疏水性化合物的穩定劑的製作方法
2023-05-28 10:52:11 2
專利名稱：疏水性化合物的穩定劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及使光和熱不穩定的疏水性化合物，特別是檜木醇(hinokitiol)穩定化的穩定劑、由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑以及利用其的穩定方法。
背景技術：
不論是天然物或合成物，也不管由於是化合物而具有優良的活性，由於穩定性的欠缺在醫藥、食品以及農藥等領域不能在實際上獲得應用的情況是很多的。例如，青森的羅漢柏的酸性油中存在有檜木醇(hinokitiol)(β-崖柏素(β-thujaplicin))，以及4-異丙烯基卓酚酮(β-dolabrin)、γ-崖柏素(γ-thujaplicin)、α-崖柏素(α-thujaplicin)及4-乙醯基託酚酮(4-acetyltroplone)等具有7元環的化合物。其中，檜木醇是1963年野副等人從臺灣檜柏(hinoki)中純化獲得的，並且確定了其化學結構式，報告了其生理活性相關的抗微生物活性、細胞障礙作用、金屬蛋白酶障礙作用、酪氨酸酶障礙活性、植物生長阻礙活性等多種生理活性(醫藥期刊39，1283-1294(2003)；Antimicrob.Agents Chemother.49，2519-2521(2005)；Arch.Pharm.Res.22，335-339(1999))。由於其具有如此多樣的生理活性，其在食品保存(特開平6-277019號公報、特開平6-153788號公報.)、防止變色(特開昭59-085279號公報)、與鋅組合成感染治療藥方面的應用已經得到研究。然而，檜木醇本身是一種升華性物質，並且在光的作用下會加速分解，因此限制了其在通常環境下的使用，不能達到充分的實用化(J.Am.Chem.Soc.83.1768-1769(1961)；Can.J.Microbiol.19，1177-1180(1973)；Biosci.Biotechnol.Biochem.67，1996-1998(2003))。
關於檜木醇的穩定化，有配合有機酸、將PH調節為5.0-6.0的方法(特開平9-188620號公報)、使用表面活性劑等的乳化分散方法(特開平10-291906號公報)、將檜木醇做成鋁鹽或/及做成與鋁化合物的配位化合物等方法(WO97/02025)等。然而以上任一方法都不能達到充分的穩定性。
發明內容
本發明的課題是關於熱穩定性和光穩定性等穩定性差的疏水性化合物的穩定化。
本申請發明含有以下實施方式。
[1]以穩定疏水性化合物為目的的穩定劑，所述的穩定劑由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成。
[2]1所述的穩定劑，所述的親水性鏈段是聚乙二醇。
[3]1或2所述的穩定劑，所述的疏水性鏈段是聚胺基酸或其衍生物。
[4]3所述的穩定劑，所述的聚胺基酸是從由聚穀氨酸、聚天冬氨酸、其衍生物及其一個或多個混合物所組成的群組中選擇出來的。
[5]1～4中任意一個所述的穩定劑，所述的嵌段共聚物的化學式為(I)或(II)
或
[上述各式中R1及R3分別獨立地表示氫原子或者由可以被保護的官能團置換的或未置換的低級烷基；R2表示氫原子、飽和或不飽和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羥基、飽和或不飽和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低級烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示從由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；L2表示從由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；n是10～2500的整數；x和y是，相同或不同的，兩者之和為10～300的整數，並且x比y是在1:1～0:1的範圍內，並且x和y是分別隨意存在的；q是1或2的整數。] [6]1～5中任意一個所述的穩定劑，所述的疏水性化合物選自由抗生素、抗菌素、抗腫瘤劑、抗炎症劑、解熱劑、鎮痛劑、抗浮腫劑、鎮咳祛痰劑、鎮靜劑、肌肉鬆弛劑、抗癲癇劑、抗潰瘍劑、抗憂鬱劑、抗過敏劑、強心劑、抗心律失常劑、血管擴張劑、降血壓劑、治療糖尿病劑、體內平衡劑、多肽、激素劑、抗酸化劑、齒齦疾患劑及維生素所組成的群組。
[7]1～6中任意一個所述的穩定劑，所述的疏水性化合物選自由檜木醇、輔酶Q10、維生素E或其衍生物、維生素A或其衍生物、維生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚組成的群組。
[8]7所述的穩定劑，所述的疏水性化合物是檜木醇。
[9]疏水性化合物的穩定方法，包括由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑和前述疏水性化合物相混合，使得該嵌段共聚物和該疏水性化合物相互作用的步驟；或者，在由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑的作用下將前述疏水性化合物包封而形成微膠囊的步驟。
[10]9所述的方法，所述的親水性鏈段是聚乙二醇。
[11]9或10所述的方法，所述的疏水性鏈段是聚胺基酸或其衍生物。
[12]11所述的方法，所述的聚胺基酸選自由聚穀氨酸、聚天冬氨酸或其衍生物及其1個或多個的混合物所組成的群組。
[13]9～12中任意一個所述的方法，嵌段共聚物的化學式為(I)或 (II)
或
[上述各式中R1及R3分別獨立地表示氫原子或者表示由可以被保護的官能團置換的或未置換的低級烷基；R2表示氫原子、飽和或不飽和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羥基、飽和或不飽和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低級烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示從由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；L2表示從由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；n是10～2500的整數；x和y是，相同或不同的，兩者之和為10～300的整數，並且x比y是在1:1～0:1的範圍內，並且x和y是分別隨意存在的；q是1或2的整數。] [14]9～13任意一個所述的方法，所述的疏水性化合物選自由抗生素、抗菌素、抗腫瘤劑、抗炎症劑、解熱劑、鎮痛劑、抗浮腫劑、鎮咳祛痰劑、鎮靜劑、肌肉鬆弛劑、抗癲癇劑、抗潰瘍劑、抗憂鬱劑、抗過敏劑、強心劑、抗心律失常劑、血管擴張劑、降血壓劑、治療糖尿病劑、體內平衡劑、多肽、激素劑、抗酸化劑、齒齦疾患劑及維生素所組成的群組。
[15]9～14中任意一個所述的方法，所述的疏水性化合物選自由檜木醇、輔酶Q10、維生素E或其衍生物、維生素A或其衍生物、維生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚組成的群組。
[16]15所述的方法，所述的疏水性化合物是檜木醇。
通過本發明的嵌段共聚物的使用，可以實現對在光和/或熱的條件下會引起異構化反應的廣範圍的疏水性化合物的穩定化。
圖1表示檜木醇的結構及其異構化。
圖2表示各種載體對於檜木醇的光穩定性的影響 圖3表示各種載體對於檜木醇的熱穩定性的影響
具體實施例方式 本發明提供了，由含有親水性鏈段和疏水性鏈段嵌段共聚物所組成的可以通用於疏水性化合物的穩定劑。作為一種實施方式的本發明的穩定劑，能使檜木醇穩定，與在十二烷基硫酸鈉(SDS)的作用下SDS微膠囊化檜木醇、在卵黃卵磷脂的作用下形成的微膠囊化檜木醇、在聚甲基丙烯酸甲酯的納米粒子中含有的檜木醇進行比較，確認顯示出對光和熱的高度穩定性。
本發明中能使用的嵌段共聚物是，含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物。這些嵌段共聚物，只要是符合本發明的目的，可以是含有任何一種親水性鏈段和任何一種疏水性鏈段的嵌段共聚物，但具體來說包含下述物質。
親水性鏈段可以列舉出但並不限於下述物質聚(乙二醇)(或聚(環氧乙烷))、多糖、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(乙烯醇)、聚(丙烯醯胺)、聚(丙烯酸)、聚(甲基丙烯醯胺)、聚(甲基丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸酯)、聚(丙烯酸酯)、聚胺基酸、聚(蘋果酸)或者它們的衍生物等構成的鏈段。此處，多糖有澱粉、右旋糖苷、果聚糖、半乳聚糖等。在這些物質中，聚乙二醇鏈段在一個末端具有各種官能團、並且鏈段的大小可以被控制而可以容易利用，所以優選聚乙二醇。
另一方面，疏水性鏈段可以列舉出但並不限於下述物質聚(甲基丙烯酸酯-co-甲基丙烯酸)、聚(天冬氨酸衍生物)和聚(穀氨酸衍生物)，例如，聚(天冬氨酸-β-苄酯)、聚(L-天冬氨酸-β-苄酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸β-烷酯)、聚(天冬氨酸β-烷酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-烯丙酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯-co-天冬氨酸)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯)、聚(天冬氨酸-β-芳烷酯-co-天冬氨酸)、聚(β-烷基天冬醯胺)、聚(β-烷基天冬醯胺-co-天冬氨酸)、聚(β-芳烷基天冬醯胺)、聚(β-芳烷基天冬醯胺-co-天冬氨酸)、聚(穀氨酸-γ-苄酯)、聚(L-穀氨酸-γ-苄酯-co-穀氨酸)、聚(穀氨酸-γ-烷酯)、聚(穀氨酸-γ-烷酯-co-穀氨酸)、聚(聚穀氨酸-γ-烯丙酯-co-穀氨酸)、聚(穀氨酸-γ-芳烷酯)、聚(穀氨酸-γ-芳烷酯-co-穀氨酸)、聚(γ-烷基穀氨醯胺)、聚(γ-烷基穀氨醯胺-co-穀氨酸)、聚(γ-芳烷基穀氨醯胺)、聚(γ-芳烷基穀氨醯胺-co-穀氨酸)、聚(丙交酯)、聚(丙交酯-co-乙交酯)、聚(ε-己內酯)、聚(δ-戊內酯)及聚(γ-丁內酯)等的聚(胺基酸衍生物)。
任意地，在這樣的聚(胺基酸衍生物)鏈段中，在側鏈上具有羧基的物質，其本身為公知的，例如，聚(L-天冬氨酸-γ-苄酯-co-穀氨酸)或聚(L-穀氨酸-γ-苄酯-co-穀氨酸)的苄基通過加水分解而被去除之後，通過與對應的乙醇或氨反應，交換成酯基或醯胺基，此時，通過變化乙醇和氨的反應量，就可以獲得期望比例的在側鏈上具有羧基的疏水性鏈段。在此時，聚(L-天冬氨酸-γ-苄酯)在加水分解的作用下，生成β重排的天冬氨酸。未發生β重排的天冬氨酸與發生了β重排的天冬氨酸的比例大約是1:3，這是已知的。理所當然，含有發生了β重排的天冬氨酸及其衍生物的疏水性鏈段是包含在本發明中的。天冬氨酸、穀氨酸，可以是任一個光學活性型物質，或它們的混合物。以上的親水性鏈段和疏水性鏈段是通過其本身已知的連接基，例如酯鍵、醯胺鍵、亞氨基、碳-碳鍵、醚鍵等而連接的。
特別是，容易製造的，本發明可以方便使用的嵌段共聚物，可以列舉出具有下述化學式(I)或(II)所示的物質。
或
上述各式中R1和R3分別獨立地表示氫原子或者表示由可以被保護的官能團置換的或未置換的低級烷基；R2表示氫原子、飽和或不飽和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羥基、飽和或不飽和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低級烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；(然而，R5是1個嵌段共聚物中的各胺基酸單元中任意的選擇可能。)L1和L2分別獨立地表示連接基，n是10～2500的整數，x是10～300的整數，y表示1或2的整數。可以被保護的官能基舉例是，羥基、縮醛基、縮酮基、醛基、糖殘基。R1和R3表示可以被保護的官能團置換後的低級烷基情況下的親水性鏈段是可以根據，例如WO96/33233、WO96/32434、WO97/06202中記載的方法。低級烷基是碳原子數在例如7個以下，優先是表示碳原子數在4個以下的直鏈或支鏈烷基，包括例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和異丁基等。
連接基總的說來因嵌段共聚物的製造方法的不同而變化因此不是被限定的，具體而言，可以列舉的連接基有，L1可以選自-NH-、-O-、-O-Z-NH-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z及-O-CO-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組；L2可以-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組。
本發明可以使用的特別好的嵌段共聚物是，聚乙二醇(PEG)-聚(L-天冬氨酸-β-苄酯)嵌段共聚物(以下略稱為「PEG-PBLA」)。PEG-PBLA可以是，例如，PEG-PBLA-5-20-100(PEG的分子量為5,000、天冬氨酸的聚合度為20，苄基化率為100％)、PEG-PBLA-12-40-50(PEG的分子量為12,000、天冬氨酸的聚合度為40，苄基化率為50％)、PEG-PBLA-12-50-50(PEG的分子量為12,000、天冬氨酸的聚合度為50，苄基化率為50％)。
本發明的一個實施方式是，疏水性化合物在嵌段化合物作用下被微膠囊化(藥物被包在微膠囊內)，從而其穩定化可以實現。例如，檜木醇是在光及/或熱條件下發生異構化反應，嵌段共聚物的對異構化反應的阻礙是，在以檜木醇/嵌段共聚物1mg/1.2mg為出發物質(檜木醇相對於嵌段共聚物處於超過剩的狀態)的情況下被認定的。因此可以認為，使檜木醇與嵌段共聚物僅僅是相互作用也可以起到對異構化反應的立體性阻礙，使檜木醇穩定化。因此，由本發明中的嵌段共聚物組成的穩定劑是可以用於在光和熱下能被引發異構化反應的廣範圍的疏水性化合物。
因此，本發明的在嵌段共聚物的作用下可以被穩定的化合物不限於檜木醇，可以列舉出例如在光和熱下被引發異構化反應的廣範圍的疏水性化合物，沒有特別的限定，但是可以列舉出例如抗生素、抗菌素、抗腫瘤劑、抗炎症劑、解熱劑、鎮痛劑、抗浮腫劑、鎮咳祛痰劑、鎮靜劑、肌肉鬆弛劑、抗癲癇劑、抗潰瘍劑、抗憂鬱劑、抗過敏劑、強心劑、抗心律失常劑、血管擴張劑、降血壓劑、治療糖尿病劑、體內平衡劑、多肽、激素劑、抗酸化劑、齒齦疾患劑及維生素等。具體地說，有檜木醇、兩性黴素B、制黴菌素、雙羥萘酸撲蟯寧(pyrvinium pamoate)、甲氨喋呤、絲裂黴素C、道諾黴素、亞德裡亞黴素、順鉑、DACH鉑、紫衫醇及其衍生物、長春新鹼、喜樹鹼及其衍生物、類固醇、吲哚美辛、水楊酸甲酯、芬太奴、檜木醇、輔酶Q10、維生素E及其衍生物、維生素A及其衍生物、維生素C及其衍生物、α-硫辛酸及多酚等。
特別好的疏水性化合物是檜木醇。根據本發明，可以極力抑制檜木醇在熱分解、光分解之時發生的超氧陰離子自由基和羥自由基的影響，提供可以實現檜木醇的各種目的的有效使用的組成物。
作為穩定劑使用的嵌段共聚物的量，可以根據嵌段共聚物的分子量及化合物的種類而進行適當的變化，沒有特別的限定，但是以摩爾比計算，相對於化合物是1嵌段共聚物是0.0001～10，優選可以是0.001～1。
作為本發明的實施例的穩定化方法之一的將疏水性化合物封入進由本發明的嵌段化合物所組成的穩定劑中而製造微膠囊的情況，該方法並非特別限定，例如根據在特開2003-26812或特開2003-342168號公報中公開的方法就可以進行。具體的一個例子是，將由親水性鏈段和疏水性鏈段構成的嵌段共聚物及疏水性化合物，溶解在揮發性的有機溶劑，例如甲醇、異丙醇、丙酮、乙腈、乙酸甲酯、乙酸乙酯、四氫呋喃、二乙醚、環已胺等及它們的混合溶劑等常溫下具有揮散性的溶劑中之後，將該有機溶劑去除之後所獲得的膜均一地分散在水中，在充分的時間如在2小時～24小時、適宜溫度如4℃～室溫下進行攪拌。所獲得的溶液在適宜的超聲波下進行照射，使用動態光散亂光度計(例如大塚電子DLS-7000DH)進行粒子徑的測定，通過凝膠(例如PD-10 columns，GE healthcare bioscience股份有限公司)過濾分離未包入微膠囊的化合物。
此外，使疏水性化合物與本發明相關的嵌段共聚物穩定劑相互作用而實現穩定化的情況下，可以將兩者在適當的溶劑中混合，可以去除不發生相互作用的疏水性化合物(自由化合物)。
本發明的穩定劑適用於醫藥品、農藥、食品等多種用途，例如作為藥品的劑型是但不限於丸劑、顆粒、糖漿、膠囊、注射劑、栓劑、吸入劑、藥膏等。
以下用比較例和實施例具體表示本發明。
實施例 以下、將聚乙二醇-co-聚(L-天冬氨酸-β-苄酯)嵌段共聚物略稱為PEG-PBLA。另外，例如在聚乙二醇的PEG鏈的平均分子量12,000，聚胺基酸鏈40個殘基，聚胺基酸側鏈的苄基化率是50％的情況下，在各嵌段共聚物之後標記12-40-50。
實施例1嵌段共聚物作用下的檜木醇的穩定化 將1mg的檜木醇(Wako，Osaka)和10mg的PEG-PBLA-5-20-100、PEG-PBLA-12-40-50或PEG-PBLA-12-50-50在螺口試管瓶中稱量，在二氯甲烷中溶解後，將二氯甲烷在氮氣流下揮發，得到檜木醇和嵌段共聚物形成的膜。向該膜中加入3ml的超純水，在遮光下，4℃下，攪拌12小時。將獲得的微膠囊溶液用5分鐘的超聲波照射，進行粒子直徑的測定，通過凝膠過濾(PD-10 columns)將未被包入微膠囊的檜木醇分離出來。檜木醇是在水中呈現330nm處有最大吸收峰，包入嵌段共聚物微膠囊的檜木醇是在324nm和372nm有最大吸收峰。下表1所示為所獲得的微膠囊中的檜木醇的包埋率(包埋入微膠囊的藥物量與藥物出發量的比值，wt/wt％)、封入率、微膠囊的尺寸。又，藥物的包埋率是，通過摩爾吸光係數求得未包埋進的藥物量值，並將該值從藥物的出發量中減去所獲得的差值作為包埋進微膠囊的藥物量值而求得的。封入率是指，包埋進微膠囊的藥物量相對於聚合物的出發量所佔的比例(wt/wt％)。聚合物微膠囊的粒子直徑可以採用所屬領域的技術人員所公知的方法進行測定，例如使用動態光散亂光度計(大塚電子(株)、DLS-7000DH)，按照其說明書可以進行測定。
表1.微膠囊化檜木醇
全部實驗使用1mg檜木醇 在聚合物10mg、檜木醇1mg作為出發物質的情況下，檜木醇的包埋率是，在使用PEG-PLBA-5-20-100、PEG-PLBA-12-50-50、PEG-PLBA-12-40-50的情況下最高，達到47-49％，封入率為4.7-4.9％(參考表1)。
作為出發物質而使用的檜木醇為1mg，PEG-PLBA-12-50-50的量為5mg、2.5mg、1.2mg、0.5mg、0.1mg的情況下，雖然被包埋的檜木醇的量隨著聚合物量的減少而減少，而聚合物量在2.5mg、1.2mg、0.5mg時卻是大致固定，封入率變高，微膠囊的尺寸也變大。
實施例2 嵌段共聚物作用下的檜木醇對光的穩定性 微膠囊化檜木醇(表1所示實驗1-6的樣本)的水溶液，在實驗室的光下，在室溫下保存，對它們的吸收強度變化經時測定，如圖2所示，324nm處的吸收強度在一天後維持在85％、在7天後維持在53％、14天後維持在40％，表明微膠囊化使得檜木醇的光分解被抑制。又、圖2所示結果表示的是實驗1-6的微膠囊的324nm處的吸收的平均值。即，可以認為圖1所示異構化反應是，在微膠囊化作用下被立體性地阻礙了。另外，這種異構化反應的阻礙是在檜木醇/嵌段聚合物為1mg/1.2mg作為出發物質的情況下(即檜木醇相對於嵌段聚合物是處於超過剩的狀態)也能觀察到，這表明在檜木醇和嵌段共聚物相互作用的狀態下也能引起對異構化反應的立體性阻礙。
實施例3嵌段共聚物作用下的微膠囊化檜木醇對熱的穩定性 微膠囊化檜木醇(表1所示實驗1-6的樣本)的水溶液，在遮光下，37℃下保存，對它們的吸收強度變化經時測定，324nm處的吸收極大值在14日之後仍然保持在97％，表明微膠囊化作用使得檜木醇的熱分解完全被抑制(圖3)。由於熱分解的情況下的光譜與光分解時的情況下的光譜完全相同，可以認為，光分解情況和熱分解情況下的分解物是環戊烯衍生物，熱分解阻礙和光分解阻礙是由同樣的機理引起的。
比較例1 單純的檜木醇對光或熱的穩定性 單純的檜木醇的對光或熱的穩定性的評價是採用與實施例2、3同樣的方法進行的。單純的檜木醇水溶液在實驗室的光下，室溫下保存，對330nm處的吸收強度經時測定，吸收強度在1日後已經減少至64％，8日後減少至9％，14日後減少至6％(圖2)。遮光下，37℃條件下，單純的檜木醇在330nm處的吸收強度是在8日後減少至57％、14日後減少至41％(圖3)。
比較例2十二烷基硫酸鈉(SDS)作用下的檜木醇的微膠囊化 將SDS(Wako，Osaka)7.2克與檜木醇453微克溶解在超純水2.5ml中，攪拌後通過凝膠過濾進行精製，獲得粒徑130納米的微膠囊。檜木醇的包埋率為12.4％，在328nm和387nm處具有極大吸收值。SDS作用下的微膠囊化檜木醇的對光或熱的安定性的評價是採用與實施例2、3及比較例1相同的方法進行的，但是測定328nm處的吸收強度。SDS微膠囊化檜木醇在328nm處的吸收強度是，在實驗室光下，常溫下保存，在1日後減少至65％、7日後減少至40％、14日後減少至30％(圖2)。遮光下，37℃條件下，328nm處的吸收強度是，在1日後減少至33％、在7日後減少至17％、在14日後減少至14％(圖3)。
比較例3含有檜木醇的脂質體 將卵黃卵磷脂(Wako，Osaka)30mg溶解於2ml的二氯甲烷之後，使二氯甲烷在氮氣流下揮發，得到卵黃卵磷脂的膜。向該膜中加入溶解於3ml超純水中的檜木醇，在遮光下，4℃攪拌，15分鐘超聲波照射，通過凝膠過濾法精製而獲得粒徑約200nm的粒子。檜木醇的包埋率為23.7％，封入率為0.8％，脂質體化檜木醇是在324nm和372nm處表現出極大吸收。卵黃卵磷脂作用下的脂質體化檜木醇對光和熱的穩定性評價採用與實施例2、3及比較例1相同的方法進行。脂質體化檜木醇在324nm處的吸收強度是在，實驗室的光下，常溫下保存，在1日後減少至38％、3日後減少至0％圖2)。遮光下，37℃條件下，328nm處的吸收強度是，在1日後減少至75％、在7日後減少至25％、在14日後減少至10％(圖3)。
比較例4含有檜木醇的聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)納米粒子 將檜木醇100mg和PMMA(Wako，Osaka)2g溶解在28ml的二氯甲烷中，再向其中加入含有SDS1g的超純水200ml並攪拌後，放入超高壓組織研磨機(Microfluidizer，Microfluidics Corporation，MA，USA)，在壓力1000bar及流速150ml/min的條件下製成乳化物。將二氯甲烷蒸發去除後，通過透析法將為SDS和未被包埋的檜木醇除去後，得到粒徑為55納米的粒子。PMMA納米粒子中包入的檜木醇在324nm和366nm處具有極大吸收，對光或熱的穩定性的評價是採用與實施例2、3及比較例1相同的方法進行的。PMMA納米粒子中所含的檜木醇在324nm處的吸收強度是，在實驗室光下，常溫下保存，在1日後減少至72％、7日後減少至25％、14日後減少至22％(圖2)。遮光下，37℃條件下，PMMA納米粒子中所含的檜木醇是穩定的，在14日後仍保持92％的吸收強度(圖3)。
權利要求
1.一種穩定疏水性化合物的穩定劑，其特徵是所述的穩定劑由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成。
2.根據權利要求1所述的穩定劑，其特徵是所述的親水性鏈段是聚乙二醇。
3.根據權利要求1或2所述的穩定劑，其特徵是所述的疏水性鏈段是聚胺基酸或其衍生物。
4.根據權利要求3所述的穩定劑，其特徵是所述的聚胺基酸是從由聚穀氨酸、聚天冬氨酸、其衍生物及其一個或多個混合物所組成的群組中選擇出來的。
5.根據權利要求1～4中任意一個所述的穩定劑，其特徵是所述的嵌段共聚物的化學式為(I)或(II)
或
上述各式中R1及R3分別獨立地表示氫原子或者由可以被保護的官能團置換的或未置換的低級烷基；R2表示氫原子、飽和或不飽和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羥基、飽和或不飽和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低級烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示從由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；L2表示從由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；n是10～2500的整數；x和y是，相同或不同的，兩者之和為10～300的整數，並且x比y是在1:1～0:1的範圍內，並且x和y是分別隨意存在的；q是1或2的整數。
6.根據權利要求1～5中任意一個所述的穩定劑，其特徵是所述的疏水性化合物選自由抗生素、抗菌素、抗腫瘤劑、抗炎症劑、解熱劑、鎮痛劑、抗浮腫劑、鎮咳祛痰劑、鎮靜劑、肌肉鬆弛劑、抗癲癇劑、抗潰瘍劑、抗憂鬱劑、抗過敏劑、強心劑、抗心律失常劑、血管擴張劑、降血壓劑、治療糖尿病劑、體內平衡劑、多肽、激素劑、抗酸化劑、齒齦疾患劑及維生素所組成的群組。
7.根據權利要求1～6中任意一個所述的穩定劑，其特徵是所述的疏水性化合物選自由檜木醇、輔酶Q10、維生素E或其衍生物、維生素A或其衍生物、維生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚組成的群組。
8.根據權利要求7所述的穩定劑，其特徵是所述的疏水性化合物是檜木醇。
9.一種疏水性化合物的穩定方法，其特徵是包括由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑和前述疏水性化合物相混合，使得該嵌段共聚物和該疏水性化合物相互作用的步驟；或者，在由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑的作用下將前述疏水性化合物包封而形成微膠囊的步驟。
10.根據權利要求9所述的方法，其特徵是所述的親水性鏈段是聚乙二醇。
11.根據權利要求9或10所述的方法，其特徵是所述的疏水性鏈段是聚胺基酸或其衍生物。
12.根據權利要求11所述的方法，其特徵是所述的聚胺基酸選自由聚穀氨酸、聚天冬氨酸或其衍生物及其1個或多個的混合物所組成的群組。
13.根據權利要求9～12中任意一個所述的方法，其特徵是嵌段共聚物的化學式為(I)或(II)
或
上述各式中R1及R3分別獨立地表示氫原子或者表示由可以被保護的官能團置換的或未置換的低級烷基；R2表示氫原子、飽和或不飽和的C1～C29脂肪族羰基或芳香族羰基；R4表示羥基、飽和或不飽和的C1～C30脂肪族氧基或芳基-低級烷氧基；R5表示苄基、烷基苄基或烯丙基；L1表示從由-NH-、-O-、-CO-、-CH2-、-O-Z-S-Z、-O-Z-NH-及-O-CO-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；L2表示從由-OCO-Z-CO-及-NHCO-Z-CO-、-O-Z-NH-(此處，Z是獨立的C1～C4烯基)所組成的群組中選出的連接基；n是10～2500的整數；x和y是，相同或不同的，兩者之和為10～300的整數，並且x比y是在1:1～0:1的範圍內，並且x和y是分別隨意存在的；q是1或2的整數。
14.根據權利要求9～13任意一個所述的方法，其特徵是所述的疏水性化合物選自由抗生素、抗菌素、抗腫瘤劑、抗炎症劑、解熱劑、鎮痛劑、抗浮腫劑、鎮咳祛痰劑、鎮靜劑、肌肉鬆弛劑、抗癲癇劑、抗潰瘍劑、抗憂鬱劑、抗過敏劑、強心劑、抗心律失常劑、血管擴張劑、降血壓劑、治療糖尿病劑、體內平衡劑、多肽、激素劑、抗酸化劑、齒齦疾患劑及維生素所組成的群組。
15.根據權利要求9～14中任意一個所述的方法，其特徵是所述的疏水性化合物選自由檜木醇、輔酶Q10、維生素E或其衍生物、維生素A或其衍生物、維生素C衍生物、α-硫辛酸及多酚組成的群組。
16.根據權利要求15所述的方法，其特徵是所述的疏水性化合物是檜木醇。
全文摘要
本發明涉及對疏水性化合物，尤其涉及對檜木醇進行穩定化的穩定劑，提供了由至少含有親水性鏈段和疏水性鏈段的嵌段共聚物所組成的穩定劑。
文檔編號A61K31/365GK101394866SQ200780007119
公開日2009年3月25日 申請日期2007年3月5日 優先權日2006年3月6日
發明者西谷孝子, 加藤泰己 申請人:那野伽利阿株式會社