一種半夏種莖生產方法與流程
2023-07-03 14:31:21
本發明涉及中藥材種植領域，具體為一種半夏種莖生產方法。
背景技術：
半夏又叫三步跳、守田等，屬天南星科。廣泛分布於中國長江流域以及東北、華北等地區。藥用植物，具有燥溼化痰，降逆止嘔，生用消癤腫作用，獸醫用以治鎖喉癀。
半夏的繁殖分為塊莖繁殖、珠芽繁殖和種子繁殖。半夏雌雄花序在同一個佛焰苞中，屬同株異花傳粉，一般只有較大塊莖才能抽出佛焰苞，其形成的種子在自然條件下萌發率非常低。經過長期採挖，野生半夏種源日益減少。而人工種植的自留種由於長期病菌積累，容易引起像軟腐病一類的病害發生。
技術實現要素：
本發明的目的在於利用植物組織培養技術，提供一種半夏種莖生產方法。
為達到上述目的，採用的技術方案為：一種半夏種莖生產方法，其步驟如下：
1）、外植體葉柄處理：
取健壯半夏葉柄，進行清洗和滅菌，然後切成0.5~1 cm小段；
2）、離體球莖誘導：
將切段的葉柄接種於離體球莖誘導培養基，pH 5.8~6.0，25~27 ℃，光照度1600 Lx，光照12 h/d，培養100~120天後待瓶內培養基全部失水乾燥，再將離體球莖取出用於大棚馴化；
3）、大棚馴化：
大棚苗床長寬高為1000 cm×150 cm×10 cm，苗床分為三層，底層為5 cm厚的育苗基質；中層為播種層，在底層上鋪一層網，將半夏離體球莖播於網上，株距為1~3 cm，行距為8~10 cm ；上層為3~5 cm厚的育苗基質覆蓋層；馴化控制大棚內光照度3500~4500 Lux、空氣溼度60~75%、溫度25~28 ℃，馴化栽培100~120天後即可採收半夏種莖；
所述離體球莖誘導培養基為：1/2MS+6-BA 0.3~0.5 mg/L+IBA 0.05~0.1 mg/L+白糖3%+瓊脂0.3% 。
所述步驟1）中，清洗和滅菌是用75%乙醇擦洗半夏葉柄表面, 再用自來水衝洗，再用75% 乙醇浸泡30 s，再用滅菌去離子水涮洗3次，再用0.1% HgCl2 浸泡8~10 min，再用滅菌去離子水涮洗5次，最後用無菌濾紙吸乾材料表面水份即可。
所述步驟3）中，苗床中層的網為尼龍網，線徑為1.5-2 mm，網孔大小為5 mm 。
所述步驟3）中，採收的半夏種莖按大小分級再進行保存或移栽。
採用上述方案的有益效果為：這種半夏種莖生產方法實現從外植體直接誘導得到離體球莖，減少了愈傷組織、胚狀體等誘導過程，簡化了離體球莖誘導步驟。大棚馴化採用無土栽培，可減少生產過程外界病菌對種莖的侵染，降低了栽培後的病害，具有較強的抗逆性。馴化過程中離體球莖播種於網上，提高了採收效率。馴化栽培一季即可收穫大量優質的半夏種莖供應大田大面積栽培，整個生產工藝簡單易行，操作簡單，較大地適用於大規模生產。
具體實施方式
下面結合實施例進一步介紹本發明，但本發明不僅限於下述實施例，可以預見本領域技術人員在結合現有技術的情況下，實施情況可能產生種種變化。
實施例1
一種半夏種莖生產方法，其步驟如下：
1）、外植體葉柄處理：選用葉片還未展開的健壯半夏葉柄作為外植體，用75%乙醇擦洗半夏葉柄表面, 再用自來水衝洗，再用75% ( V/V，體積比) 乙醇浸泡30 s，再用滅菌去離子水涮洗3次，再用0.1% ( M/V，體積質量比) HgCl2 浸泡8~10 min，再用滅菌去離子水涮洗5次，最後用無菌濾紙吸乾材料表面水份完成清洗和滅菌處理，然後切成0.5~1 cm小段。
2）、離體球莖誘導：將切段的葉柄接種於離體球莖誘導培養基：1/2MS+6-BA 0.3 mg/L+IBA 0.05 mg/L+白糖3%+瓊脂0.3% ，pH 5.8~6.0，25~27 ℃，光照度1600 Lx，光照12 h/d，培養100~120天後待瓶內培養基全部失水乾燥，可形成帶芽的離體球莖，再將離體球莖取出用於大棚馴化。
3）、大棚馴化：大棚苗床長寬高為1000 cm×150 cm×10 cm，為了便於採收，苗床設計為三層，底層為5 cm厚的育苗基質。中層為播種層，在底層上鋪一層尼龍網，線徑為1.5-2 mm，網孔大小為約為5 mm，將半夏離體球莖播於網上，株距為1~3 cm，行距為8~10 cm。上層為3~5 cm厚的育苗基質覆蓋層。馴化控制大棚內光照度3500~4500 Lux、空氣溼度60~75%、溫度25~28 ℃，馴化栽培100~120天後即可採收半夏種莖。採收時緩慢揭起尼龍網，慢慢抖下基質，即可快速的採收半夏種莖。採收的半夏種莖按大小分級再進行保存或移栽。
上述步驟1）中，外植體還可以選擇半夏葉片、塊莖、株芽等進行培養，經過反覆試驗選擇葉柄為外植體進行組培汙染較低且誘導效果好，是最優選的方案。
實施例2
在實施例1中，步驟2）、離體球莖誘導，所用的培養基替換為：1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+白糖3%+瓊脂0.3% ，其餘步驟相同。
經試驗證明，上述離體球莖誘導培養基：1/2MS+6-BA 0.3~0.5 mg/L+IBA 0.05~0.1 mg/L+白糖3%+瓊脂0.3% ，用於半夏葉柄組織培養其誘導效果好，經過誘導培養100~120天可得到用於大棚馴化的離體球莖。病菌感染率小，生產工藝簡單，產值高，適於大規模生產。