菲律賓蛤仔選育系的制種方法
2023-06-02 05:48:51
專利名稱：菲律賓蛤仔選育系的制種方法
技術領域：
本發明屬於貝類養殖範疇，具體涉及菲律賓蛤仔的制種方法。
技術背景菲律賓蛤仔(^zo^邵es /^'h'，i'朋7Yffl7)屬雙殼綱簾蛤科、綴錦亞科、蛤仔屬，屬於廣溫、廣鹽性品種。目前在世界約200萬噸的菲律賓蛤仔產量中，約 90%來自於養殖，且主要來自我國大陸的養殖(Goulletquer 1997)。 1999年我 國灘涂貝類的產量為246.4萬噸，其中73%為菲律賓蛤仔，約佔我國海水養殖總 產量的18.4%。隨著人民生活水平的提高，國內外市場均供不應求，市場潛力巨 大。但是由於不注重資源保護，亂採濫捕，其天然產量呈逐年下降趨勢。目前 苗種嚴重不足，種質退化是制約我國北方地區蛤仔養殖業發展的"瓶頸"(閏 喜武，2005)。菲律賓蛤仔貝殼形態變化很大，殼面顏色和花紋變化各異，曾被許多分類 學家定義為不同的種(莊啟謙，2000)。長期以來，人們認識到這種殼色多態現 象，但還沒有人研究這種殼色多態現象存在的原因。在殼色的多態方面，Taki(1941)已經詳盡地描述過，他將殼色劃分為4種類型條帶；花紋；白化；雜色；並根據孟德爾遺傳定律，對菲律賓蛤仔殼色特徵的提出了一個遺傳假設(沒 有經過證實)；Gerard (1978)研究了菲律賓蛤仔貝殼條紋的分布，Richardson (1978， 1988)研究了條紋形成與潮汐節奏相關的問題；閆喜武等(2002-2005) 建立了菲律賓蛤仔殼色品系，成功選育出斑馬蛤、海洋紅、兩道紅等殼色品系。 張躍環等(2005-2008)在此基礎上，繼續對不同殼色菲律賓蛤仔的進行定向 選育，得到生長快或抗逆性強的選育系。海洋雙殼類貝殼的顏色過去僅被作為分泌產物而一直被忽視。事實上雙殼 類貝殼的顏色不僅與它們的生態和行為有關還與其生長、存活等表型性狀有關。 Newkirk等(1980)研究了貽貝(#j^z7"s ed/h's)殼色的可遺傳性與生長的關 系發現，由於殼色深淺影響對光和熱的吸收，不同殼色的貽貝在高溫季節生長 快慢不同，藍殼色個體大於棕殼色個體10%-20% 。 Fiqueroa等(1992)研究了智利牡蠣(7Yo ^res c^7e/L^s)殼色多態與生長的關係發現，在周年的生長 中，各種殼色不同種群生長無差異性，但在高溫季節，無條帶的淺殼色個體生長 快，相反，在低溫季節，有條帶個體生長快，也就是說，不同顏色貝殼具有吸 熱和散熱的功能。Brand等(1994)以不同產地，不同年齡組成蝦夷扇貝 (/^z^'/20/ ecte/ yessoe/LS^s)為試驗材料，對決定殼色多態的因素進行了分析， 認為殼色與生長有關。根據每個貝殼上的著色與否將天然種群中的蝦夷扇貝劃 分為3種類型，即p/p (兩殼均著色)、p/n (—殼著色，另一殼不著色)、n/n (兩 殼均未著色)。發現隨著年齡的增長，p/p、 p/n類型的比例增加，n/n類型比例 迅速減少，且n/n類型個體小、生長慢、成活率低。在我國，張國範等(2000-2005)以殼色為標記，選育出的"中科紅海灣扇 貝"，主要特點是養殖群體95%以上的子代個體為桔紅殼色，成活率提高15% 20%，生長速度提高10% 15%，出肉率增加10%以上。趙洪恩等[34]在關於瑪 瑙鮑(^ah'o"s 力a/ /7ai)探索與研究中發現，由於基因突變產生的紅殼鮑(瑪瑙鮑)具有生長快，抗病力強的特點，說明殼色與生長、存活相關。 閆喜武等(2002-2005)在對菲律賓蛤仔研究中發現，不同殼色的菲律賓蛤仔生 長發育存在差別並且殼色這一質量性狀可以穩定遺傳給後代，斑馬蛤、兩道紅 蛤仔、海洋紅蛤仔的子一代100%仍為斑馬蛤、兩道紅、海洋紅，並由此培育出 一系列菲律賓蛤仔養殖新品種斑馬蛤、兩道紅、海洋紅等。何毛賢等(2006) 在對馬氏珠母貝(/^'/7c"A歷ai^e/ sh')的研究中，通過單體培養得到了一個 紅殼色品系。常亞青等(2007)根據蝦夷扇貝的殼色，選育出蝦夷扇貝象牙白 殼色品系。 發明內容為解決菲律賓蛤仔種質退化的問題，本發明提供一種以殼色為標記的菲律 賓蛤仔選育系的制種方法，利用殼色這一質量性狀為標記，以不同殼色的菲律 賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優良性狀的選育系。所述的逐代的定向選育的方法，是以兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、 珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為繁殖群體，親貝成熟後以相同殼色的親貝作為父 本、母本，在親貝性腺成熟時，通過人工刺激的方法促使親貝產卵、排精，經 過產卵及孵化、幼蟲培養、稚貝培育、稚貝中間育成環節，獲得了子一代的各種殼色的蛤仔品系；待子代性腺成熟，可以產卵、排精時，再以相同殼色的子一代作為親貝放養，並以相同的方式進行定向選育，從而獲得子二代，如此循環下去使得殼色得到進一步純化；從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。 所述的菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特徵在於親貝產卵、排精前，將不同殼色的親貝放在同一個生態4下池中混養，產卵時再單獨放置放養。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於按常規方法進行產卵、孵化的操作過程中採取嚴格的隔離措施，即對親本產卵、排精開始到孵化成D形幼蟲階段所採用的一切器具和設施進行清洗，並對親本進行清洗後再將同一殼色蛤仔親貝單獨放入同 一容器中放養。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於所述人工刺激的方法為陰乾4h，流水刺激lh。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於在稚貝中間育成時， 定期更換不同數目的網袋，即60目-40目-20目。所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於在幼蟲培養時每天投 餵的餌料為，前期投餵綠色巴夫藻，後期混合投餵質量比l: l的綠色巴夫藻和 小球藻；所述綠色巴夫藻為湛江等鞭金藻。其制種方法的具體步驟如下-a. 親貝來源與選取從野生群體(養殖群體)中，選出2齡的殼型規整，殼色一致的兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為 繁殖群體，放到生態蝦池中進行自然促熟。定期取樣觀察性腺發育，待其性腺成熟。b. 產卵及孵化於6月上旬和9月下旬，親貝性腺成熟，將不同殼色蛤仔親 貝單獨放置，經過陰乾4h，流水lh的刺激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料 桶中，大約經過2-4h，各組幾乎全部產卵。為了提高孵化率，對受精卵採取分 桶孵化，孵化密度控制在30-40個/ml，並將多餘的受精卵收集到水泥池中。在 溫度22-24。C的條件下，大約經過25 h全部孵化至D形幼蟲。c. 幼蟲培養用300目篩絹網製作的網箱選育D形幼蟲，為了獲得大量子代， 採用白色塑料桶與水泥池培育相結合的辦法，水泥池中為各種幼蟲的混合培養。 幼蟲培養密度6-8個/ml，每2天換1次水，換水量為100%。館料每天投餵2次，前期為綠色巴夫藻(湛江等鞭金藻)，後期為綠色巴夫藻(湛江等鞭金藻)、小球 藻(1: 1)混合投喂，投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同
殼色蛤仔幼蟲之間渴雜，換水網箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為20. 4-23. 6°C， 鹽度為24-28。為了消除養殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調整。
d. 稚貝培育幼蟲變態後，正常培育同c。當稚貝生長至40日齡時，春季 稚貝裝入60目的網袋中，進行中間育成；秋季稚貝裝入80目的網袋，並保證每 種殼色蛤仔稚貝密度一致。進行室內越冬，水溫為生態池中自然水溫；而後到 第二年的春季進行中間育成。
e. 稚貝中間育成於當年的7-10月或次年5-10月在該場的生態池中進行中 間育成。中間育成採用60目網袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段，定期更 換不同目數的網袋(60目-40目-20目)，消除網目對稚貝生長的影響；同時， 對密度進行調整，使每個重複密度保持一致。水泥池中混合個體大概在3mm左右 殼色就完全表現出來，在更換網目的過程中，將各種殼色子代挑選出來，進行 中間育成。
f. 經過幼蟲培養、稚貝培育、中間育成等環節，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。9月下旬的子代性腺成熟，可以產卵，從而獲得子二代，如此循環 下去使得殼色得到進一步純化。從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。
本發明的優點和積極效果在於通過若干代的定向純化，篩選出生長快的 珍珠白、海洋紅、兩道紅品系；抗逆性強的斑馬蛤品系。本發明獲得的選育系 具有生長快或存活率高的特點，珍珠白〉海洋紅>兩道紅，生長速度分別提 高20%>15%>10%;斑馬蛤抗逆性最強，存活率提高120-200%。從而為菲律賓 蛤仔殼色品系間雜交及品種改良奠定了一定的基礎。將不同殼色的親貝放在同 一個池中混養，主要目的是使各種殼色的親貝性腺發育一致，達到同步產卵的 目的，這樣也有利於開展雜交試驗。
具體實施方式
實施例1.
a.親貝來源與選取於2003年6月，從野生群體(養殖群體)中，選出2齡 的處於臨產狀態的殼型規整，殼色一致的兩道紅、海洋紅、斑馬蛤各20個作為 繁殖群體。b. 產卵及孵化將不同殼色品系蛤仔親貝單獨放置，經過陰乾4h，流水lh
的剌激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料桶中，大約經過2-4 h，各組幾乎全 部產卵。為了提高孵化率，孵化密度控制在30-40個/ml，採取分桶孵化。在溫 度22-23"的條件下，大約經過25 h全部孵化至D形幼蟲。
c. 幼蟲培養用300目篩絹網製作的網箱選育D形幼蟲，分別放置白色塑料 桶中培養。幼蟲培養密度6-8個/ml，每1天換1次水，換水量為50%。餌料每天投 餵2次，前期為湛江等鞭金藻，後期為湛江等鞭金藻、小球藻(1: 1)混合投喂， 投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同殼色蛤仔幼蟲之間混雜， 換水網箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為22.4-23.6匸，鹽度為24-28。為了消 除養殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調整，使每個殼色品系幼蟲的密度 保持一致。
d. 稚貝培育幼蟲變態後，正常培育同c。當稚貝生長至40日齡時，將各 種殼色蛤仔稚貝裝入60目的網袋，並保證每種殼色蛤仔稚貝密度一致。
e. 稚貝中間育成於7-IO月在該場的生態池中進行中間育成，此時水溫 24-30°C，。中間育成採用60目網袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段，定期 更換不同目數的網袋(60目-40目-20目)，消除網目對稚貝生長的影響；同時， 對密度進行調整，使每個重複密度保持一致。
f. 經過幼蟲培養、稚貝培育、中間育成等環節，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。次年6月上旬和9月下旬子代性腺成熟，可以在春秋兩個季節產卵， 從而獲得子二代，如此循環下去使得殼色得到進一步純化，經過3代的純化，殼 色純化率達100%。從2003-2005年，先後選育出F廣F3代殼色品系，發現兩道紅、 海洋紅品系具有生長快的特點；斑馬蛤品系具有抗逆性強的特點。
實施例2.
a. 親貝來源與選取於2005年9月，從野生群體(養殖群體)中，選出2齡 的處於臨產狀態的殼型規整，殼色一致的兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、 珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤各20個作為繁殖群體。
b. 產卵及孵化將不同殼色品系蛤仔親貝單獨放置，經過陰乾4h，流水lh 的刺激，放到澄有新鮮海水的100L白色塑料桶中，大約經過2-4h，各組幾乎全 部產卵。為了提高孵化率，孵化密度控制在30-40個/ml，採取分桶孵化。在溫度22-23"C的條件下，大約經過25 h全部孵化至D形幼蟲。
c. 幼蟲培養用300目篩絹網製作的網箱選育D形幼蟲，分別放置白色塑料 桶中培養。幼蟲培養密度6-8個/ml，每1天換1次水，換水量為50%。餌料每天投 餵2次，前期為湛江等鞭金藻，後期為湛江等鞭金藻、小球藻(1: 1)混合投喂， 投餌量適幼蟲攝食情況而定。為防止白色塑料桶中不同殼色蛤仔幼蟲之間混雜， 換水網箱單獨使用。幼蟲培育期間，水溫為22.4-23.6'C,鹽度為24-28。為了消 除養殖密度的影響，在幼蟲期定期對密度進行調整，使每個殼色品系幼蟲的密度 保持一致。
d. 稚貝培育幼蟲變態後，正常培育同c。當稚貝生長至40日齡時，將各 種殼色蛤仔稚貝裝入80目的網袋，進行室內越冬，並保證每種殼色蛤仔稚貝密
度一致。
e. 稚貝中間育成於2006年5-10月在該場的生態池中進行中間育成，此時 水溫24-3(TC，。中間育成採用60目網袋(40cmX60cm)，在稚貝中間育成階段， 定期更換不同目數的網袋(60目-40目-20目)，消除網目對稚貝生長的影響； 同時，對密度進行調整，使每個重複密度保持一致。
f. 經過幼蟲培養、稚貝培育、中間育成等環節，獲得了子一代的各種殼色 的蛤仔品系。
2006年9月下旬，以實施例1得到的子代性腺成熟，通過實施例1的環節， 獲得子二代，如此循環下去使得殼色得到進一步純化，經過3代的純化，殼色 純化率近乎100%。從2005-2008年，先後選育出F「F3代殼色品系，發現珍珠白、 海洋紅、兩道紅品系具有生長快的特點；斑馬蛤品系具有抗逆性強的特點，與 2003-2005年得到的選育繫結果一致。與對照組相比，大小珍珠白〉海洋紅〉 兩道紅，生長速度分別提高20%〉15%〉10%;斑馬蛤抗逆性最強，存活率提高 120-200%。
權利要求
1、一種菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特徵在於利用殼色這一質量性狀為標記，以不同殼色的菲律賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優良性狀的選育系；所述的逐代的定向選育的方法，是以兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤作為繁殖群體，親貝成熟後以相同殼色的親貝作為父本、母本，在親貝性腺成熟時，通過人工刺激的方法促使親貝產卵、排精，經過產卵及孵化、幼蟲培養、稚貝培育、稚貝中間育成環節，獲得了子一代的各種殼色的蛤仔品系；待子代性腺成熟，可以產卵、排精時，再以相同殼色的子一代作為親貝放養，並以相同的方式進行定向選育，從而獲得子二代，如此循環下去使得殼色得到進一步純化；從中篩選出生長快、抗逆性強的殼色品系。
2、 如權利要求1所述的菲律賓蛤仔選育系的制種方法，其特徵在於親 貝產卵、排精前，將不同殼色的親貝放在同一個生態蝦池中混養，產卵時再單 獨放置放養。
3、 如權利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於按常 規方法進行產卵、孵化的操作過程中採取嚴格的隔離措施，即對親本產卵、排 精開始到孵化成D形幼蟲階段所採用的一切器具和設施進行清洗，並對親本進行 清洗後再將同 一殼色蛤仔親貝單獨放入同 一容器中放養。
4、 如權利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於所述 人工刺激的方法為陰乾4h，流水刺激lh。
5、 如權利要求l所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於在稚 貝中間育成時，定期更換不同數目的網袋，即60目-40目-20目。
6、 如權利要求1所述的菲律賓蛤仔雜交系的制種方法，其特徵在於在幼 蟲培養時每天投餵的餌料為，前期投餵綠色巴夫藻，後期混合投餵體積比1: 1 的綠色巴夫藻和小球藻；所述綠色巴夫藻可以用湛江等鞭金藻取代。
全文摘要
一種菲律賓蛤仔選育系的制種方法，利用殼色這一質量性狀為標記，以不同殼色的菲律賓蛤仔為材料，通過逐代的定向選育獲得具有優良性狀的選育系。具體地說，殼色品系包括兩道紅、兩道白、瑪瑙黑、海洋紅、珍珠白、斑馬蛤、波紋蛤；通過若干代的定向純化，篩選出生長快的珍珠白、海洋紅、兩道紅品系；抗逆性強的斑馬蛤品系。本發明獲得的選育系具有生長快或存活率高的特點，從而為菲律賓蛤仔殼色品系間雜交及品種改良奠定了一定的基礎。
文檔編號A23K1/18GK101288387SQ20081001175
公開日2008年10月22日 申請日期2008年6月11日 優先權日2008年6月11日
發明者澎 張, 張力群, 張國範, 張躍環, 鳳 楊, 潘發林, 閆喜武 申請人:大連水產學院