一種海參用微生物發酵餌料的生產方法
2023-06-02 05:53:11
專利名稱：：一種海參用微生物發酵餌料的生產方法
技術領域：
：本發明涉及微生物發酵舛料，具體的說是一種海參用微生物發酵辨料的生產方法。
背景技術：
：近年來，隨著海參人工育苗技術的成功與海參養殖水平的提高，以及國內外市場成品參價格不斷攀升，使得海參養殖業迅速發展，隨之海參鉺料業也迅速發展，海參何料業已成為海參養殖業重要配套產業之一。目前，海參何料需求量大，但原料缺、質量差、市場混亂，海參何料已成為海參育苗與養殖生產的限制因素之一，為此，加強海參斜料研究，不斷推出能量高、適口性好、能夠促使海參快速生長的微生物發酵斜料是十分必要的，由此，海參何料的研究愈來愈受到人們的重視。國外海參飾料研究始於1950年，日本學者最初用無色鞭毛蟲作為刺參幼體斜料培育出稚參，此後陸續用金藻、角毛藻、底棲硅藻和人工配合何料，對稚參、幼參進行培育。國內海參何料的研究始於1957年，最初，以菱形藻為何料，培育出幼參。60年代開始以小新月菱形藻、小球藻、鹽藻和大葉藻的磨碎液為斜料，培育出稚參和幼參。80年代中期，開始研究刺參配合飾料，並用稻草發酵液成功培育出稚參。目前，海參幼體階段辨料主要用單細胞藻類和代用何料。單細胞藻類有牟氏角毛藻、小新月菱形藻、鹽藻和金藻等，鹽藻、金藻和角毛藻混合投餵培育效果最好。代用何料有海洋紅酵母、假絲酵母、球擬酵母、光合細菌和大型海藻磨碎液等。大量試驗結果證明變態期用藻類和海洋紅酵母，後期用海洋紅酵母和大型海藻磨碎液作為幼體的何料，育苗效果好。稚參和幼參階段辨料主要用底棲硅藻、大型海藻磨碎液、人工配合何料等。大型海藻磨碎液的種類目前有鼠尾藻、馬尾藻和大葉藻等，鼠尾藻投餵效果最好。將大型海藻磨碎液、人工配合斜料通過發酵作為稚參幼參辨料，均取得很好效果。稚參階段以大型海藻磨碎液為主，幼參階段以人工配合發酵辨料為主。成參階段何料主要用人工配合何料和大型藻類的發酵液。大型藻類有鼠尾藻、馬尾藻、大葉藻等，人工配合餌料主要成分有發酵豆粕、麩皮、米糠、魚粉、海藻粉、玉米蛋白粉、海浮泥等。目前在海參養殖中斜料存在的主要問題1、所取原料質量不好，使用效果不穩定。2、配方中營養構成不合理，4某些營養元素缺乏。3、生產工藝不成熟不規範。4、使用的海泥和海浮泥質量差，微生物含量少，配製出的辨料效果不理想。海參辨料的發展方向和解決辦法從海參育苗模式、養殖生產模式和存在的實際問題上看，具體到海參幼體階段用單細胞藻類、海洋紅酵母和豆粕發酵小肽辨料。稚參和幼參階段用大型海藻磨碎液、海洋紅酵母和豆粕發酵小肽訶料及複合菌發酵配合何料。成參階段用大型藻類、豆粕發酵小肽飾料和複合菌發酵配合飾料。在上述三個階段，我們採用微生物發酵斜料飼餵海參幼體、稚參、幼參，均獲得了理想的應用效果。在海參微生物發酵辨料的研製上，必須考慮海參棲息的生態條件，及海參自身的營養需求和自然採食規律等。根據我們大量的科研數據表明海參的內臟中存在著大量的微生物菌群，主要以芽孢菌、酵母菌、乳酸菌、光合細菌為主。所以，目前人們推出的各種發酵何料，其主要功能為促進腸道對營養物質吸收、促進免疫機能的提高，減少發病率，提高成活率，提高產量。所以開展海參用微生物發酵鉺料的研究非常必要。
發明內容本發明的目的在於提供一種生產工藝簡單易於操作、生產原料來源廣泛成本低易於推廣、生產周期短髮酵產物多產品質量好易於應用的海參用微生物發酵辨料的生產方法。為實現上述目的，本發明採用的技術方案為以豆粕、麩皮、米糠、醬油渣、海虹肉、海藻、海浮泥為原料，以釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌為有益微生物菌群，在25-3(TC條件下接種，對原料進行固體發酵，得海參用微生物發酵斜料；固體發酵過程中，水的條件為發酵原料與微生物菌群種子液和水的重量比例為，發酵原料釀酒酵母假絲酵母枯草芽胞桿菌乳酸菌光合細菌水=100:5~7:5~7:5~7:5~7:5~7:25。最佳重量比例為，發酵原料釀酒酵母假絲酵母枯草芽胞桿菌乳酸菌光合細菌水=100:6:6:6:6:6:25;枯草芽胞桿菌、乳酸菌種子液中每毫升含活菌數>30個億，光合細菌種子液中每毫升含活菌數>20個億，釀酒酵母、假絲酵母種子液中每毫升含活菌數>10個億。固體發酵過程中，各種發酵原料的重量比例為；豆粕1020份、麩皮10~20份、米糠1020份、醬油渣1020份、海虹肉10~20份、海藻10~20份、海浮泥2030份最佳的各種發酵原料重量比例為豆粕10份、麩皮10份、米糠10份、醬油渣20份、海虹肉10份、海藻10份、海浮泥30份。微生物種子發酵為液體發酵，液體發酵過程中，釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌的種子液發酵培養基以重量百分比計為豆粕粉0.5~1.Q%、玉米面0.5~1.0%、餘量為水。其中，釀酒酵母、假絲酵母培養基中還含葡萄糖2.0~3.0%、枯草芽胞桿菌培養基中還含葡萄糖0.5~1.0%;乳酸菌培養基中還含葡萄糖1.0~2.0%。釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌的種子液發酵培養基最佳重量百分比計為豆粕粉1.0%、玉米面l.0%。其中，釀酒酵母、假絲酵母培養基中含葡萄糖3.0%、枯草芽胞桿菌培養基中含葡萄糖1.0%:乳酸菌培養基中含葡萄糖2.0%。釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌在搖床上的培養溫度均為28°C~30°C。培養時間是釀酒酵母、假絲酵母培養72~96小時；枯草芽胞桿菌培養24~36小時、乳酸菌培養48~72小時。光合細菌的種子液發酵培養基的重量百分比計為氯化銨0.1~0.2%、碳酸氫鈉0.05~0.1°/。、石粦酸氫二鉀0.05~0.1%、乙酸鈉0.25~0.50°/。、碌u酸《美0.02~0.05%、餘量為水。光合細菌的種子液發酵培養基最佳重量百分比計為氯化銨0.1%、碳酸氫鈉0.05%、磷酸氫二鉀0.05°/。、乙酸鈉0.25%、硫酸鎂O.02%、餘量為水。PH7.8，自然光照，培養溫度為30°C~32°C。培養時間是靜止培養96-120小時。最佳的培養溫度為30°C，時間為120小時。固體發酵過程中主要為好氧發酵，兼有厭氧發酵。固體發酵過程中起始溫度為25。C30。C，控制溫度為30°C~40°C，最高溫度40。C應控制48小時以內。固體發酵過程中PH值的變化為鹼性-中性-微酸性。本發明具有如下優點1.生產工藝筒單，易於才喿作。本發明採用液體-固體發酵法，液體發酵採用釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌為有益微生物菌群，所用菌種數目較少；種子發酵過程中所用的培養基和培養條件簡單，固體發酵採用大劑量液體接種，發酵過程中起溫快、持續時間長、效果好。2.生產原料來源廣泛、成本低、易於推廣。本發明以豆粕、麩皮、米糠、醬油渣、海虹肉、海藻、海浮泥為發酵原料，經過有益微生物菌群的發酵，使低值的生產原料轉變為含有活性生物蛋白、生物小肽、Y-氨基丁酸等生物促長因子的高質量的微生物發酵斜料，其發酵原料來源廣泛，價格低廉，可廣泛用於稚參、幼參、成參的養殖中，促進養參業的發展。3.產品質量好。本發明採用的有益微生物菌群及其菌體代謝產物營養成份豐富，發酵代謝產出的生物小肽、Y-氨基丁酸、賴氨酸、多糖、乳糖、酵母素、細菌素、乳酸菌素及其它生物促長因子隨餌料一起飼餵稚參、幼參、成參，能促進海參腸胃的代謝功能，提高海參肌體的免疫力。4.生產周期短。本發明採用微生物液體與固體相結合的發酵技術，在固體發酵過程中，大量接種有益微生物菌群，選擇適合於微生物繁殖生長的培養基，在適應微生物生長條件下，微生物菌群生長繁殖快、菌數高、原料發酵速度快，避免感染雜菌，發酵生產安全性能好，對生態環境友好，保證了產品質量，是一種高質量微生物菌群快速繁殖生長的海參用微生物發酵何料的生產方法。5.使用效果好。本發明發酵過程中產生的氣味具有酵母菌和乳酸菌的發酵香性氣味，該氣味是海參何料中最好的誘食劑，其誘食效果和適口性極佳。具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步詳細說明。實施例1:1、酉良酒酵母、假絲酵母(產生蛋白酶、澱粉酶、淨化水質等)液體種子發酵操作步驟如下(l)種母活化分別將釀酒酵母、假絲酵母菌的種母移接到新配製的斜面培養基中，溫度28。C，培養72小時；種母活化培養用斜面培養基組成為20wt。/。馬鈴薯(土豆)浸出液1000mL、蔗糖20g、瓊脂18g、PH6.8;(2)種子發酵培養(選擇培養基和發酵條件試驗)採取深層發酵法生產液體種子，將分別活化好的釀酒酵母、假絲酵母的種母(克氏瓶)接到種子發酵培養基中發酵，發酵罐可以是50立升罐(也可以是100立升、500立升、1p屯罐)，裝液量不超過70%，通氣發酵培養，培養溫度為28。C,時間為72小時，培養成熟時，菌液有一種酒香味，顯微鏡下檢查酵母菌菌體健壯，無雜菌汙染等異常現象，即可供擴大發酵培養用或作為固體混合發酵用種子液。釀酒酵母、假絲酵母菌發酵培養基組成如下(按重量百分比計算)蔗糖3.0%、豆粕粉l.0%、玉米面1.0%、餘量為水、PH6.8。2.枯草芽胞桿菌(產生蛋白酶、澱粉酶、纖維素酶、肽抗生素等)液體種子發酵步驟如下(1)種母活化將枯草芽胞桿菌種母，分別移至新配製培養基上(克氏瓶)，活化培養24小時，溫度28。C,活化成熟後的克氏瓶中的菌體稱為種子。種母活化培養用斜面培養基組成為蔗糖10g、牛肉膏3g、蛋白腖3g、酵母膏3g、水1000mL、瓊脂18g、PH7.0;(2)種子罐接種與發酵培養將活化好的克氏瓶中的種子，用200mL無菌水洗入至500mL無菌的三角瓶中，用火焰接種法或壓差接種到50立升的種子罐(或IOO立升的種子罐)中，裝液量不超過70%,通氣攪拌培養，通氣量為1:1，溫度為28°C，培養時間為36小時，顯微鏡鏡檢芽孢桿菌菌體運動活潑，整齊，無汙染，含活菌達到30億/ml，(採用血球計數法計算菌數)培養液無異味，可供擴大發酵培養用或留作固體發酵用的液體種子液。採用培養基的組成配方按重量百分比計如下葡萄糖1.0%、豆粕粉71.0%，玉米面1.0%、餘量為水、PH7.0。3.乳酸菌(產生蛋白酶、乳酸菌素、肽類物質、肽抗生素等)菌液體種子發酵步驟如下(1)種母活化將乳酸菌種母，分別移至新配製的培養基的克氏瓶斜面上，活化培養48小時，溫度3(TC,活化成熟後的克氏瓶中的菌體稱為種子。種母活化培養用斜面培養基組成為蔗糖20g、蛋白腖3g、酵母膏3g、水1000mL、瓊脂18g、PH7.0;(2)種子罐接種與發酵培養其過程同本實施例的1(2);其不同之處培養溫度為3(TC，且可靜止培養5天，也可以達到上述技術指標，即可供擴大發酵培養用或留作固體發酵用的液體種子液。採用培養基的組成配方按重量百分比計如下葡萄糖2.0%、豆粕粉1.0°/。、玉米面1.0°/。、餘量為水、PH6.8。4.光合細菌菌群液體種子發酵步驟如下(l)種母活化對光合細菌種母進行活化(移接新斜面，或轉接到新鮮液體培養基中活化5天)，活化後的菌體稱種子。種母活化斜面培養基組成為氯化銨1.0g、碳酸氫鈉0.5g、磷酸氫二鉀0.5g、乙酸鈉2.5g、硫酸鎂0.2g、蒸餾水1000mL、瓊脂18克。PH7.8,自然光照，培養溫度為30°C~32°C。培養時間是靜止培養96120小時。(2)種子發酵培養:將光合細菌種子發酵培養液以30%劑量接種到5000毫升透明的玻璃瓶內(裝液體發酵培養基量不超過70%),放在自然太陽光下照射培養溫度3(TC,5天種子培養基本成熟，含活菌量達到每10億/mL以上，PH值為8.0~9.0，培養液呈鮮紅或深紅色，顯微鏡下檢查光合細菌運動活潑，整齊，無汙染，即可留作為固體混合發酵用種子液。培養基的組成配方按重量百分比計為氯化銨0.1%、碳酸氫鈉0.05%、磷酸氫二鉀0.05%、乙酸鈉0.25%、硫酸鎂0.02%。PH7.8,自然光照，培養溫度30°C，時間為120小時。實施例2:以釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌為有益微生物菌群，有益微生物菌群混合發酵種子液固體發酵操作步驟如下(1)以豆粕、麩皮、米糠、醬油渣、海虹肉、海藻、海浮泥為發酵原料，發酵原料中各種原料重量比例為豆粕10份、麩皮10份、米糠10份、醬油渣20份、海虹10份、海藻10份、海浮泥30份；按上述的比例將原料混合，按常規的基本要求進行粉碎並混拌均勻，而後放置在溫度為25~30。C基本無菌的乾淨房間內備用；(2)在室溫條件下，將按照上述實施例1步驟所得高質量微生物菌群(釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌)的懸浮液混拌到發酵原料中，發酵原料與微生物菌群種子液和水的重量比例為，發酵原料釀酒酵母假絲酵母枯草芽胞桿菌乳酸菌光合細菌水=100:6:6:6:6:6:25，以"手握成團，落地就散"無游離水滲出為適度，翻拌均勻後，裝到清潔的塑料桶和編織袋中，放在室溫28。c士rc，進行固體發酵，每天早、晚測定塑料桶和編織袋中的發酵溫度各一次。固體發酵過程中，起始溫度為25。C3(TC，塑料桶和編織袋中的發酵溫度會從起始溫度慢慢升至4042。C,升至超過4(TC時，需要翻動，最高溫度4(TC應控制48小時以內。隨後，發酵溫度自然下降，發酵過程中的PH值是鹼性-中性-微酸性。塑料桶、編織袋複合菌發酵對海參用微生物發酵斜料溫度的影響見表1。tableseeoriginaldocumentpage9通過表i可以看出，在室溫28。c土rc時，複合菌種採用塑料桶和編織袋兩種方式進行固體發酵，試驗結果表明透氣的編織袋發酵升溫快、溫度高，發酵結果明顯好於不透氣的塑料桶，即發酵應以好氧兼性為主，兼性厭氧為輔。(3)當發酵料溫度回落到室溫時，發酵料產生的氣味具有酵母、乳酸的發酵氣味和微酸香性氣味。該氣味是海參餌料中最好的誘食劑。發酵終點的發酵料的含水量應在20~30%;將培養好的海參用微生物辨料，在自然條件下風乾或者在45。C以下烘乾，水分含量《12，含活菌總數2億/克以上，經過粉碎、過篩、質檢、包裝製成海參用微生物發酵餅料產品，稚參辨料用200目、幼參辨料用100目過篩，成參辨料用60目過篩。實施例3:將發酵好的海參用微生物發酵餅料在幼參中進行應用試驗，海參用微生物發酵辨料對海參增重的影響見表2。表2.海參用微生物發酵餌料對海參增重的影響tableseeoriginaldocumentpage9通過表2可以看出，在水溫16。C時，經過12天的餵養試驗，編織袋發酵料平均增重率22.9，塑料桶發酵料平均增重率2Q，6，未發酵料平均增重率17.7，試驗結果表明，編織袋發酵料和塑料桶發酵料的平均增重率明顯高於未發酵料平均增重率，在海參的養殖中應以微生物發酵何料為主。本發明具有生產工藝簡單易於操作、生產原料來源廣泛成本低易於推廣、生產周期短髮酵產物多產品質量好易於應用等特點。在海參養殖中應用，可提高海參成活率，可提高海參免疫力，可加快海參生長發育，可改善養殖池水體的生態環境，淨化水質，是一種理想的優質海參用微生物發酵辨料。為提高產品質量，縮短生產周期，申請人還試用了中國科學院瀋陽應用生態研究所分離、純化並鑑定的高活性微生物菌林(如釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌)其應用效果更佳。權利要求1.一種海參用微生物發酵餌料生產方法，其特徵在於以豆粕、麩皮、米糠、醬油渣、海虹肉、海藻、海浮泥為發酵原料，以釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌為有益微生物菌群，在25～30℃條件下接種，對原料進行固體發酵，得海參用微生物發酵餌料。2.按照權利要求l所述的生產方法，其特徵在於所述固體發酵過程中，發酵原料與微生物菌群種子液和水的重量比例為，發酵原料釀酒酵母假絲酵母枯草芽胞桿菌乳酸菌光合細菌水=100:5~7:5~7:5~7:5~7:5~7:25。3.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述固體發酵過程中，發酵原料與微生物菌群種子液和水的重量比例為，發酵原料釀酒酵母假絲酵母枯草芽胞桿菌乳酸菌光合細菌水=100:6:6:6:6:6:25;所述種子液中，枯草芽胞桿菌、乳酸菌種子液中每毫升含活菌數為>30個億，光合細菌種子液中每毫升含活菌數為>20個億，釀酒酵母、假絲酵母種子液中每毫升含活菌數為>10個億。4.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述固體發酵過程中，發酵原料中各種原料的重量比例為；豆粕1020份、麩皮10~20份、米糠1020份、醬油渣1020份、海虹肉1020份、海藻1020份、海浮泥20~30份。5.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述固體發酵過程中，發酵原料中各種原料重量比例為豆粕10份、麩皮10份、米糠10份、醬油渣20份、海虹肉10份、海藻10份、海浮泥30份。6.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述固體發酵過程中，起始溫度為25。C30。C,控制溫度為30。C4(TC，若達到最高溫度40。C應控制在48小時以內；發酵達到終點後，可將發酵產物，在自然條件下風乾或者在3Q-45。C條件下烘乾，至含水量<12,然後粉碎過篩，稚參餌料用200目、幼參餌料用100目、成參辨料用60目過篩。發酵斜料中含粗蛋白18%,含小肽8%。7.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述微生物種子液體發酵中，釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌的種子液發酵培養基以重量百分比計為豆粕粉O.5~1.0%、玉米面0.5~1.0%、餘量為水。其中，釀酒酵母、假絲酵母培養基中還含有葡萄糖2.0~3.0%、枯草芽胞桿菌培養基中還含有葡萄糖0.5~1.0%:乳酸菌培養基中還含有葡萄糖1.0~2.0%;搖床上的培養溫度均為28°C~3(TC;培養時間釀酒酵母與假絲酵母培養7296小時；枯草芽胞桿菌培養24~36小時；乳酸菌培養48~72小時。8.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述微生物種子液體發酵中，釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌的種子液發酵培養基最佳重量百分比計為豆粕粉l.0%、玉米面l.0%、餘量為水；其中，釀酒酵母、假絲酵母培養基中還含葡萄糖3.0%、枯草芽胞桿菌培養基中含葡萄糖l.0%;乳酸菌培養基中含葡萄糖2.0%。9.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述微生物種子液體發酵中，光合細菌的種子液發酵培養基的重量百分比計為氯化銨G.1~0.2%、碳酸氫鈉0.05~0.1%、磷酸氫二鉀0.05~0.1%、乙酸鈉0.25~0.50%、硫酸鎂0.02~0.05°/。，餘量為水；自然光照，培養溫度為30°C~32°C，培養時間靜止培養96120小時。10.按照權利要求1所述的生產方法，其特徵在於所述微生物種子液體發酵中，光合細菌的種子液發酵培養基重量百分比計為氯化銨O.1%、碳酸氫鈉0.05%、磷酸氫二鉀0.05%、乙酸鈉0.25%、硫酸鎂0.02%,餘量為水；PH7.8;培養溫度為3(TC,靜止培養時間為120小時。全文摘要本發明涉及微生物發酵技術，具體地說是一種海參用微生物發酵餌料的生產方法。以豆粕、麩皮、米糠、醬油渣、海虹肉、海藻、海浮泥為發酵原料，以釀酒酵母、假絲酵母、枯草芽胞桿菌、乳酸菌、光合細菌為有益微生物菌群，在25～30℃條件下接種，對原料進行固體發酵，得海參用微生物發酵餌料。本發明具有生產工藝簡單易於操作、生產原料來源廣泛成本低易於推廣、生產周期短髮酵產物多產品質量好易於應用等特點。在海參養殖中應用，可提高海參成活率，可提高海參免疫力，可加快海參生長發育，可改善養殖池水體的生態環境，淨化水質，是一種理想的優質海參用微生物發酵餌料。文檔編號A23K1/18GK101611767SQ200810012058公開日2009年12月30日申請日期2008年6月27日優先權日2008年6月27日發明者麗劉,張仲良,王書錦,王國安,胡江春,薛德林申請人:中國科學院瀋陽應用生態研究所