一種治療認知功能障礙的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法

2023-05-31 19:14:16

專利名稱：一種治療認知功能障礙的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物，該藥物組合物主要由原料藥三七和桅子組成，具有 治療和緩解認知功能障礙或低下的作用，尤其是治療和緩解老年痴呆、血管性痴呆、輕度認 知障礙症或健忘症的作用，屬於中藥技術領域。
背景技術：
認知功能障礙是輕度認知障礙(Mild Cognitive Impairment，MCI)、痴呆和健忘 症的共有核心症狀，嚴重影響患者生活。MCI是介於正常衰老認知功能減退與極輕度阿爾 茨海默病(Alzheimer，s disease,AD)和血管性痴呆(vascular dementia,VD)的過度性、 痴呆前期的病理狀態，是認知障礙的最早期階段，首次報導見於1990年，以獲得性認知功 能障礙，但不伴有顯著的日常生活能力下降為特徵。MCI患病率波動在3% 20%，也有認 為在20 % 30 %，平均每年有10 % 15 %的MCI發展為痴呆，其診斷主要依賴於臨床評估 和神經影像學手段。目前MCI主要分為遺忘型(aMCI)、多認知域遺忘型(md-aMCI)、多認知 域非遺忘型(md-naMCI)和單一非記憶障礙型(single non-memory MCI，s-nmMCI)幾種。 年齡是MCI發病的基礎，高脂血症、動脈硬化、高血壓、冠心病、糖尿病和心腦血管病是導致 MCI高發的基礎疾病，現代認為，MCI的發病與中樞膽鹼能缺陷密切相關，MCI患者左丘腦的 血流灌注顯著低於健康老人，且神經纖維纏結密度顯著高於非認知障礙對象。Celsis等研 究指出情景記憶障礙是記憶障礙最敏感和最早的症狀，是早期診斷AD的敏感預測因子，也 是MCI最突出的神經心理學表現。可見記憶障礙是MCI和AD早期的核心症狀，故改善記 憶障礙可以作為MCI研究的核心內容。目前的研究認為，遺忘型輕度認知障礙更容易發展 成為AD，其中年齡和簡易精神狀況檢查量表(Mini-Mental State Examination, MMSE)是 早期關鍵性的標識，故被認為是AD的早期預警。AD已經成為所有年齡段人群的第7位致 死原因和65歲及以上人群的第5位致死原因。從國際現狀看，AD是痴呆的最主要類型， 約佔60% 80%，血管性痴呆(vascular dementiame, VD)具第2位，約佔15 % 20 %， 亞洲多數家VD佔痴呆性疾病的第一位，我國情況與國際情況相當，也有認為我國VD約佔 60%, AD約佔30%，其餘為混合性痴呆。通常情況下，AD患者從正常腦功能到痴呆形成可 分為症狀前階段、臨床前階段、輕度痴呆、中度痴呆和重度痴呆5個階段。由於目前對於AD 的治療策略還只是改善症狀，如能在AD的臨床前階段即能進行早期幹預，則有助於減緩或 逆轉痴呆的腦功能損害。在此背景下，MCI成為近年來研究AD的熱點之一。就目前研究來 看，呈現出臨床研究多，實驗研究少，臨床觀察多，治療研究少的特點。Peterson等於1999 年提出的MCI的診斷標準得到大多數研究者的認可，該診斷標準包括以下6個方面，S卩(1) 存在由患者自己、家屬或知情人提供的記憶主訴；(2)記憶測驗成績低於年齡和文化程度 匹配的正常對照1.5個標準差；(3)總體認知分級量表輕度異常，即總體衰退量表(global deterioration scale，GDS) 2 3 級或臨床痴呆評定量表(clinical dementia rating， ⑶R)0. 5分；(4) 一般認知功能正常(5)日常生活能力保持正常；(6)除外痴呆或任何可以 導致腦功能紊亂的軀體和精神疾患。國內以王永炎院士和田金洲教授為首的「首都醫學發展基金輕度認知損害聯合攻關項目組」於2008年提出了 MCI臨床研究指導原則，極大的促 進了我國輕度認知障礙的臨床診療水平和研究。但目前由於MCI動物模型的缺乏，實驗研 究國內外均處於探索階段。中醫沒有「輕度認知障礙」的提法，但根據臨床表現，可歸屬於「健忘」、「呆病」、「善 忘」、「神病」、「文痴」等病範疇。早在上世紀80年代，王永炎院士就指出，「毒邪」和「絡病」 可以作為痴呆深入研究的切入點，並於2005年明確提出了 AD 「毒損腦絡」病機新認識，認 為「毒損腦絡」是AD發生發展的核心，貫穿病理演變的全過程，為Alzheimer病的研究和治 療提供了全新的視覺。從痴呆和MCI發病來看，年齡因素是二者發病一個十分關鍵的因素， MCI介於正常老化和痴呆之間，「髓消腦減」是老年的一個基本生理變化過程，也是AD和MCI 的病機基礎。隨著年齡增長，腦血管硬化，腦絡的運載功能受損，腦微血管通透性降低，氣血 等營養物質輸送功能減弱，導致腦神經細胞能量供應不足，不養則功能減退；腦神經細胞缺 血缺氧，產生大量的自由基和代謝物質，這些物質一則損傷血管內皮細胞，導致相關腦區微 血管灌流障礙，加重微循環瘀滯，造成神經元等功能單位的生理機能損傷，一則作用神經膠 質細胞，導致膠質細胞水腫變性，一則導致神經膠質細胞和神經元的嚴重損害，最終使腦神 經細胞凋亡和突觸功能減退或缺失，膽鹼能神經受損，Ach合成/釋放障礙，各種因素互為 因果，形成惡性循環，最終導致MCI。由此可見，「髓消腦減」是MCI的病機基礎，腦絡瘀滯痺 阻是MCI的核心環節，氧化因子等是MCI發病和進展的重要條件。中藥複方是根據中醫藥理論的作用機理，選用不同的組方，採用多種分析手段，從 多方位、多角度，全面而客觀地闡述了中藥複方製劑的促智作用。根據臨床經驗及實驗研 究，選項出的有效中藥複方有補腎益智方是老年性痴呆的主要生化指標、中藥補腎益智方 具有補腎、益氣、生髓、養腦作用，其含藥血清能有效地保護由澱粉樣蛋白引起的這些改變； 丹桅逍遙散使模型大鼠腦能量負荷、蛋白質、糖醛還原酶信使含量降低；使模型的腦蛋白 質、糖醛還原酶信使含量回升，減輕物質代謝障礙。中醫藥治療老年性痴呆已經積累了豐富 的經驗，具有整體調理、綜合施治的優點，且毒副作用少，適宜長期服用，同時在保健預防及 調暢情志等方面有許多獨到之處，形成了較為系統的理論。但目前還存在一些不足，主要表 現在許多臨床研究中沒有採用統一的診斷、分型、療效評定標準，在組方、選藥、劑量上因人 而異，無法規範。治療老年性痴呆應以早期診斷預防為主，並早日開發出療效確切的系列藥 物，促使中醫藥治療老年性痴呆的研究深入化和科學化，提高中醫藥治療老年性痴呆的臨 床療效，以造福人類。隨著人口的老齡化以及疾病譜的改變中醫中藥在防治老年性痴呆的 前景會越來越廣闊。三七桅子配伍方是王永炎院士根據自己多年腦科臨床經驗總結提煉的治療認知 障礙的經驗組方，臨床適用於神經退行性病變而導致的認知功能障礙諸症，可用於早期老 年痴呆、血管性痴呆和輕度認知障礙等病的治療。方中三七活血補血充絡、活血通絡、養血 益智為君，桅子解毒益智為臣，兩藥合用，共奏通絡益智的效用。三七為五加科植物三七 Panax notoginseng (Burk.) F. H. Chen的根，具有散瘀止血、消腫定痛的功效。《本草綱目拾 遺》中記載「人參補氣第一，三七補血第一，味同而功亦等，故稱人參三七，為中藥中之最珍 貴者」；《玉揪藥解》記載三七能「和營止血，通脈行瘀，行瘀血而劍新血」；《醫學衷中西錄》
記載三七「善化瘀血......病癒後不至瘀血留於經絡，證變虛勞」；1912年版《中國醫藥
大辭典》記載「三七功用補血，去瘀損，止血紐，能通能補，功效最良，是方藥中之最珍貴者。三七生吃，去瘀生新，消腫定痛，並有止血不留瘀血，行血不傷新的優點；熟服可補益健體」。 現代藥理研究證三七具有延緩衰老、擴張血管，改善微循環，促進蛋白質、核糖核酸(RNA)、 脫氧核糖核酸(DNA)合成，雙向調節中樞神經，提高腦力，增強學習和記憶能力等作用；PNS 及Rgl、Rbl和Rl等具有增強學習記憶、抗痴呆、改善腦部供血等作用。桅子為茜草科常綠 灌木植物桅子Gardenia jasminoides Ellis的成熟果實，具有瀉火除煩、清熱利溼、涼血解 毒、消腫止痛的功效，現代研究證實桅子具有降血脂、降壓、防治動脈粥樣硬化、抗痴呆、益 智等作用，GD是其主要的藥效物質基礎。目前尚無文獻報導僅僅由三七和桅子兩味原料藥製備成製劑，尤其是將這三種藥 合用用於治療中樞神經系統退行性病變，未見相關研究。

發明內容
本發明的目的在於提供一種藥物組合物，該藥物組合物主要由三七和桅子組成， 具有治療和緩解認知功能障礙或低下的作用，尤其是治療和緩解老年痴呆、血管性痴呆、輕 度認知障礙症或健忘症的作用。優選地，本發明藥物組合物中，所述的主要原料藥三七和桅子的重量配比為三七 1-15份，桅子1-15份；更為優選地，所述主要原料藥的重量配比為三七1-12份，桅子1-12 份，更優選為三七8-12份，桅子8-12份，更優選為三七6-10份，桅子6_10份。本發明的目的還在於提供一種製備本發明藥物組合物的活性成分的製備方法，制 備本發明藥物組合物的活性成分時，先從原料藥中製備獲取三七總皂苷和桅子苷，按照特 定比例混合均勻，即得藥物組合物活性成分，混合後的活性成分加入製藥上可接受的輔料， 以製劑常規技術製備所需的藥物單元劑型，如可以是顆粒、片劑、膠囊、滴丸、口服液、混懸 液、乳濁液、注射液等臨床所需的劑型。或者，本發明主要原料藥組合物的活性成分的提取製備方法可以是取處方量的 原料藥，粉碎合併後，以水或與水相互溶的有機溶劑提取1-4次，過濾，合併各次提取濾液， 濾液減壓濃縮後的活性成分提取物清膏，備用；提取物清膏加入製藥上可接受的賦形劑，混 合均勻，以製劑常規技術製備所需的藥物單元劑型。本發明中，所用的能夠與水相互溶的有機溶劑，可以是選自與水相互溶的甲醇、乙 醇、丙酮中的任意一種，優選為與水相互溶的乙醇，更優選為濃度為30% -80%的乙醇。本發明中，所用的提取方法可以是煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超聲提取或滲 漉提取中的任意一種方式，或者採用不同提取方法的組合。本發明中，製藥上可接受的賦形劑，是本領域技術人員所熟知的常用賦形劑，根據 製成不同製劑的需要，本領域技術人員可以從這些常規的賦形劑中做出選擇，以製備成所 需的單元劑型，所選用的賦形劑包括但不局限於填充劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、防腐劑寸。在本發明一實施例中，給出了不同比例的本發明藥物組合物用於抗認知功能障礙 小鼠模型的實驗研究，從而得出本發明原料藥組合物較為優選的原料藥的配比範圍。在本發明其它實施例中，給出了本發明主要原料藥較優配比的提取物成分用於抗 東莨菪鹼致認知功能障礙模型小鼠、抗慢性腦缺血致認知功能障礙模型大鼠、「寒凝血瘀」 證模型大鼠和對小鼠軟腦組織循環的藥理實驗，證明本發明藥物組合物可用於認知功能障礙相關病變的治療。本發明中，藥物組合物的形式還可以是從三七和桅子中提取出有效部位群進行部 位群的組合配比以用於治療認知功能障礙，尤其是老年痴呆、血管性痴呆、輕度認知障礙和 健忘症的治療和緩解改善。本發明中，從主要原料藥三七和桅子中提取的有效部位群分別 為三七總皂苷和桅子苷，其中各有效部位群間的重量配比為三七總皂苷1-15份，桅子苷 1-15份，優選為三七總皂苷2-8份，桅子苷1-6份，更優選為三七總皂苷3-6份，桅子苷1_3 份，最優選為三七總皂苷5份、桅子苷2份。製備本發明所述三七總皂苷和桅子苷的方法，對於本領域的技術人員來說，通過 現有文獻中公開的技術，是容易實現的，通過現有技術的任何方法，只要能提取製備得到本 發明所述的三七總皂苷和桅子皂苷，都可以用於本發明。當然，本發明所用的三七總皂苷和 桅子苷，也可以是市售的成品。本發明中，藥物組合物的形式還可以是從三七和桅子中提取出單一活性成分進行 單一活性成分組合配比以用於治療認知功能障礙，尤其是老年痴呆、血管性痴呆、輕度認知 障礙和健忘症的治療和緩解改善。本發明中，從主要原料藥三七和桅子中提取的單一活性 成分分別為三七皂苷Rgl和桅子苷，其中單一活性成分間的重量配比為三七皂苷Rgll-IO 份，桅子苷1-10份，優選為三七皂苷Rgl2-5份、桅子苷2-5。在本發明實施例中，還給出了優選的三七皂苷Rgl、桅子苷對認知障礙模型的藥理 研究。


圖1為PNS與⑶配伍對小鼠學習記憶功能的影響圖。圖2為SZ對小鼠避暗和跳臺潛伏期和錯誤次數的影響圖。圖3為SZ對各組大鼠典型有用軌跡圖，其中A為假手術組，B為模型對照組，C為 尼莫地平對照組，D為SZ高劑量組，E為SZ中劑量組，F為低劑量組，G為PNS組，I為⑶組。圖4為SZ對慢性腦缺血學習記憶障礙模型腦及海馬組織病例形態切片圖，其中A 為假手術組，B為模型對照組，C為尼莫地平對照組，D為SZ高劑量組，E為SZ中劑量組，F 為低劑量組，G為PNS組，I為⑶組。圖5為SZ對急性血瘀模型大鼠學業流變學影響圖。圖6為SZ對慢性腦缺血學習記憶障礙模型大鼠學業流變學影響圖。圖7為SZ對學習記憶障礙小鼠腦組織AchE活性影響圖。圖8為SZ對學習記憶障礙小鼠腦組織Ml受體和CHAT基因的相對表達量影響圖。
具體實施例方式本發明通過下述實施例進一步闡明，但任何實施例或其組合不應當理解為對本發 明的範圍或實施方式的限制。本發明的範圍由所附權利要求書限定，結合本說明書和本領 域一般常識，本領域普通技術人員可以清楚地明白權利要求書所限定的範圍。在不偏離本 發明的精神和範圍的前提下，本領域技術人員可以對本發明的技術方案進行任何修改或改 變，這種修改和改變也包含在本發明的範圍內。
實施例1本發明活性成分的製備三七總皂苷的製備取三七粉碎成粗粉，用20% -85%的乙醇浸泡三七粉末8-lOh 提取，濾過，濾液減壓濃縮，濾過，過苯乙烯型非極性或弱極性共聚體大孔吸附樹脂柱，用水 洗滌，水洗液棄去，以50 % -85 %的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮，脫色，精製，減壓濃縮至浸
膏，乾燥，即得。桅子苷的製備取桅子粉碎成粗粉，每次以10倍量水，提取池，提取3次，合併提 取液，減壓濃縮至相對密度為1. 12(60°c )，加入60% -95%，使含醇量達50% -80%，靜置 Mh，抽濾，以適量相同濃度的乙醇溶液洗滌沉澱，濾液回收乙醇，合併濾液，用活性炭純化1 次後，再大孔樹脂純化1次，精製，減壓濃縮至浸膏，乾燥，即得。將製備所得的三七總皂苷與桅子苷混合均勻，加入只要上可接受的輔料、賦形劑 及其它輔助成分，按照本領域製劑的常規技術，根據需要製成片劑、膠囊劑、丸劑、混懸液或 乳劑。或者，將製備所得到的三七皂苷Rgl和桅子苷混合均勻，加入只要上可接受的輔 料、賦形劑及其它輔助成分，按照本領域製劑的常規技術，根據需要製成片劑、膠囊劑、丸 劑、混懸液或乳劑。以下實驗實施例中，所用的實驗動物未明確註明，均為KM小鼠，雌雄各半， 體重20士2g，由四川省醫學科學院實驗動物研究所提供，動物合格證號川實動管質 SCXK(川)2004-16。實驗場地為國家中醫藥管理局成都中醫藥大學中藥藥理三級實驗室， 編號TCM2032043。小鼠均在室溫22-24°C，明暗周期1池/1池條件下飼養，自由飲水攝食。所用的實驗藥物，均包括實驗用藥三七總皂苷(PNS)，每g相當於原生藥10g，由 北京中醫藥大學提供，批號090104 ；桅子苷(⑶)，每g相當於原生藥25g，由北京中醫藥大 學提供，批號090202實施例2本發明藥物顆粒抗東莨菪鹼致小鼠學習記憶障礙模型的試驗1實驗材料1. 1 藥物哈伯因(石杉鹼甲片)，河南太龍藥業股份有限公司豫中製藥廠生產，批號 080402 ；氫溴酸東莨菪鹼液(SCOP)，上海禾豐製藥有限公司生產，批號6A18007。1. 2試劑和儀器DT-200小鼠跳臺測試儀(及測試箱)，成都泰盟科技有限公司BA-200自動避暗測試儀(及測試箱)(小鼠)，成都泰盟科技有限公司2實驗方法2. 1模型製備造模小鼠於第14日給藥後50min，各組小鼠在避暗訓練、跳臺訓練前lOmin，ip給 予氫溴酸東莨菪鹼注射液(SCOP) 2mg/kg體重(0. lml/10g體重)，造成小鼠記憶獲得障礙模型。2. 2分組與給藥KM小鼠，雌雄各半，按體重及性別隨機分為正常對照組、模型對照組、哈伯因對照 組、三七原藥材與桅子原藥材重量配比分別為10 OUO 3,10 6,10 10,6 10、 3 10六個配伍組，各組原料藥配比有效成分製備按實施例1給出的方法進行製備(給藥劑量根據成人日用劑量原藥材換算，以臨床等效劑量即10倍量計)，小鼠每天所需給藥量 以給藥體積按0. aiii/lOg比例溶解到相應蒸餾水中，灌胃(ig)給藥，正常對照組和模型組 給予等體積生理鹽水，哈伯因組給藥劑量為0. 5mg/kg體重。小鼠連續給藥15日，於第14、 15日給藥後開始進行學習記憶行為學實驗，即跳臺與避暗實驗。三七和桅子配伍在二者原 生藥總量恆定的前提下(即人臨床三七和桅子日用量各9g，總量為18g)，分別按照相應的 配伍配比劑量組合，採用蒸餾水超聲配製，於4°C冰箱中保存備用，給藥前恢復至室溫。2. 3小鼠學習記憶能力測定2. 3. 1 避暗法(1)避暗訓練避暗試驗組小鼠於實驗第14日ig給藥或蒸餾水50min後，除空白 對照組外，其餘各組小鼠ip. SCOP造模，造模後IOmin後將動物背對洞口放入避暗箱明室， 適應3min，通36V交流電，即刻計時，記錄5min內各動物的潛伏期和錯誤次數。(2)避暗測試避暗組小鼠於實驗第15日(避暗訓練M小時後)ig給藥或 N. S60min後，同上法將小鼠放入避暗箱明室，同時通36V交流電、計時，記錄5min內各動物 的潛伏期和錯誤次數，比較各組差異，結果見表1和圖1。2. 3. 2 跳臺法(1)跳臺訓練跳臺試驗組小鼠於實驗第14日ig給藥或N. S 50min後，採用與避 暗實驗相同的方法造小鼠記憶獲得障礙模型，IOmin後將各組小鼠放跳臺上，適應3min，然 後給予32V交流電，即刻計時，記錄動物5min內的潛伏期和錯誤次數。(2)跳臺測試跳臺組小鼠於實驗第15日(跳臺訓練24小時後)，ig給藥或N. S 60min後，同上法將小鼠放於跳臺上，同時給予32V交流電、並計時，記錄動物5min內的潛伏 期和錯誤次數，比較各組差異，結果見表1和圖1。表IPNS與⑶配伍對小鼠學習記憶功能的影響(7±SD)
權利要求
1.一種藥物組合物，其特徵在於，主要是由原料藥三七和桅子製成。
2.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於，所述的原料藥重量配比為三七 1-15份，桅子1-15份。
3.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於所述的原料藥重量配比為三七3-12 份、桅子3-12份。
4.根據權利要求1所述的藥物組合物，其特徵在於所述的原料藥重量配比為三七6-10 份，桅子6-10份。
5.權利要求1-3中任意一權利要求所述的藥物組合物，其中所述原料藥三七為三七總 皂苷，所述原料藥桅子為桅子苷。
6.權利要求5所述的藥物組合物，所述三七總皂苷與所述桅子總皂苷的重量配比為 三七總皂苷1-15份，桅子總皂苷1-15份。
7.權利要求6所述的藥物組合物，所述三七總皂苷與所述桅子總皂苷的重量配比為 三七總皂苷2-8份，桅子總皂苷1-6份。
8.權利要求6所述藥物組合物，所述三七總皂苷與所述桅子總皂苷的重量配比為三七 總皂苷5份，桅子總皂苷2份。
9.權利要求5-8中任意一權利要求所述的藥物組合物，其中所述三七總皂苷為三七皂 苷Rgl，所述桅子總皂苷為桅子苷。
10.一種藥物製劑，包括權利要求1-9中任意一項權利要求所述的藥物組合物，和製藥 上可接受的藥物載體。
11.權利要求10所述的製劑，所述的製劑為口服、注射或經皮給藥製劑。
12.權利要求1-9中任意一權利要求所述藥物組合物在製備具有治療和緩解中樞神經 系統退行性病變藥物中的應用。
13.根據權利要求12所述的應用，其特徵是所述的中樞神經系統退行性病變為老年痴 呆、血管性痴呆、輕度認知障礙症或健忘症。
全文摘要
本發明屬於製藥技術領域，具體提供了一種藥物組合物，主要由原料藥三七和梔子組成。本發明還提供了該藥物組合物的製備方法和用途，經實驗證明本發明藥物組合，具有活血通絡，解毒益智，即能夠有效改善痴呆或認知障礙的認知功能，改善行為學異常，提高患者生命質量，也能有效針對腦細胞氧化應激損傷、微炎症損傷，還能增加腦細胞能量供應，抗神經細胞凋亡，促進突觸再塑，具有治療認知功能障礙的作用，尤其是用於治療老年痴呆或血管性痴呆或輕度認知障礙或健忘症的作用。
文檔編號A61P25/28GK102091147SQ20111000874
公開日2011年6月15日 申請日期2011年1月17日 優先權日2011年1月17日
發明者張文生, 徐世軍, 王永炎, 辛文鋒 申請人:北京師範大學