粘度降低的製劑的製作方法
2023-06-28 15:20:56 2
粘度降低的製劑的製作方法
【專利摘要】本發明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法以及使用請求保護的方法製得的製劑。本發明還涉及通過本發明任一方法製備的穩定製劑。本發明還涉及包含容器的製品，該容器包含本發明的製劑。
【專利說明】粘度降低的製劑
發明領域
[0001]本發明涉及治療性蛋白的製劑領域。更具體地，本發明涉及粘度降低的製劑以及製備其的方法。
[0002]發明背景
[0003]許多包含蛋白的藥品需要高治療劑量以實現有效的患者響應。由於治療性蛋白(包括單克隆抗體)體積大以及易於蛋白分解，為了達到血流中的治療濃度，需要將其經靜脈內或皮下注射給藥。在這兩種給藥途徑中，皮下注射對患者更為便利，因為可在家給予靶向皮下給藥途徑的藥品。存在多種在預填充注射器中的已經重新或作為產品線延伸而開發的單克隆抗體藥品，用於皮下給藥途徑。通常，由於皮下空間對給藥劑量的體積限制，通過預填充注射器單次推注給藥(bolus administration)的方式可給藥不超過ImL藥品溶液。然而，給藥總體積和持續時間由給藥溶液中單克隆抗體的濃度控制。為在更小體積內實現輸注或推注給藥更高劑量，需要溶液中高濃度的單克隆抗體。
[0004]多種濃度範圍超過100mg/mL的單克隆抗體以及大多數濃度為更高的200mg/mL的單克隆抗體具有相對高粘度，導致處置單克隆抗體藥品溶液的問題。諸如用於濃縮抗體至高水平的切向流動過濾以及無菌過濾的製備エ藝是困難的並導致高粘度溶液的產量損失。當必須達到超過約20牛的カ以使用預填充注射器遞送藥品的皮下劑量時，還可出現患者或醫療專業人員藥品處理和注射能力的問題。顯然需要降低粘度的製劑方法，且在製劑開發期間使用降低粘度的賦形劑是一可行的方法。
【發明內容】
[0005]本發明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法。
[0006]在一項實施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將氯化鈉添加至該製劑中至約20mM至約150mM的濃度，其中具有氯化鈉的製劑的粘度比不具有氯化鈉的相同製劑的粘度小。
[0007]在另ー項實施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該製劑中至濃度約0.4%w/v至約1.l%w/v，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的製劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同製劑的粘度小。
[0008]在另ー項實施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該製劑中至濃度約0.4%w/v至約1.l%w/v,其中具有苯丙氨酸的製劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同製劑的粘度小。
[0009]在另ー項實施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將酪氨酸添加至該製劑中至濃度約0.001%w/v至約0.005%w/v,其中具有酪氨酸的製劑的粘度比不具有酪氨酸的相同製劑 的粘度小。
[0010]在另ー項實施方案中，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將脯氨酸添加至該製劑中至濃度約4.0%w/v，其中具有脯氨酸的製劑的粘度比不具有脯氨酸的相同製劑的粘度小。[0011 ] 本發明還涉及通過本發明任一方法製備的穩定製劑。
[0012]本發明還涉及包含容器的製品，該容器包含本發明製劑。
[0013]附圖簡述
[0014]圖1.氯化鈉:在所有測試濃度下，氯化鈉降低了檸檬酸鹽緩衝液中的抗IL5mAb的粘度。
[0015]圖2.檸檬酸鹽緩衝液:除了 0.04%甲硫氨酸以外，所有濃度的直鏈胺基酸降低了樣品的粘度。
[0016]圖3.檸檬酸鹽:苯丙氨酸、酪氨酸和脯氨酸降低了抗IL5mAb製劑的粘度，而色氨酸未改變抗IL5mAb製劑的粘度。
[0017]發明詳述
[0018]應當理解，本發明不限於具體的方法、試劑、化合物、組合物或生物系統，其當然可以變化。還應當理解，本文所用的術語僅為描述具體的實施方案，而不是為了限制。如本說明書及所附權利要求書中使用的，除非內容明確另有所指，単數形式「ー個」、「ー種」和「該」包括所指事物的複數形式。因此，例如，提及「多肽」包括兩種或多種多肽的組合等。
[0019]當涉及可測量值如量、持續時間等時，本文所用的「約」是指涵蓋從特定數值的±20%或±10%的變體(包括±5%、±1%和±0.1%),這樣的變體適於施行所公開的方法。
[0020]除非另有所指，否則本文所用的所有技術和科學術語具有與本發明所屬領域的技術人員通常所理解的相同的含義。儘管任何與本文所述的方法和材料相似或相當的方法和材料可用於本發明測試的實踐中，但優選的材料和方法如本文所述。在描述和請求本發明中，將用到以下術語。·
[0021]本發明涉及一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法。
[0022]在本發明的示例性實施方案中，所生產的液體多肽組合物表現出理想的特性，如理想的粘度和表面張カ特性。
[0023]術語「表面張力」是指表面下的分子對表面/空氣界面的分子施加的吸引力，是由於液體的高分子濃度相對氣體的低分子濃度而引起。具有低表面張カ值的液體，如非極性液體，比水更容易流動。通常，表面張カ值以牛/米或達因/釐米表示。
[0024]本文涉及的「動態表面張力」是指表面/空氣界面和對表面/表面界面的動態界面張力。有多種可選的方法測量動態表面張力，例如，捕泡表面張カ計(captivebubble surface tensionometry)或搏胡氣泡表面張カ計(pulsating bubble surfacetensionometry)。
[0025]術語「粘度」指的是流體在規定溫度表現的對流動的內部阻力；是切應力與剪切速率之比。如果I達因/平方釐米的カ導致兩個面積為I平方釐米且相距I釐米的平行液體表面以lcm/s的速度相對運動，則液體具有I泊的粘度。I泊=100釐泊。
[0026]當涉及表觀粘度，應當理解粘度值取決於進行測量的條件，如所採用的溫度、剪切速率和切應力。表觀粘度定義為切應カ與應用的剪切速率之比。有多種可選的方法測量表觀粘度。例如，粘度可通過合適的錐和板、平行板或其它類型的粘度計或流變儀測試。
[0027]在一些實施方案中，粘度降低的製劑具有小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP、小於約35cP、小於約30cP、小於約25cP、小於約20cP或小於約15cP的粘度。
[0028]本文替換使用的「多肽」、「肽」和「蛋白」是指胺基酸殘基的聚合物。多肽可以是天然(組織衍生的)起源的、重組的或由原核或真核細胞製品天然表達的，或者是經由合成方法化學生產的。該術語適用於胺基酸聚合物(其中一個或多個胺基酸殘基為相應的天然存在的胺基酸的人工化學模擬物)，也適用於天然存在的胺基酸聚合物和非天然存在的胺基酸聚合物。胺基酸模擬物是指具有與胺基酸的一般的化學結構不同的結構，但作用的方式與天然存在的胺基酸類似的化學化合物。科學和專利文獻充分地描述了非天然殘基。ー些示例性的用作天然胺基酸殘基模擬物的非天然組合物和指導如下所述。芳香族胺基酸的模擬物可通過由以下替代而生成:例如D-或L-萘基丙氨酸(naphylalanine) ;D_或L-苯基甘氨酸；D_或L-2噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_或L_l, _2，3_，或4-花基丙氨酸(pyreneylalanine) ;D_ 或 L-3 噻吩基丙氨酸(thieneylalanine) ;D_ 或 L-(2_ 吡唳基)-丙氨酸；D-或L- (3-吡啶基)-丙氨酸；D-或L- (2-吡嗪基)-丙氨酸；D-或L- (4-異丙基)-苯基甘氨酸；D- ( 二氟甲基)-苯基甘氨酸；D_ ( 二氟甲基)-苯丙氨酸；D_對-氟-苯丙氨酸；D-或L-對-聯苯基苯丙氨酸；K-或L-對-甲氧基-聯苯基苯丙氨酸；D-或L-2-吲哚(烷基)丙氨酸；和D-或L-烷基丙氨酸，其中烷基可以為取代或未取代的甲基、乙基、丙基、己基、丁基、戍基、異丙基、異丁基、sec-1sotyl、異戍基,或非酸性胺基酸。非天然胺基酸的芳香族環包括，例如噻唑基、噻吩基(thiophenyl)、吡唑基、苯並咪唑基、萘基、呋喃基、吡咯基，和吡啶基芳香族環。
[0029]本文所用的「肽」包括作為本文具體舉例說明的那些肽的保守變體的肽。本文所用的「保守變體」表示使用另ー生物學上相似的殘基替代胺基酸殘基。保守變體的實例包括但不限於，ー個疏水性殘基如異亮氨酸、纈氨酸、亮氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、色氨酸、酪氨酸、正亮氨酸或甲硫氨酸取代另ー個疏水殘基，或一個極性殘基取代另ー個極性殘基，如精氨酸取代賴氨酸、穀氨酸取代天冬氨酸或穀氨醯胺取代天冬醯胺等。可互相取代的中性親水性胺基酸包括天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸和蘇氨酸。「保守變體」還包括使用取代的胺基酸代替未取代的母體胺基酸，條件是取代的多肽的抗體也與未取代的多肽起免疫反應。這樣的保守取代在本發明的肽的種類的定義之內。本文所用的「陽離子的」是指在PH7.4時具有淨正電荷的任何肽。肽的生物活性可通過本領域技術人員已知的和本文所述的標準方法測定。
[0030]當關於蛋白使用「重 組」時，表示該蛋白已通過引入異源核酸或蛋白或者改變天然核酸或蛋白進行修飾。
[0031]本文所用的「治療性蛋白」指的是(例如)研究者或臨床醫生所尋找的、可向哺乳動物給藥以引出組織、系統、動物或人類的生物學或醫學應答的任何蛋白和/或多肽。治療性蛋白可引出多於ー種生物學或醫學應答。而術語「治療有效量」是指與未接受該量的相應的受試者相比，導致(但不限幹)疾病、病症或副作用痊癒、預防或減輕，或者疾病或病症進展速率降低的任何量。該術語在其範圍內還包括有效增強正常生理功能的量以及在患者中有效地引起增強或有助於第二種藥物的治療作用的生理功能的量。
[0032]本文所鑑定的所有「胺基酸」殘基為天然的L-構型。與標準多肽命名一致，胺基酸殘基的縮寫如下表所示。
[0033]表1.胺基酸縮寫
[0034]
【權利要求】
1.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將氯化鈉添加至該製劑中至約20mM至約150mM的濃度，其中具有氯化鈉的製劑的粘度比不具有氯化鈉的相同製劑的粘度小。
2.權利要求1的方法，其中氯化鈉添加至選自約25mM、約50mM和約IOOmM的濃度。
3.前述權利要求任ー項的方法，其中具有氯化鈉的製劑的粘度比不具有氯化鈉的製劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%或至少約 40% o
4.前述權利要求任ー項的方法，其中具有氯化鈉的製劑的粘度小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP或小於約35cP。
5.一種 降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將甘氨酸和/或精氨酸添加至該製劑中至約0.4%w/v至約1.l%w/v的濃度，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的製劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的相同製劑的粘度小。
6.權利要求5的方法，其中甘氨酸和/或精氨酸添加至選自約0.5%w/v和約l%w/v的濃度。
7.權利要求5或6的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的製劑的粘度比不具有甘氨酸和/或精氨酸的製劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
8.權利要求5、6或7的方法，其中具有甘氨酸和/或精氨酸的製劑的粘度小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP、小於約35cP、小於約30cP或小於約25cP。
9.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將苯丙氨酸添加至該製劑中至約0.4%w/v至約1.l%w/v的濃度，其中具有苯丙氨酸的製劑的粘度比不具有苯丙氨酸的相同製劑的粘度小。
10.權利要求9的方法，其中苯丙氨酸添加至為約0.8%w/v的濃度。
11.權利要求9或10的方法，其中具有苯丙氨酸的製劑的粘度比不具有苯丙氨酸的製劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
12.權利要求9、10或11的方法，其中具有苯丙氨酸的製劑的粘度小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP、小於約35cP、小於約30cP或小於約25cP。
13.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將酪氨酸添加至該製劑中至約0.001%w/v至約0.005%w/v的濃度，其中具有酪氨酸的製劑的粘度比不具有酪氨酸的相同製劑的粘度小。
14.權利要求13的方法，其中酪氨酸添加至為約0.004%w/v的濃度。
15.權利要求13或14的方法，其中具有酪氨酸的製劑的粘度比不具有酪氨酸的製劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%或至少約50%。
16.權利要求13、14或15的方法，其中具有酪氨酸的製劑的粘度小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP、小於約35cP、小於約30cP或小於約25cP。
17.一種降低包含檸檬酸鹽和治療性蛋白的製劑的粘度的方法，該方法包括:(a)提供包含檸檬酸鹽的製劑；以及(b)將脯氨酸添加至該製劑中至約4.0%w/v的濃度，其中具有脯氨酸的製劑的粘度比不具有脯氨酸的相同製劑的粘度小。
18.權利要求17的方法，其中具有脯氨酸的製劑的粘度比不具有脯氨酸的製劑的粘度降低至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約40%、至少約50%、至少約60%、至少約70%或至少約75%。
19.權利要求17或18的方法，其中具有酪氨酸的製劑的粘度小於約50cP、小於約45cP、小於約40cP、小於約35cP、小於約30cP、小於約25cP、小於約20cP或小於約15cP。
20.前述權利要求任ー項的方法，其中該方法進ー步包括測定蛋白製劑的穩定性。
21.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑進ー步包含蔗糖。
22.權利要求21的方法，其中該製劑進ー步包含濃度為約234mM的蔗糖。
23.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑配製為pH約6.0。
24.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑進ー步包含聚山梨酷-80。
25.前述權利要求任ー項的方法，其中該治療性蛋白是抗原結合多肽。
26.前述權利要求任ー項的方法，其中該抗原結合多肽是抗體。
27.前述權利要求任ー項的方法，其中該抗原結合多肽是免疫球蛋白單一可變域。
28.權利要求25的方法，其中該抗原結合多肽結合至白細胞介素5(IL5)。
29.權利要求28的方法，其·中該抗原結合多肽是抗IL5抗體。
30.權利要求29的方法，其中該抗IL5抗體包括包含SEQID NO:1的重鏈以及包含SEQID NO:2的輕鏈。
31.前述權利要求任ー項的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml、至少約175mg/ml、至少約200mg/ml、至少約225mg/ml、至少約250mg/ml、至少約275mg/ml或至少約300mg/ml。
32.前述權利要求任ー項的方法，其中該治療性蛋白的存在濃度為至少約150mg/ml至約 300mg/ml。
33.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑是重構製劑。
34.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑是液體藥物製劑。
35.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑適於腸胃外給藥。
36.前述權利要求任ー項的方法，其中該製劑包含約IOmM至約50mM檸檬酸鹽。
37.權利要求36的方法，其中該製劑包含約20mM檸檬酸鹽。
38.通過前述權利要求任ー項方法製備的穩定製劑。
39.包含容器的製品，該容器包含權利要求38的製劑。
40.權利要求39的製品，其進ー步包含用於給藥該製劑的說明書。
【文檔編號】A61K39/00GK103596585SQ201280026486
【公開日】2014年2月19日 申請日期:2012年4月6日 優先權日:2011年4月7日
【發明者】M.A.蒙克, M.Y.王, K.張 申請人:葛蘭素史密斯克萊有限責任公司