一種抗hbv的藥物組合物及其應用的製作方法
2023-05-27 19:34:26
一種抗hbv的藥物組合物及其應用的製作方法
【專利摘要】本發明涉及一種抗HBV的藥物組合物及其應用,該組合物由活性成分和輔料製備而成,其特徵在於:所述的活性成分包括雷公藤乙素或/和其衍生物。本發明具有較強的抗HBV的生物活性,並且不會產生耐藥性,為治療B肝提供了新的候選藥物。
【專利說明】一種抗HBV的藥物組合物及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於醫藥【技術領域】,具體而言,涉及一種抗病毒藥物,尤其涉及一種抗HBV的藥物組合物及其應用。
【背景技術】
[0002]乙型病毒性肝炎病毒(HBV)是引起乙型病毒性肝炎罪魁禍首。慢性乙型病毒性肝炎治療的目的是在肝臟發生明顯損傷之前抑制HBV的複製。治療的初期目標是抑制病毒複製,阻止肝臟損傷;治療的遠期目標是清除病毒,阻止疾病向肝硬化以及肝癌的發展,延長生存期。抗病毒治療還用於防止肝移植後、化療或免疫抑制治療時乙型病毒性肝炎病毒的再複製。因為目前所有的抗病毒藥物不能有效的清除HBV DNA,所以實現長期清除HBV的目標幾乎不可能實現。慢性乙型病毒性肝炎的治療有兩種方式:免疫調節和抑制病毒。肝移植可用於對藥物治療無效的終末期肝病患者。
目前市場上治療乙型病毒性肝炎的方法主要有注射幹擾素類藥物、服用阿德福韋酯,恩替卡韋等核苷類似物類藥物以及注射乙型病毒性肝炎疫苗三種方式。但上述三種方式均存在比較大的缺點,長期服用幹擾素會造成患者出現流感感樣症狀、並可能使患者出現消化道症狀、脫髮等不良反應。嚴重者還能抑制骨髓導致白細胞、血小板減少,這樣就會導致患者的凝血功能下降。而服用阿德福韋酯,恩替卡韋等核苷類似物類則會導致乳酸性酸中毒和重度的脂肪性肝腫大,且很多患者服用半年左右就會耐藥,而且還不能隨時停藥,否則可能會導致病情迅速惡化,甚至轉化為肝硬化、肝癌。雖然乙型病毒性肝炎疫苗能夠抑制HBV的複製,其安全性和耐受性都很好,但是還不足以打破乙型病毒性肝炎的免疫耐受狀態進而清除HBV,仍需輔 以抗乙型病毒性肝炎藥物的治療。
[0003]雷公藤(Tripterygium willfordii Hook, f.)系衛矛科雷公藤屬植物,其藥用部位是該植物的根及根莖。雷公藤藥材中最重要的有效且毒性大的成分是雷公藤甲素,而雷公藤乙素(Tripdiolide,又名雷公藤羥內酯、雷公藤內酯二醇)是有效卻毒性低的二萜內酯成分。通過檢索國內外文獻,尚沒有發現雷公藤乙素具有抗乙型病毒性肝炎病毒活性的文獻報導。
【發明內容】
[0004]為了克服現有乙型病毒性肝炎治療藥物毒副作用大,治療過程中易出現耐受性等不足,本發明通過對天然藥物進行研究,提供一種植物源性的抗HBV的藥物。該治療藥物以雷公藤乙素為活性成分,其用於乙型病毒性肝炎患者治療時,療效確切,毒副作用小,且雷公藤乙素的安全性和耐受性均較好,具有十分廣泛的醫療應用前景。
本發明的目的是這樣實現的:
一種抗HBV的藥物組合物,由活性成分和輔料製備而成,所述的活性成分包括雷公藤乙素或/和其衍生物。
[0005]優選地,如上所述抗HBV的藥物組合物,其中所述的活性成分由雷公藤乙素組成。[0006]進一步優選地,如上所述抗HBV的藥物組合物,其中所述的藥物組合物為口服製劑,所述的口服製劑包括片劑、膠囊劑、顆粒劑。
[0007]本發明通過體外試驗研究證明,雷公藤乙素在體外抗乙型病毒性肝炎病毒(HBV)的效果很顯著。因此,本發明還提供一種製藥用途,即:雷公藤乙素或/和其衍生物在製備抗HBV的藥物中的應用。優選的方案為:雷公藤乙素作為唯一活性成分在製備抗HBV的藥物中的應用。
[0008]與現有技術相比,本發明涉及的含有雷公藤乙素的藥物組合物具有如下突出的優勢:
(1)有較強的抗乙型病毒性肝炎病毒的生物活性,並且不會產生耐藥性;
(2)為治療B肝提供了新的候選藥物,可以單獨作為防治B肝的藥物使用,具有非常重要的臨床意義。
【具體實施方式】
[0009]HBV是一種引起急性和慢性壞死炎症性肝病及肝細胞癌的DNA病毒。HBV具有特異嗜肝性、非細胞損傷與裂解、易發展為慢性等特徵。H印G2.2.15細胞是能夠表達HBV抗原和分泌完整HBV顆粒的肝胚瘤細胞系,也是目前用來研究HBV複製及篩選抗B肝藥物最為合適的細胞模型系統。本發明採用H印G 2.2.15細胞的培養,MTT比色法檢測藥物對細胞的毒性,ELISA檢測上清HBs Ag及HBe Ag,從而證實了雷公藤乙素具有抗HBV的藥效。具體試驗過程如下:
UHepG2.2.15細胞培養
細胞培養液為MEN培養液,每IOOmL含胎牛血清10mL,3% (W/V)的穀氨醯胺溶液lmL,G418 380 μ g/mL,慶大黴素50U/mL ;細胞消化液為0.25% (W/V)的胰酶溶液,用Hanks液配製。
細胞培養方法:將H印G 2.2.15細胞解凍後,接種入25cm2培養瓶,濃度為I X IO5個/mL,待細胞長滿後,加0.25% (W/V)的胰酶溶液37°C消化3-5min。加培養液吹打,I: 3傳代,每天收集上清,連續2周,冷藏待檢。
2、藥物的細胞毒性試驗
用MTT法測定藥物的細胞毒性,96孔板每孔加濃度為3 X IO5個細胞/mL的H印G 2.2.15細胞100 μ L,37°C 5% CO2培養箱中培養。一天後,換用含藥培養液,每個濃度4孔,將雷公藤乙素用DMEM培養液稀釋成(200 μ g/mL, 100 μ g/mL, 50 μ g/mL, 25 μ g/mL),每3天換同濃度含藥培養液,370C 5% CO2培養箱中繼續培養8天。向每孔細胞中加入5 μ g/mL MTT 10 μ L,每孔中存留有上清100μ L,37°C 5% CO2培養箱中培養4h後,酶標儀570/630nm波長測定OD值。細胞抑制百分率=[(細胞對照OD值-藥物作用組OD值)/細胞對照OD值]X 100%。按Reed-Muench法計算最大無毒濃度(TCO)。每個濃度雷公藤乙素進行兩批實驗,每批進行3組平行實驗。表1顯示雷公藤乙素對IfepG2.2.15細胞有低毒作用,它的最大無毒劑量是100 μ g/mL。
表1雷公藤乙素對HepG2.2.15細胞的毒性作用
【權利要求】
1.一種抗HBV的藥物組合物,其特徵在於:由活性成分和輔料製備而成,所述的活性成分包括雷公藤乙素或/和其衍生物。
2.根據權利要求1所述抗HBV的藥物組合物,其特徵在於:所述的活性成分由雷公藤乙素組成。
3.根據權利要求1或2所述抗HBV的藥物組合物,其特徵在於:所述的藥物組合物為口服製劑,所述的口服製劑包括片劑、膠囊劑、顆粒劑。
4.雷公藤乙素或/和其衍生物在製備抗HBV的藥物中的應用。
5.雷公藤乙素作為唯一活性成分在製備抗HBV的藥物中的應用。
【文檔編號】A61P31/20GK103989688SQ201410199848
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2014年5月13日 優先權日:2014年5月13日
【發明者】於法周 申請人:於法周