用於製備組織、特別是脂肪組織的裝置和方法

2023-06-20 06:34:41

專利名稱：用於製備組織、特別是脂肪組織的裝置和方法
技術領域：
本發明涉及用於從通過脂肪抽吸而提取的小葉脂肪來製備用於移植的組織、具體地是脂肪組織的裝置和方法。本發明還涉及處理身體和面部體積缺陷、改進皮膚營養性和/或用於藉助於通過所述裝置和方法獲得的脂肪組織進行生物刺激的方法。本發明還涉及用於執行所述方法的套件。
背景技術：
根據現有技術，再使用吸脂材料所需的製備涉及待再注射的活細胞組分與廢棄材料的分離，所述廢棄材料包括麻醉劑液體或生物流體(血清或血液)和由抽吸的脂肪細胞的破裂產生的細胞碎片和油。這種分離可在用於抽取的注射器或在特定的容器中發生，基本上以三種方式發生-通過沉澱材料通過密度差異在重力下分離，-通過離心作用材料通過密度差異在離心力的作用下分離，-通過洗滌將脂肪抽吸物放置在薄網式濾器中並通常利用鹽水進行洗滌，鹽水可逐漸地被替換或不被替換。根據最為廣知的技術(Coleman脂肪結構移植)，容納脂肪抽吸物的注射器在底部由魯爾鎖帽封閉，並且放置在離心機中以將液相與固體生物材料分離。在利用如此獲得的生物材料之前，在離心作用之後留在注射器底部的麻醉劑和生物液體應通過將魯爾鎖帽從 注射器移除並使所述生物材料通過重力流出而被手動地排出，而由脂肪細胞的細胞壁的破裂引起的細胞碎片和油存在於待移植的細胞材料上，並且利用部分地吸收過量的油的紗布以不完全的且初步的方式移除，並且通常使抽吸的材料的最後部分不可用。上述技術具有某些缺陷。首先，通過離心進行的抽吸和分離步驟導致大量脂肪細胞破碎並釋放很多油，油不能夠利用Coleman技術完全去除，並且使大部分脂肪抽吸物不可用，即在離心之後位於注射器筒的上部的細胞材料的部分與油接觸，並因此被所述油汙染。這是因為在待注射的生物填充物中的油的存在增加傳染和排斥的危險，並且引起增加的發炎。而且，上述過程涉及抽吸的材料與各種類型的器械表面的多次接觸，以及與在可能非消毒環境中的空氣長期接觸，從而推薦在手術室的使用該過程。還已知但很少使用的一種技術，其涉及利用混合器對抽吸的細胞團塊進行機械分裂，混合器的切割刀片分離脂肪小葉並且提供可注射的細胞懸液。該分裂技術具有許多缺陷。首先，之後是離心的分裂步驟引起大量脂肪抽吸物破裂，這引起多於一半的抽吸的材料不可用於稍後的麻醉處理。作為直接結果，需要增加的脂肪抽吸時間量來補償在待移植材料製備期間發生的材料損失，並且增加患者的不舒適。此外，可利用上述程序和裝置獲得的可使用的細胞懸液的量主要取決於在設定混合器和離心機的速度和操作時間參數中健康護理人員的技能以及器械的條件刀片的過大旋轉速度或具有較差切割刀片的混合器的使用，例如不會引起脂肪小葉的分離，而是相反引起大量脂肪抽吸物的細胞壁的機械破裂，除需要細胞碎片和油與懸液的精確分離之外，這涉及油形成和使細胞懸液不可用。這是因為在待注射的生物填充物中油的存在增加傳染和排斥的危險。此外，上述過程涉及抽吸的材料與各種類型的器械的表面的多次接觸，以及與非完美的消毒環境中的空氣的一些接觸，如醫生辦公室的情形中的那樣。因為材料是生物性質的，與空氣或與可能不是完美地消毒的多個器械長期接觸，增加了細菌或病毒汙染的危險，且可以影響處理結果。涉及通過濾器洗滌的技術也具有某些缺陷。具體地，濾器網可以容易被抽吸的材料堵塞，這需要手動作用來從網眼移除脂肪，從而減慢製備過程並且具體地增加待注射材料汙染的危險。簡單濾器的使用不允許抽吸的材料在整個製備過程，即從脂肪抽吸步驟到注射步驟被恆定地保持在封閉且完美消毒的環境中。公開細胞隔離裝置的專利文獻是已知的。國際申請W02009/073724公開了`用於將細胞從脂肪抽吸物隔離的方法和設備。具體地，其公開了用於將脂肪細胞和油部分從脂肪抽吸物中的非脂肪細胞部分分離的方法。為獲得在關注的細胞溶液和在定義為「分離腔室」的容器內的其它小細胞的細胞溶液上漂浮的脂類和脂肪細胞，脂肪組織被置於消化腔室中，並迫使其穿過過濾器並穿過具有孔的頭部進入所述「腔室」。洗滌組織、移除過量的液體、酶消化、添加抗生素和細胞選擇的步驟可在定義為「消化腔室」的容器中進行。消化腔室可包含保持組織但是允許分離的細胞和流體通過的過濾器。包含脂肪細胞脂類的含水乳化液在該腔室中形成。消化腔室中的分離的材料可通過具有小於包含在第一「分離腔室」中的分散頭部上的孔的分散過濾器。該過濾器115用於防止分散頭部的孔堵塞。在「分離腔室」中，脂類和脂肪細胞與細胞群分離。該裝置在不利用離心力而是通過迫使溶液穿過具有各種尺寸的孔的過濾器來從組織提供細胞群。所述裝置尤其是在構造方面來說是複雜的，如圖所示的那樣。此外，器官材料多次穿過腔室和過濾器通過延長了方法的持續時間並且使有機材料受到汙染危險。而且，方法和裝置的複雜性使它們不適合用於例如門診環境，所述門診環境需要在沒有特別的專門人員的輔助的情況下從脂肪抽吸物迅速地製備可注射的材料以及面部和身體缺陷矯正的迅速實現。此外，在該方法中，利用化學物質形成了乳化液，而不是僅通過使用機械裝置和力。
美國申請2007/0274960公開了製備包含幹細胞的組分的方法。為了製備幹細胞群，在某些實施方式中，抽吸的脂肪組織被物理處理，即切割或切碎成較小的片，並且經歷酶處理，這促進感興趣細胞從其它組織組分的釋放。因此，US2007/0274960允許通過迫使脂肪組織通過一組網眼將脂肪組織分離成較小的片，以獲得能夠以更均勻的方式經歷酶處理的均勻尺寸的較小部分，從而提供幹細胞的較迅速的釋放並減少釋放細胞和酶溶液之間的接觸時間。根據該專利，可利用全氟化碳溶液來製備脂肪組織乳化液，該乳化液可從感興趣幹細胞分離。該專利不包括液體的乳化液的製備，所述液體的乳化液能夠從脂類細胞或小的細胞團塊機械地分離。包含切割裝置的容器也不能用於將脂肪組織注射到患者。專利US6，020，196公開了用於收集微脈管內皮細胞的方法。該專利描述了處理所抽吸的脂肪組織的方法，通過具有帶有最小化細胞組分上的應力並獲得均質脂肪細胞的尺寸的孔隙的插管的注射器抽吸的該脂肪組織從一個注射器到另一個注射器而被迫通過位於兩個注射器的抽吸孔口之間的過濾器(74)。通過拉動注射器的活 塞，抽吸的脂肪組織通過從一個注射器到另一個注射器被迫通過過濾器而被均勻化。所抽吸的材料的較低粘度允許汙染物的較容易去除以及改進的樣品消化，以獲得內皮細胞。該專利中公開的方法具有使其不適合用於製備可注射脂肪的某些缺陷，因為-過濾器可能被脂肪組織堵塞過濾器保持裝置在從一個注射器到另一個注射器的流動線路中形成限制；堵塞的過濾器阻礙脂肪組織從一個注射器到另一個注射器穿過並需要斷開注射器和更換過濾器以繼續脂肪組織洗滌；由於這些步驟，固體組分和液體組分的乳化液的製備變得困難且耗時並且器官材料受到汙染；-通過用於結締組織的分解的過濾器網眼也導致脂肪細胞破裂，並且形成過量油並需要完好無損的脂肪細胞稍後從油的精確分離。US6, 020, 196提供了勻漿，內皮細胞可通過添加膠原酶和離心作用，因此通過化學作用和物理作用的組合而從該勻漿中被提取。該專利沒有涉及形成液體組分的乳化液，從抽吸的脂肪組織獲得的脂類細胞或脂類細胞的小團塊可漂浮在該乳化液上，該細胞在合適的處理之後直接地可注射到患者，而不需要特定的環境消毒條件，例如不需要完美消毒的手術室。US6, 020，196沒有涉及提供單個裝置的可能性，該單個裝置通過幾個簡單的處理步驟，允許製備抽吸的材料並收集和臨時儲存脂肪直到再注射為止。專利申請US2003/0100105公開了用於從器官提取細胞的設備。該設備包括容納器官和蛋白酶的消化腔室以及諸如具有至少一個空腔的球的攪拌裝置，該球僅作用於器官。因此，與前述專利一樣，該專利涉及器官材料的化學侵害性處理。如第0026段第3欄描述的那樣，攪拌裝置14隨消化腔室12移動以攪拌器官並方便細胞的釋放。
該專利沒有涉及從小葉脂肪獲得用於移植的脂肪細胞製備的可能性，具體地說，該專利涉及使用球來攪拌器官並促進從所述器官釋放細胞。

發明內容
本發明的目的在於提供一種能夠避免上述缺陷的簡單且低價的裝置，用於從小葉脂肪、即包含細胞大團塊、細胞和細胞碎片的脂肪製備組織，特別是用於移植的脂肪組織，所述脂肪藉助於脂肪抽吸而獲得。本發明的目的是提供一種裝置，該裝置能夠不使用化學物質來提供用於移植的組織，即沒有化學侵害或脂肪抽吸物的任何其它化學處理。這提供僅使用手動施加的機械力的簡單且容易使用的裝置，該裝置可能不需要醫療使用的試驗或僅需要簡單試驗。本發明的裝置也可用於醫療門診環境，而不需要特定的消毒條件，諸如在手術室中需要的條件。本發明另外的目的是涉及使用所述裝置來製備組織、具體地是用於移植的脂肪組織的方法，所述方法和裝置允許將生物材料維持在完全封閉的系統中，即防止抽吸的患者材料與外部環境有任何接觸的系統。另一目的也是藉助於通過所述裝置和方法獲得的脂肪組織來處理身體和面部體積缺陷、改進皮膚營養性和/或用於生物刺激的方法。特別地，本發明的裝置允許利用幾個簡單的器械和少數處理步驟來製備細胞團塊、具體地是脂肪細胞團塊，而不使用化學或物理化學處理，而是僅使用機械攪拌，同時消除了大部分油組分並避免了在非完美的消毒環境中操縱生物材料。因此，還由於使用特別細的針，脂肪組織的移植將是侵入性小的、微創的且更有效的。而且，由本發明的裝置產生的細胞團塊是在與外部環境的最小接觸或沒有接觸的情況下並且利用一次性器械來製備的，所述一次性儀器減少生物材料汙染的危險、器械劣化的危險和與洗滌和再消毒有關的缺陷。如此獲得的生物材料可被注射到任何組織或器官。 上述目的通過包括至少一個洗滌和分離容器的裝置來實現，所述至少一個洗滌和分離容器具有用於洗滌抽吸的材料的洗滌腔室，該容器具有入口和出口，用於使抽吸的材料通過入口進入洗滌腔室並且使所述材料的至少一部分，具體地是流體組分穿過出口離開所述腔室，所述洗滌腔室包括用於機械地形成流體組分的乳化液的裝置，被設計為用於稍後移植的細胞組分將漂浮在該乳化液上，從該液體組分中分離。優選地，如此製備的組織用於自體移植，但是該裝置也可用於製備用於異體移植的組織。本發明的裝置和方法不僅能夠提供用作生物填充物的脂肪組織、即用於面部和身體體積缺陷的矯正的脂肪組織，而且還能夠提供在其表面上具有幹細胞的脂肪組織的大團塊，其與注射區域的組織的接觸的布置允許處理組織的迅速再生。用於機械地形成乳化液的這些裝置能夠通過簡單的機械作用而獲得包含在抽吸的材料中的血液流體、血液殘餘物、油和其它溶液(諸如洗滌鹽水溶液或在抽吸期間使用的麻醉劑溶液)的乳化液，從而允許所述流體保持與固體材料(即脂類細胞、幹細胞)分離。待除去的液相與待移植的固相的分離僅通過機械(而非化學)作用而獲得。在優選實施方式中，該作用通過攪拌裝置來執行，其可為任何類型，具體地是主動類型或被動類型。主動裝置為由馬達或動力驅動以提供攪拌運動的機動化攪拌裝置。被動裝置為在攪拌容器時施加其作用的裝置，並且因此例如通過慣性操作。攪拌裝置形成待除去的液體的乳化液，且具體地在諸如生理洗滌流體的溶劑中的脂肪液體。尤其是，在具有被動攪拌裝置的實施方式中，裝置具有非常簡單的構造且是有效的。利用該裝置，容器的機械作用與被動攪拌裝置組合將不具有與需要使用機械裝置一樣的強度。手動攪拌在本裝置中是足夠的。優選地，機械攪拌作用在於容器圍繞垂直於容器的端表面並且在容器外部或內部的軸線，諸如縱軸線的旋轉。還可以提供其它種類的攪拌，諸如搖動等。用於在不使用可能導致細胞材料分解的酶或化學物質的情況下，通過洗滌和分離容器的簡單手動或可能地機械攪拌而形成乳化液的這些裝置提供在洗滌腔室中固體組分與液體組分的分離，並且特別地允許由細胞碎片、細胞和細胞團塊組成的固體組分漂浮在液體物質諸如血液、消毒溶液和由脂肪細胞破裂而產生的油的乳化液上。在優選實施方式中，固體組分在洗滌腔室中被洗滌消毒洗滌溶液，例如消毒鹽水，通過入口被注射到洗滌和分離容器中一次或多次。利用容器的攪拌，該溶液允許用於移植的細胞材料沒有任何廢棄液體諸如血液和油。抽吸的脂肪包含流體材料和細胞碎片、細胞和異種(heterogeneous)尺寸的一個或多個細胞大團塊的混合物。使由於在洗滌腔室中機械乳化裝置的存在而在攪拌時形成的乳化液從出口離開並且將乳化液收集在密封容器中，以防止外部環境汙染以及獲得在完美消毒條件下被儲存在洗滌腔室中的用於移植的 細胞材料(細胞碎片、細胞、細胞團塊)。然後，使所述細胞材料離開洗滌和分離腔室，並且被注射或分離並且被儲存到一個或多個消毒容器，諸如注射器等中，用於稍後移植。因此，簡單地形成了廢棄液體的乳化液，細胞碎片、脂類細胞、脂質大團塊和幹細胞則漂浮在該乳化液上，碎片或細胞將準備使用而不需要額外處理，具體地不需要化學處理。洗滌和分離容器將填充有高達其容積的約1/3的脂肪抽吸物，其餘容積由洗滌液體填充。在材料處理期間在容器中沒有空氣。通過使用壓縮裝置諸如連接到所述容器的注射器、與所述容器的開口配合的活塞等對所述洗滌和分離和/或尺寸減小容器的內含物、即對在待處理材料施加壓力或抽吸，而迫使脂肪和/或脂肪洗滌或處理液體通過本發明的裝置。因而，該裝置允許脂肪抽吸物的洗滌並且從流體材料，諸如洗滌溶液、鹽水溶液、麻醉劑溶液、血液和油的的乳化液分離細胞物質，使得過程結束時收集到最少量的與細胞或細胞團塊、具體地是脂肪細胞混在一起的不期望的雜質。利用本發明的裝置，通過機械裝置並且具體地通過洗滌形成了乳化液，並且通過密度梯度而除去液體組分的乳化液。裝置可用於洗滌分離成較小細胞和/或團塊的脂肪抽吸物。
用於分離抽吸的材料的技術是已知的，例如通過使用攪拌器。在優選實施方式中，抽吸的材料、具體地是細胞大團塊被減小到較小的尺寸，用於更容易的移植。根據本發明，在洗滌和分離容器或在稱為尺寸減小容器的另一容器中，其適合於流體密封地連接到所述洗滌和分離容器，提供了尺寸減小裝置，用於將脂肪抽吸物的固體組分、具體地是細胞大團塊的尺寸減小到具有等於或小於給定值的尺寸的平均相等的更小的細胞團塊，該裝置由至少一組平行的或相交的片材或切割線構成，以形成至少一個尺寸減小網，抽吸的材料通過該至少一個尺寸減小網。在優選實施方式中，脂肪抽吸物的同種化和/或尺寸減小在洗滌之前藉助於第一尺寸減小網發生，抽吸的材料在進入洗滌和分離容器的洗滌腔室之前被迫通過該第一尺寸減小網，而第二尺寸減小/同種化藉助於第二尺寸減小網發生，該尺寸減小在洗滌和分離容器中的至少一個細胞材料洗滌步驟之後執行。第二尺寸減小/同種化(homologation)可在洗漆步驟結束時、在用於移植的材料從洗滌和分離容器離開之前發生。優選地，第二尺寸減小網具有比第一尺寸減小網更窄的網眼。明顯地，可使用於移植的材料通過多個網或尺寸減小裝置、具體地是通過兩個或更多個網或尺寸減小裝置，所述尺寸減小裝置可能地設置在單個容器中或者在兩個或更多個可連接的洗滌和分離容器中。第一減小促進洗滌，因為其使脂肪小葉的纖維組分破碎或停止並且其通過將脂肪抽吸物塊減小到較小的團塊而均勻化該脂肪抽吸物塊的尺寸，將團塊相互分離並且與脂肪抽吸物自身分離。第二減小提供洗滌 的準備用於移植的細胞材料，其尺寸允許通過任何種類的針，甚至是非常小尺寸的針進行注射。具有不同尺寸的網眼或網孔、具體地具有在位於脂肪抽吸物入口處的網中的較大網眼或網孔和在位於準備移植的材料的出口處的網中的較小網眼的至少兩個尺寸減小裝置的存在，以及所述至少兩個尺寸減小裝置在所述兩個裝置之間的給定距離的設置，即所述至少兩個尺寸減小裝置被設置在洗滌腔室的端側處，防止所述尺寸減小裝置被細胞材料堵塞，因為尺寸減小是逐漸發生的。此外，這種脂肪抽吸物的逐漸尺寸減小允許在從供體區域抽取組織期間可能地使用大的針，從而加速材料收集過程。因此，甚至當抽吸的材料包括大的團塊時，其仍不會堵塞裝置的網孔或尺寸減小裝置，因為大的團塊不是通過穿過單個尺寸減小網眼、網或片材，而是通過順序地通過在待處理材料的流動方向上具有減小的尺寸的網眼或網孔的兩個或更多個尺寸減小裝置，而被逐漸減小到較小的團塊。優選地，細胞材料被減小到允許在洗滌步驟結束之後通過非常細的針將其移植的尺寸。特別小的尺寸的移植插管的使用減小由移植過程引起的創傷，並允許移植過程在局部麻醉下執行，而沒有縫合或特殊的藥療法且具有快速的癒合效果。考慮到抽吸的材料也含有幹細胞，脂肪尺寸減小提供小的細胞團塊、具體地是其表面附有幹細胞的單個細胞或脂肪細胞的大團塊。脂肪抽吸物塊減小成多個團塊提供在注射由本發明的方法和裝置製備的材料時可能接觸待處理的組織的大量幹細胞，因為除將抽吸的物質減小成多個相等的較小的團塊之外，尺寸減小作用還導致可能接觸待處理組織的表面積的增加，從而增加其上具有幹細胞的暴露區域。將由脂肪抽吸取得的脂肪組織的小葉轉變成生物填充物，即含有脂肪細胞、其它類型的細胞諸如幹細胞或間質細胞和可能地結締材料的細胞碎片和殘餘物的細胞懸液或物質或流體或半流體團塊，所述懸液在本申請的轉變過程結束時具有包含小的平均地均勻尺寸的細胞和/或細胞團塊的固相，適合於以小量或大量注射，允許所製備的脂肪不僅在肌肉注射或肌下注射中使用，而且在皮下注射中使用，而沒有不規則性、硬化效果、鈣化和注射脂肪的總體再吸收。然而，脂肪材料可被注射到任何組織或器官。此外，脂肪小葉分離成小細胞或細胞團塊促進雜交，即在其被注射在其中的組織中細胞物質的整合。脂肪小葉分成細胞團塊還提供接觸經受移植的組織的注射細胞物質的表面的增力口，從而促進處理組織的生物刺激以及因此注射的細胞材料的整合。包括在實際上整個製備過程中將提取的生物材料與外部環境隔離的幾個消毒部件的簡單裝置的使用明顯減少生物材料汙染、人員和環境的危險、以及因此在細胞材料的稍後使用期間傳染或排斥的危險。因此，本發明的裝置還允許在手術室外面，在門診環境中處理生物材料。裝置的簡單構造，以及除導致乳化液形成的洗滌溶液之外的脂肪抽吸物的任何化學和/或酶處理的缺乏，能夠促進生產和銷售，並且能夠避免、促進或減小收集關於新的藥物或新的裝置的安全和有效數據以獲得其使用授權所進行的長期和昂貴研究步驟。因此，本發明的裝置和方法提供簡單且快速的程序，例如為從患者身體抽吸脂肪需要單個門診會晤，所述脂肪的處理沒有脂肪抽吸物的化學/酶乳化劑，以及其儲存和/或向患者的再注射。利用其中具有用於形成液體乳化液的裝置、具體地是球的本發明的裝置通過手動機械攪拌需要非常短的時間來獲得液體乳化液以及漂浮在所述乳化液上的固體細胞材料的分離。處理脂肪抽吸物和使其適合使用所需的時間平均地為10至20分鐘；在任何情形中，獲得可移植材料所需的時間比其它現有技術裝置或方法所需的時間短。脂肪抽吸物儲存和處理裝置還可用於稍後的移植步驟。另外，優選地，處理材料可被分離並轉移到其它容器，例如一個或多個IOcc注射器，該容器可經受沉澱和/或離心，以將殘餘液體/油組分與固體組分分離，所述固體組分將通過隨後轉移到較小容量的一個或多個注射器而因此準備用於移植。因此，本發明的裝置提供脂肪組織群的快速尺寸減小，允許通過非常小的針來注射所述脂肪組織群，從而在患者上留下不可見的疤痕(製備組織可用於面部移植，其中大的且可見的孔將是美學上不可接受)，且分離乳化液/細胞相，以獲得可注射的細胞或細胞團塊，所述可注射的細胞或細胞團塊具有較大表面，用於包含在脂肪抽吸物中的幹細胞與待處理組織接觸。減小到小的團塊允許位於所述團塊的外表面上的末梢幹細胞活化。團塊越多，暴露的細胞表面就越大並且可能地與處理組織相互作用的末梢幹細胞就越多。
下面更詳細描述的方法、裝置和套件可用於簡單地通過機械攪拌而不僅處理脂類材料而且用於需要細胞團塊尺寸減小和/或從固體細胞相洗滌和分離液相的任何種類的細胞團塊。


本發明的這些及其它特徵和優點將通過在附圖中示出的幾個實施方式的以下說明而變得更清楚，在附圖中圖1是根據一個實施方式的洗滌和分離容器的透視圖，圖2是根據不同實施方式的洗滌和分離容器的透視圖，圖3是洗滌和分離容器的側視圖，圖4是具有位於出口附近的過濾器的洗滌和分離容器的縱截面圖，圖5是洗滌和分離容器的縱截面圖，所述洗滌和分離容器具有位於洗滌腔室的入口附近的細胞團塊尺寸減小網、位於出口附近的第二尺寸減小網和在洗滌腔室中的攪拌元件，

圖6是尺寸減小容器的透視圖，圖7是尺寸減小容器的縱截面圖，所述尺寸減小容器具有在入口附近的尺寸減小網和用於減小尺寸的脂肪的收集腔室，圖8a_8d示出了在洗滌和分離容器中發生的脂肪抽吸物處理步驟，圖9是洗滌和分離容器的縱截面圖，其中固體組分漂浮在液體組分的乳化液上以允許液體組分從洗滌腔室的出口離開，圖10示出了在前景位置中連接到非固定的和/或外科手術裝備中的本發明的裝置，圖lla、llb、llc示出了尺寸減小裝置的實施例，圖12a、12b以放大細節示出尺寸減小網的實施例，圖13a、13b、13c示出洗滌和分離容器以及封閉端子的實施例，圖14示出了適於與本裝置組合使用的、以移植所製備的材料的針。
具體實施例方式本發明的裝置在身體和面部體積矯形過程和/或在單獨地利用所述處理的脂肪材料或利用任何其它合成或天然填充物注射的任何組織或器官的生物刺激期間、提供用作生物填充物、即天然和自源或異源的填充物的脂肪組織的細胞懸液。由本發明的裝置處理的小葉脂肪材料，即細胞的大團塊，具體地是脂肪細胞，可藉助於吸脂過程來獲得，所述吸脂過程涉及在局部麻醉下或通常在門診環境中從患者的任何供區，例如皮下髖部、腹部或膝部區域提取脂肪組織。一旦已經利用本發明的裝置對所述脂肪組織進行了處理，該脂肪組織就能夠用於自體移植，即注入到組織已經被抽取的患者的身體的特定區域中，以填充如下區域由於老化、疾病、例如放射療法的治療或以往的手術而展現出皮下脂肪的體積缺乏或重吸收，並且身體相關部位凹陷，骨骼突出和皮膚鬆弛的區域。利用本發明的裝置和方法處理的組織可以被布置為用在受體患者上而不是供體患者上。現在將描述示例性的脂肪抽吸過程。脂肪抽吸過程包括在消毒過的注射器中製備麻醉劑液體，該麻醉劑液體被適當地稀釋並且可能地添加有血管收縮腎上腺素，該消毒注射器優選地具有針或稱為魯爾連接器的插管連接器，具有適於待麻醉的身體的表面區域的筒體積，例如10至60CC注射器。一旦用於抽取脂肪組織的區域已經被標記併合適地消毒，通過具有約Imm直徑的消毒的一次性鈍端的插管注射局部麻醉劑液體，該插管優選地具有魯爾連接器。患者皮膚利用常規技術消毒並通過疹塊(wheal)來麻醉。麻醉是通過將一次性鈍端的消毒過的插管逐漸引入穿過皮膚而將麻醉劑溶液引入到皮下組織中，以用麻醉劑浸潰整個目標區域來獲得的。為了注射麻醉劑以及稍後插入針或插管以進行脂肪組織抽取，可利用具有充分直徑的消毒的尖針或消毒的柳葉刀形刀片穿透皮膚，以允許稍後將一次性抽取插管引入。如果需要，可給患者服用鎮靜劑。脂肪抽吸，S卩脂肪組織的抽取利用連接到插管的消毒注射器來執行，該插管優選地具有直徑在1. 2至3_範圍的多個孔。也可以使用高達6_直徑的插管。利用本發明的裝置，可以使用大直徑插管(優選3_的多孔插管)來抽取，從而允許快速抽出大量脂肪組織，因為被如此抽出的細胞的大團塊將在使用之前經受尺寸減小，如下面更詳細說明的那樣。在一個實施方式中，具有至少IOcc容積的所述注射器具有用於連接到一次性消毒插管的魯爾連接 器，所述插管在其表面上具有用於抽吸組織的一個或多個孔。明顯地，抽吸注射器和抽吸插管的容積取決於待抽吸的脂肪組織的量，待抽吸的脂肪組織的量則取決於稍後的填充和/或矯形手術必定需要的處理脂肪組織的體積。脂肪組織抽取插管優選地被引入通過為了麻醉而預先形成在皮膚中的孔。對於脂肪抽吸來說優選地使用IOcc注射器，因為它們對組織施加足夠的壓力並允許容易的操縱。這些優選是已知的魯爾鎖注射器7，其被直接地連接到具有相應的魯爾連接器的抽吸插管，或者在插管和注射器之間插入有特定的雙向閥的情況下被連接到具有相應的魯爾連接器的抽吸插管，所述閥，與圖10中示意性顯示的閥類似，由管或導管8連接到優選地配備有三向閥9的裝置的入口 102，並且允許通過一個或多個步驟將脂肪抽吸物從患者直接轉移到本發明的裝置。這樣的轉移可在封閉系統中發生，在該封閉系統中生物材料決不接觸外部環境。下面所描述和要求保護的裝置和方法使用抽吸的小葉脂肪來獲得細胞懸液，所述細胞懸液具有固相和液相，所述固相由細胞、具有小的且平均恆定的尺寸的細胞團塊組成，所述液相沒有任何諸如血液、油、細胞碎片和麻醉劑液體的雜質。如圖1和2所示，本發明的裝置包括洗滌和分離容器1，所述洗滌和分離容器I具有用於洗滌抽吸的材料的洗滌腔室101，所述容器I具有入口 102和出口 103，用於使抽吸的材料通過入口 102進入洗滌腔室101並且用於所述材料的至少一部分，具體地是以時間順序，即首先流體組分和然後固體組分的順序通過出口 103離開所述腔室101，所述洗滌腔室101包括用於機械地形成流體組分、具體地是從破裂的脂肪細胞獲得的油、血液和/或其它消毒液體溶液的乳化液的裝置。所述乳化液形成裝置由至少一個攪拌元件104組成，所述至少一個攪拌元件104諸如具有相等或不同尺寸的球等，用於在使洗滌和分離容器I經受攪拌時增加液體組分的乳化液。在本發明的裝置中，裝置的簡單手動攪拌能夠提供液相與固相的分離，所述液相包括流體乳化液，所述固相包括細胞、細胞碎片、細胞團塊。顯然，還可提供機械攪拌來模仿至少手動施加的力。這些攪拌元件104在與洗滌腔室101相比時可具有較小的尺寸，因為如果它們太大，則它們不能在腔室101中自由地移動且可能破壞容納在該腔室101中的細胞材料。所述攪拌構件的重量也應是足夠的，以形成液體乳化液而不會引起細胞壁破裂。這些攪拌構件104可為大體球形本體，即具有連續的圓化外表面，且為中空的或實心的，並且可在腔室101內旋轉和移動，以輔助液體組分的緩和混合。攪拌構件10 4優選地由消毒材料製成，該消毒材料不與容納在洗滌腔室中的生物材料相互作用或不與為洗滌細胞材料而被注入的溶液相互作用例如，它們可以由金屬製成，所述金屬即使在高溫下也容易消毒並且防止攪拌構件在相互碰撞時或與洗滌腔室101的內壁碰撞時制動或變形。因為攪拌構件104的圓化表面防止在所述構件104上產生將阻礙清潔和消毒條件的維持的碎片積聚區域或細菌繁殖區域，所以攪拌構件104的圓化表面還可促進消毒。優選地，攪拌構件104由具有給定重量和尺寸的球組成，以促進液體的相互乳化，而不會在手動或機械攪拌期間引起細胞壁的機械破裂。液體的乳化液由於攪拌裝置104的存在而獲得，該攪拌裝置104增強混合作用，同時還溫和地攪拌容器，以獲得液體的乳化液並防止可能導致細胞破裂的突然運動，這樣的攪拌不涉及液體組分之間的鍵的分解。顯然，可以使用具有任何形狀和材料、諸如玻璃的攪拌構件104。洗滌和分離容器I優選地具有柱形形狀，但是其可以被形成為可以容納給定量的抽吸的脂肪並且確保最佳操縱的任何形狀和尺寸。在優選實施方式中，洗滌腔室中的脂肪抽吸物不超過整個腔室容量的1/3。其餘容積由液體填充。例如，可提供具有10至3000cc容積的容器I。優選的尺寸是300至600cc的容器，其中約100至250cc脂肪抽吸物被處理。如圖所示，洗滌和分離容器I由具有形成在其中的洗滌腔室101的中心管狀部分111，以及在所述管狀部分111的端部處的兩個封閉端子112、113諸如蓋帽112、113等組成，洗滌和分離容器I的洗滌腔室101的入口 102和出口 103由形成在每個蓋帽112、113中的、與連接端子1021、1031和/或封閉閥連通的孔構成。很顯然，所述端子1021、1031和/或所述至少一個入口 102和出口 103可被設計
成在將脂肪注射和壓入到所述容器I中的步驟期間利用消毒蓋帽來封閉，並且/或者配備有防回流裝置，諸如單向閥。例如，所述入口 102和/或出口 103和/或所述連接端子1021、1032可被連接到三向閥9，類似於圖10中示意性示出的那些。脂肪材料通過開口 102而被注射到容器I的洗滌腔室101中，所述開口 102例如配備有例如魯爾連接器1021和/或三向閥9。陽性、陰性和中性魯爾連接器是已知的並允許具有所述連接器的兩個裝置之間的流體密封連接。魯爾連接器例如為由GVS公司在其網址www. gvs. com上銷售的連接器。具有雙向閥的注射器的示例在www.1nteraationalpb1.1t中示出。可在洗滌和分離容器I的洗滌腔室101中靠近出口 103設置至少一個過濾器4，所述過濾器允許脂肪的流體組分和/或固體組分通過並將攪拌元件104保持在洗滌腔室101中。在本發明的變型實施方式中，所述過濾器4可由選擇性可滲透膜構成，該選擇性可滲透膜允許液相的至少一部分通過，並且保留固體細胞相，所述液相由含油組分、血液組分、諸如麻醉劑液體和/或鹽水的消毒溶液構成，所述固體細胞相由細胞碎片、整細胞和細胞團塊構成，從而允許乳化液的液相與固相分離。所述選擇性可滲透膜可由具有細網眼的網組成，其為光滑的，即不具有可能破壞細胞壁的突出部分或不規則或尖銳表面，其網眼或貫通網孔小於容納在洗滌和分離容器I的洗滌腔室101中的細胞團塊。形成選擇性可滲透膜的網的網眼可具有在1000至50 μ m範圍的尺寸。這種過濾器4用於將攪拌構件104保持在洗滌腔室101中，並且防止它們在洗滌和將固體細胞組分從乳化液分離期間堵塞出口 103。在一個優選實施方式中，如下文更好地描述的那樣，所述過濾器4由細網眼的切割網(cutting net)代替,其提供用於減小從洗漆腔室101出來的脂肪抽吸物的固體組分的尺寸的裝置。在一個實施方式中 ，在相對端，即在入口 102處，可提供尺寸減小裝置以將抽吸的脂肪3的固體組分、具體地是細胞大團塊的尺寸減小成較小的細胞團塊，即具有等於或小於給定值的尺寸的細胞團塊，所述裝置由至少一組平行的或相交的由消毒材料諸如金屬製成的片材或切割線構成，以形成至少一個尺寸減小網，抽吸的材料在進入洗滌和分離容器I的洗滌腔室101之前通過該尺寸減小網。所述容器可由消毒塑料或玻璃製成，或總之由優選地耐高溫和高壓釜可處理的半透明材料製成，以將抽吸的脂肪注入其中。如圖4和5所示，用於細胞團塊的所述尺寸減小網3在大體垂直於進入所述洗滌和分離容器I的洗滌腔室101的脂肪流的方向的位置中、靠近洗滌和分離容器I的入口 103被包(subtended)在洗漆腔室102中。在本發明的優選實施方式中，脂肪抽吸物的尺寸被逐漸減小。這種逐漸減小通過強迫脂肪抽吸物通過定位在距離彼此給定距離處的兩個或更多個尺寸減小網的網眼或網孔至少一次來獲得。除靠近入口 102的網之外，洗滌和分離容器I具有第二尺寸減小切割網6，所述第二尺寸減小切割網6在大體垂直於從所述洗滌和分離容器I的洗滌腔室101離開的脂肪流的方向的位置中、靠近洗滌和分離容器I的出口 103被包在洗滌腔室101中，使得進入洗滌和分離腔室101的脂肪抽吸物在從所述腔室101離開之前可流過具有逐漸變細的網眼的兩個網，較粗的網眼被設置在位於入口 102附近的網中。因此，兩個網被設置在距離彼此給定距離處具體地，兩個網被設置在洗滌和分離容器的端側處，與洗滌和分離腔室101分開，所述洗滌和分離腔室101容納攪拌裝置104以及用以形成乳化液的足夠空間。考慮脂肪抽吸物的流動方向，第一網3，即位於入口 102附近的一個網阻擋脂肪小葉的纖維組分並執行第一減小，例如提供具有相對均勻的最大尺寸、即具有從0.5至2mm的直徑的細胞團塊，而位於出口 103附近的第二網6執行先前已經被洗滌的團塊的進一步減小。例如，在洗滌和分離容器I上出來的團塊和/或細胞可具有至多10 μ m的直徑。可使用第二網6替代過濾器4，用以將攪拌構件保持在洗滌和分離腔室中。通過多個網的切割網眼的這種逐漸減小提供待注射的固體組分，所述待注射的固體組分包括非常小直徑的團塊，並且如果需要的話則包括單個細胞。本發明的裝置允許脂肪抽吸物減小到具有任何尺寸的可移植材料。隨著細胞材料在洗滌和分離腔室103中執行的洗滌步驟之後穿過位於出口 103附近的第二網6，所述網具有減小尺寸的網眼或網孔，由於脂肪細胞的破裂，其可導致油形成。可通過將細胞材料轉移到具有洗滌和分離腔室101的另一容器I內而移除該油，該另一容器I具有或不具有尺寸減小裝置。作為到第二洗滌和分離容器中的這種轉移的替代或與這種轉移組合，可通過一個或一個地對離開洗滌和分離腔室的處理材料進行沉澱和/或離心而將任何殘餘的油/液體移除，並且放置在特定容器中。這些容器可為被保持在注射器保持器中的一個或多個注射器。如圖12a和12b所示，利用已知的技術和裝置的位於洗滌和分離腔室101的入口和出口附近的網可具有蜂窩狀切割網眼。在一個實施方式中，靠近入口 102的網的每個網眼的面積約為4mm2，而靠近出口103的網的每個網眼的面積約為1mm2。細胞團塊尺寸的減小和同種化(homologation)可由網或優選地位於容器I中的兩個切割網的網眼或片材來提供。每個網均具有相同的網眼或貫通網孔，所述網眼或貫通網孔具有2000μπι至50 μ m範圍、優選地1500μπι至100ym範圍的直徑。因為位於入口 102附近的網3的網眼大於位於出口 103附近的第二網6的網眼，所以脂肪抽吸物團塊的第一尺寸同種化和/或減小通過穿過第一網3的網眼來獲得，而第二增加的減小在通過使材料穿過第二網6的網眼而從容器I離開時獲得。在一個實施方式中，用於細胞團塊的尺寸減小裝置的空隙(網眼、孔隙)，具體地在位於出口 103附近的網6中的空隙(網眼、網孔)，具有750μπι至50μπι範圍的直徑並且總之足以允許細胞材料通過，甚至允許單個細胞通過。顯然，脂肪抽吸物尺寸減小和/或洗滌也可不利用在其中具有尺寸減小裝置，即一個、兩個或更多個網的單個洗滌和分離容器I來進行，而是利用適合於連接在一起的兩個或多個容器I的序列來進行。每個容器I的網3、6的網眼可具有與設置在另一容器I中的網的網眼不同的尺寸，和/或容器的網的網眼可具有彼此不同的尺寸。因此，對於脂肪抽吸物團塊的逐漸尺寸減小，可迫使材料從裝置出來而進入到第二裝置中，所述第二裝置具有洗滌和分離腔室I和具有比在先前使用的裝置中設置的網更小的網眼的尺寸減小裝置。
如圖6和7所示，用於細胞團塊的至少一個尺寸減小網3被包在脂肪尺寸減小容器2的減小腔室201中的入口 202和出口 203之間，靠近用於接收進入所述減小腔室202的脂肪的尺寸減小容器2的所述入口 202，所述容器2還具有出口 203，用於使抽吸的脂肪通過入口 202被注入，穿過尺寸減小網3進入到第二容器2的減小腔室201中並且允許所述抽吸的脂肪通過出口 203離開所述減小腔室201，所述出口 203被設計成連接到分離和收集容器I的入口 102以提供尺寸減小容器(2)的尺寸減小腔室(201)與洗滌和分離容器I的洗滌腔室101之間的連通。可選擇地且優選地，多步驟的減小可通過將細胞材料收集到注射器，例如IOcc注射器中，並利用注射器將所述材料弓丨入到具有逐漸變細的網眼的第二完整裝置來進行。如圖6和7所示，尺寸減小容器2可包括連接在一起的半殼體和兩個部分，所述兩個部分中的至少一個部分，優選地具有出口 203的部分，具有用於收集減小尺寸的脂肪的內腔室201。在一個實施方式中，所述收集容器2可被設計成包括與在此描述的洗滌腔室的封閉端子類似的兩個元件。兩個端子可以固定或可移除方式連接到彼此，以形成具有內尺寸減小腔室201的尺寸減小容器2。與洗滌和分離容器I相似，收集容器優選地為一次性類型的或者可被移除，以進行內部元件的消毒並且再使用。顯然，尺寸減小腔室201可允許具有各種尺寸，以收集各種量的通過至少尺寸減小網3的尺寸減小的細胞材料。`在出口 203附近，可提供另外的細胞團塊尺寸減小網。具體地，可在尺寸減小容器2中設置兩個脂肪抽吸物尺寸減小網，一個靠近入口202且另一個靠近出口 203，所述兩個網具有不同尺寸的網眼具體地，靠近入口 202的網具有比靠近出口 203的網大的網眼。根據變型，本發明的裝置包括至少一個尺寸減小容器2和用於將流體組分與固體組分分開的至少一個洗滌和分離容器，所述尺寸減小容器2具有尺寸減小腔室201，所述尺寸減小腔室201帶有入口 202和出口 203以及在入口 202和出口 203之間的尺寸減小網3，所述出口 203具有可移除的流體密封連接裝置2021、2031，用於與位於洗滌和分離容器I的洗滌腔室101的入口 102處的配合連接裝置102連接。如圖7所示，尺寸減小容器2具有入口 202和出口 203以及用於細胞團塊的尺寸減小網3，所述細胞團塊形成脂肪的固體組分，該尺寸減小網3位於入口 202和出口 203之間的中間位置中或者朝入口 203偏移，並且參考脂肪的注射方向，下遊隔間作為用於減小尺寸的材料202的收集腔室，所述隔間具有預定的容積。尺寸減小容器2和/或洗滌和分離容器I的入口 102、202和出口 103、203具有可移除的流體密封連接裝置諸如魯爾連接器等，用於連接到醫療裝置諸如注射器、袋子等，所述醫療裝置具有與位於開口 102、202、103、203處的裝置相容的可移除的流體密封連接裝置。顯然，尺寸減小容器2的入口 202和出口 203可被設計成在尺寸減小期間由消毒蓋帽封閉和/或配備有防回流裝置，諸如單向閥。為了允許抽吸的脂肪流入和流出尺寸減小容器的尺寸減小腔室201和/或洗滌和分離容器I的洗滌腔室101，並且允許從洗滌腔室101移除流體組分，即由機械攪拌獲得的乳化液，提供了用於壓縮或抽吸脂肪的流體組分和/或固體組分的裝置諸如注射器等，所述裝置可以與位於尺寸減小腔室201和/或洗滌和分離腔室101的入口 102、202和出口103,203處的配合裝置1021、1031、2021、2031可移除地且流體密封地連接。明顯地，脂肪材料穿過尺寸減小網3、4的網眼的流動可通過將所述脂肪材料與液體、具體地是鹽水混合來促進。洗滌和分離容器I中的尺寸減小網3、6和/或尺寸減小容器2中的網3可分別被設計成具有不同尺寸的空隙或網眼，使得容器中的網具有彼此不同的尺寸的網眼和/或具有與另一容器中的網的網眼不同尺寸的網眼，使得旨在獲得等於或小於給定值的細胞團塊的細胞團塊尺寸減小在多個步驟中通過所述容器I和/或2中的網來進行。因此，本發明的裝置的這一部分的目的在於，通過迫使脂肪組織小葉穿過特定的切割網或平行的切割片材，優選地通過兩個網而減小脂肪組織小葉的尺寸，並且形成細胞懸液，所述細胞懸液帶有具有減小的且平均均勻的尺寸的細胞和/或細胞團塊、具體地是脂肪細胞，或總之具有等於或小於預定值的團塊，所述細胞懸液適於在使用特別細的針或插管的稍後移植步驟中使用，同時避免其堵塞。尺寸減小網的目的還在於，增加外周的幹細胞的量，所述外周幹細胞在被注射之後可以接觸待處理的組織，該幹細胞附著到通過減小脂肪抽吸物塊而獲得的細胞團塊的外表面。利用上述裝置，細胞團塊的尺寸在穿過尺寸減小裝置時基本上是相等的且範圍從2000 μ m 至 50 μ m,優選地從 1500 μ m 至 100 μ m。如附圖所示，洗滌和分離容器I包括中心管狀本體111和被固定到或能夠被固定到中心本體111的端部的兩個封閉端子1 12、113或蓋帽。所述中心部分111被示出為具有柱形形狀，但是可具有任何形狀和尺寸。洗滌容器101所具有的尺寸允許由單手操縱該洗滌容器101。在一個變型中，如圖2、3、4和5所示，在中心管狀部分111的一端處提供了加寬的杯形部分115，該部分是所述管狀部分的加寬的軸向端，其內直徑大於中心部分111的內直徑。一個封閉端子112具有適於與中心部分的端部接合的開口，而第二封閉端子113具有軸向柱形延伸部116，用於通過抵靠外環形徑向鄰接肩部117而接合在中心部分111的杯形底座115中。在封閉端子113的軸向延伸部116和在中心部分111的一端處的加寬的杯形部分115的接觸表面處，以及在中心部分的端側的外表面和與其接觸的第二封閉端子112的開口的內表面之間，可以提供用於流體密封連接的裝置，例如O形圈等，其與上述部件，SP封閉端子112、113以及與中心部分111組合而形成與外部環境隔離的完全消毒的洗滌腔室101。還可在這些接觸表面上進設置凹入和凹槽，以確保這些端子112、113在管狀本體111上的固定。所述封閉端子112、113可以被設計成被可移除地固定到中心管狀本體111，但是所述洗滌和分離容器I還可以設計成是可移除的，以允許一個或兩個端子從管狀部分111的分離。由此，這將提供一次性洗滌和分離容器1，其適合於也在其內洗滌腔室101中進行消毒，並且因此是可再使用的。如圖13a、13b、13c所示，封閉端子112、113和中心管狀部分可具有非常簡單的結構。兩個封閉端子可為被固定地或可移除地安裝到管狀本體111的端部的蓋帽的形式。這些端子可以在面朝洗滌腔室的一側上具有肩部，以防止網的變形，所述網可以是薄且易碎的。這些封閉端子112、113具有形成在管狀部分的縱向中心軸線處的孔隙，諸如通孔，所述孔隙具有封閉閥和/或諸如魯爾連接器或卡扣配合或螺釘連接器等的流體密封連接裝置1021、1031，或多向閥，從而提供洗滌腔室101與一個或多個醫療裝置諸如注射器、袋子等的可能同時的連接，或者通過具有配合連接裝置2021、2031的相應的入口 202和/或出口 203而與尺寸減小容器的尺寸減小腔室201的連接。如圖所示，在洗滌腔室內側，在封閉端子113和中心管狀部分的端側之間的連接處，在出口 103處，大致垂直於中心管狀部分111的縱向軸線設置過濾器4，該過濾器將攪拌構件104維持在洗滌腔室101內，以防止當洗滌和分離容器2相對於地面垂直地定向以移除液體乳化液時攪拌構件104堵塞任何開口，具體地堵塞出口 133。如上面所提到的，洗滌和分離容器I還可被設計成在入口 102處設有尺寸減小裝置3，用於將從脂肪抽吸產生的小葉脂肪的尺寸減小成具有較小且相同或相似尺寸的細胞和細胞團塊，具體地是脂肪細胞和幹細胞。如上面提到的，代替過濾器4或除過濾器4之外，可設置用於抽吸的材料的尺寸減小裝置，諸如脂肪 抽吸物尺寸減小網，所述脂肪抽吸物在從洗滌和分離腔室101出來之前被進一步分離成較小的團塊。因此，在封閉端子112和中心管狀部分的端側之間的連接部處，在洗滌腔室中靠近入口 102，大致垂直於中心管狀部分111的縱向軸線地設置了尺寸減小網，該網將大團塊的尺寸減小到預定值，該大 團塊通過入口 102被注射或推壓到洗滌和分離腔室中。可在封閉端子113和中心管狀部分的端側之間的連接部處，在洗滌腔室101中靠近出口 103，大致垂直於中心管狀部分111的縱向軸線地設置另外的尺寸減小網。在該優選實施方式中，穿過靠近入口 102的它們的第一尺寸減小網，將脂肪抽吸物的結締組織片破碎，並且/或提供脂肪抽吸物團塊尺寸的第一粗略的減小，而穿過位於出口 103附近的第二尺寸減小網提供其尺寸等於或小於給定值的細胞團塊，所述網具有不同尺寸的網眼，具體地，參考流入洗滌和分離容器I的脂肪的流動方向，第一個網具有比第二個網大的網眼。由上述裝置製備的脂肪組織物質，即通過尺寸減小網進行尺寸減小的，和/或被洗滌並且固體組分被從液體組分分離的脂肪組織主要包括脂肪細胞，但是還可以包括其它類型的完美健康的且有活力的細胞，所述完美健康的且有活力的細胞可以在脂肪抽吸物中發現並且可用於在面部和/或身體重塑過程中的移植。本發明涉及一種處理或防止在患者中造成傷害或疾病的方法，具體地涉及一種處理身體和面部中的體積缺陷、改進皮膚營養性和/或生物刺激的方法，所述方法包括-從患者的供體區域提取生物材料的至少一個步驟，具體地是通過脂肪抽吸而提取的脂肪組織，-處理所述材料的至少一個步驟，
-將所處理的材料注射到患者中的至少一個步驟。在注射步驟之前，顯然可以提供生物材料的收集和儲存的步驟。處理步驟包括用於減小所提取材料的尺寸的至少一個尺寸減小步驟，和/或用於洗滌和將液相從固體細胞相分離的至少一個洗滌和分離步驟，所述處理步驟利用本發明的裝置和方法實施。在本方法中，供體患者也是在其中執行注射步驟的受體患者。然而，供體和受者也可以是不同的人員。顯然，用於處理組織的裝置和方法以及用於處理患者的方法可涉及使用除脂肪組織之外的組織。現在描述用於移植通過上述裝置製備的生物材料的示例性過程。使用上述裝置製備的材料可以被儲存在一個或多個消毒容器，例如注射器中，並且被允許沉澱且可能地進行 離心，以將固體組分從任何殘餘的油或溶液分離。可利用任何合適的過程將使用本發明的裝置和方法製備的細胞材料注射到任何類型的組織中。一旦接收區域已經被設計並且被正確地消毒，就將含有製備的細胞懸液的注射器的針或微插管引入到皮下或肌肉組織中，從而產生用於注射非常少量的細胞團塊的三維通道網。該步驟優選地利用具有魯爾連接器的一次性消毒鈍端插管來實施，所述魯爾連接器具有非常小的直徑。形成在處理組織中的小尺寸的通道促進細胞和細胞團塊在皮下組織的胞間隙或在肌肉組織中的整合，由此減小手術創傷並且促進經受體積增加和重塑處理的組織快速恢復至正常的稠度。因此，組織中的各種小直徑通道的形成優化組織體積重構和/或生物刺激效果。通過將這種小葉分解成細胞團塊來減小脂肪小葉的尺寸在注射物質和被處理組織之間提供更大的接觸表面，從而促進相關區域的生物刺激和移植的脂肪組織的整合。這些特別細的、可能地小於Imm的插管的使用是通過抽吸的小葉脂肪的尺寸的減小而被允許的，所述抽吸的小葉脂肪的尺寸的減小在具有的尺寸減小裝置的至少一個尺寸減小容器2和/或至少一個洗滌和分離容器I中發生，所述尺寸減小裝置由至少一組平行的片材和/或至少一個線網或薄片材網，優選地至少兩個網構成，所述兩個網中的至少一個網具有非常小尺寸的網眼，這允許細胞團塊或甚至具有微米級尺寸的單個細胞通過。如果脂肪尺寸減小沒有發生，則在移植過程中使用的插管將被堵塞。作為具有鈍端的消毒插管的替代，可以使用與圖12所示類似的具有尖端或鈍端的螺旋狀或螺旋形插管5來移植脂肪細胞。螺旋插管5對於其中需要移植針的幾個穿透步驟的注射到器官中來說是特別有用的螺旋形針提供沿單個路徑沉積的最大化的細胞材料密度。這種類型的插管允許通過單個注射部位甚至在高稠度的組織或具體地精細組織中移植脂肪組織細胞團塊，所述單個注射部位允許一定體積的組織的處理，所述精細組織諸如疤痕組織、骨骼、軟骨、心肌或其它器官。利用旋轉運動將插管引入以允許螺旋進入組織。然後，以相同的方式將插管抽出、同時注射脂肪組織的細胞團塊或細胞群。與通過直線針的單個注射相比，這將顯著地增加每單位體積移植的脂肪組織的量，並且因此增加處理體積的量，而沒有減小注射脂肪組織和接收組織之間的接觸表面，從而增加注射細胞的脈管形成可能性，因為脂肪組織由於插管的小直徑且具有螺旋狀路徑而作為條帶或非常薄的細胞珠釋放。以螺旋狀路徑被釋放到待處理組織中的這些插管的使用在例如由於待處理組織的過度的稠度而沒有辦法執行科爾曼(Coleman)填充、即在待處理的組織中形成通道網時，或當組織創傷是不期望、諸如在心肌處理中時，是特別適合的，所述插管允許製備除脂肪細胞之外還包含其它類型的細胞(包括幹細胞)的脂肪組織。本發明還涉及用於移植的組織，例如用於自體移植或異種移植的組織，所述組織包括細胞，可能地包括細胞碎片和/或細胞團塊，並且是使用上述裝置和/或方法獲得的。所述組織包括均勻尺寸的細胞材料,所述細胞材料具有範圍從10 μ m至2mm的平
均直徑。優選地,0. 05至1. 5mm,特別是約O. 75-0. 5mm或更小(達10 μ m)。如果需要，本裝置還可提供包括單個細胞的組織。在優選實施例中，所述組織為主要包括脂肪細胞和幹細胞的脂肪組織。所述幹細胞適於用來產生任何細胞類型，諸如軟骨細胞、骨細胞、脂肪細胞、神經細胞。 在製備之後，該脂肪組織具有小的液體部分，沒有任何雜質，其與細胞團塊混合併且足以促進將細胞引入到待處理的組織中。所述液體部分可以是按重量計為移植而製備的脂肪組織的約50%。本發明還明顯地涉及具有上述一種或多種特性，而不是脂肪組織的組織。本發明還涉及優選地消毒的和一次性的套件，適合用於門診患者和外科手術環境。本發明的裝置或套件具有帶有閥或沒有閥的雙向連接器或三向連接器、連接管和注射器以及各種容器(例如，用於洗滌鹽水的袋子和用於收集洗滌廢物的袋子)。套件可用於處理任何類型的細胞材料，優選地為用於自體移植或異種移植I的脂肪，並且包括用於洗滌脂肪的固體組分並將所述固體組分與流體組分分離的至少一個容器1，所述洗滌和分離容器I如上所述形成。包括在洗滌腔室101中具有尺寸減小裝置的至少一個洗滌和分離容器的該套件在美容處理例如門診環境的場所中使用時是特別有利的，因為其提供簡單完美的消毒裝置，以被用於快速地處理從患者提取的材料，而沒有由於與外部環境接觸而對細胞材料汙染的危險。該套件允許從第一組織抽吸步驟到最後的注射步驟在完全封閉的系統中處理生物材料，這允許材料被處理而不會使材料接觸外部環境和/或不必使用可能汙染該材料的
>J-U ρ α裝直。這是通過使用一個或多個管、注射器、袋子、多向閥、魯爾連接器和明顯地一個或多個洗滌和分離容器I (以及可能地一個或多個尺寸減小容器2)而被允許的，它們被消毒並以或能夠以流體密封的方式連接在一起。因此，提供生物材料的抽取、材料的處理、生物材料的儲存、注射的系統是在從患者抽取到注射到受體患者中的所有其步驟中與外部環境完全隔離的系統。一個或多個系統部件可通過連接到特定設備而機械化，使得包括生物材料的抽吸和/或處理和/或注射的過程的一個或多個步驟可在不需要由操作者執行的任何動作的情況下實施。該套件特別適於輕度美容外科手術過程。在一個優選實施例中，該套件包括一個或多個容器1，所述一個或多個容器I具有至少一個尺寸減小網，優選具有兩個尺寸減小網，如上所述。該套件的每個容器I可被設計成具有帶有尺寸與其它容器I的網的網眼不同的網眼的網，使得通過迫使材料穿過多個容器的網的網眼，細胞團塊的尺寸被逐漸地減小到允許移植的期望值。這種逐漸減小避免了網的網眼堵塞的危險並且防止處理過程減慢。作為替代，可提供這樣的套件，其包括-至少一個容器1，用於洗滌脂肪的固體組分並將所述固體組分與流體組分分離，該至少一個容器I可能具有至少一個尺寸減小網或片材3，-至少一個尺寸減小容器2，所述至少一個尺寸減小容器2如上所述形成並且適於連接到所述容器I。在一個實施例中，套件具有兩個或更多個尺寸減小容器2，所述尺寸減小容器2適合於通過其出口 203或入口 202交替地連接到洗滌和分離容器I的入口 102或出口 103，預定量的減小尺寸的脂肪在消毒狀態下被儲存並保存在每個尺寸減小容器2的減小腔室201中。還可提供具有一組尺寸減小容器2的套件，其包括至少兩個尺寸減小容器2，所述至少兩個尺寸減小容器2就尺寸減小網3的網眼和容納在減小腔室201中的減小尺寸的脂肪的體積而言具有不同尺寸。例如，該套件可被設計成包含具有尺寸減小裝置3的兩個或更多個尺寸減小容器2，細胞材料可被迫使穿過所述尺寸減小裝置3，其具有帶有不同尺寸的網眼的網3。提供兩個或更多個尺寸減小容器2允許處理大量的脂肪而沒有堵塞尺寸減小網的網眼並且因此減慢材料處理過程的危險。洗滌和分離容器I和/或尺寸減小容器2可為一次性類型或以某種方式被形成以允許完全消毒和其稍後的再使用。可替代地或組合地，本發明的套件還可包括-具有不同容積的一個或多個一次性消毒注射器，-—個或多個消毒的尖針或消毒的柳葉刀形刀片，其具有不同的特定尺寸以允許用於麻醉、切除和移植的插管的經皮引入，-一個或多個一次性消毒插管，其具有尖端或鈍端，該一個或多個一次性消毒插管中的至少一個一次性消毒插管具有非常小的、Imm級別的直徑，-一個或多個單向或多向閥，具有或不具有止回閥，例如將連接到容器I和/或2的入口 102、202和/或出口 103、203的三向閥，-一個或多個消毒管，其具有魯爾連接器，從而允許生物材料從套件的一個部件通過到達另一部件(例如，從注射器到洗滌和分離腔室I或者從鹽水袋子到洗滌和分離腔室)，-諸如注射器的裝置或容器，以允許利用上述裝置製備的脂肪材料的沉澱和/或可能地離心，所述脂肪材料可被分布到一個或多個消毒容器中，以提供固體組分的額外分離，所述固體組分在沉澱之後漂浮在殘餘的液體/油組分上，以便在移植之前被移除，-用於保存所製備並準備用於移植的生物材料的裝置，例如用於所述生物材料在充當清潔室的封閉環境、即例如就特定汙染物、壓力和溫度而言具有受控條件的容器中的低溫貯藏的裝置。如圖10中示意性地示出的那樣，套件可包括一個或多個裝置，諸如一個或多個洗滌和分離以及尺寸減小容器1、用於從患者抽吸材料的注射器8、用於收集/注射處理的生物材料的注射器12、洗滌液體袋子10 (例如，容納鹽水的袋子)、用於收集廢棄材料的袋子11，它們通過消毒管、多向閥、魯爾連接器連接或能夠連接到一起。代替或除所述小直徑插管之外，套件可包括具有尖端或鈍端的至少一個螺旋狀或螺旋形插管5，允許如上所述通過利用單個注射點增加處理組織的體積，而將脂肪組織的細胞物質移植到高稠度或特別精細的組織中。套件還可包括用於在抽吸期間將注射器鎖緊以暫時防止柱塞例如在脂肪抽吸期間彈回，並且允許較少創傷的脂肪組織抽吸的器械。套件還可包括彈簧偏壓機構，用於向注射器活塞賦予往復運動，所述機構被連接到雙向閥並且提供脂肪組織的快速抽取，所述脂肪組織通過在其端部具有魯爾連接器的管而在不接觸外部環境的情況下被輸送到洗滌和分離腔室101。

在腔室的入口 102處提供三向閥還允許將洗滌溶液注射到所述腔室中而不斷開抽取注射器。套件中的注射器可由塑料製成，優選地具有魯爾連接器等並且具有各種容積。以下可以使用，舉例來說-用於局部麻醉注射的10至60cc注射器，-用於產生麻醉疹塊的具有針的5cc注射器，-1Occ或更大容積的注射器，其連接到消毒的1. 5至3mm直徑插管，用於從供體區域吸出脂肪組織，-用於脂肪移植的I至5cc注射器。因此，可利用本發明的裝置實施的處理方法允許製備例如通過脂肪抽吸獲得的脂肪提取物，所述脂肪提取物為在含有細胞團塊、具體地是脂肪細胞團塊的細胞懸液中的流體材料和細胞碎片以及異種尺寸的一個或多個細胞大團塊的混合物的形式，其具有較小和相等或類似尺寸，在任何情形中，小於給定值，以允許移植到患者面部或身體區域內，且需要具有微小創傷的填充程序，並且伴隨在過程中涉及的組織的生物刺激。該方法可以在封閉系統中實施，以避免在其施用到患者之前對細胞材料的汙染。顯然，待移植的脂肪組織可以不僅通過脂肪抽吸，而且還可以利用其它已知技術來獲得。如上所述，根據用於抽吸的材料尺寸減小的尺寸減小裝置的網眼或網孔的尺寸，可以獲得具有500 μ m或更小，即約100-10 μ m的平均尺寸的團塊。因此，脂肪材料的製備涉及將所述脂肪材料分離成小於抽吸的大團塊的細胞碎片、細胞或細胞團塊。如上所述，因為其產生促進幹細胞與移植在其中發生的組織接觸的有利微觀環境，所以這種分離提高幹細胞的活性。在本發明中，對於要被分離成等於或小於給定值的尺寸的細胞團塊，脂肪抽吸物尺寸的逐漸減小是優選的，這意味著脂肪被迫使穿過相交的或平行的線或片材的至少一個切割網，優選地穿過位於距離彼此給定距離處的兩個網至少一次，所述網具有不同尺寸的網眼。在尺寸減小之前和/或之後，顯然可以利用消毒洗滌溶液對脂肪進行一次或多次洗漆。如此獲得的細胞團塊經受額外的處理，該處理涉及利用消毒溶液洗滌和將細胞組分與液相分離，即與血液、從脂肪細胞破裂出來的油、使用的任何麻醉劑溶液和所述團塊已經混合的溶液例如鹽水分離。通過帶有洗滌腔室的容器I而允許洗滌和分離，所述洗滌腔室容納諸如球等的攪拌構件104，所述攪拌構件104通過攪拌容器I能夠形成容納在所述洗滌腔室中的液體組分的乳化液。在一個或多個洗滌和分離容器中的細胞團塊的洗滌可繼續，直到從出口 103出來的液相廢棄物是完全清澈的為止。有利地，因為脂肪抽吸物的逐漸尺寸減小是通過迫使該脂肪抽吸物穿過在洗滌和分離容器中位於距離彼此給定距離處，即在中心管狀部分的端部處的至少兩個網來獲得的，所以在分離脂肪組織小葉或大團塊以及將所述團塊的尺寸減小/同種化到預定值以下的第一步驟之後對所述細胞團塊進行第一次洗滌，這是因為通過對所述脂肪組織施加壓力而獲得的穿過脂肪組織尺寸減小裝置3可以導致脂肪細胞的細胞壁破裂，且形成油，所述油必須從含有細胞團塊的細胞懸液移除以確保所述組織的成功移植。一個或多個稍後的洗滌步驟將在第二或稍後的尺寸減小步驟之後執行，用於獲得用於移植的足夠尺寸的固體 組分。細胞組分的洗滌以及與在上述容器I中的提取的脂肪的液相的分離還可以在細胞團塊尺寸減小步驟之前發生。代替或除了分開步驟之外，本發明的方法包括洗滌細胞團塊的至少一個步驟，其與將乳化液形式的流體組分從固體組分分離的步驟同時實施。圖8a_8d和10示意性地示出了該方法。在第一步驟中，空氣從洗滌和分離容器I排出，並且整個內容積填充液體。例如，在使用裝置之前要排出的空氣可通過以下方式移除通過利用注射器7將鹽水吸出、通過藉助於重力使其進入袋子10以及通過使空氣從注射器12離開(在移除注射器帽之後)和/或從容器11 (其可配備有可打開的排氣閥)離開。洗滌和分離容器I以出口 103打開並且向上面向的方式豎直地定向液體被引入到容器I中並且空氣通過入口 102從該容器I排出。液體可以是容納在袋子10中的鹽水，所述袋子10經由管而連接到具有三向閥的腔室的開口。然後，將脂肪抽吸物注射到洗滌和分離腔室101中。可以將脂肪抽吸物從容器I的抽吸注射器直接注射或通過如圖10所示的完全封閉系統來注射。
可以使用任何容積的注射器。IOcc注射器是優選的。通過用於抽取的抽吸注射器，例如配備有閥的雙向注射器、直接地或通過連接到注射器並且連接到容器的開口的管來將脂肪材料注射到腔室101中，並且通過由注射器的活塞施加的壓力作用將脂肪材料推壓到所述腔室中。在該步驟中，優選地以出口 103向下面向的方式將容器保持在相對於地面的豎直位置。靠近入口 102的尺寸減小裝置的存在提供第一脂肪抽吸物尺寸減小/同種化。可通過處於壓力作用下的洗滌流體對脂肪材料施加液壓力，該洗滌流體被注射到洗滌和分離腔室101中並迫使脂肪材料進入和離開該洗滌腔室101。通過入口 102被注射到分離和洗滌容器I中的脂肪團塊可通過將諸如消毒鹽水的液體材料壓力注射到所述內洗滌腔室101中來進行重複洗滌，以獲得沒有任何油、血液以及任何抽取期間使用的溶液的高純度細胞團塊。所述流體材料從所述團塊分離的洗滌和分離步驟通過以下方式來發生-將諸如鹽水的消毒洗滌溶液注射到洗滌和分離容器I的含有脂肪材料的洗滌腔室101中至少一次，該洗滌腔室包含至少一個攪拌元件104。
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在該步驟中，以出口 103面朝地面並平行於地面的方式將容器保持在豎直位置，-手動或機械地攪拌所述洗滌和分離容器1，手動攪拌是足夠的，以促進流體組分、具體地具有消毒流體物質的油組分和血液的乳化；乳化通過將洗滌和分離容器定向在水平位置，即近似平行於地面(圖8b)來形成，-以出口103面朝下的方式將洗滌和分離容器I布置在相對於地板的豎直位置中，以獲得在構成容納在洗滌腔室101中的脂肪的液體乳化液上的固體組分的分層，具體地獲得包括在流體組分的乳化液上漂浮的細胞碎片、細胞和一個或多個細胞團塊的固體組分，所述流體組分在洗滌腔室101的下部中與洗滌和分離容器I的出口 103接觸，-將流體組分(S卩，油/液體)的乳化液通過洗滌和分離容器I的出口103從洗滌腔室101排出(圖8c)。通過利用給定的壓力通過開口 102將洗滌流體注入來迫使乳化液出來。因為容器具有柱形形狀，所以其水平位置意味著其長軸平行於地面穿過端側，而其豎直位置意味著柱體以其長軸垂直於地面定向。乳化液被收集在另一容器11中，該容器11通過合適的裝置流體密封地連接到所述開口 103，以防止外部環境和容納在腔室101中的細胞材料兩者的汙染。因此，在洗滌步驟中，由於球104的存在，容納有脂肪的洗滌和分離容器I被以一定的力攪拌，所述力不引起細胞壁破裂但是足以形成乳化液、即微小油滴在洗滌流體中的分散，所述脂肪與消毒溶液、例如利用注射器通過入口 102注入的鹽水或者從袋子抽取的鹽水混合。在容器I被水平定向的情況下容器被攪拌以形成乳化液。顯然，在該步驟中，容器I的開口，即至少一個入口 102和/或一個出口 103被封閉以防止材料的任何洩漏。在容器攪拌步驟結束時，將容器移動到豎直位置，並且形成脂肪抽吸物的材料的不同密度在洗滌腔室101中產生細胞和細胞碎片的一個固體層，所述層漂浮在液體乳化液上。通過將消毒洗滌溶液注射到腔室中，且隨後(通過攪拌容器，同時封閉入口和出口)形成乳化液並且(通過注射乾淨的洗滌溶液)將乳化液排出而重複洗滌步驟，直到流出的液體-油-血液乳化液顯現出沒有諸如血液和油的任何雜質為止。因此，可重複流體組分乳化液的排出。乳化液的這種排出是通過由重力弓I起的生理液體的流動來獲得的，該流動允許液體組分(油/液體)通過密度梯度以至少給定的時間間隔移除，即直到存在微小油滴和液體之間的乳化液為止，其每次、即對於每個洗滌循環是足夠的，以移除大量廢棄液體(特別是油)。顯然只要所述洗滌流體足夠，則在流出的液體(從入口 102到出口 103的流動)之後，水/油乳化液通過密度梯度而從溶液被消除。 如圖9所示，油/液體乳化液被排出。 只要其為乳化液的一部分，油就可以被排出。所排出的是微小油滴和洗滌溶液的乳化液。細胞物質漂浮在所述乳化液上。因此，需要乳化以允許消除在脂肪抽吸物中的雜質諸如油。在洗滌步驟結束時，固體組分漂浮在乾淨的洗滌溶液上。因此，在洗滌和分離步驟結束時，容器的腔室101中的材料可用於移植。脂肪組織洗滌是重要的步驟，因為其允許油的移除，所述油是在使用插管或針從供體區域機械抽取脂肪組織期間，和在在壓力下使脂肪通過尺寸減小網3期間由脂肪細胞的細胞壁的破裂而導致的。固體組分不保留在裝置I中而是被回收，優選地在出口 103處通過從入口 102施加的液壓推力而執行進一步的尺寸減小之後進行回收。通過在出口 103向上面向，使得固體組分漂浮在洗滌溶液上(圖8d)的情況下將所述容器豎直定向而將固體組分從洗滌和分離容器排出，所述出口 103具有優選地靠近該出口 103設置的尺寸減小網6。因此，待被排出的固體組分位於出口 103附近。通過將洗滌溶液穿過入口 102注入而將固體組分穿過第二網6推出。發現的是，所排出的首先是具有很少細胞材料的含水溶液，然後是富含細胞材料的溶液，最後是具有很少細胞材料的溶液。—個或多個容器可一個接一個地連接到出口 103，例如注射器12，用於收集所製備的與液體混合的生物材料。該材料已經通過網6而經受了進一步的減小/同種化。容器12被允許沉澱以獲得固體組分與殘餘的液體組分的分離。代替或除上述之外，可通過離心來進行分離。如此製備的生物材料被保存或優選地低溫貯存在用作清潔室的封閉環境中。顯然，儲存在容器12中的材料可以被設計成在最終保存和/或再注射之前在洗滌和分離容器I和/或尺寸減小容器2中進行再次處理。整個材料處理系統從患者的抽取到再注射都是封閉的。該特性對於生物組織的庫存，即其在生物庫中的保存是特別重要的。因此，被輸送到容器12中的生物材料總是在消毒的封閉系統中，決不與空氣接觸。因而，所述材料可被直接地低溫貯存而不需要使用清潔腔室的進一步的改變。如上所述，可提供多個相互可連接的洗滌和分離容器，以逐漸地減小和/或洗滌脂肪抽吸物。本發明的裝置允許細胞提取物的簡單、迅速且低價的處理，所述細胞提取物是與液相混合的細胞大團塊形式的，這提供預定尺寸的，總之小於預定值的大致相等的全和活細胞的細胞團塊，所述團塊與含有廢棄液體的乳化液形式的液體組分分離。這些團塊可以用於移植。明顯地，從脂肪小葉的處理得到的材料可不僅包含細胞團塊而且還包含待被用作生物填充物的單個細胞和細胞碎片。此外，抽吸的材料不僅包含脂肪細胞而且還包含其它類型的細胞，諸如幹細胞。由該裝置實施的處理方法不涉及使用酶或其它組分，所述酶或其它組分可能對抽吸的材料具有化學作用或對構成細胞的團塊具有生物作用，而是使用改變細胞團塊尺寸的可能性來獲得較大暴露的細胞表面，所述細胞表面可以在移植期間接觸處理的組織。具體地，提供了用於注射的固體材料，其還形成對於幹細胞在所述處理材料被再注射的區域中的作用來說最理想的在活的有機體內的微觀環境，所述幹細胞被包含在抽吸材料中。因此，也由於幹細胞的存在，本發明的方法簡單地且低價地提供了來自從患者提取的材料的生物活性可注射生物材 料，而且既不需要使用諸如乳化劑或酶的化學物質也不需要離體培養步驟。此外，這些非常小的細胞團塊可使用非常細的插管來移植，這減少手術創傷並最佳化組織完整性。而且，使用本發明的裝置提供使生物材料與外部環境隔離的封閉系統，並允許以非常短的時間製備該生物材料以進行使用，由此減少可能的汙染危險。形成本發明的主題的以上公開的裝置、套件和方法可以明顯地不僅用於製備待移植的脂肪組織，而且還用於製備需要具有高純度水平以供使用的任何類型的細胞團塊。
權利要求
1.一種用於從通過例如脂肪抽吸而提取的小葉脂肪製備用於移植的脂肪細胞的裝置，所述脂肪由液體組分和固體組分構成，所述液體組分包括油組分、血液組分和/或消毒溶液，所述固體組分包括異種尺寸的細胞碎片、細胞和一個或多個細胞大團塊，其特徵在於，所述裝置包括至少一個洗滌和分離容器(I )，所述至少一個洗滌和分離容器(I)具有用於洗滌吸脂材料的洗滌腔室(101 )，所述容器(I)具有入口( 102)和出口( 103)，用於使所述吸脂材料通過所述入口(102)進入所述洗滌腔室(101)和用於使所述材料的至少一部分、具體地是所述流體組分通過所述出口( 103)離開所述腔室(101 )，且所述洗滌腔室(101)包括用於通過機械攪拌而形成流體組分的乳化液的裝置。
2.根據權利要求1所述的裝置，其中所述乳化液通過使所述容器經受手動攪拌而獲得。
3.根據權利要求2所述的裝置，其特徵在於，所述乳化液形成裝置由諸如球等的至少一個攪拌元件(104)構成，用於在所述洗滌和分離容器(I)經受機械或手動攪拌時增加所述液體組分的乳化，且等於通過手動作用而賦予的力的力足以產生所述乳化液。
4.根據前述權利要求中得一項或多項所述的裝置，其特徵在於，設置尺寸減小裝置(3)，用於將抽吸的脂肪(3)的固體組分、具體地是細胞大團塊的尺寸減小到較小的細胞團塊，即使之具有等於或小於給定值的尺寸，所述裝置由至少一組平行的或相交的片材或切割線構成，以形成至少一個尺寸減小網，所述吸脂材料在進入所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)之前經過所述至少一個尺寸減小網。
5.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的所述尺寸減小網(3)在大致垂直於進入所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(11)的脂肪流的方向的位置中、靠近所述洗滌和分離容器(I)的所述入口(102)被包在所述洗滌腔室(101)中。
6.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的第二尺寸減小網(6)與所述第一網(3)以間隔開的方式被包在所述洗滌腔室(101)中，所述第一網靠近所述入口(102)定位。
7.根據權利要求6所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的所述第二尺寸減小網(6)在大致垂直於進入所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)的脂肪流的方向的位置中、靠近所述洗滌和分離容器(I)的所述出口(103)被包在所述洗滌腔室(103)中，使得所述洗滌和分離腔室(101)介於所述兩個網(3、6)之間。
8.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的所述尺寸減小網(3、6)從一個網(3)到另一網(6)具有不同的網眼或網孔，且具體地是，靠近所述入口(102)，所述網(3)的網眼或網孔大於靠近所述出口(103)定位的所述尺寸減小網(6)的網眼或網孔。
9.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的所述尺寸減小網(3、6)具有直徑範圍從2000 iim到50 的網眼或網孔。
10.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，用於細胞團塊的所述至少一個尺寸減小網(3)靠近脂肪尺寸減小容器(2)的入口(202)被包在所述脂肪尺寸減小容器(2)的尺寸減小腔室(201)中的入口(202)和出口(204)之間，所述尺寸減小容器(2 )的所述入口( 202 )用於接收進入所述尺寸減小腔室(201)的脂肪，且所述容器(2 )還具有出口(203)，用於使抽吸的脂肪通過所述入口(202)注入、通過所述尺寸減小網(3)進入到所述第二容器(2)的所述尺寸減小腔室(201)中，並且允許所述抽吸的脂肪通過所述出口(203)從所述尺寸減小腔室(201)離開，所述出口(203)被設計成連接到所述分離和收集容器(I)的所述入口(102)，以提供所述尺寸減小容器(2)的所述尺寸減小腔室(201)與所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)之間的連通。
11.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，所述裝置包括尺寸減小容器(2);洗滌和分離容器，用於將所述流體組分與所述固體組分分離開來，所述尺寸減小容器(2)具有尺寸減小腔室(201)，所述尺寸減小腔室(201)具有入口(202);出口(203);以及在所述入口(202)和所述出口(203)之間的尺寸減小網(3)，所述出口(203)具有可移除的流體密封連接裝置(2021、2031)，用於與位於所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)的所述入口( 102)處的配合連接裝置(1021)連接。
12.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，代替或除所述尺寸減小網(6)之外，至少一個過濾器(4)靠近所述出口( 103)設置在所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)中，所述至少一個過濾器(4)允許所述脂肪的所述流體組分和/或所述固體組分通過，並且將所述攪拌元件(104)保持在所述洗滌腔室(101)中。
13.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，所述尺寸減小容器(2)和/或所述洗滌和分離容器(I)的所述入口(102、202)和所述出口(103、203)具有可移除的流體密封連接裝置(1021、1031、2021、2031)，諸如魯爾連接器、雙向閥或多向閥等、消毒管或消毒容器，用於與一個或多個醫療器械諸如注射器、袋子等連接，所述一個或多個醫療器械具有與位於所述開口(102、202、103、203)處的所述連接裝置相容的可移除的流體密封連接裝置。
14.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，設置了用於將脂肪的所述流體組分和/或所述固體組分壓到所述洗滌和所述分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)和/或所述尺寸減小容器(2 )的所述減小腔室(201)中，或將脂肪的所述流體組分和/或所述固體組分從所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)和/或所述尺寸減小容器(2)的所述減小腔室(201)吸出的裝置。
15.根據前述權利要求中地一項或多項所述的裝置，其特徵在於，所述洗滌和分離容器(I)包括中心管狀部分(111)，所述中心管狀部分(111)具有形成在所述中心管狀部分(111)中的所述洗滌腔室(101);以及在所述管狀部分(111)的端部處的兩個封閉端子(112、113)，諸如蓋帽(112、113)等，所述洗滌和分離容器(I)的所述洗滌腔室(101)的所述入口( 101)和所述出口( 103)由形成在每個蓋帽(112、113)中的孔構成，其與連接端子(1021、1031)和/或閥連通。
16.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，所述尺寸減小容器(2)具有入口(202);和出口(203);以及用於細胞團塊的尺寸減小網(3)，所述細胞團塊形成脂肪的固體組分，所述尺寸減小網(3)位於所述入口(202)和所述出口(203)之間的中間位置中或朝所述入口(202)偏移，並且參照脂肪的注射方向，下遊的隔間作為用於所述尺寸減小材料的收集腔室(201 )，所述隔間具有預定的容積。
17.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置，其特徵在於，所述裝置包括多個洗滌和分離容器(I )，所述多個洗滌和分離容器(I)適於連接到一起，所述容器具有尺寸減小裝置，即具有一個、兩個或更多個網(3、6)，每一個容器(I)的網(3、6)的網眼具有與另一容器(I)的網的網眼不同的尺寸，並且/或者容器(I)的網的網眼具有彼此不同的尺寸，具體地是，考慮進入到所述容器(I)中和離開所述容器(I)的材料的流動方向，所述網具有逐漸更小尺寸的網眼。
18.一種用於從通過例如脂肪抽吸而提取的小葉脂肪製備用於移植的脂肪細胞的方法，所述脂肪由液體組分和固體組分構成，所述液體組分包括油組分、血液組分和/或消毒溶液，所述固體組分包括異種尺寸的細胞碎片、細胞和一個或多個細胞大團塊，其特徵在於，所述方法包括如下步驟將所述脂肪分離成小於所述大團塊的細胞團塊，使得所述細胞團塊與預定尺寸一樣大或小於預定尺寸，並且使得所述細胞團塊平均起來具有相同的尺寸，所述尺寸減小步驟通過使所述提取的小葉脂肪通過尺寸減小裝置(3)至少一次來執行，所述尺寸減小裝置(3)由形成定位於洗滌和分離容器(I)和/或尺寸減小容器(2)中的至少一個尺寸減小網的至少一組平行的或相交的片材或線構成。
19.根據權利要求18所述的方法，其特徵在於，將脂肪尺寸分離或減小或均勻化的所述步驟通過使所述脂肪通過具有不同直徑的網眼或網孔的兩個或更多個尺寸減小網(3、6)、具體地是通過在脂肪流動方向上具有減小的直徑的網眼或網孔的網而以逐漸的方式執行。
20.根據權利要求19所述的方法，其特徵在於，脂肪尺寸的逐漸減小通過使脂肪通過兩個或更多個尺寸減小網來獲得，所述兩個或更多個尺寸減小網被包在適於連接在一起的一個或多個容器(1、2)的腔室(101、201)中。
21.根據前述權利要求18至20中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，代替所述分離步驟或除所述分離步驟之外，所述方法包括洗滌所述細胞團塊的至少一個步驟，洗滌細胞團塊的所述至少一個步驟與將所述流體組分與所述固體組分分離的步驟同時執行。
22.根據權利要求21所述的方法，其特徵在於，洗滌以及將所述流體物質與所述固體組分分離的所述步驟包括 -將消毒洗滌溶液注射到洗滌和分離容器(I)的脂肪洗滌腔室(101)中至少一次，所述洗滌腔室(101)容納至少一個攪拌元件(104)諸如球等，所述至少一個攪拌元件具有這樣的形狀和尺寸，即相對於所述洗滌腔室(101)，在所述容器(I)經受攪拌時允許液體組分乳化，且手動攪拌作用是足夠的， -攪拌所述洗滌和分離容器(1)，以通過乳化裝置(104)的設置而促進流體組分的乳化，具體地是促進油組分與消毒流體物質的乳化， -將所述洗滌和分離容器(I)布置在這樣的位置中，即獲得所述固體組分在液體乳化液上的分層，所述固體組分的分層構成容納在所述洗滌腔室(101)中的脂肪，具體地是獲得包含漂浮在與所述洗滌和分離容器(I)的所述出口(103)接觸的所述洗滌腔室(101)的下部中的流體組分的乳化液上的細胞碎片、細胞和一個或多個細胞團塊的固體組分， 通過所述入口( 102)將清潔的洗滌溶液注入，並且通過所述洗滌和分離容器(I)的所述出口(103)以及流體組分的乳化液的密度梯度的除去作用而將所述流體組分的乳化液從所述洗滌腔室(101)排出。
23.根據權利要求22所述的方法，其特徵在於 -所述洗滌溶液注射步驟和所述乳化液排出步驟在所述容器(I)被布置在豎直位置中，並且所述出口(103)向下面向，即朝向地面的情況下發生， -用於產生所述乳化液的所述攪拌步驟在所述容器被相對於地面水平地布置的情況下發生。
24.根據權利要求23所述的方法，其特徵在於將洗滌以及使所述流體物質與所述團塊分離的所述步驟重複多次，直到出來的流體組分沒有諸如油和/或血液的任何雜質為止。
25.根據前述權利要求18至24中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，所述分離步驟和/或所述洗滌步驟在其中所述洗滌和分離容器(I)完全地填充消毒洗滌溶液的步驟之後進行，所述容器(I)被保持在豎直位置中，並且所述出口(103)打開並且向上面向，以完全釋放空氣。
26.根據前述權利要求18至26中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，提供了固體組分排出步驟，該步驟包括 -在所述出口( 103)向上面向的情況下將所述洗滌和分離容器(I)豎直地定位，以允許所述固體組分漂浮在所述洗滌溶液上， -通過所述洗滌和分離容器(I)的所述入口( 102)在壓力作用下將洗滌溶液注入，以允許所述固體組分的排出。
27.根據前述權利要求中的一項或多項所述的裝置和方法，其特徵在於，所述裝置或方法涉及除脂肪組織之外的生物材料的提取和/或處理。
28.一種用於從通過脂肪抽吸而提取的小葉脂肪製備用於移植的組織，具體地是用於移植的脂肪組織的套件，其特徵在於，所述套件包括至少一個容器(1)，用於洗滌脂肪的固體組分以及將所述固體組分與流體組分分離，所述容器(I)根據權利要求1至17中的一項或多項所述形成。
29.一種用於從通過脂肪抽吸而提取的小葉脂肪製備用於移植的組織，具體地是用於移植的脂肪組織的套件，其特徵在於，所述套件包括 -至少一個容器(1)，用於洗滌脂肪的固體組分以及將所述固體組分與流體組分分離， -至少一個尺寸減小容器(2)，所述至少一個尺寸減小容器(2)具有尺寸減小裝置(3)，用於減小抽吸的固體組分的尺寸， 所述容器(1、2)根據權利要求1至17中的一項或多項所述形成。
30.根據權利要求29所述的套件，其特徵在於，提供了兩個或更多個尺寸減小容器(2)，所述兩個或更多個尺寸減小容器(2)通過其出口(203)而交替地連接到所述洗滌和分離容器(I)的所述入口( 102)，且預定量的減小尺寸的脂肪在消毒狀態下被儲存並保存在每個尺寸減小容器(2)的尺寸減小腔室(201)中。
31.根據前述權利要求28至30中的一項或多項所述的套件，其特徵在於，提供了一組尺寸減小容器(2 )和/或一組洗滌和分離容器(I)，在所述尺寸減小網(3 )的網眼和/或容納在所述尺寸減小腔室(201)和/或所述洗滌和分離腔室(101)中的減小尺寸的脂肪的體積方面，所述一組尺寸減小容器(2)和/或一組洗滌和分離容器(I)具有不同的尺寸。
32.一種用於實施根據前述權利要求18至26中的一項或多項所述的方法的套件，所述套件包括如權利要求1至17所述的用於移植組織的裝置。
33.根據前述權利要求28至32中的一項或多項所述的套件，其特徵在於，所述套件替代性地或組合地還包括 -具有不同容積的一個或多個一次性消毒注射器， -具有不同的特定尺寸的一個或多個消毒的尖針或消毒的柳葉刀形刀片，以允許插管的經皮引入，用於進行麻醉、切除和移植， -具有尖端或鈍端的一個或多個一次性的消毒插管，所述一個或多個一次性的消毒插管中的至少一個消毒插管具有約Imm的非常小的直徑， -具有或沒有止回閥的一個或多個雙向閥或多向閥， -用以允許對製備的生物材料進行沉澱和/或離心的裝置或容器(12)，用於在移植之前將所述固體組分從殘餘的液體/油組分分離開來， -用於在受控條件下儲存所述製備的生物材料以進行移植的裝置， -用於保存和給藥洗滌溶液的裝置，諸如袋子等， -用於收集廢棄液體組分的裝置，諸如袋子等， -用於將所述生物材料和/所述溶液從所述套件中的一個部件轉移到另一部件的裝置，諸如管、導管、魯爾鎖連接器等，以產生在其中所處理的材料決不接觸外部環境的封閉系統。
34.根據權利要求33所述的套件，其特徵在於，代替或除小直徑插管之外，設置具有尖的或鈍的末端的螺旋狀或螺旋形插管(5 )。
35.一種處理或防止在患者中造成傷害或疾病的方法，具體地是處理身體和面部中的體積缺陷、改進皮膚營養性和/或生物刺激的方法，所述方法包括 -從患者的供體區域提取生物材料，具體地是通過脂肪抽吸而提取的脂肪組織的至少一個步驟， -處理所述材料的至少一個步驟， -將所處理的材料注射到患者中的至少一個步驟， 其特徵在於，所述處理步驟包括對所提取的材料進行的至少一個尺寸減小步驟和/或洗滌並且將液相從固體細胞相分離的至少一個步驟，且所述處理步驟使用前述權利要求1至17中的一項或多項所述的裝置和前述權利要求18至26中的一項或多項所述的方法來執行。
36.根據權利要求35所述的方法，其特徵在於，所述供體患者也為所述注射步驟在其中執打的患者。
37.根據權利要求35或36所述的方法，其特徵在於，將所處理的材料注射到患者的所述步驟通過將針或插管引入來執行，所述引入被執行多次，以在皮下或肌肉組織中產生3D通道網，並且非常少量的細胞材料被引入所述3D通道網中。
38.根據前述權利要求35至37中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，注射利用鈍端的消毒插管來執行，所述鈍端的消毒插管具有小於Imm的非常小的直徑。
39.根據前述權利要求35至38中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，注射利用尖端或鈍端的螺旋狀或螺旋形插管(5)執行，所述插管通過旋轉運動被引入和抽出，從而允許所述插管以螺旋運動進入所述組織，並且因此允許材料以螺旋運動進入所述組織。
40.根據前述權利要求35至39中的一項或多項所述的方法，其特徵在於，所處理和注射的材料不同於脂肪組織。
41.一種用於移植的組織，具體地是用於自體移植的組織，所述組織包括細胞、可能地是細胞碎片和/或細胞團塊，其特徵在於，所述組織是利用根據前述權利要求1至26中的一項或多項所述的裝置和/或方法獲得的。
42.根據權利要求41所述的組織，其特徵在於，所述組織包括具有範圍從10y m至2mm的平均直徑的均勻尺寸的細胞團塊。
43.根據權利要求41或42所述的組織，其特徵在於，所述組織具有與細胞團塊混合的少量液體部分，即按重量計約50%的所製備的用於移植的組織。
44.根據前述權利要求41至43中的一項或多項所述的組織，其特徵在於，所述組織為主要包括脂肪細胞和幹細胞的脂肪組織，所述幹細胞適於用於產生任何細胞類型，諸如軟骨細胞、骨細胞、脂肪細胞、神經細胞。
45.根據前述權利要求41至43中的一項或多項所述的組織，其特徵在於，所述組織由不同於脂肪組織的組織組成。
46.根據前述權利要求41至45中的一項或多項所述的組織，其特徵在於，所述組織由幹細胞和脂肪細胞的細胞團塊組成，且所述幹細胞被提供在所述團塊的表面上。
全文摘要
用於從例如通過脂肪抽吸而提取的小葉脂肪來製備用於移植的脂肪組織的裝置和方法，所述脂肪由流體組分和固體組分組成，所述流體組分包括油組分、血液組分和/或消毒溶液，所述固體組分包含異種尺寸的細胞碎片、細胞和一個或多個細胞大團塊，其中所述裝置包括至少一個洗滌和分離容器(1)，所述至少一個洗滌和分離容器(1)具有用於洗滌腔室(101)，所述容器(1)具有入口(102)和出口(103)，用於使吸脂材料穿過入口(102)進入洗滌腔室(101)和用於使所述材料的至少一部分通過所述出口(103)離開所述腔室(101)，所述洗滌腔室(101)包括用於形成流體組分的乳狀液的攪拌裝置。
文檔編號C12M3/08GK103038333SQ201180034851
公開日2013年4月10日 申請日期2011年5月20日 優先權日2010年5月20日
發明者卡洛·特雷莫拉達 申請人:裡波熱姆斯國際公司