吲哚衍生物及其製備方法和其抗流感病毒作用與流程

2023-06-23 01:05:46

本發明涉及藥物化學領域，具體涉及一類新型吲哚類化合物、它們的製備方法及其在抗流感病毒，特別是在抗h1n1作用方面的應用。

背景技術：

流感是一個嚴重的公共衛生問題，在人類中發病率很高，經常導致大規模的發病率和死亡率。它是一種通過空氣傳播，並導致急性發熱性症狀的高度傳染性疾病。全身症狀由輕微的疲勞到呼吸衰竭甚至會引起死亡。據世界衛生組織統計，每年全球流行病的平均負擔大約在10億例左右，每年3-5百萬例嚴重疾病和萬例死亡病例。每年都有流感病毒在人群內傳播，通常會影響所有年齡組的5-20％的人口，當爆發重大傳染病時，這個數字會上升到30％。在年齡>65歲或年齡<2歲的兒童患者，以及患有慢性心臟病、肺部、腎臟、肝臟血液或代謝疾病，或免疫系統減弱等使流行性感冒併發症風險增加的任何年齡的人群中，這些人獲得嚴重疾病和死亡的機率最高。雖然兒童死亡人數不多，但5歲以下兒童的住院率為每10萬人人左右。2歲以下兒童的住院率與年齡在65歲以上者相當。引起流感的病原體是單股負鏈rna病毒，屬於正黏病毒科。流感病毒分為a(甲)、b(乙)、c(丙)三型，其中甲型流感病毒是最常見的亞型，它可以在哺乳動物和鳥類中傳播。流感病毒a亞型的命名由表面蛋白血凝素(h)和神經氨酸酶(n)的類型決定。有18種不同的血凝素和11種已知的神經氨酸酶。目前的季節性流感病毒存在於人體的主要是h1n1和h3n2亞型。b型流感病毒通常只存在於人類體內，它們不分亞型，但可以進一步細分為不同的毒株。流感病毒每年變異很大，流感a和b都會導致世界各地的季節性流行病。c型流感病毒的症狀溫和得多，不會引起流行病。

這三種病毒都有相似的基因組結構，基因組包含8個片段，編碼9-11個蛋白質，具體取決於病毒類型。流感a編碼11種蛋白質，其中包括表面蛋白血凝素(ha)和神經氨酸酶(na)，聚合酶複合物(pa，pb1和pb2)，核蛋白(np)，膜蛋白(m1和m2)和其他蛋白質(ns1，ns2，nep)。在三種流感病毒中，a型流感的變異率最高，b型流感的演變速度比a慢，但比c快。分段基因組使得不同病毒株之間基因交換，導致產生流感病毒的新變體。流感病毒可以通過與受感染個體或病毒汙染物質的直接接觸在人體中傳播。機體也可以通過吸入懸浮的病毒飛沫再感染，這些飛沫是由感染個體的咳嗽，打噴嚏或說話而產生的。季節性流感的特徵是突然發高燒、咳嗽(通常是幹的)、頭痛、肌肉和關節痛，嚴重的不適(感覺不適)，喉嚨痛和流鼻涕。咳嗽可能比較嚴重，並可持續兩周以上，大多數人在一周之內就可以從發燒等症狀中恢復，而不需要醫療。但流感可以導致嚴重的疾病或死亡，特別是在高危人群中。

從感染到發病的時間，稱為潛伏期，大約是兩天。預防這種疾病最有效的方法是接種疫苗。安全有效的疫苗已有60年多的使用歷史。在健康成年人中，流感疫苗可以提供合理的保護。但疫苗接種有幾個局限性：首先，流感疫苗在預防老年人疾病方面效果較差，只能降低疾病的嚴重程度、併發症和死亡的發生率。此外，當流行病毒與疫苗病毒很好地匹配時，流感疫苗接種最有效，疫苗的成功在很大程度上取決於對最流行病毒類型的良好預測。通過抗原漂移，流感病毒株的快速和持續演變加上疫苗引起的免疫應答使得目前流行性感冒疫苗有效性短暫，意味著每年需要接種季節性適宜的毒株進行預防。

目前的流感治療要麼直接使用抗病毒藥物，要麼用其他藥物來緩解流感引起的症狀。市場上有兩類流感抗病毒藥物：神經氨酸酶抑制劑和m2通道抑制劑。神經氨酸酶抑制劑奧塞米韋(達菲)或扎那米韋是主要的抗病毒藥物，推薦用於流感的預防和治療。這些藥物對a型和b型流感病毒都有效。在治療季節性流感時，已經發現了對這些抗病毒藥物的抗藥性，和零星發生的2009奧司他韋耐藥的h1n1病毒，但是對公眾健康影響迄今為止卻很有限。m2通道抑制劑，如金剛烷胺和金剛乙胺，對a型流感病毒株有效，但對b型流感病毒株無效。2003-2004年期間，甲型流感病毒的金剛烷耐藥性在全球迅速增加。因此，金剛烷胺和金剛乙胺不推薦用於目前流行的甲型流感病毒株的抗病毒治療或化學預防。2009年，由人、豬、禽h1n1病毒基因重組而成的新型豬h1n1病毒株導致意想不到的流感大流行。這種大流行病以及高致病性禽流感h5n1毒株的持續流行以及最近出現的h7n9病毒均來自中國的禽源性重組株，與40％死亡率的嚴重的呼吸道疾病有關，有可能引起人與人之間的傳播，說明在新型流感病毒株面前人類的脆弱性。雖然疫苗接種仍然是控制流感感染的主要預防策略，為了彌補在新疫苗可用之前時期嚴重流行性感冒病症的治療問題以及對付病毒耐藥性問題，需要更廣泛地選擇抗流感藥物。因此，新型流感抗病毒藥物的開發再次成為迫切和未滿足的醫療需求。

技術實現要素：

本發明目的在於提供新型抗流感病毒吲哚類化合物；另一目的在於提供其製備方法。

本發明所述吲哚類化合物如以下通式i，ii，iii所示：

r為ph-、4-f-ph-、3-f-ph-、4-ch3-ph-、3-ch3-ph-、2-ch3-ph-、3，5-2ch3-ph-、2，4，6-3ch3-ph-、4-c6h5-ph-、等飽和或者不飽和的碳環、雜環結構中的一種。

優選：

r為ph-、4-f-ph-、3-f-ph-、4-ch3-ph-、3-ch3-ph-、2-ch3-ph-、3，5-2ch3-ph-、2，4，6-3ch3-ph-、4-c6h5-ph-、中的一種。

優選如下化合物：

更優選：化合物i‐2，i‐3，i‐4。

通式i，ii，iii所示化合物的製備方法：

通式i所示化合物的製備方法

通式i的製備方法分兩步：第一步以5‐氯吲哚為原料，在鹼存在下，在溶劑中與對氟苄氯室溫反應獲得中間體2。其中，所用的鹼為氫化鈉、氫化鈣、碳酸鈉、三乙胺、吡啶等中的一種，5氯吲哚與鹼的當量比為1：1～1.6；所用的溶劑為乙腈、四氫呋喃、二氯甲烷、dmf等中的一種。所得產物經柱層析分離得到中間體2。

第二步，中間體2在路易斯酸存在下，在溶劑中與醯氯室溫反應製備得到通式i所示的化合物。其中，所用的路易斯酸為三氯化鋁、三氯化鐵、四氯化鈦、二氯化鋅、四氯化錫等中的一種,5‐氯吲哚與路易斯酸的當量比為1：1～1.8；所用的溶劑為二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、四氫呋喃等溶劑中的一種。所得產物經適當方法如柱層析或重結晶提純可以得到純品。重結晶所用溶劑為乙醇、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿中的一種或其中兩種混合物。

通式ii所示化合物的製備方法

通式ii所示的化合物製備方法：通過通式i所示的化合物在鹼存在的情況下，在溶劑中，經硼氫化鈉還原得到，底物與還原劑硼氫化鈉的當量比為1：1～3。其中，所用的鹼為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、三乙胺等中的一種，底物與鹼的當量比為1：1～3。溶劑為甲醇、乙醇、丙醇等中的一種或者它們的混合物。反應溫度為0℃～90℃。所得產物經柱層析分離即可得到終產物。

通式iii所示化合物的製備方法

通式iii的製備分三步：第一步，5-氯吲哚在路易斯酸存在下，在溶劑中與乙醯氯反應製備得到中間體3。其中，所用的路易斯酸為三氯化鋁、三氯化鐵、四氯化鈦、二氯化鋅、四氯化錫等中的一種,5氯吲哚與路易斯酸的當量比為1：1～3；所用的溶劑為二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、甲苯、四氫呋喃等溶劑中的一種。反應溫度為0℃～90℃。所得產物經適當方法如柱層析或重結晶提純可以得到純品。重結晶所用溶劑為乙醇、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿中的一種或其中兩種:混合物。

第二步，以中間體3為原料，在鹼存在下，在溶劑中與對氟苄氯室溫反應獲得中間體4。其中，所用的鹼為氫化鈉、氫化鈣、碳酸鈉、三乙胺、吡啶等中的一種，中間體3與鹼的當量比為1：1～1.6；所用的溶劑為乙腈、四氫呋喃、二氯甲烷、dmf等中的一種。所得產物經適當方法如柱層析或重結晶提純可以得到純品。重結晶所用溶劑為乙醇、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿中的一種或其中兩種的混合物。

第三步，以中間體4為原料，在鹼存在下，在溶劑中與各種醛反應獲得通式iii化合物。其中，所用的鹼為氫化鈉、氫化鈣、碳酸鈉、三乙胺、吡啶、氫氧化鈉等中的一種，中間體4與鹼的當量比為1：1～2.5；所用的溶劑為乙腈、四氫呋喃、二氯甲烷、dmf、甲醇等中的一種。反應溫度為0℃～90℃。所得產物經柱層析分離得到化合物iii。

本發明的創新點在於：合成了一類新型吲哚類衍生物，其表現出良好的抗流感病(h1n1)活性，豐富了吲哚類抗流感病毒化合物，有利於新藥開發。合成方法簡單，收率高，總收率達67％以上。

具體實施方式

為了對本發明進行更好說明，舉實施例如下：

實施例1通式i所示化合物合成中中間體2的製備

取5‐氯吲哚(5mmol)，nah(15mmol)於25ml圓底燒瓶中，加入6ml無水乙腈，室溫攪拌1h後，向反應體系中緩慢滴加用無水乙腈溶解的對氟苄氯(6.5mmol)，室溫反應5-7h，tlc監測反應完全，過濾去除不溶性固體，將濾液真空下濃縮，矽膠柱層析洗脫分離，洗脫劑及其比例為石油醚：乙酸乙酯＝12:1，粘稠狀淺黃色液體，冷凍乾燥處理後，產物為白色固體2，產率94.6％。

實施例2通式i所示化合物合成中，r＝4-ch3c6h5-時即i-1的製備

取alcl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入4‐甲基苯甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到淺黃色固體i-1，收率89.2％。m.p.126.0-129.1℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.34(s,1h),8.24(d,j＝2.1hz,1h),7.73(d,j＝8.0hz,2h),7.58(d,j＝8.8hz,1h),7.39–7.32(m,4h),7.28(dd,j＝8.7,1.9hz,1h),7.13(dd,j＝17.5,8.7hz,2h),5.53(s,2h),2.40(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ189.14,162.80,160.38,141.49,139.64,137.20,134.89,129.44,129.03,128.59,128.19,127.15,123.28,120.86,115.60,115.38,113.91,112.93,49.08,21.03.hrms(esi):m/zcalcdforc23h17clfno(m+h)+，378.1061；found，378.1066.。

實施例3通式i所示化合物合成中，時即i-2的製備

取alcl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入3-甲基噻吩-2-羰基氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到白色固體i-2，收率92.8％。m.p.123.5-125.1℃；1hnmr(400mhz,acetone)δ8.37(d,j＝2.0hz,1h),8.32(s,1h),7.62(d,j＝5.0hz,1h),7.57(d,j＝8.8hz,1h),7.44–7.38(m,2h),7.28(dd,j＝8.8,2.1hz,1h),7.13(ddd,j＝10.9,5.9,2.5hz,2h),7.08(d,j＝5.0hz,1h),5.63(s,2h),2.49(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ181.77,162.85,160.42,142.14,138.68,134.93,132.92,131.90,129.52,129.27,127.96,127.16,123.42,120.74,115.64,115.43,112.99,49.03,15.81.hrms(esi):m/zcalcdforc21h15clfnos(m+h)+，384.0625；found，384.0625.。

實施例4通式i所示化合物合成中，時即i-3的製備

取zncl2(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水四氫呋喃，室溫25℃攪拌，加入5-氯-2-吡啶甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水四氫呋喃溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去四氫呋喃，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到白色固體i-3，收率67.4％。m.p.138.3-141.2℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.52(d,j＝2.1hz,1h),7.94(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),7.70(d,j＝8.5hz,1h),7.56(d,j＝2.0hz,1h),7.45(d,j＝8.7hz,1h),7.40(s,1h),7.29–7.21(m,2h),7.17–7.10(m,2h),7.08(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),6.06(d,j＝4.6hz,1h),5.95(d,j＝4.3hz,1h),5.35(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ184.55,160.40,153.80,147.13,141.90,137.41,134.49,133.86,129.33,128.70,127.58,124.45,123.35,121.04,115.67,115.45,113.01,112.46,49.18.hrms(esi):m/zcalcdforc21h13cl2fn2o(m+na)+，421.0287；found，421.0289。

實施例5通式i所示化合物合成中，時即i-4的製備

取ticl4(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水氯仿，室溫25℃攪拌，加入4-吡啶甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水氯仿溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去氯仿，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到白色固體i-4，收率72.8％。m.p.142.1-144.7℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.82(dd,j＝4.4,1.5hz,2h),8.46(s,1h),8.28(d,j＝2.1hz,1h),7.73(dd,j＝4.4,1.6hz,2h),7.63(d,j＝8.8hz,1h),7.42–7.36(m,2h),7.34(dd,j＝8.8,2.2hz,1h),7.22–7.11(m,2h),5.55(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ188.02,162.84,160.42,150.24,146.34,140.98,135.06,132.70,129.54,127.68,123.71,122.13,120.79,115.60,115.39,113.30,49.25.hrms(esi):m/zcalcdforc21h14clfn2o(m+h)+，465.0857；found，365.0854.。

實施例6通式i所示化合物合成中，時i-5的製備

取alcl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入2-氯吡啶-4-甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到淺褐色固體i-5，收率77.3％。m.p.124.6-127.0℃；1hnmr(400mhz,acetone)δ8.58(d,j＝5.0hz,1h),8.39(d,j＝2.1hz,1h),8.37(s,1h),7.75(s,1h),7.72(dd,j＝5.0,1.3hz,1h),7.57(d,j＝8.8hz,1h),7.40(dd,j＝8.6,5.4hz,2h),7.32(dd,j＝8.8,2.1hz,1h),7.14–7.07(m,2h),5.62(s,2h)；13cnmr(101mhz,acetone)δ187.26,164.51,162.08,152.43,151.37,141.32,136.57,130.27,129.33,124.94,123.61,122.38,116.55,116.33,115.00,113.64,50.89.hrms(esi):m/zcalcdforc21h13cl2fn2o(m+na)+，421.0287；found，421.0288.。

實施例7通式i所示化合物的合成中，r＝4-c6h5c6h5-時即i-6的製備

取fecl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入聯苯-4-甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到白色固體i-6，收率98.4％。m.p.192.7-194.2℃；1hnmr(400mhz,acetone)δ10.59(s,1h),8.09(s,1h),7.72(dd,j＝7.5,6.7hz,4h),7.64(d,j＝8.3hz,2h),7.53–7.46(m,3h),7.41–7.35(m,3h),7.16–7.08(m,4h),5.59(s,2h)；13cnmr(101mhz,acetone)δ151.20,142.19,141.23,137.82,135.26,134.57,130.42,129.93,129.44,128.46,127.72,127.46,126.10,122.71,122.14,116.45,116.24,112.67,107.89,50.18.hrms(esi):m/zcalcdforc28h19clfno(m+na)+，462.1037；found，462.1036.

實施例8通式i所示化合物合成中，r為3-ch3c6h5-時即i-7的製備

取alcl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入3-甲基苯甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到黃色固體i-7，收率93.4％。m.p.122.4-124.7℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.35(s,1h),8.26(d,j＝2.1hz,1h),7.64–7.57(m,3h),7.45(dd,j＝8.4,5.0hz,2h),7.40–7.34(m,2h),7.31(dd,j＝8.8,2.2hz,1h),5.55(s,2h),2.43(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ189.56,162.81,160.38,139.90,137.86,134.92,132.00,129.44,128.86,128.35,128.14,127.22,125.66,123.32,120.87,115.60,115.39,113.90,112.97,49.08,20.97.hrms(esi):m/zcalcdforc23h17clfno(m+h)+，378.1061；found，378.1065.。

實施例9通式i所示化合物合成中，r為時即i-8的製備

取alcl3(2mmol)於燒杯中，加入8ml無水二氯甲烷，室溫25℃攪拌，加入2-萘甲醯氯(2mmol)，室溫25℃攪拌1h，反應體系中逐滴滴加化合物2(2mmol,1.5ml無水二氯甲烷溶解)，反應在室溫25℃條件下，攪拌12h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去二氯甲烷，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，石油醚：乙酸乙酯＝4:1重結晶，得到白色固體i-8，收率89.7％。1hnmr(400mhz,dmso)δ8.47(d,j＝15.3hz,2h),8.31(d,j＝2.0hz,1h),8.13(d,j＝7.3hz,1h),8.09(d,j＝8.5hz,1h),8.04(d,j＝7.4hz,1h),7.95–7.87(m,1h),7.70–7.60(m,3h),7.40(dd,j＝8.5,5.5hz,2h),7.33(dd,j＝8.8,2.1hz,1h),7.15(dd,j＝18.1,9.3hz,2h),5.56(s,2h).13cnmr(101mhz,dmso)δ160.41,140.17,137.13,134.99,134.29,132.89,132.13,129.06,128.18,127.83,127.61,127.28,126.73,125.11,123.38,120.90,115.60,115.38,114.10,113.01,49.18.hrms(esi):m/zcalcdforc26h17clfno(m+h)+，414.1061；found，414.1062.。

實施例10通式ii所示化合物的合成中，r為3-ch3c6h5-時即ii-1的製備

取系列i中合成的化合物i-7(1mmol)於燒瓶中，加入10ml無水甲醇，加入碳酸鈉，然後分多次逐漸加入nabh4(5mmol)，反應體系在室溫25℃條件下攪拌12h，tlc監測反應完全，硅藻土過濾去除不溶性固體，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，將濾液真空下濃縮，矽膠柱層析洗脫分離，洗脫劑及其比例為石油醚：乙酸乙酯＝8:1，得到粘稠狀液體ii-1，產率97.1％。1hnmr(400mhz,acetone)δ7.56(d,j＝1.9hz,1h),7.38–7.27(m,4h),7.26–7.17(m,3h),7.07(ddd,j＝11.4,5.6,2.9hz,4h),6.05(d,j＝4.5hz,1h),5.37(d,j＝20.1hz,2h),4.62(t,j＝6.2hz,1h),2.08(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ162.63,160.22,145.17,136.86,134.71,134.22,129.11,127.90,127.30,126.91,123.40,121.14,119.43,119.07,115.41,115.20,111.74,68.35,48.26,21.13.hrms(esi):m/zcalcdforc23h19clfno(m+na)+，402.1037；found，402.1038.。

實施例11通式ii所示化合物合成中，r為時即ii-2的製備

取系列i中合成的化合物i-8(1mmol)於燒瓶中，加入10ml無水甲醇，加入三乙胺，然後分多次逐漸加入nabh4(5mmol)，反應體系在室溫25℃條件下攪拌12h，tlc監測反應完全，硅藻土過濾去除不溶性固體，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，將濾液真空下濃縮，矽膠柱層析洗脫分離，洗脫劑及其比例為石油醚：乙酸乙酯＝8:1，得到淡黃色固體ii-2，產率97.1％。m.p.48.2-49.1℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.03(s,1h),7.91(d,j＝7.3hz,1h),7.84(dd,j＝10.8,8.1hz,2h),7.55–7.42(m,5h),7.40(s,1h),7.27–7.21(m,2h),7.16–7.09(m,2h),7.08–7.04(m,1h),6.10(t,j＝7.0hz,1h),5.87(dd,j＝10.3,4.5hz,1h),5.36(s,2h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ162.64,160.22,142.74,134.75,134.16,132.80,132.15,129.11,128.23,127.79,127.46,126.01,125.55,125.22,124.14,123.47,121.20,119.11,115.41,115.20,111.79,68.42,48.30.hrms(esi):m/zcalcdforc26h19clfno(m+na)+，438.1037；found，438.1035.。

實施例12通式iii所示化合物合成中中間體4的合成

取sncl4(20mmol)於燒瓶中，加入15ml甲苯，冰水浴攪拌，體系中加入乙醯氯(20mmol)，冰水浴攪拌0.5h後，2ml甲苯溶解5‐氯吲哚(10mmol)，逐滴加入反應體系中，冰水浴攪拌2h。tlc監測反應完全，減壓旋蒸除去甲苯，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，無水乙醇重結晶，得到化合物3。取化合物3(5mmol)，nah(15mmol)於25ml圓底燒瓶中，加入6ml無水乙腈，室溫攪拌1h後，向反應體系中緩慢滴加用無水乙腈溶解的對氟苄氯(6.5mmol)，室溫反應5-7h，tlc監測反應完全，過濾去除不溶性固體，將濾液真空下濃縮，在石油醚：乙酸乙酯＝4:1的溶劑體系中重結晶，產物為黃色固體4，產率98.4％。m.p.118.2-120.1℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ8.63(s,1h),8.17(d,j＝1.8hz,1h),7.60(d,j＝8.8hz,1h),7.37(dd,j＝8.6,5.5hz,2h),7.26(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),7.17(t,j＝8.9hz,2h),5.50(s,2h),2.47(s,3h)；13cnmr(101mhz,dmso)δ192.33,162.84,160.42,138.63,134.91,132.97,129.42,126.99,122.97,120.63,115.62,115.41,112.78,49.08,27.22.hrms(esi):m/zcalcdforc17h13clfno(m+na)+，324.0567；found，324.0564.。

實施例13通式iii所示化合物合成中，r為ph-時即iii-1的製備

取苯甲醛(1mmol)於燒瓶中，加入2ml甲醇，室溫25℃攪拌溶解，加入3mmolnaoh溶液30μl的，然後加入實施例12製得的化合物4(1mmol),室溫25℃攪拌，tlc檢測反應完全後，過濾去除不溶性固體，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，矽膠柱層析洗脫分離，洗脫劑及其比例為石油醚：乙酸乙酯＝4:1，產物為白色固體iii-1，產率77.6％。m.p.114.5-117.2℃；1hnmr(400mhz,dmso)δ9.03(s,1h),8.34(d,j＝2.1hz,1h),7.88–7.83(m,2h),7.80(d,j＝15.6hz,1h),7.69(d,j＝5.6hz,1h),7.66(s,1h),7.50–7.44(m,3h),7.41(dd,j＝8.7,5.5hz,2h),7.34–7.27(m,1h),7.22–7.16(m,2h),5.55(s,2h)；13cnmr(101mhz,acetone)δ182.93,162.70,143.65,136.15,133.93,132.03,130.66,128.53,128.05,127.01,125.41,123.55,122.14,115.24,111.61,52.65.hrms(esi):m/zcalcdforc24h17clfno(m+h)+，390.1061；found，390.1062.。

實施例14通式iii所示化合物合成中，r為時即iii-2的製備

取2‐呋喃醛(1mmol)於燒瓶中，加入2ml乙腈，室溫25℃攪拌溶解，加入3mmolnaoh溶液30μl的，然後加入實施例12製得的化合物3((1mmol),室溫25℃攪拌，tlc檢測反應完全後，過濾去除不溶性固體，水和乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鎂乾燥。抽濾除去硫酸鎂，濃縮濾液，矽膠柱層析洗脫分離，洗脫劑及其比例為石油醚：乙酸乙酯＝4:1，產物為白色固體iii-2，產率68.1％。m.p.107.3-106.8℃；1hnmr(400mhz,acetone)δ8.67(s,1h),8.50(d,j＝2.0hz,1h),7.71(dd,j＝13.0,2.3hz,1h),7.56(d,j＝15.3hz,1h),7.51(d,j＝8.7hz,1h),7.47–7.35(m,3h),7.24(dd,j＝8.7,2.1hz,1h),7.17–7.04(m,2h),6.87(t,j＝8.1hz,1h),6.60(dd,j＝3.3,1.8hz,1h),5.58(s,2h).13cnmr(101mhz,acetone)δ183.80,164.51,162.08,152.92,145.64,138.15,136.51,130.33,129.23,128.75,128.11,124.41,122.80,122.19,118.14,116.57,116.35,115.83,113.46,113.17,50.75.hrms(esi):m/zcalcdforc22h15clfno2(m+na)+，402.0673；found，402.0672.。

實施例15通式i、ii、iii中部分化合物的體外抗病毒活性測定

1.實驗方法

本實驗測定通式i、ii、iii所示化合物中部分化合物對h1n1的體外抗病毒活性。

樣品貯備液：稱取1-3mg樣品置於1.5mlep管中，然後用dmso配製成濃度是10mm的溶液，4℃保存放置，實驗室根據所需濃度用dmso稀釋。

細胞毒性檢測cc50：mdck鋪96孔板，每孔2.5×104個，體積百分含量5％co2，37℃孵育；24h後，去掉培養液，每孔加200μl用質量百分含量2％fbs的dmem配製好的待測藥物，設200、100、…(μm/l)9個濃度，每個濃度3個復孔，並設對照；48h後，用mtt法測定細胞存活率。

表1目標化合物對流感病毒(h1n1)的體外抗病毒活性(ec50)

病毒擴增：mdck細胞消化後，接種到2×75cm的大培養瓶中；待細胞長至單層(70％左右)，棄去培養基，pbs洗三次；加病毒液，每15min搖一次，共3次；2h後，棄去培養液，各加12ml質量百分含量2％fbs的dmem，每日觀察並拍照記錄；病變70％～90％時收毒：培養瓶放至-80℃，反覆凍融3次，4℃、4500r離心15min，取上清，分裝標記後存於-80℃備用。

病毒tcid50測定：mdck細胞鋪96孔板，每孔2.5×104個，體積百分含量5％co2，37℃孵育；24h後，pbs洗3次，每孔加100μl用純dmem配製好的病毒液，稀釋成10-1～10-10十個梯度，每個濃度8個復孔，並設對照；2h後，去掉病毒液，每孔加100μl質量百分含量2％fbs的dmem；每日觀察，72h後用姬姆薩染液檢測。

抗病毒活性檢測ec50：mdck鋪96孔板，每孔2.5×104個；24h後，去掉培養液，pbs洗3次，每孔加100μl用純dmem配製好的100tcid50病毒液；2h後，去掉病毒液，每孔加200μl用質量百分含量2％fbs的dmem配製好的待測藥物，設50、25、12.5、6.25、3.12...(μm/l)6個濃度，每個濃度3個復孔；48h後，用mtt法測定病毒抑制率。

2.實驗結果如表1所示。

實驗表明：大部分化合物對甲型流感病毒h1n1表現出很好的抑制作用，特別是通式i中，時即化合物i-2、時即化合物i-3、時即化合物i-4，活性更好。