液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的製作方法
2023-06-02 15:13:31
液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的製作方法
【專利摘要】本發明屬分析化學領域，本發明公開了一種用液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質化學純度的方法，該方法採用以辛烷基矽烷鍵合矽膠為填料的色譜柱，以一定比例的無機酸鹽緩衝溶液－有機相為流動相，可以定量測定琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的含量，從而有效控制琥珀酸索利那新中間體起始物料及琥珀酸索利那新的質量。本發明方法專屬性強，準確度高，操作簡便。
【專利說明】液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質
【技術領域】
[0001]本發明屬於分析化學領域，具體涉及一種液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的方法。
【背景技術】
[0002]琥珀酸索利那新用於膀胱過度活動症患者伴有的尿失禁或尿頻。琥珀酸索利那新中間體英文化學名為(S)-4-nitrophenyll-phrnyl-3，4-dihydroisoquinoline-2 (IH) -carboxylate,分子式為C22H18N204。琥拍酸索利那新中間體結構式為:
Y M 丫。
在合成該化合物的過程中，有幾步重要的中間體可能會由於去除不完全而影響藥物的純度和質量，對於琥珀酸索利那新中間體的合成主要控制的有關物質有3個，分別是有關物質 I (1-Phenyl-l，2，3，4-tetrahydro-1soquinoline)、有關物質 2 (4_Nitro-phenol)和有關物質 3 (Carbonic acid bis-(4-nitro-phenyl) ester)，結構式分別為:
NO2
COh Φ
kOH
0:1.1N 0:
有關物質I有關物質2有關物質3
對於合成琥珀酸索利那新中間體中引入的雜質，在原料藥中是需要進行質量控制的，因此，實現琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的分離分析，在琥珀酸索利那新的合成及其質量控制方面具有重要的現實意義。
【發明內容】
[0003]本發明的目的在於提供一種分析琥珀酸索利那新中間體化學純度以及分離其有關物質的方法，從而實現琥珀酸索利那新中間體與其有關物質的分離和測定，保證琥珀酸索利那新及含琥珀酸索利那新製劑的質量控制。
[0004]本發明所述的用液相色譜法分析琥珀酸索利那新中間體化學純度以及分離其有關物質的方法，是採用以辛烷基矽烷鍵合矽膠為填料的色譜柱，以一定比例的無機鹽緩衝溶液一有機相為流動相。
[0005]本發明採用Kromasil、Apollo和Ultimate品牌的色譜柱,優選Apollo-C8色譜柱。
[0006]本發明所述的有機相選自以下化合物:甲醇、乙腈、丙醇、異丙醇，優選為乙腈。
[0007]本發明所述的流動相無機鹽緩衝溶液-有機相採用梯度洗脫。
[0008]本發明所述的無機鹽緩衝溶液中包含的無機鹽選自磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽，優選為磷酸鹽，最優選為磷酸二氫鉀。
[0009]本發明所述的無機鹽緩衝溶液中包含的無機鹽的濃度為0.01?0.lmol/L，優選濃度為 0.02mol/Lo
[0010]本發明所述的分離分析方法，可按照以下方法實現:
1)取琥珀酸索利那新中間體樣品適量，用乙腈或流動相溶解樣品，配製成每IrnL含琥拍酸索利那新中間體及其有關物質0.1?1.5mg,優選為0.5 mg/mL的樣品溶液；
2)設置流動相流速為0.5?1.5mL/min，優選為1.0mL/min，檢測波長為205?280nm，優選為210nm，柱溫箱溫度為20?50°C，優選為25°C ；
3)取I)的樣品溶液10?50μ L，優選為10 μ L注入液相色譜儀，完成琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的分離與分析。
[0011]本發明採用緩衝液的最優pH值為4.5。
[0012]本發明使用的儀器與最優色譜條件為:
高效液相色譜儀的型號，無特別要求，本發明採用的色譜儀為島津:LC-20AT，CBM-20A, SIL-20AC, SPD-M20A，CTO-1OASvp色譜柱:C8 (Apollo, 250 X 4.6 mm, 5 μ m)
流動相:A:0.02mol/L磷酸二氫鉀緩衝溶液(稱取磷酸二氫鉀2.72g，加水溶解至1000ml，用稀磷酸溶液調pH 4.5) ；B:乙腈；採用梯度洗脫；
流速:1.0 mL/min 檢測波長:21nm 柱溫:25°C 進樣體積:10μ L0
[0013]本發明採用C8 (Apollo, 250X4.6 mm, 5 μ m),能夠有效地分離分析琥拍酸索利那新中間體及其有關物質。本發明解決了琥珀酸索利那新及其有關物質的分離測定問題，從而確保了琥珀酸索利那新中間體原料藥的質量可控(結果見附圖1?7)。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0014]圖1為實施例1時的琥珀酸索利那新中間體及其有關物質HPLC色譜圖；圖2為實施例1時琥珀酸索利那新中間體HPLC色譜圖；
圖3為實施例2時的琥珀酸索利那新中間體及其有關物質HPLC色譜圖；
圖4為實施例2時的琥珀酸索利那新中間體的HPLC色譜圖；
圖5為實施例3時的溶劑HPLC色譜圖；
圖6為實施例3時的琥珀酸索利那新中間體及其有關物質HPLC色譜圖；
圖7為實施例3時的琥珀酸索利那新中間體的HPLC色譜圖。
[0015]【具體實施方式】:
以下實施例用於進一步理解本發明，但不限於本實施的範圍。
[0016]實施例1 儀器與條件
高效液相色譜儀:島津:LC-20AT，CBM-20A, SIL-20AC，SPD-M20A，CTO-1OASvp ；
色譜柱:C8 (Apollo, 250 X 4.6 mm,5ym);
流動相:A相:0.02 mol/L磷酸二氫鉀緩衝溶液(稱取磷酸二氫鉀2.72 g，加水溶解至
1000ml，用稀磷酸溶液調pH4.5)，B相:乙腈，採用梯度洗脫;
【權利要求】
1.一種液相色譜法分離分析琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的方法，其特徵在於採用以辛烷基矽烷鍵合矽膠為填料的色譜柱，以一定比例的無機鹽緩衝溶液一有機相為流動相，流動相採用梯度洗脫。
2.根據權利要求1所述的分離分析方法，色譜柱品牌選自Kromasil、Apollo和Ultimate,優選 Apollo-C8 色譜柱。
3.根據權利要求1所述的分離分析方法，所說的有機相選自以下化合物中的一種:甲醇、乙腈、丙醇、異丙醇。
4.根據權利要求3所述的有機相的選取，優選為乙腈。
5.根據權利要求1所述的分離分析方法，所說的無機鹽緩衝溶液中的無機鹽選自:磷酸鹽、碳酸鹽、檸檬酸鹽等。
6.根據權利要求1所述的分離分析方法中，所說的無機鹽緩衝溶液中所含無機鹽的濃度為 0.01 ?0.lmol/L，優選為 0.02mol/L。
7.根據權利要求5所述的無機鹽緩衝溶液中無機鹽的選取，優選磷酸鹽。
8.根據權利要求1所述的分離分析方法，其特徵在於，包括以下幾個步驟: O取琥珀酸索利那新中間體樣品適量，分別用乙腈或流動相溶解樣品，配製成每ImL含琥珀酸索利那新中間體及其有關物質0.1?1.5mg，優選為0.5mg/mL的樣品溶液； 2)設置流動相流速為0.5?1.5mL/min，優選為1.0 mL/min ;檢測波長為205?280nm，優選為210 nm ;色譜柱柱箱溫度為20?50°C，優選為25°C ； 3)取I)的樣品溶液10?50μL，優選為10 μ L注入液相色譜儀，完成琥珀酸索利那新中間體及其有關物質的分離與分析。
9.根據權利要求7所述的無機鹽緩衝溶液中無機鹽的選取，優選磷酸二氫鉀。
10.根據權利要求1所述的分析分離方法，緩衝液的pH值優選為4.5。
【文檔編號】G01N30/60GK104133011SQ201410308382
【公開日】2014年11月5日 申請日期:2014年7月1日 優先權日:2014年7月1日
【發明者】楊敏, 郭夏 申請人:北京萬全德眾醫藥生物技術有限公司