一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物及其製備方法和應用的製作方法

2023-06-07 22:25:26

專利名稱：一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物及其製備方法和應用的製作方法
技術領域：
本發明屬於中藥領域，涉及一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物及其製備方法和應用。
背景技術：
腫瘤細胞對抗腫瘤藥物的多藥耐藥(multidrug resistance, MDR)是導致腫瘤化學藥物治療失敗的常見因素。目前國內腫瘤患病率呈上升趨勢，並且90%的腫瘤患者的死亡在不同程度上受腫瘤細胞耐藥的影響，因此需要研製新一代耐藥逆轉劑。已知某些中藥具有鈣拮抗作用，且藥物作用較溫和，並能在逆轉MDR中提高化療效果，具有很好的應用和開發前景。研究結果表明多種機制參與腫瘤細胞多藥耐藥形成，主要包括細胞膜P-糖蛋白(Permeabi 1 ity-glycoprotein, P_gP)、多藥耐藥相關蛋白(Multidrug Resistance Associated Protein, MRP)的過度表達形成藥物外輸泵，使抗癌藥物在腫瘤細胞內蓄積下降；穀胱甘肽-S-轉移酶(GST)單獨或與穀胱甘肽(GSH) —起參與多種細胞毒代謝及解毒過程；與細胞凋亡相關的因子及基因如bcl-2，P53等異常。國內外針對上述環節進行了廣泛研究以尋求拮抗和/或逆轉腫瘤細胞MDR的藥物，體外被證實具有逆轉耐藥活性的化合物或生物製劑很多，但真正進入臨床研究的只有異博定、環孢菌素A等極少數，而且療效不理想。目前還沒有一種藥物或方法在臨床被廣泛接受，原因在於現有逆轉劑大多為「老藥新用」，逆轉耐藥往往不是其主要功能，臨床使用禁忌症多，毒副作用大；生物製劑在體內不穩定，難以作用到靶點且毒副反應多；臨床耐藥往往數種機制同時參與，只對單一機制起作用的逆轉劑難以發揮顯著的效應。其中對於中藥或有效單體成分研究而言，真正能結合臨床療效和中醫理論的研究少見。從中醫藥學上講，中藥協同化療治療惡性腫瘤研究已從「扶正」 「增效減毒」擴展到「抗癌增敏減毒」，並已明確提出中藥的綜合治療概念，假使經過臨床觀察療效確切的某種中藥，其既起到逆轉MDR活性，又能體現抗癌活性，並且兩重作用有機結合，將使其成為接近理想的腫瘤耐藥逆轉劑，體現出高效、低毒、靶點廣泛的特點。中國發明專利CN200710070320. 4公開了 「薑黃素在製備腫瘤多藥耐藥預防劑中的用途」，中國發明專利CN200710143393. 1公開了「青蒿素在製備抗腫瘤多藥耐藥藥物中的應用」；但目前有關作為腫瘤多藥耐藥逆轉劑的中藥組合物的報導較少。

發明內容
為了克服以上現有技術的不足，本發明的首要目的是提供一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。本發明的另一目的是提供上述逆轉腫瘤多藥耐藥中藥組合物的製備方法。本發明的目的還在於提供上述逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的應用。本發明的目的通過以下技術方案實現
一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物，由下述按重量份數計的中藥原料製備而成山豆根10 30份，白英10 30份，苦丁茶10 30份，側佰葉10 30份，葉子花 10 30份。優選地，上述逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物由下述按重量份數計的中藥原料製備而成山豆根12份，白英12份，苦丁茶18份，側佰葉12份，葉子花18份。所述逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備方法包括如下步驟(1)將山豆根10 30重量份，白英10 30重量份，苦丁茶10 30重量份，側佰葉10 30重量份與葉子花10 30重量份混合後加各中藥原料總重量9 10倍量水浸泡2 3小時，加熱煎煮1. 5 2小時，傾出煎煮液；藥渣再加各中藥原料總重量8 9倍量水加熱煎煮1 1. 5小時，傾出煎煮液，將兩次煎煮得到的煎煮液合併過濾，得到清液；(2)將清液濃縮至相對密度為1. 05 1. 06後進行噴霧乾燥，得到噴霧乾燥粉；將噴霧乾燥粉粉碎至細度為30 100目，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。所述步驟O)中的噴霧乾燥條件為進風溫度為140 160°C，出風溫度為100 110°c，霧化器轉速50 60轉/分鐘，進料速度為3 5ml/分鐘。上述中藥組合物可用於製備逆轉腫瘤多藥耐藥的藥物。本發明使用的中藥原料的功效如下山豆根味苦，性寒；有毒；歸肺、胃經；白英味苦，性微寒；有小毒；入肝、胃經；苦丁茶味甘，苦；性寒；歸肝；肺；胃經；側佰葉味苦、澀，性寒；歸肺、肝、脾經；葉子花性味苦，澀；性溫；歸肝經；本發明採用各種中藥原料配伍，起到清熱解毒功效，應用在腫瘤多藥耐藥患者治療中，可產生逆轉腫瘤多藥耐藥的作用，且該中藥組合物無毒副作用，起到提高化療藥物療效的有益作用。與現有技術相比，本發明具有如下有益效果實驗研究表明，本發明中藥組合物的血清與阿黴素聯合使用可使阿黴素對白血病細胞阿黴素耐藥株的半數抑制濃度IC5tl明顯下降，不同給藥濃度對白血病細胞阿黴素耐藥株的逆轉倍數為2. 87 4. 37，且呈濃度正相關，具有顯著的逆轉腫瘤多藥耐藥的作用。
具體實施例方式下面結合實施例對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限於此。實施例1逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備(1)稱取山豆根100g，白英300g，苦丁茶100g，側佰葉300g和葉子花100g，混合後
加各中藥原料總重量9倍量水浸泡2小時，加熱煎煮1.證，傾出煎煮液；藥渣再加各中藥原料總重量8倍量水加熱煎煮1.紐，傾出煎煮液，將兩次煎煮得到的煎煮液合併過濾，得到清液；(2)將清液濃縮至相對密度為1. 05時，送入噴霧乾燥器進行噴霧乾燥，進風溫度控制為140°C，出風溫度為100°C，霧化器轉速50轉/分鐘，進料速度為:3ml/分鐘，得噴霧乾燥粉30克；將噴霧乾燥粉粉碎至細度為100目，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。實施例2逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備(1)稱取中藥原料山豆根300g，白英100g，苦丁茶300g，側佰葉IOOg和葉子花 300g，混合後加各中藥原料總重量10倍量水浸泡3小時，加熱煎煮池，傾出煎煮液；藥渣再加各中藥原料總重量8倍量水加熱煎煮lh，傾出煎煮液，將兩次煎煮得到的煎煮液合併過濾，得到清液；(2)清液濃縮至相對密度為1. 05時，進噴霧乾燥器，進風溫度控制140°C，出風溫度10(TC，霧化器轉速50轉/分鐘，進料速度為:3ml/分鐘，得噴霧乾燥粉50克；將噴霧乾燥粉粉碎至細度為80目，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。實施例3逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備(1)稱取中藥原料山豆根120g，白英120g，苦丁茶180g，側佰葉120g，葉子花 180g，混合後加各中藥原料總重量9. 5倍量水浸泡2. 5小時，加熱煎煮池，傾出煎煮液；藥渣再加各中藥原料總重量9倍量水加熱lh，傾出煎煮液，將兩次煎煮得到的煎煮液合併過濾，得到清液；(2)清液濃縮至相對密度為1. 06時，進噴霧乾燥器，進風溫度控制160°C，出風溫度110°C，霧化器轉速60轉/分鐘，進料速度為5ml/分鐘，得噴霧乾燥粉30克；將噴霧乾燥粉粉碎至細度為30目，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。實施例4實施例1製備的中藥組合物用於逆轉多藥耐藥細胞系K562/ADR耐藥性的實驗結果如下阿黴素是一種抗腫瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，對RNA的抑制作用最強， 對多種腫瘤均有作用，屬周期非特異性藥物，對各種生長周期的腫瘤細胞都有殺滅作用。本實施例中白血病細胞K562/S為敏感株，K562/ADR為白血病細胞阿黴素耐藥株， 其中K562/ADR是由K562/S細胞接觸遞增濃度的阿黴素(ADR)誘導而成，具有典型多藥耐藥性。細胞株均培養於含10%小牛血清的RPMI-1640培養液中。含藥血清製備NIH小鼠適應性飼養3天後，稱重，根據隨機數目表隨機分為高劑量組、中劑量組、低劑量組、空白組共4組，每組10隻；高劑量組的小鼠按本中藥組合物 40g/kg灌胃給藥，中劑量組按20g/kg灌胃給藥，低劑量組按10g/kg灌胃給藥；空白對照組以生理鹽水灌胃；給藥濁後，取血離心分離血清，56°C 30min滅活，用RPMI-1640配製不同濃度的血清培養液。逆轉耐藥的MTT檢測取對數生長期細胞，K562/ADR細胞以lX105/ml、K562/S以0. 5X105/ml的濃度分別接種於96孔培養板，100 μ 1/孔。在37°C和5% CO2條件下培養過夜後，加不同濃度的含藥血清和ADR共100μ 1，空白組加相應體積的培養液，每組設4個平行孔。培養7 後， 每孔加5mg/ml噻唑藍(MTT) 20 μ 1，再培養4h，傾去培養液，加二甲基亞碸(DMSO) 100 μ 1/ 孔，待完全溶解後，用酶聯免疫儀在波長570nm處空白組調零後讀取吸光度(A)值；取4孔 A值的均數，求出半數抑制濃度(IC5tl，細胞抑制率為50%時的藥物濃度)；逆轉倍數=空白組IC5tl/試驗組IC5tl。表1實施例1製備的中藥組合物對K562/ADR耐藥株的逆轉作用
權利要求
1.一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物，其特徵在於該中藥組合物由下述按重量份數計的中藥原料製備而成山豆根10 30份，白英10 30份，苦丁茶10 30份，側佰葉 10 30份，葉子花10 30份。
2.根據權利要求1所述的一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物，其特徵在於該中藥組合物由下述按重量份數計的中藥原料製備而成山豆根12份，白英12份，苦丁茶18份， 側佰葉12份，葉子花18份。
3.根據權利要求1所述的逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備方法，其特徵在於包括如下步驟(1)將山豆根10 30重量份，白英10 30重量份，苦丁茶10 30重量份，側佰葉 10 30重量份與葉子花10 30重量份混合後加入各中藥原料總重量9 10倍量的水浸泡2 3小時，加熱煎煮1. 5 2小時，傾出煎煮液；藥渣再加各中藥原料總重量8 9 倍量的水加熱煎煮1 1. 5小時，傾出煎煮液，將兩次煎煮得到的煎煮液合併過濾，得到清液；(2)將清液濃縮至相對密度為1.05 1. 06後進行噴霧乾燥，得到噴霧乾燥粉；將噴霧乾燥粉粉碎至細度為30 100目，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。
4.根據權利要求3所述逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物的製備方法，其特徵在於所述步驟( 中的噴霧乾燥條件為進風溫度為140 160°C，出風溫度為100 110°C，霧化器轉速50 60轉/分鐘，進料速度為3 5ml/分鐘。
5.根據權利要求1或2所述的中藥組合物在製備逆轉腫瘤多藥耐藥藥物中的應用。
全文摘要
本發明屬於中藥領域，公開一種逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物及其製備方法和應用。該中藥組合物由下述按重量份數計的中藥原料製成山豆根10～30份，白英10～30份，苦丁茶10～30份，側佰葉10～30份，葉子花10～30份；將所述重量份數的中藥原料混合後加水浸泡2～3小時，加熱煎煮後傾出煎煮液，再加水加熱煎煮並傾出煎煮液，煎煮液合併後過濾，得到的清液經濃縮、噴霧乾燥、粉碎後過篩，得到逆轉腫瘤多藥耐藥的中藥組合物。本發明中藥組合物的血清與阿黴素聯合使用可使阿黴素對白血病細胞阿黴素耐藥株的半數抑制濃度明顯下降，逆轉倍數為2.87～4.37，且呈濃度正相關，具有顯著的逆轉腫瘤多藥耐藥的作用。
文檔編號A61K36/81GK102397398SQ20111037716
公開日2012年4月4日 申請日期2011年11月23日 優先權日2011年11月23日
發明者張榮華, 蔡宇 申請人:暨南大學