一種從草蓯蓉中提取草蓯蓉甙的方法
2023-06-21 04:39:01 2
專利名稱：一種從草蓯蓉中提取草蓯蓉甙的方法
技術領域：
本發明屬於天然有機化學領域，涉及一種草蓯蓉甙的純化方法，特別是涉及一種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法。
背景技術：
草蓯蓉，為列當科植物草蓯蓉的全草，一年生寄生草本。全草含8-表脫氧馬錢子式酸(8-epideoxyloganic acid),草灰蓉苯丙烯醇式(rossicaside) B、C、D,草灰蓉苯丙烯醇式A,草灰蓉式(boschnaside),草灰蓉醒式(boschnaloside),松脂酹-β -D-卩比喃葡萄糖式(pinoresinol-β-D-glucopyranoside),對-香豆酸(p-coumaric acid),對-香豆酸甲酯(methyl p-coumarate), β-谷留醇(β-sitos-terol),齊墩果酸(oleanolicacid), 3-表齊墩果酸(3-epioleanol·ic acid), β _D_卩比喃葡萄糖基(1 — 4) α-卩比喃鼠李糖基-(I — 3) -D- (4-0-咖啡酸基)批喃葡萄糖(β -D-glucopyranosyl (I — 4) - a -L-rhamnopyranosyl-(I — 3)-D-(4-0-caffeoyl)-glucopyranose), C9>C10>C11 職內酯(C9、C10、Cllterpene lactones) 0主要用於補腎壯陽；潤腸通便；止血。主腎虛陽痿；遺精；腰膝冷痛；小梗遺浙；尿血；宮冷不孕；帶下；崩漏。草蓯蓉甙是一種對人類健康有顯著保健作用的天然活性物質，已引起國際社會的譜遍關柱。近年來，人們發現天然植物草蓯蓉中含有大量的草蓯蓉甙，由於原料草蓯蓉來源較廣，從中提取草蓯蓉甙已取得了可喜進展。目前國內對草蓯蓉甙的提取方法主要是甲醇製備工藝，其工藝主要為幹品粉碎後用甲醇浸泡過夜，在用布氏濾鬥過濾，提取4次，合併濾液，最後旋轉蒸發、減壓濃縮、噴霧乾燥得草蓯蓉甙，所用的提取分離方法其效果遠遠不如超臨界CO2流體萃取後進行大孔吸附樹脂分離的效果。
發明內容
本發明的目的在於克服常規技術提取率相對較低、提取純度低等缺點，提供一種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法。為實現上述目的，本發明採用的技術方案是一種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其步驟如下(I)將乾草蓯蓉粉碎，加入到C02超臨界萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，萃取壓力為20MPa 40MPa，溫度為50°C 60°C，萃取時間IOOmin 140min，得萃取物；(2)將經步驟(I)處理的草蓯蓉萃取液用鹽酸調其pH值為3. O 4. 0，靜置、抽濾、減壓濃縮得草蓯蓉甙粗提物；(3)將所得草蓯蓉甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗
脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液；(5)將草蓯蓉甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得草蓯蓉甙半成品，其含量為在30%以上；(6)將所得草蓯蓉甙半成品上矽膠層析柱，並以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑；(7)將所收集的草蓯蓉甙濃縮液用溶劑結晶，分離結晶，洗滌，乾燥精製得草蓯蓉甙，其含量在95%以上。所述步驟(3)中，所用的大孔吸附樹脂為天津南開大學所產生的X-5、NKA-9、S_8、D 3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-H型樹脂中的一種，吸附為靜態吸附或動態吸附。本發明應用超臨界CO2流體萃取可確保原有的色、味不因受熱破壞，更能確保其中熱敏性，易氧化物質不被破壞；還可在萃取的過程中同時對萃取物進行分離純化；大孔吸附技術分離純化草蓯蓉甙，對草蓯蓉甙的吸附選擇性良好，吸附快解析也快，吸附容量較大；提取方便快捷，原料來源豐富，生產成本低廉，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量35%以上的草蓯蓉甙半成品和含量95%以上的草蓯蓉帶終產品，克服了常規提取率相對較低、提取純度低的特點。本發明選用理化性質穩定、表面積較大、交換速度較快、機械強度高、抗汙染能力強、熱穩定性好的大孔吸附樹脂，不容於酸、鹼及有機媒，對有機物選擇性較好，不受無機鹽類技強離子低分子化合物存在的影響，可以通過物理吸附從溶液中有選擇地吸附草蓯蓉甙，吸附快、解析也快，吸附容量較 大。
具體實施例方式實施案例1:一種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其步驟如下(I)將500g乾草蓯蓉粉碎後過60目篩，加入到CO2超臨界萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，夾帶劑佔總萃取溶劑的體積百分比為1%，萃取壓力為20MPa，溫度為50°C，CO2流量為lmg/g生藥· min,萃取時間IOOmin,得萃取物；(2)將經步驟⑴處理的草蓯蓉萃取液用鹽酸調其pH值為3.0，靜置、抽濾、減壓濃縮得草蓯蓉甙粗提物；(3)將所得草蓯蓉甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學所生產的NKA-H型樹脂；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗
脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液；(5)將草蓯蓉甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得草蓯蓉甙半成品，其含量為
30.2% (6)將所得草蓯蓉甙半成品上矽膠層析柱，並以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑；(7)將所收集的草蓯蓉甙濃縮液用無水乙醇結晶，分離結晶，洗滌，乾燥精製得草蓯蓉甙，其含量在95. 3%。實施案例2 : —種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其步驟如下(I)將500g乾草蓯蓉粉碎後過70目篩，加入到CO2超臨界萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，夾帶劑佔總萃取溶劑的體積百分比為2%，萃取壓力為30MPa，溫度為55°C，CO2流量為2mg/g生藥· min,萃取時間120min,得萃取物；(2)將經步驟(I)處理的草蓯蓉萃取液用鹽酸調其pH值為38，靜置、抽濾、減壓濃縮得草蓯蓉甙粗提物；(3)將所得草蓯蓉甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學所生產的D4006型樹脂；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗
脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液；(5)將草蓯蓉甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得草蓯蓉甙半成品，其含量為
31.5% ；(6)將所得草蓯蓉甙半成品上矽膠層析柱，並以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑；(7)將所收集的草 蓯蓉甙濃縮液用無水乙醇結晶，分離結晶，洗滌，乾燥精製得草蓯蓉甙，其含量在96. 1%。實施案例3 : —種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其步驟如下(I)將500g乾草蓯蓉粉碎後過80目篩，加入到CO2超臨界萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，夾帶劑佔總萃取溶劑的體積百分比為3%，萃取壓力為40MPa，溫度為60°C，CO2流量為3mg/g生藥· min,萃取時間140min,得萃取物；(2)將經步驟⑴處理的草蓯蓉萃取液用鹽酸調其pH值為4.0，靜置、抽濾、減壓濃縮得草蓯蓉甙粗提物；(3)將所得草蓯蓉甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附，所用的大孔樹脂為天津南開大學所生產的NKA-9型樹脂；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗
脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液；(5)將草蓯蓉甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得草蓯蓉甙半成品，其含量為33. 7% ；(6)將所得草蓯蓉甙半成品上矽膠層析柱，並以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑；(7)將所收集的草蓯蓉甙濃縮液用無水乙醇結晶，分離結晶，洗滌，乾燥精製得草蓯蓉甙，其含量在96.5%。
權利要求
1.一種利用超臨界c(v流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其步驟如下 (1)將乾草蓯蓉粉碎，加入到CO2超臨界萃取器中，用乙醇作為夾帶劑，萃取壓力為20MPa 40MPa，溫度為50°C 60°C，萃取時間IOOmin 140min，得萃取物； (2)將經步驟(I)處理的草蓯蓉萃取液用鹽酸調其pH值為3.0 4.0，靜置、抽濾、減壓濃縮得草蓯蓉甙粗提物； (3)將所得草蓯蓉甙粗提物用大孔吸附樹脂進行吸附； (4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同濃度的乙醇對大孔吸附樹脂進行洗脫，用薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液； (5)將草蓯蓉甙各階段洗脫液濃縮回收乙醇，得草蓯蓉甙半成品，其含量為30%以上； (6)將所得草蓯蓉甙半成品上矽膠層析柱，並以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同體積比例進行洗脫，薄層色譜法跟蹤檢測，收集草蓯蓉甙各階段洗脫液，減壓濃縮，回收溶劑； (7)將所收集的草蓯蓉甙濃縮液用溶劑結晶，分離結晶，洗滌，乾燥精製得草蓯蓉甙，其含量在95%以上。
所述步驟(3)中所用的大孔吸附樹脂為天津南開大學所產生的X-5、NKA-9、S-8、D3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-1I型樹脂中的一種，吸附為靜態吸附或動態吸附。
2.根據權利要求1所述的利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其特質是所述的步驟(I)中，乾草蓯蓉粉碎後過60 80目篩。
3.根據權利要求2所述的利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其特徵是所述的步驟(I)中，夾帶劑佔總萃取溶劑的體積百分比為1% 3%。
4.根據權利要求3所述的利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草灰蓉中草灰蓉式的方法，其特徵是所述的步驟(I)中，CO2流量為I 3mg/g生藥 min。
5.根據權利要求4所述的利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草 蓯蓉中草蓯蓉甙的方法，其特徵是所述的步驟(7)中，濃縮液結晶所用的溶劑為無水乙醇。
全文摘要
本發明屬於天然有機化學領域，涉及一種利用超臨界CO2流體萃取和大孔吸附樹脂耦合法富集純化草蓯蓉中草蓯蓉甙的方法。其特點是超臨界CO2流體萃取技術在萃取過程中保持著藥用植物的有效成分，萃取過程中不發生化學反應，安全性好，不僅萃取的效率高而且能耗較少，提高了生產效率也降低了費用成本。應用大孔吸附技術分離純化草蓯蓉甙，分離效果明顯，提取純度高，可以得到含量30％以上的草蓯蓉甙半成品和含量95％以上的草蓯蓉甙終產品，克服了常規提取率相對較低、提取純度低的缺點。
文檔編號C07H17/04GK103044504SQ20121059560
公開日2013年4月17日 申請日期2012年12月13日 優先權日2012年12月13日
發明者萬莉, 姚德坤, 張亞紅, 姚德利 申請人:大興安嶺林格貝有機食品有限責任公司