超臨界二氧化碳提取當歸和川芎混合物中的總生物鹼的方法
2023-07-03 19:56:51 5
專利名稱：超臨界二氧化碳提取當歸和川芎混合物中的總生物鹼的方法
技術領域：
本發明涉及傳統中草藥領域，具體涉及超臨界C02提取當歸和川芎中 的總生物鹼的方法。
背景技術：
當歸為傘形科植物當歸j"ge"o7w7im'^(01iv.)Diels的乾燥根。當 歸歸肝、心、脾經，藥性甘、辛、溫，具有補血活血，調經止痛，潤腸通 便的作用。用於血虛萎黃，眩暈心悸，月經不調，閉經痛經，虛寒腹痛， 腸燥便秘，風溼痺痛，跌打損傷，癰疽瘡瘍。主產於我國甘肅岷縣。此外， 四川、陝西、雲南、湖北等省亦有少量栽培。當歸是傳統中藥，臨床應用 廣泛，有效部位及藥理作用明確。近年來，國內外學者採用了植物化學、 分子生物學、生物化學、藥理學等技術，開展了當歸的化學成分及藥理學 研究，取得長足進展，為當歸的應用提供了依據。
川芎為傘形科植物h'gw"cwwc/^fl/o:/o/igHort.的乾燥根莖，具有行氣 活血、祛風止痛的功效。為活血化瘀常用中藥。其化學成分的研究，國內 外報導較多。川芎主要成分的藥理學研究表明總生物鹼為川芎的主要有效 部位。
當歸與川芎中含有的總生物鹼具有擴張血管、降低血壓、抗血小板聚 集、改善微循環等作用，是其發揮藥效的主要的有效部位。
由於當歸、川芎同屬一科，有著傘形科植物共同的植物分類學特徵， 有著相似的化學成分，有著相似的功能主治，常在活血和血的處方中同時 出現，常作為藥對來應用，且應用十分廣泛，2005版藥典所載513首複方 成方製劑中有49首當歸與川芎同用的處方。
現有技術提取總生物鹼的方法有溶劑提取法、酸提鹼沉法等，這些方 法提取工藝複雜，提取物中總生物鹼的含量不高且含有大量的雜質，往往 需要進行進一步的純化，並且在其提取的過程中需要大量的有機溶劑或酸
鹼試劑。
超臨界C02提取總生物鹼的方法則可以解決上述的問題。
發明內容
為解決現有技術中提取總生物鹼的方法的缺點，本發明對當歸與川芎 進行了合提與分提的比較研究後，採用將當歸和川芎藥對混合物進行超臨 界C02提取法，並以提取物中總生物鹼含量為考察指標，對影響總生物鹼
提取工藝的因素進行了研究，優選出當歸和川芎中總生物鹼的最佳超臨界
萃取條件；經該工藝得到的提取物的總生物鹼的含量可達40 52%。
超臨界C02提取當歸和川芎藥對混合物中的總生物鹼成分，需先進行
鹼化，鹼化劑的選擇是非常重要的環節。常用的有三種鹼化劑氫氧化鈣、 氨水以及三乙胺，其中氨水的鹼化效果較好。因此，本發明選擇1 30%
氨水溶液作為鹼化劑。同時為消除含水量對C02的超臨界狀態可能造成的
影響，還考慮增加夾帶劑，本發明選擇以70% 100%乙醇為夾帶劑。 本發明的技術方案是
提供一種超臨界C02提取當歸和川芎混合物中的總生物鹼的方法，其
特徵在於，所述超臨界C02的提取條件為萃取溫度為60 80°C，萃取壓 力為30 40MPa， C02流速為20 50L/h，萃取時間為1.0 2.0h，夾帶劑 為70% 100%乙醇，鹼化劑為1 30%氨水溶液，分離釜I溫度40 55°C， 壓力6 10Mpa，分離釜II溫度30 40°C，壓力4.0 6.0Mpa。
優選地，所述超臨界C02的提取條件為萃取溫度為65 75°C，萃取 壓力為32 38MPa， C02流速為30 45L/h，萃取時間為1.2 1.8h，夾帶 劑為90% 無水乙醇，鹼化劑為5 25%氨水溶液，分離釜1溫度40 50°C， 壓力7 9Mpa，分離釜II溫度32 38°C，壓力4,5 5.5Mpa。
更優選地，所述超臨界C02的提取條件為萃取溫度為70。C，萃取壓 力為35MPa， C(V流速為40L/h，萃取時間為1.5h，夾帶劑為無水乙醇， 鹼化劑為15%氨水溶液，分離釜I溫度45°C，壓力8 Mpa，分離釜II溫度 35°C，壓力5.0Mpa。
其中，所述夾帶劑的用量為50 200ml /100g生藥，所述鹼化劑的用 量為20 100ml/100g生藥，優選為80 180ml/100g生藥，所述鹼化劑的
用量為30 80ml/100g生藥，更優選為150ml /100g生藥，所述鹼化劑的 用量為50ml/100g生藥。
本發明還提供由該方法得到的總生物鹼提取物，其中總生物鹼的含量 為40 52%。
按照本發明方法得到的提取物中總生物鹼的含量測定方法如下 標準曲線的製備
對照品溶液的製備精密稱取乾燥至恆重的川芎嗪對照品40mg，置 於20ml具塞試管中，氯仿定容至10ml，再加入磷酸鹽緩衝液(pH5.8)5ml， 溴麝香草酚蘭lml，振搖，靜置使分層，分別吸取下層液4.0、 5.0、 6.0、 7.0、 8.0ml，氯仿定容至10ml。空白溶液的製備取20ml具塞試管，不 加川芎嗪對照品，加氯仿10ml，再加入磷酸鹽緩衝液(pH5.8)5ml，溴麝 香草酚蘭lml，振搖，靜置使分層，取下層氯仿層液作空白對照。
取上述對照品溶液及空白溶液，於415nm波長處測定其吸光度值。以 對照品溶液的濃度為橫坐標(X)，以相應的吸光度A為縱坐標(Y)，得回歸 方程Y=0.3304X-0.1523，相關係數Y =0.9995。川芎嗪的標準曲線如圖l 所示。
供試品溶液的製備精密稱取超臨界提取物100mg，置於10ml棕色 容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，精密吸取5ml，置於15ml具塞試管中，用 氯仿定容至10ml，再加入磷酸鹽緩衝液(pH5.8)5ml，溴麝香草酚蘭lml， 振搖，取下層氯仿層液，作為供試品溶液。
含量測定分別取空白溶液、供試品溶液，於415nm波長處測定其吸 光度值，以標準曲線法計算超臨界提取物中總生物鹼的含量。
採用本發明方法提取當歸與川芎混合藥材中的總生物鹼，具有低溫操 作、耗能低、時間短、無有機殘留等優點，所得固含物量少，總生物鹼的 含量達到48 52%。該提取物可作為當歸與川芎藥對的有效部位進一步開 發製劑產品。
圖1是川芎嗪的標準曲線。
具體實施方式
實施例1:
將當歸與川芎的混合藥材(l:l)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為15%的氨 水溶液100ml，夾帶劑為無水乙醇300ml。萃取條件為萃取釜溫度70。C， 壓力35MPa;分離釜I溫度45°C，壓力8MPa;分離釜II溫度35°C，壓力 5.0MPa; CO2流速為40L/h;萃取時間為1.5h，得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 52%。
實施例2:
將當歸與川芎的混合藥材(1:2)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為1%的氨水 溶液200ml，夾帶劑為80。/。乙醇400ml。萃取條件為萃取釜溫度75。C， 壓力30MPa;分離釜I溫度5(TC，壓力10MPa;分離釜II溫度4(TC，壓力 6.0MPa; C02流速為50L/h;萃取時間為l.Oh，得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 50%。
實施例3:
將當歸與川芎的混合藥材(1:0.5)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為30%的氨 水溶液40ml，夾帶劑為90%乙醇100ml。萃取條件為萃取釜溫度65。C， 壓力40MPa;分離釜I溫度4(TC，壓力6MPa;分離釜II溫度30°C，壓力 5.5MPa; C02流速為30L/h;萃取時間為2.0h，得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 49%。
實施例4:
將當歸與川芎的混合藥材(1:5)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為8%的氨水 溶液60ml，夾帶劑為70%乙醇160ml。萃取條件為萃取釜溫度60°C， 壓力38MPa;分離釜I溫度48°C，壓力9MPa;分離釜II溫度38°C，壓力 5.5MPa; C02流速為45L/h;萃取時間為1,5h，得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 47%。
實施例5:
將當歸與川芎的混合藥材(1:0.2)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為22%的氨 水溶液160ml，夾帶劑為無水乙醇200ml。萃取條件為萃取釜溫度8(TC， 壓力32MPa;分離釜I溫度55°C，壓力7MPa;分離釜II溫度35°C，壓力 5.0MPa; C02流速為20L/h;萃取時間為1.5h,得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 45%。
實施例6:
將當歸與川芎的混合藥材(1:3)粉末(40目)200g投入超臨界萃取裝 置的1L的萃取釜中，用超臨界C02進行萃取。採用的鹼化劑為10%的氨 水溶液80ml，夾帶劑為75。/。乙醇350ml。萃取條件為萃取釜溫度75匸， 壓力35MPa;分離釜I溫度35°C，壓力8MPa;分離釜II溫度35°C，壓力 5.0MPa; C02流速為45L/h;萃取時間為1.5h，得到超臨界提取物。經該 工藝得到的超臨界提取物經酸性染料比色法測定，總生物鹼的含量為 48%。
權利要求
1. 超臨界CO2提取當歸和川芎混合物中的總生物鹼的方法，其特徵在於，所述超臨界CO2的提取條件為萃取溫度為60～80℃，萃取壓力為30～40MPa，CO2流速為20～50L/h，萃取時間為1.0～2.0h，夾帶劑為70％～100％乙醇，鹼化劑為1～30％氨水溶液，分離釜I溫度40～55℃，壓力6～10Mpa，分離釜II溫度30～40℃，壓力4.5～6.0Mpa。
2. 如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述夾帶劑的用量為50 200ml/100g生藥，所述鹼化劑的用量為20 100ml/100g生藥。
3. 如權利要求1所述的方法，其特徵在於，所述超臨界C02的提取條件 為萃取溫度為65 75。C，萃取壓力為32 38MPa， CO2流速為30 45L/h， 萃取時間為1.2 1.8h，夾帶劑為90% 100%乙醇，鹼化劑為5 25%氨水 溶液，分離釜I溫度40 50。C，壓力7 9 Mpa，分離釜II溫度32 38。C ， 壓力4.5 5.5Mpa。
4. 如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述夾帶劑的用量為80 180ml /100g生藥，所述鹼化劑的用量為30 80ml/100g生藥。
5. 如權利要求3所述的方法，其特徵在於，所述超臨界C02的提取條件 為萃取溫度為70。C，萃取壓力為35MPa， CO2流速為40L/h，萃取時間為 1.5h，夾帶劑為無水乙醇，鹼化劑為15%氨水溶液，分離釜I溫度45。C，壓 力8Mpa，分離釜II溫度35。C，壓力5.0Mpa。
6. 如權利要求5所述的方法，其特徵在於，所述夾帶劑的用量為150ml /100g生藥，所述鹼化劑的用量為50ml/100g生藥。
7. 由權利要求1 6所述方法得到的總生物鹼提取物。
8. 如權利要求7所述的總生物鹼提取物，其特徵在於，其中總生物鹼 的含量為40 52%。
全文摘要
本發明提供一種超臨界CO2提取當歸和川芎混合物中的總生物鹼的方法，其特徵在於，所述超臨界CO2的提取條件為萃取溫度為60～80℃，萃取壓力為30～40MPa，CO2流速為20～50L/h，萃取時間為1.0～2.0h，夾帶劑為70％～100％乙醇，鹼化劑為1～30％氨水溶液，分離釜I溫度40～55℃，壓力6～10MPa，分離釜II溫度30～40℃，壓力4.5～6.0MPa。
文檔編號A61K36/236GK101380342SQ20071004568
公開日2009年3月11日 申請日期2007年9月6日 優先權日2007年9月6日
發明者楊義芳, 玫 許 申請人:上海醫藥工業研究院