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一種苯醚甲環唑快速檢測卡的製作方法

2023-06-02 13:19:51

專利名稱:一種苯醚甲環唑快速檢測卡的製作方法
技術領域:
本實用新型涉及一種苯醚甲環唑快速檢測卡及其檢測方法,是一種檢測苯醚甲環唑的檢測器具,屬於農藥殘留檢測技術領域。
背景技術:
苯醚甲環唑屬於含有三氮雜茂的一類殺蟲劑,具有保護、治療和內吸活性,是甾醇脫甲基化抑制劑,抑制細胞壁留醇的生物合成,阻止真菌的生長。其殺菌譜廣,對子囊亞門, 擔子菌亞門和包括鏈格孢屬、殼二孢屬、尾孢黴屬、刺盤孢屬、球座菌屬、莖點黴屬、柱隔孢屬、殼針孢屬、黑星菌屬在內的半知菌,白粉菌科,鏽菌目某些種傳病原茵有持久的保護和治療活性,同時對甜菜褐斑病,小麥穎枯病、葉枯病、銹病和由幾種致病菌引起的黴病,蘋果黑星病、白粉病,葡萄白粉病,馬鈴薯早疫病,花生葉斑病、網斑病等均有較好的治療效果。 適宜作物有番茄、甜菜、香蕉、禾穀類作物、水稻、大豆、園藝作物及各種蔬萊等。環境保護局確定了苯醚甲環唑在蔬菜、塊莖和球莖的殘留量容許度為0. 01 ppm ; 在甜菜中的殘留量容許度為0.01 ppm;在番木瓜果(進口)中的殘留量容許度為0.30 ppm; 在溼果渣中的殘留量容許度為4. 5 ppm ;在甜菜乾燥果肉中的殘留量容許度為1. 9 ppm ;在馬鈴薯加工廢料中的殘留量容許度為0.04 ppm。目前,現有技術對於苯醚甲環唑的檢測主要依賴色譜和質譜技術,這些方法普遍存在操作繁瑣,對實驗儀器設備要求高,需要專門技術人員操作等缺點。為此,本實用新型擬發明一種基於苯醚甲環唑蛋白質偶聯物抗原性的免疫學檢測方法,採取免疫學競爭法的原理,結合膠體金標記技術和免疫層析法設計的一種快速檢測試劑,可快速特異地檢測蔬菜水果中殘留的苯醚甲環唑。反應是利用苯醚甲環唑蛋白質偶聯物抗原性而建立的一種檢測方法,具有特異性強的優點,可避免其它檢測方法的假陽性導致的誤檢問題。同時檢測卡操作簡單快速,無需特殊的儀器設備,既可以在實驗室進行, 也可在超市、家庭、車間等實地進行測定。由於樣本量需要少、簡便快速,適用於大量樣本的篩查。
發明內容本實用新型的目的在於提供一種能檢測苯醚甲環唑的檢測器具,應用免疫學的方法直接檢測蔬菜水果等農產品中苯醚甲環唑的殘留量,克服現有技術操作繁瑣、對儀器設備要求高的缺點,建立基於免疫學特異性的檢測方法。本實用新型的技術方案一種苯醚甲環唑快速檢測卡,其為在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設置測試條2,檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4 ;測試條2是由支承背板5上通過不乾膠在其上依次粘貼樣品墊8、膠體金膜7、硝酸纖維素膜6、和吸水膜9 所組成;支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6,支承背板一端疊置粘貼吸水膜9,另一端疊置粘貼樣品墊8,吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜搭接,在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部,兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7 ;膠體金膜為含抗苯醚甲環唑抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜,硝酸纖維素膜上有一條檢測帶和一條質控帶,依次是含苯醚甲環唑蛋白質偶聯物的檢測帶10,含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶11,測試條置入檢測卡外殼內,樣品墊正對加樣孔,硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。採用上述苯醚甲環唑快速檢測卡,檢測樣品是農產品蔬菜水果。其檢測樣品的處理方法是取1克粉碎的固態樣品或液態樣品,加入含有3毫升樣品抽提液的試管中,震蕩混合反應10分鐘。靜置5分鐘後,輕輕吸取上清液350 μ L,加入體積比1 1的樣品稀釋液,混合後用於測定。樣品抽提液為ρΗ7. 6的含20%甲醇和0. 05%吐溫-20的l(tomol磷酸鹽緩衝液。樣品稀釋液為ρΗ7. 6的含0. 05%吐溫-20的IOmmol磷酸鹽緩衝液。當檢測帶10和質控帶11同時顯現棕紅色印跡帶,檢測結果為陰性,表示被檢測樣品中苯醚甲環唑含量未超標;當檢測帶10不顯示顏色,只有質控帶11顯現棕紅色印跡,檢測結果為陽性, 表示被檢測樣品中苯醚甲環唑含量超標;當檢測帶10和質控帶11均不顯色,則表明測試條已失效。本實用新型的有益效果是能檢測蔬菜水果等農產品中殘留的苯醚甲環唑,易於製備且節省檢測費用,使用方便,檢測快速,靈敏度高,結果準確。

圖1苯醚甲環唑快速檢測卡外殼及測試條在外殼內的安置圖。1、外殼,2、測試條, 3、檢測窗孔,4、加樣孔。圖2測試條的硝酸玻璃纖維膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜,10、檢測帶, 11、質控帶。圖3苯醚甲環唑快速檢測卡的測試條結構示意圖。5、支承背板,6、硝酸纖維素膜, 7、膠體金膜,8、樣品墊,9、吸水膜。
具體實施方式
本實用新型結合具體實施例參見附圖進一步說明如下實施例1一種苯醚甲環唑快速檢測卡,它是在檢測卡外殼1中設置測試條2,檢測卡外殼 1的結構及測試條2的設置參見附圖1,檢測卡外殼1為長條扁平薄殼狀外殼,長70mm,寬 20mm,厚5mm,薄殼壁厚1mm,由工程塑料製成。檢測卡外殼1由殼蓋與殼座兩半聯接構成, 在檢測卡外殼1殼蓋上有檢測窗孔3和加樣孔4。測試條2放置在檢測卡外殼1的殼座內。測試條2是多層結構的窄條薄片,片長約60mm,片寬約4mm,厚度約2. 5mm。測試條2是多層結構底層是支承背板5,為聚氯乙烯塑料薄片,厚約0. 5mm,長60mm,寬4mm ;支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6,硝酸纖維素膜厚0. 5mm,長20_25mm,寬4mm。硝酸纖維素膜6上有二條間隔開的橫向顯示印跡帶,參見附圖2,二條顯示印跡帶中,一條是檢測帶10,含苯醚甲環唑蛋白質偶聯物;另一條是質控帶11,含抗兔抗體或抗鼠抗體。支承背板5 —端部上疊置粘貼吸水膜9,支承背板5另一端部上疊置粘貼樣品墊8,吸水膜9內端與樣品墊8內端各自分別與硝酸纖維素膜6—端搭接,在樣品墊8與硝酸纖維素膜6的搭接部,兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7,膠體金膜7是含抗苯醚甲環唑單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7厚0. 5-0. 8mm,長5mm,寬4mm。樣品墊 8 厚 0. 5-0. 8mm,長 20mm,寬 4mm。吸水膜 9 厚 0. 5-0. 8mm,長 16_20mm,寬 4mm。膠體金膜 7、 樣品墊8及吸水膜9與硝酸纖維素膜搭接長度為l_2mm。吸水膜9材料是吸水紙,樣品墊8 材料是吸水玻璃纖維膜。本實用新型苯醚甲環唑檢測卡用於蔬菜水果等農產品中的苯醚甲環唑殘留量的檢測。實施例2樣品的處理方法是取1克粉碎的固態樣品或液態樣品,加入含有3毫升樣品抽提液的試管中,震蕩混合反應10分鐘。靜置5分鐘後,輕輕吸取上清液350 μ L,加入等體積的樣品稀釋液,混合後用於測定。使用苯醚甲環唑快速檢測卡進行檢測時,先將待檢測的樣品液從加樣孔4中滴注入苯醚甲環唑快速檢測卡的樣品墊8上,由於虹吸作用原理,帶動待檢測的樣品液及膠體金膜7所含的抗苯醚甲環唑單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標記物一起向硝酸纖維素膜6 擴散,5-10分鐘內觀察結果。檢測卡的主要反應是免疫學的抗原和抗體反應,在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金標記的抗體,在測試帶上分別與含苯醚甲環唑蛋白質偶聯物,以及質控帶抗兔抗體或抗鼠抗體反應,形成棕紅色條帶。若樣品中有待檢苯醚甲環唑存在,當樣品加入後即與抗體發生反應,而不會與檢測帶所含的苯醚甲環唑蛋白質偶聯物反應,從而不顯色。主要反應的結果有以下3種情況1、當檢測帶10和質控帶11同時顯現棕紅色印跡帶,表示檢測結果為陰性,說明被檢測樣品中苯醚甲環唑含量未超標;2、當檢測帶10不顯示顏色,只有質控帶11顯現棕紅色印跡,檢測結果為陽性,說明被檢測樣品中苯醚甲環唑含量超標;3、當檢測帶10和質控帶12均不顯色,則表明檢測試條已失效。
權利要求1. 一種苯醚甲環唑快速檢測卡,其特徵在於在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼(1)中設置測試條(2),檢測卡外殼表面有檢測窗孔(3)和加樣孔(4);測試條(2)由支承背板(5) 上通過不乾膠在其上依次粘貼樣品墊(8)、膠體金膜(7)、硝酸纖維素膜(6)、和吸水膜(9) 所組成;支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜(6),支承背板一端疊置粘貼吸水膜(9),另一端疊置粘貼樣品墊(8),吸水膜內端與樣品墊內端各自分別與硝酸纖維素膜搭接,在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部,兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜(7);硝酸纖維素膜上有一條檢測帶和一條質控帶,依次是含苯醚甲環唑蛋白質偶聯物的檢測帶(10),含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶(11 ),測試條置入檢測卡外殼內,樣品墊正對加樣孔,硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。
專利摘要一種苯醚甲環唑快速檢測卡,屬於農藥殘留檢測技術領域。本實用新型苯醚甲環唑快速檢測卡外殼內有測試條,測試條由支承背板上依次粘貼樣品墊、膠體金膜、硝酸纖維素膜和吸水膜所組成;膠體金膜為含抗苯醚甲環唑抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜,硝酸纖維素膜上有兩條顯色帶,一條為含苯醚甲環唑蛋白質偶聯物的檢測帶,另一條為含抗兔抗體或抗鼠抗體的質控帶。本實用新型優點是應用免疫學的方法直接檢測蔬菜水果樣品中苯醚甲環唑的殘留量。本實用新型苯醚甲環唑快速檢測卡易於製備,使用方便快速,結果準確。
文檔編號G01N33/558GK202101993SQ201120015999
公開日2012年1月4日 申請日期2011年1月19日 優先權日2011年1月19日
發明者吳文曄, 周堅, 熊曉芳 申請人:無錫安迪生物工程有限公司

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