種強抗氧化劑並具有抗炎症作用。經實驗證明， 橄欖多酚能減輕低密度脂蛋白的氧化程度，預防冠心病，動脈粥樣硬化的 發生，也有舒緩血管平滑肌，降低血壓的能力。另外，酪醇能有力清除多 餘自由基，起到美容保健和殺菌的功效，對被動吸菸造成的氧化壓力有緩 解的效果，而且還可作為營養補充品和機能性食品食用，安全無副作用。
目前國外關於橄欖多酚中酪醇研究較為廣泛，主要研究從植物(主要是 歐橄欖樹)各個部位如果實、葉、莖和皮中提取分離橄欖多酚物質，並進行
實驗室中的定性定量研究(Danielle Ryan等，Journal of Chromatography A, 832(1999)87-96);也有從橄欖油和制橄欖油的工業廢水中提取其中的橄欖 多酴，有時酪醇含量也較高(M.Murkovic等J.Biochem. Biophys. Methods 61(2004)155—160; H.K.Obied等Food and Chemical Toxicology 45 (2007) 1238-1248)。國內對於橄欖中的酪醇研究較少，主要是從紅景天中提取酪 醇，如中國專利申請200610096054.8公開了一種酪醇植物提取物，它從紅 景天的根或根莖，或者從女貞子的成熟果實或花或者發酵後的豆醬、醋渣 中提取，該方法是用有機溶劑乙醇初提後再用大孔樹脂和矽膠層析柱提純。 何志勇等研究了中國南方所產橄欖中的橄欖多酚的提取檢測方法，提供了 定性定量的方法和依據(Food Chemistry, 2007,105 (3 ): 1307-1311 );另 外專利CN 1665764提供了生產及提純羥基酪醇的方法，但分離時所用設備 為超臨界萃取設備，投資較大。
發明內容
本發明的目的是提供一種將橄欖多酚粗品中的酪醇純度進一步提高的 方法，工藝較為簡單。
本發明實現過程如下
一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法，包括
(a) 將橄欖多酚粗粉用鹽酸水溶液溶解，溶解橄欖多酚粗粉所用的溶 液為5 7M的鹽酸，然後用鹼調節橄欖多酚溶液pH至2左右；
(b) 將氯化鈉加入上述橄欖多酚溶液中，製得食鹽飽和的橄欖多酴溶 液； '
(c) 用乙酸乙酯萃取食鹽飽和的橄欖多酴溶液中的酪醇；
(d) 除去乙酸乙酯萃取相中水分。
上述製備方法中，橄欖多酚粗粉和6M的鹽酸的料液比為lg-. (20~30ml)，且鹽酸溶解橄欖多酴粗粉的時間為15h 20h。
上述製備方法中，加入氯化鈉時需輕輕攪拌溶液，直至容器底部有不 溶氯化鈉沉積停止加入。
上述製備方法中，所用乙酸乙酯體積與溶解橄欖多酴粗粉6 M鹽酸體 積的比例為l: (0.4-0.5),且萃取時間為6 10min,共萃取2 4次。
上述製備方法中，無水硫酸鈉脫水所用柱子直徑為2 3cm,裝柱高度 與乙酸乙酯萃取相體積比例為lcm: (1(M5ml)。
本發明提供了一種可以有效提高橄欖多酚中酪醇純度的方法，具有明 顯的技術優點和優勢。該方法簡便，易於實施，按本工藝操作最後乙酸乙 酯相中酪醇純度能夠得到較大幅度提高，能夠達到70%~90%。 說明書附圖
圖1為酪醇標準品高效液相色譜圖2為乙酸乙酯萃取物高效液相色譜圖。
具體實施方式
下面通過具體實施實例對本發明作進一步說明。
本發明中橄欖多酚粗品為法國La Gardonnenque集團生產，上海崴僑商 貿有限公司提供，按說明書其成分主要為酪醇及羥基酪醇且兩者總含量約 為45%。
實施例1:
將橄欖多酚樣品lg溶於20ml 6M鹽酸，待溶解15小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用40ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min，萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約8cm,將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
圖1 、 2為溶於甲醇的酪醇標準品與最後工藝操作得到的乙酸乙酯相 在同一流速、流動相配比等洗脫條件下的高效液相色譜圖，其中兩圖中的 主峰均為酪醇。圖1為lmg/mL酪醇標準品進樣10nL的圖譜，主峰位於保 留時間1.962,圖2為乙酸乙酯按工藝萃取三次後乙酸乙酯相進樣20nL的 圖譜，主峰位於保留時間1.948,在兩圖中，在RT二13.152左右有一相同雜 峰，屬於高效液相色譜系統誤差，若不記該雜峰，則應用分析軟體按照面 積歸一化法，酪醇標準品主峰面積為100%,乙酸乙酯相中酪醇主峰面積即 酪醇在乙酸乙酯中的純度則達到89.78%。
實施例2:
將橄欖多酚樣品lg溶於25ml 6M鹽酸，待溶解15小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min,萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約10cm,將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。高效液相 色譜分析酪醇在乙酸乙酯中的純度則達到88.35%。
實施例3:
5將橄欖多酚樣品lg溶於30ml 6M鹽酸，待溶解15小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用60ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min,萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約12cm，將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。高效液相 色譜分析酪醇在乙酸乙酯中的純度則達到89.68%。
實施例4:
將橄欖多酚樣品lg溶於20ml 6M鹽酸，待溶解20小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為10min，萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約10cm,將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例5:
將橄欖多酚樣品lg溶於25ml 6M鹽酸，待溶解20小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2，再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用62.5ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為10min,萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約12cm，將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例6:
將橄欖多酚樣品lg溶於30ml 6M鹽酸，待溶解20小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2，再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用75ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為10min，萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約15cm,將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例7:
將橄欖多酚樣品lg溶於20ml 6M鹽酸，待溶解18小時後，用4M氫氧化鈉調pH為2，再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用48ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為8min,萃取2次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約10cm，將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例8:
將橄欖多酚樣品lg溶於20ml 6M鹽酸，待溶解18小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用40ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min,萃取3次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約12cm，將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例9:
將橄欖多酚樣品lg溶於25ml 6M鹽酸，待溶解18小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min,萃取3次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約15cm,將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
實施例10:
將橄欖多酚樣品lg溶於25ml 6M鹽酸，待溶解20小時後，用4M氫 氧化鈉調pH為2,再向燒杯中加入適量氯化鈉至飽和為止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振搖萃取時間為6min,萃取4次，收集所有有機相，用無水硫 酸鈉裝柱，裝柱高度約20cm，將乙酸乙酯相過柱除去其中水分。
權利要求
1.一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法，包括(a)將橄欖多酚粗粉用鹽酸水溶液溶解；(b)將氯化鈉加入上述橄欖多酚溶液中，製得食鹽飽和的橄欖多酚溶液；(c)用乙酸乙酯萃取食鹽飽和的橄欖多酚溶液中的酪醇；(d)除去乙酸乙酯萃取相中水分。
2. 根據權利要求l所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵 在於溶解橄欖多酚粗粉所用的溶液為5 7M的鹽酸，然後用鹼調節橄 欖多酴溶液pH至2左右。
3. 根據權利要求2所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵在於橄欖多酚粗粉與鹽酸的料液比為lg: (20 30ml)。
4. 根據權利要求l所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵 在於所用乙酸乙酯體積與溶解橄欖多酚粗粉鹽酸的體積比為1:(0.5~0.6 )。
5. 根據權利要求l所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵 在於所用乙酸乙酯萃取時間為6 10min,萃取次數為2 4次。
6. 根據權利要求l所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵 在於使用無水硫酸鈉除去乙酸乙酯萃取相中水分。
7. 根據權利要求6所述的提純橄欖多酴粗品中酪醇的方法，其特徵 在於無水硫酸鈉脫水所用柱子直徑為2 3cm,裝柱高度與乙酸乙酯萃 取相體積比例為lcm: (10 15ml)。
8. 根據權利要求l所述的提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法，其特徵 在於脫水後的乙酸乙酯萃取相中酪醇的純度為70% 90%。
全文摘要
本發明公開了一種提純橄欖多酚粗品中酪醇的方法，包括(a)將橄欖多酚粗粉用鹽酸水溶液溶解；(b)將氯化鈉加入上述橄欖多酚溶液中，製得食鹽飽和的橄欖多酚溶液；(c)用乙酸乙酯萃取食鹽飽和的橄欖多酚溶液中的酪醇；(d)除去乙酸乙酯萃取相中水分。本發明方法簡便，易於實施，按本工藝操作最後乙酸乙酯相中酪醇純度能夠得到較大幅度提高，能夠達到70％～90％。
文檔編號C07C37/72GK101575268SQ20091002299
公開日2009年11月11日 申請日期2009年6月22日 優先權日2009年6月22日
發明者劉博文, 惠俊峰, 朱曉麗, 朱晨輝, 鈺 米, 範代娣, 薛文嬌, 沛 馬, 馬曉軒, 駱豔娥 申請人:西北大學