應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法

2023-06-29 16:51:06 1

專利名稱：應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法
技術領域：
本發明屬於食品安全技術領域，涉及一種應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法。
背景技術：
我國是中藥種植、使用及出口大國，其藥用功效越來越得到國內外消費者的認可。近年來由於種植不當、環境汙染或利益驅動，人工種植中藥不斷出現農藥殘留汙染問題，成為影響藥物療效和安全性的重要因素，對人類和環境造成的危害也是不容忽視的，近年來國內外對中藥農藥殘留的關注度呈上升趨勢，目前歐美、日本、韓國等國家都對中藥中的農藥殘留制定了嚴格的限量標準，對我國中藥出口造成技術壁壘。因此建立快速準確的中藥中農藥殘留的檢測方法是很有必要的。現在中藥中的農藥殘留的檢測主要有氣相色譜法、液相色譜法以及氣相色譜-質譜法，液相色譜-質譜法，氣相色譜-串聯質譜和液相色譜-串聯質譜法，氣相色譜法和液相色譜法主要依賴色譜分離，針對複雜基質如各種中藥，在農藥的定性上存在一定難度，基質中的幹擾峰與待測農藥不能有效分離，幹擾結果的準確性，甚至造成假陽性。氣相色譜-質譜法和液相色譜-質譜法主要利用低分辨質譜檢測器，由於受到掃描速度的限制，在農藥多殘留的分析上靈敏度會不理想，氣相色譜-串聯質譜法和液相色譜-串聯質譜法在 農藥多殘留的定量分析上具有較高的靈敏度，適合分析目標化合物；在對複雜基質的分離和未知物的篩選及定性定量上，近年來發展較快的二維氣相色譜-飛行時間質譜(TOFMS)技術具有優勢，氣相色譜採用兩支極性不同的色譜柱，當樣品經過第一支非極性柱時，待測組分按分子大小進行分離，在一維色譜柱上未分開的組分在數據機的作用後進入第二支極性色譜柱，一維相同保留時間的組分在第二支色譜柱上按極性再次分離，實現了樣品組分的正交分離，強度在三維譜圖上顯示，得到三維譜圖。TOFMS可提供非常高的採集頻率，這使得在GCXGC上重疊峰得以分辨，並自動解析。該方法具有較高的解析度、靈敏度，提高了農藥在定性和定量上的準確性和可靠性，解決了複雜基質如中藥的分離及同時定性和定量的難題。目前國內涉及中藥中農藥殘留的檢測標準很少，2010年修訂頒布的新版《中華人民共和國藥典》中涉及了中藥中二十多種農藥的檢測方法，多為氣相色譜法，國標gb /t23200-2008桑枝、金銀花、枸杞子和荷葉中488種農藥及相關化學品殘留量的測定氣相色譜-質譜法，gb / t 23201-2008桑枝、金銀花、枸杞子和荷葉中413種農藥及相關化學品殘留量的測定液相色譜-串聯質譜法涉及了多殘留農藥的檢測，但方法僅適用於基質比較簡單的桑枝、金銀花、枸杞子和荷葉四種中藥，而應用二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測中藥中的多殘留農藥還研究很少。中藥中農殘前處理方法主要有溶劑提取、加速溶劑萃取、液液分配、固相微萃取等，這些方法存在耗時長、試劑消耗量大、待測物回收不穩定、易分解、固相微萃取造價高等問題。

發明內容
針對現有技術存在的問題，本發明的目的在於設計提供一種快速、簡便，靈敏度高、分離效果好，有效減少來自複雜的中藥基質幹擾的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法。為了解決上述技術問題，本發明採用的技術方案是一種應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，包括以下步驟I)中藥樣品中農藥殘留的乙腈提取；2)氧化鋁無機膜的超濾分離；3)樣品提取溶液的固相分散萃取淨化； 4)使用二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測；5)結果分析。具體地說，包括以下步驟I)中藥樣品中農藥殘留的乙腈提取稱取I 2g中藥粉末樣品，加入2 4mL蒸餾水使中藥潤溼，加入IOmL乙腈，劇烈震搖，得到由中藥基質、水、乙腈組成的混合勻漿溶液，在上述勻漿溶液中加入Ig氯化鈉固體，再劇烈震搖，然後進行離心操作，靜置分層，取出上清液，離心管中再加IOmL乙腈，重複提取一次，合併2次提取液；2)氧化鋁無機膜的超濾分離氧化鋁無機膜膜厚O. 02 O. 2um,固定於溶液過濾接收裝置上，加樣前先用乙腈潤溼，真空抽濾，棄去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽濾至膜面近幹，再加入IOmL乙睛抽濾洗膜，接收液轉入旋轉蒸餾瓶中旋轉蒸發近幹，加入ImL丙酮於蒸餾瓶中溶解待測樣品；3)樣品提取溶液的固相分散萃取淨化在2mL離心管中分別加入150 300mg無水硫酸鎂,50 IOOmgN-丙基-乙二胺，100 200mg石墨碳黑，再加入ImL待測物丙酮溶解液，再進行震蕩離心取上清液，上清液過O. 22um有機濾膜，即得到樣品溶液；4)用二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測c)標準溶液的製備分別準確稱取標準品農藥，用甲苯或甲苯-丙酮混合液溶解並配成lmg/mL的儲備液，使用時再根據各農藥的響應，用乙睛稀釋成標準工作液；d)使用二維氣相色譜-飛行時間質譜儀檢測標準溶液和樣品溶液由自動進樣器分別吸取標準工作液和樣品溶液，注入二維氣相色譜-飛行時間質譜儀中，樣品溶液中農藥組分和部分中藥基質經一維色譜柱分離後，經雙噴口 4通道數據機加熱冷卻後進入二維氣相色譜柱再分離，飛行時間質譜全掃描檢測；5)結果分析軟體Leco ChromaTOF-GC V 4. 32用於數據處理，當樣品在EI電離源70V電壓的條件下電離時，其質譜圖與NIST/PEST He譜庫相比對，當相似度大於設定值，該物質被自動識別完成定性，定量離子是軟體根據碎片離子的最大豐度自動選定；以標準工作液的質量濃度X為橫坐標，定量離子的峰面積Y為縱坐標，繪製標準工作曲線，用標準工作曲線對樣品進行單離子外標法定量；用標準曲線和定量離子一維和二維保留時間設定定量處理方法，當樣品中的定量離子的信噪比大於設定值，一維保留時間偏差在6 10ms，二維保留時間偏差在O. I O. 5ms內，樣品被設定的定量處理方法自動定量。所述步驟2)氧化鋁無機膜在使用前要用8mL乙腈潤溼。所述步驟3)在漩渦震蕩器上震搖O. 5 2min，然後在離心機8000 12000rpm下離心4 6min。
所述的步驟4)中標準品農藥為敵敵畏、甲胺磷、乙醯甲胺磷、五氯苯、滅線磷、氧化樂果、四氯硝基苯、氟樂靈、久效磷、硫線磷、甲拌磷、A-666、六氯苯、樂果、莠去津、B-666、五氯硝基苯、特丁硫磷、C-666、二嗪磷、地蟲硫磷、卩密黴胺、氟蟲脲、乙拌磷、D-666、百菌清、異稻溫淨、五氯苯胺、乙草胺、敵稗、甲基毒死蜱、甲基對硫磷、甲草胺、七氯、撲草淨、炔蟎特代謝物、甲基嘧啶磷、殺螟硫磷、馬拉硫磷、五氯硝基苯代謝物、異丙甲草胺、毒死蜱、禾草丹、倍硫磷、4，4_ 二氯苯酚、對硫磷、艾氏劑、毒蟲畏、嘧菌環胺、二甲戊樂靈、氟蟲睛、環氧七氯、喹硫磷、三唑醇I、腐黴利、pp-DDD、三唑醇2、殺撲磷、噻嗪酮、氯丹、苯線磷、pp-DDE、A-硫丹、丙硫磷、稻痕靈、丙溴磷、op-DDE、異狄氏劑、氟娃唑、睛菌唑、環氟菌胺、狄氏劑、蟲蟎睛、蟲蟎磷、乙酯殺蟎醇、B-硫丹、乙硫磷、PP-DDT、三唑磷、丙環唑、硫丹硫酸鹽、甲氧滴滴涕、炔蟎特、增效醚、戊唑醇、聯苯菊酯、溴蟎酯、亞胺硫磷、甲氰菊酯、伏殺硫磷、三氟氯氰菊酯、保棉磷、氯菊酯、蠅毒磷、氟氯氰菊酯、苯醚菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、丙炔氟草胺、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、烯醯嗎啉、苯醚甲環唑、溴氰菊酯共103種。所述的步驟4)中二維氣相色譜條件一維柱為非極性柱30mX O. 25mmX O. 25um+5mX O. 25mm>5%diphenyl/95%dimethylpolysiloxane ；二維柱為中極性柱 Rtx_200 2. OmXO. 18mmXO. 20um> trifluoropropylmethylpolysiloxane ；載氣He，流速I. Oml/mL,進樣2uL，不分流進樣，進樣口溫度250°C ；一維色譜柱升溫程序40°C保持lmin，以30°C / min的速度升至130°C，再以IO0C / min的速度升至280°C保持10分鐘，整個運行時間為29分鐘；二維色譜柱起始溫度比一維高15°C，55°C保持lmin，以30°C / min的速度升至145°C，再以10°C / min的速度升至295°C保持10分鐘；數據機溫度比二維溫度高40°C，95°C保持lmin，以30°C / min的速度升至185°C，再以10°C / min的速度升至330°C保持10分鐘，調製周期為4s，其中熱吹O. 8秒，冷吹I. 2秒；質譜條件質量分析器飛行時間質譜解析度1000 ;質量範圍lO-lOOOamu，採
集速率每秒100張圖譜以上，離子源EI源。電離電壓70V ;離子源溫度250°C，傳輸線溫度 280 0C ο所述的步驟I)中乙腈提取液劇烈震搖I分鐘。本發明的優點和積極效果如下(I)本發明中涉及的分離膜是氧化鋁無機膜。常規的超濾膜是中空纖維有機膜，孔徑在10-1000埃，相當於Ι-lOOnm，但應用超濾膜分離耗時長，需要幾個小時。而應用孔徑20nm的無機氧化鋁膜在真空抽濾下對中藥提取液進行分離，同樣起到超濾的效果，而分離只需幾分鐘。(2)將膜分離結合固相分散萃取應用於中藥的農殘前處理，淨化效果等同2隻串聯的固相微萃取柱(PSA和氨基柱串聯)，優於單支氟羅裡矽土柱(通過二維色譜質譜圖驗證)。(3)本發明首次將膜分離技術引入農藥殘留的前處理方法中，具有創新性。(4)本發明提供的樣品前處理方法在I小時內可完成，而傳統的方法如固相微萃取需要4-5個小時，本發明方法一次只需38mL乙腈溶液，而固相微萃取方法一次至少要IOOmL乙腈溶液，兩隻固相微萃取柱一般在100兀,而固相分散萃取一次只需200mg吸附齊IJ，l-2mL樣品提取液經固相分散萃取淨化後可直接進樣。因此本發明具有快速、簡便、節省試劑、費用低、提取淨化效果好等特點。
(5)氣相或液相色譜的定性只依據一維保留時間，二維氣相色譜可依據2個保留時間，即一維保留時間和一個調製周期內的二維保留時間，增加了定性的準確性。一維氣相色譜色譜柱只能是一種極性如非極性或極性，而二維氣相色譜可同時使用非極性和極性柱，多種待測物經過一維非極性柱時先按分子大小進行分離，再經過二維極性色譜柱時再按極性再次分離，因此能達到GCXGC的分離效果，使複雜基質能得到高效分離，因此本發明方法非常適合中藥這種複雜基質中多種農藥殘留的同時分析。(6)傳統四級杆質譜採集譜圖的速度很慢，對多農殘的分析為提高採集頻率保證足夠的靈敏度，每一種物質只能採集2-3個特徵離子，其定性依據是2-3個特徵例子的豐度t匕，當幹擾物也出現相同的離子豐度比時，儀器就會給出假陽性的判斷。而飛行時間質譜由於其具有高採集速率，每一種物質都採集全譜圖，如在50-550amu質量範圍內全掃，其定性是每一張全譜圖與NIST或農殘譜庫中標準物質的全譜庫相比對，當相似度達到設定值如700時，儀器才做出定性的判定，因此結果是非常準確的，也不會出現假陽性。該儀器在沒有標準品時也可通過譜庫檢索做出定性分析，該方法也適於做大批量樣品中農藥殘留的快速篩選。


圖I為103種農藥混合標準溶液的二維氣相色譜-飛行時間質譜圖(部分時間段譜圖)；圖2為實施例I銀杏葉基質的檢出農藥的二維氣相色譜-飛行時間質譜圖；圖3為實施例2中氯氰菊酯標準品的實測質譜圖、農藥譜庫檢索圖及對比結果；圖4為實施例2五味子基質在氯氰菊酯(1356，2. 19)處幹擾峰的二維氣相色譜-飛行時間質譜圖；圖5為實施例2五味子基質中疑似氯氰菊酯幹擾物的質譜圖；圖6為實施例2五味子基質中添加氯菊酯的二維氣相色譜-質譜圖；圖7為實施例3五味子基質的檢出農藥的二維氣相色譜-質譜圖；圖8為實施例3五味子中檢出氯氰菊酯的實測質譜圖、農藥譜庫檢索圖及對比結果O
具體實施例方式下面結合附圖和具體實施方式
對本發明作進一步詳細說明實施例II.儀器與試 劑儀器LecoPega sus 4D GCXGC — TOF — MS 飛行時間質譜儀(美國 Leco 公司)；配備 Agilent7890 二維氣相色譜儀，Gerstel MPS 2 (Gerstel GmbH, M iilheiman derRuhr, Germany)自動進樣器，組織勻眾機(德國IKA公司)，旋轉蒸發器(瑞士 Buchi公司)，高速冷凍離心機(日本Hitachi CR G Series),離心機(日本Sigma 2-16PK),過濾接受裝置47mm, 25OmL (賽默飛世爾科技公司)無機氧化招膜O. 02um, 47mm (Whatman公司)。乙睛，丙酮，HPLC級，購自迪馬公司，2mL淨化管中包括N-丙基乙二胺(PSA)吸附劑 50mg,無水硫酸續 150mg,購自 Waters 公司(DisQue Dispersive SPEKit),石墨碳黑(購自美國SEPAX-UCT)，氯化鈉，分析純。103種農藥標準品(純度不低於95%，購自Dr. Ehrenstorfer公司),用甲苯或甲苯-丙酮混合液分別配成lmg/mL的單標,並於-18°C下封存。使用前用乙睛稀釋配置為所需要的標準工作液。2.樣品處理(I)樣品提取稱取磨碎的銀杏葉粉末I. Og於15mL離心管，加入2mL蒸餾水使中藥潤溼,加入IOmL乙腈，劇烈震搖I分鐘,加入Ig氯化鈉固體,再劇烈震搖I分鐘，4000r/min離心5分鐘，取出上清液，離心管中再加IOmL乙腈，重複提取一次，合併2次提取液；(2)無機氧化鋁膜分離將氧化鋁無機膜(膜厚O. 02um,直徑47mm)固定於溶液過濾接收裝置上，加樣前先用8mL乙腈潤溼，真空抽濾，棄去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽濾至膜面近幹，再加入IOm乙睛抽濾清洗氧化鋁無機膜上殘留的農藥，接收液轉入旋轉蒸發瓶中旋轉蒸發近幹，加入ImL丙酮於蒸發瓶中溶解待測樣品。(3)樣品提取溶液的固相分散萃取淨化在2mL離心管中分別加入150mg無水硫酸鎂，50mgPSA, IOOmg石墨碳黑，再加入ImL待測物濃縮液，旋渦震蕩lmin，8000r/min離心5分鐘，取上清液過O. 22um有機濾膜，濾液轉入含O. 5mL濃縮杯的樣品瓶中，待測。(4)基質混合標準工作溶液分別在進樣瓶中加入濃度為lug/mL的103種混合標準溶液O. OlmL, O. 05mL, O. IOmL, O. 25mL，加入空白銀杏葉基質提取液至ImL,配成0,0. 01、
0.05,0, 10,0. 25ug/mL系列混合標準，繪製標準曲線，見表I。(與權利要求書2中的4)要對應的上)(5)樣品測定方法標準工作液和樣品待測液在二維氣相色譜-飛行時間質譜上分別進樣(見圖I)。氣相色譜條件一維柱為TR-pesticides (賽默飛世爾科技公司農殘專用柱)，二維柱為Rtx-200，載氣He，流速1.0ml/mL，進樣2uL，不分流進樣，進樣口溫度250°C，一維色譜柱升溫程序40°C保持lmin，以30°C / min的速度升至130°C，再以10°C / min的速度升至280°C保持10分鐘，整個運行時間為29分鐘，二維色譜柱起始溫度比一維高15°C，升溫程序同一維。數據機起始溫度比二維高40°C，調製周期為4s (熱吹O. 8秒，冷吹
1.2 秒)。質譜條件離子源EI電離源，溫度250°C，傳輸線溫度280°C，質量掃描範圍50-550amu，採集速率每秒100張圖譜，檢測器電壓1750V，電離電壓_70V。數據處理Pegasus,譜庫檢索NIST/PEST He(6)結果分析軟體Leco ChromaTOF-GC v 4· 32用於數據處理，首先得到標準譜圖，建立基質混合標準溶液的校正表(該表可包括農藥名稱，一維和二維保留時間、一維和二維保留時間允許偏差、樣品類型、濃度單位，定量離子及信噪比、相關係數、校正方程、標準濃度等信息)，再建立定性定量樣品處理方法(包括NIST/PEST He譜庫，質量起始範圍，譜圖相似度，定量離子信噪比、校正表等信息)，樣品譜圖用定性或定量處理方法進行譜圖處理，得到定性和定量結果。在該銀杏葉樣品中檢出莠去津0.01mg/kg、三氟氯氰菊酯
O.06mg/kg、二甲戍樂靈O. 01mg/kg、乙草胺O. 02mg/kg,譜圖見圖2。103種農藥的化合物及在二維氣相色譜上的定性定量信息見表I.部分時間段的二維氣相色譜-飛行時間質譜圖見圖I-去掉表I 103種農藥的化合物名稱及在二維氣相色譜上的定性定量信息

CASquant RKfirstco 線性方程Rz
Registry No ion I，second )
m/z
甲胺轉__10265-92-6 94 436, 2. 19 Y=+182331x-4665 0.9819
敵敵畏__62-73-7__109 436,2. 08 Υ=+320782χ-8050 O. 9939
甲拌嶙__298-02-2 75 720, 1. 03 Υ=+157538χ+1286 0.9969
甲基對硫磷 298-00-0 125 844, I. 72 Υ=+204327χ-5474 O. 9994
馬拉硫嶙__121-75-5 125 884, I. 44 Υ=+514481χ-3302 O. 9920
倍硫嶙__55-38-9__278 896,1. 29 Υ=+404730χ-2956 O. 9926
毒死蜱__2921-88-2 97 892, I. 22 Υ=+894303χ-4954 O. 9821
對硫磚__56-38-2__97 900, I. 70 Υ=+562040χ-3553 O. 9951
殺撲磚__950-37-8 145 968, 1. 51 Υ=+309458χ-1255 O. 9849
三唑轉__24017-47-8 162 1068, 1. 43 Υ=+106101χ-1234 O. 9849
殺螟硫鱗__122-14-5 125 876, 1. 670 Υ=+468257χ-3639 0. 9923
乙醯甲胺磷 30560-19-1 136 548, 1. 73 Υ=+375821χ-3052 0.9910
氧化樂果__1113-02-6 156 652, I. 93 Υ=+145356χ-1025 O. 9854
二嗪嶙__333-41-5 179 776，I. 09 Υ=+335859χ-1415 0. 9957
久效石粦__6923-22-4 127 704,1.84 Υ=+2456870χ-150339 O. 9921
樂果60-51-5 丨 87 丨 744，I. 62 Υ=+278540χ-2897 丨 0. 9852

權利要求
1.一種應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，包括以下步驟 O中藥樣品中農藥殘留的乙腈提取； 2)氧化鋁無機膜的超濾分離； 3)樣品提取溶液的固相分散萃取淨化； 4)使用二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測； 5)結果分析。
2.根據權利要求I所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，包括以下步驟 O中藥樣品中農藥殘留的乙腈提取 稱取I 2g中藥粉末樣品，加入2 4mL蒸餾水使中藥潤溼，加入IOmL乙腈，劇烈震搖，得到由中藥基質、水、乙腈組成的混合勻漿溶液，在上述勻漿溶液中加入Ig氯化鈉固體，再劇烈震搖，然後進行離心操作，靜置分層，取出上清液，離心管中再加IOmL乙腈，重複提取一次，合併2次提取液； 2)氧化鋁無機膜的超濾分離 氧化鋁無機膜膜厚O. 02 O. 2um,固定於溶液過濾接收裝置上，加樣前先用乙腈潤溼，真空抽濾，棄去接收器中的乙腈，加入提取液，真空抽濾至膜面近幹，再加入IOmL乙睛抽濾洗膜，接收液轉入旋轉蒸餾瓶中旋轉蒸發近幹，加入ImL丙酮於蒸餾瓶中溶解待測樣品； 3)樣品提取溶液的固相分散萃取淨化 在2mL離心管中分別加入150 300mg無水硫酸鎂,50 IOOmgN-丙基-乙二胺，100 200mg石墨碳黑，再加入ImL待測物丙酮溶解液，再進行震蕩離心取上清液，上清液過O. 22um有機濾膜，即得到樣品溶液； 4)用二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測 a)標準溶液的製備分別準確稱取標準品農藥，用甲苯或甲苯-丙酮混合液溶解並配成lmg/mL的儲備液，使用時再根據各農藥的響應，用乙睛稀釋成標準工作液； b)使用二維氣相色譜-飛行時間質譜儀檢測標準溶液和樣品溶液由自動進樣器分別吸取標準工作液和樣品溶液，注入二維氣相色譜-飛行時間質譜儀中，樣品溶液中農藥組分和部分中藥基質經一維色譜柱分離後，經雙噴口 4通道數據機加熱冷卻後進入二維氣相色譜柱再分離，飛行時間質譜全掃描檢測； 5)結果分析 軟體Leco ChromaTOF-GC v 4. 32用於數據處理，當樣品在EI電離源70V電壓的條件下電離時，其質譜圖與NIST/PEST He譜庫相比對，當相似度大於設定值，該物質被自動識別完成定性，定量離子是軟體根據碎片離子的最大豐度自動選定；以標準工作液的質量濃度X為橫坐標，定量離子的峰面積Y為縱坐標，繪製標準工作曲線，用標準工作曲線對樣品進行單離子外標法定量；用標準曲線和定量離子一維和二維保留時間設定定量處理方法，當樣品中的定量離子的信噪比大於設定值，一維保留時間偏差在6 10ms，二維保留時間偏差在O. I O. 5ms內，樣品被設定的定量處理方法自動定量。
3.根據權利要求2所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，所述步驟2)氧化鋁無機膜在使用前要用SmL乙腈潤溼。
4.根據權利要求2所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，所述步驟3)在漩渦震蕩器上震搖O. 5 2min，然後在離心機8000 12000rpm下離心4 6min。
5.根據權利要求2所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，所述的步驟4)中標準品農藥為敵敵畏、甲胺磷、乙醯甲胺磷、五氯苯、滅線磷、氧化樂果、四氯硝基苯、氟樂靈、久效磷、硫線磷、甲拌磷、A-666、六氯苯、樂果、莠去津、B-666、五氯硝基苯、特丁硫磷、C-666、二嗪磷、地蟲硫磷、嘧黴胺、氟蟲脲、乙拌磷、D-666、百菌清、異稻溫淨、五氯苯胺、乙草胺、敵稗、甲基毒死蜱、甲基對硫磷、甲草胺、七氯、撲草淨、炔蟎特代謝物、甲基嘧啶磷、殺螟硫磷、馬拉硫磷、五氯硝基苯代謝物、異丙甲草胺、毒死蜱、禾草丹、倍硫磷、4，4_ 二氯苯酚、對硫磷、艾氏劑、毒蟲畏、嘧菌環胺、二甲戊樂靈、氟蟲睛、環氧七氯、喹硫磷、三唑醇I、腐黴利、pp-DDD、三唑醇2、殺撲磷、噻嗪酮、氯丹、苯線磷、pp-DDE、A-硫丹、丙硫磷、稻痕靈、丙溴磷、op-DDE、異狄氏劑、氟娃唑、睛菌唑、環氟菌胺、狄氏劑、蟲蟎睛、蟲蟎磷、乙酯殺蟎醇、B-硫丹、乙硫磷、PP-DDT、三唑磷、丙環唑、硫丹硫酸鹽、甲氧滴滴涕、炔蟎特、增效醚、戊唑醇、聯苯菊酯、溴蟎酯、亞胺硫磷、甲氰菊酯、伏殺硫磷、三氟氯氰菊酯、保棉磷、氯菊酯、蠅毒磷、氟氯氰菊酯、苯醚菊酯、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯、丙炔氟草胺、氰戊菊酯、氟胺氰菊酯、烯醯嗎啉、苯醚甲環唑、溴氰菊酯共103種。
6.根據權利要求2所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，所述的步驟4)中二維氣相色譜條件 一維柱為非極性柱30mX0. 25mmXO. 25um+5mXO. 25mm>5%diphenyl/95%dimethylpolysiloxane ； 二維柱為中極性柱 Rtx_200 2. OmX O. 18mmX O. 20um、trifluoropropylmethylpolysiloxane ； 載氣He，流速I. Oml/mL,進樣2uL，不分流進樣，進樣口溫度250°C ； 一維色譜柱升溫程序40°C保持lmin，以30°C / min的速度升至130°C，再以10°C /min的速度升至280°C保持10分鐘，整個運行時間為29分鐘； 二維色譜柱起始溫度比一維高15°C，55°C保持lmin，以30°C / min的速度升至145°C，再以10°C / min的速度升至295°C保持10分鐘； 數據機溫度比二維溫度高40°C，95°C保持lmin，以30°C / min的速度升至185°C，再以10°C / min的速度升至330°C保持10分鐘，調製周期為4s，其中熱吹O. 8秒，冷吹I. 2秒； 質譜條件質量分析器飛行時間質譜解析度1000 ;質量範圍lO-lOOOamu，採集速率每秒100張圖譜以上，離子源EI源。電離電壓70V ;離子源溫度250°C，傳輸線溫度280。。。
7.根據權利要求2所述的應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法，其特徵在於，所述的步驟I)中乙腈提取液劇烈震搖I分鐘。
全文摘要
本發明公開了一種應用膜分離和全二維氣相色譜-飛行時間質譜快速檢測中藥中農藥多殘留的方法。中藥樣品中的農藥殘留用乙腈提取，無機氧化鋁膜超濾分離，固相分散萃取淨化，全二維氣相色譜-飛行時間質譜檢測。全二維氣相色譜採用兩支極性不同的色譜柱對中藥基質中的基質和待測組分的進行正交分離，並在數據機的作用下進入飛行時間質譜完成定性定量檢測，外標法定量。本發明方法具有快速、簡便，靈敏度高、分離效果好，節省試劑、定性定量準確可靠等特點，解決了複雜基質如中藥中農藥殘留的分離及同時定性和定量的難題。
文檔編號G01N30/06GK102914608SQ201210453778
公開日2013年2月6日 申請日期2012年11月12日 優先權日2012年11月12日
發明者王雲鳳, 高健會, 劉暘 申請人:天津出入境檢驗檢疫局動植物與食品檢測中心