一種苦參鹼的提取方法
2023-06-08 02:46:01
一種苦參鹼的提取方法
【專利摘要】本發明提供一種從山豆根或苦參中提取苦參鹼的方法，該方法是以5%亞硫酸氫鈉溶液作為提取液，將提取液通過50nm超濾膜過濾，再通過分子印跡柱分離，該工藝簡單環保，提取效率高。
【專利說明】—種苦參鹼的提取方法
【技術領域】
[0001]本發明屬於醫藥加工生產領域，涉及一種苦參鹼的提取方法，尤其是從山豆根中提取苦參鹼。
【背景技術】
[0002]苦參鹼來源於山豆根、苦參、苦豆子等植物，是一類具有抗腫瘤、抗菌和抗病毒等多種藥理作用與功效的生物鹼。由於苦參鹼作為抗癌藥物而具有重大的開發價值，近年來備受:關注。
[0003]分子印跡技術是目前研究的熱點，是一種比較具有產業化價值的技術。目前，全世界至少有包括瑞典、日本、德國、美國、中國、澳大利亞、法國在內的幾十個國家、上百個學術機構和企事業團體在從事分子印跡聚合物(molecular imprinting polymers, MIPs)的研究和開發，發展如此迅速，主要因為它具有構效預定性、特異識別性的特點，分子印跡技術一般是將目標分子作為模板分子，選擇在官能團結構上與之相匹配的功能單體，讓兩者間發生共價作用或非共價作用，再加入交聯劑通過熱聚合或光聚合，在引發劑的致孔劑的誘發下產生聚合反應，從而形成包裹有目標分子的高聚物，即分子印跡聚合物(MIPs)，隨後，利用物理或者化學方法，將目標分子從聚合物內部洗脫出來，以此獲得具有與目標分子形狀相同且官能團位置一定的記憶空穴。
[0004]目前苦參鹼的生產工藝主要是溶劑提取法，其工藝繁瑣，收率低，汙染嚴重。超聲波提取(也稱為超聲波萃取)以其提取溫度低、提取率高、提取時間短的獨特優勢被應用於中藥材和各種動、植物有效成分的提取，是替代傳統工藝方法實現高效、節能、環保式提取的現代高新技術手段。關於超聲提取苦參鹼的報導，目前只涉及相關參數的調整，如超聲功率、頻率、溶劑和時間等。
【發明內容】
[0005]本發明的目的在於克服上述技術問題，提供一種從山豆根或苦參中提取苦參鹼的方法。
[0006]本發明的目的是通過如下技術方案實現:
一種苦參鹼的提取方法，其特徵在於包括以下步驟:
(O苦參鹼分子印跡的製備:
將廣1.5_01苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在5~10ml氯仿中，置於0°C下保持30min,然後加入15~30mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與15~30mmol N-異丙基丙烯醯胺和4(Tl00mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣IOmin,封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，裝載固相萃取柱；
(2)苦參鹼溶液的提取:
將山豆根或苦參藥材以水作為提取媒介，超聲提取，再將提取液過50nm超濾膜；(3)苦參鹼分子印跡固相萃取柱對苦參鹼的提取分離:
將過膜後的提取液加熱至50°C，加載在固相萃取柱上，先用50°C水洗脫雜質，再用25 °C水洗脫苦參鹼。
[0007]本發明還可以用5%亞硫酸氫鈉溶液作為提取媒介，可將藥材中氧化苦參鹼(0ΜΤ)、氧化槐果鹼(OSC)及槐果鹼(SC)還原為苦參鹼(MT)，從而提高收率，見圖1。色譜條件:島津LC-20A，LC-20AT泵，SPD-20A檢測器，SIL-20進樣器；LCsoluton色譜工作站；檢測波長為 220nm ;色譜柱:GL Sciences Inertsil ODS-SP 5 μ m 4.6X 250mm ;流動相條件:甲醇:乙腈:乙醇:0.1%磷酸溶液(42:36:10:12)。
[0008]本發明將提取液用50nm超濾膜處理，可將大部分雜質去除的同時對苦參鹼的損失較少，見圖2 ;含苦參鹼123.94g的提取液20L，通過50nm陶瓷膜後，回收120.36g，收率為97.11%。膜分離設備:型號TGMF 1904-1-3，廈門市天泉鑫膜科技有限公司；流動相條件:異丙醇:乙腈:0.1%磷酸(74:18:8)為流動相；檢測波長為210nm。
[0009]本發明製備的苦參鹼分子印跡材料，先用熱水(38°C以上)洗脫吸附在分子印跡上的雜質，再用冷水(低於38°C)是聚合物發生容張，從而對於苦參鹼的特異性吸附轉變為非特異性吸附，利於苦參鹼的解吸。8mmol/L濃度下25°C和50°C時，分子印跡聚合物對苦參鹼的吸附量見圖3。
[0010]本發明公開的一種苦參鹼的提取方法，工藝綠色環保，沒有用到任何有機試劑，利用膜分離設備去除雜質後，通過分子印跡SPE柱，調節洗脫劑溫度，即可獲得純度較高的苦參鹼水溶液。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0011]圖1水和5%亞硫酸氫鈉溶液作為提取媒介對比液相色譜圖 圖2超濾前後對比液相色譜圖
圖3 8mmol/L濃度下25°C和50°C時，分子印跡聚合物對苦參鹼的吸附量 圖4分子印跡SPE柱洗脫色譜圖
【具體實施方式】
[0012]下面結合實施例對本發明做進一步描述:
實施例1
分子印跡的製備
將1.5mmol苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在IOml氯仿中，置於(TC下保持30min,然後加入30mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與30mmol N-異丙基丙烯醯胺和IOOmg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣lOmin，封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，即得。
[0013]實施例2
分子印跡固相萃取柱的製備
將1.2mmol苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在5ml氯仿中，置於0°C下保持30min,然後加入15mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與15mmol N-異丙基丙烯醯胺和40mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣IOmin,封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，將洗脫乾淨的分子印跡材料裝於固相萃取柱，即得苦參鹼分子印跡萃取柱。
[0014]實施例3
分子印跡固相萃取柱的製備
將Immol苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在6ml氯仿中，置於0°C下保持30min,然後加入25mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與25mmol N-異丙基丙烯醯胺和50mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣IOmin,封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，即得苦參鹼分子印跡聚合物MIP;將洗脫乾淨的分子印跡材料裝於固相萃取柱，即得苦參鹼分子印跡萃取柱。
[0015]MIP在8mmol/L時，在不同溫度下的吸附情況見圖3。
[0016]實施例4
取山豆根藥材500g，置於250W，40MHz超聲提取設備中，加入10倍量(V/W) 5%亞硫酸氫鈉溶液作為提取媒介，提取30min，將提取液過50nm超濾膜，將過膜後的提取液加熱至500C，裝載於包含200g苦參鹼分子印跡材料的SPE柱，先用40倍住體積的50°C水洗脫，再用30倍柱體積的25°C水洗脫，收率為87.3%，純度見圖4，流動相條件:甲醇:乙腈:乙醇:
0.1% 磷酸溶液(42:36:10:12)。
[0017]需要說明的是， 可調節洗脫劑50°C水的用量，控制收率及純度，亦可多次過柱提高純度，這並不限制本發明的範圍)。
【權利要求】
1.一種苦參鹼的提取方法，其特徵在於包括以下步驟: (O苦參鹼分子印跡的製備: 將1-1.5mmol苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在5_10ml氯仿中，置於O °C下保持30min,然後加入15_30mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與15_30mmol N-異丙基丙烯醯胺和40-100mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣IOmin,封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，裝載固相萃取柱； (2)苦參鹼溶液的提取: 將山豆根藥材以水作為提取媒介，超聲提取，再將提取液過50nm超濾膜； (3)苦參鹼分子印跡固 相萃取柱對苦參鹼的提取分離: 將過膜後的提取液加熱至50°C，加載在固相萃取柱上，先用50°C水洗脫雜質，再用25 °C水洗脫苦參鹼。
2.根據權利要求1所述的一種苦參鹼的提取方法，其特徵在於所述苦參鹼分子印跡的製備為: 將Immol苦參鹼與6mmol甲基丙烯酸溶解在6ml氯仿中，置於0°C下保持30min,然後加入25mmol 二甲基丙烯酸乙二醇酯與25mmol N-異丙基丙烯醯胺和50mg偶氮二異丁腈，混合後，通入氮氣，攪拌至完全溶解，通氮氣IOmin,封口，在65°C條件反應直至聚合完全，粉碎，過200目篩，用甲醇:乙酸(9:1)洗脫苦參鹼，即得。
3.根據權利要求1或2所述的一種苦參鹼的提取方法，其特徵在於所述提取媒介為5%亞硫酸氫鈉溶液。
【文檔編號】C08J9/26GK103739602SQ201310679953
【公開日】2014年4月23日 申請日期:2013年12月16日 優先權日:2013年12月16日
【發明者】王立升, 蔣敏捷, 劉旭, 江俊, 楊華, 周永紅 申請人:廣西大學