一種含益生元的液態奶的製作方法

2023-05-31 12:58:56 1

專利名稱：一種含益生元的液態奶的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種液態奶，特別是涉及一種含有活性益生元的液態奶。
背景技術：
乳是營養最全面的天然食品，是哺乳動物出生後最初食用的食物，其中含有幼兒或幼畜所需的蛋白質、脂肪、碳水化合物和礦物質等。對新生的牛犢，如果每天餵奶，那麼50天後體重會增加一倍；而對於嬰兒來說，100天後其體重也可增加1倍左右。隨著人們對健康的認識，飲奶肯定會越來越重視，在其他的國家已經成為一種固定的飲食文化。在眾多食品中，乳的營養價值無可非議。在我國市場上，乳產品的發展迅速，年增長率在30.0％左右。特別是高溫瞬時滅菌和無菌包裝在乳產品上的應用，最大程度的保留了牛乳的營養成分，延長了產品的保質期，擴大了產品的銷售範圍，從而使乳製品以其口味多樣性、營養價值高和飲用方便等特點，在食品市場中佔據了重要位置。
人體內雙歧桿菌的增殖對人大有裨益，然而提高人體內雙歧桿菌的數量迄今為止仍是一個技術難題。這是因為雙歧桿菌是厭氧型菌群，在空氣中很難存活，再加上胃酸的酸性很強，雙歧桿菌經過胃時絕大部分都被殺死了，只有極少部分可到達腸內，從而使其對人體的有益功效很難體現出來。低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖不能被人體的胃和小腸所消化吸收，而直接進入大腸，為雙歧桿菌優先利用，而腸內的有害菌很難利用它們。雙歧桿菌以低聚糖為養分得到大量繁殖，增加了活力，逐漸佔據優勢，抑制了有害菌的生長，促使微生態向良性調整，有利於人的身體健康。
低聚異麥芽糖(IMO)是澱粉糖的一種，主要成分是由α-1，6-糖苷鍵結合的異麥芽糖(IG2)、潘糖(P)、異麥芽三糖(IG3)及四糖以上(GN)組合成的功能性低聚糖。按形態可分為低聚異麥芽糖漿和低聚異麥芽糖粉兩種。糖漿為無色或淺黃色，透明的粘稠液體，甜味柔和，無異味，無正常視力可見雜質。糖粉為白色無定形粉末，甜味柔和，無異味，無正常視力可見雜質。不同純度低聚異麥芽糖(IMO)的基本組成如表1所示。
表1不同純度低聚異麥芽糖(IMO)的理化指標


低聚木糖又稱木寡糖，是由2-7個木糖分子以-1，4糖苷鍵結合而成的功能性聚合糖，為無色至淺棕色液體或白色固體，相對甜度約為40％，其理化指標、微生物指標分別如表2和表3。
表2不同純度低聚木糖的理化指標

表3不同純度低聚木糖的微生物指標

低聚果糖(簡稱FOS)，是一種以不超過4個果糖為鏈節，並以葡萄糖為鏈的端基的蔗果低聚糖，又名果寡糖和果糖低聚糖。低聚果糖通常作為果糖基單元以β(2-1)鍵連接在蔗糖(GF)分子上的果糖寡聚物的通稱，即GFn(n＝1-9)，主要包括蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)。按低聚果糖總含量分為G型和P型低聚果糖總含量不小於50％者為G型；低聚果糖總含量不小於90％者為P型。其理化指標、微生物指標分別如表4和表5。
表4不同純度低聚果糖的理化指標、微生物指標

表5不同純度低聚果糖的微生物指標

發明內容本發明的目的是提供一種能促進體內有益菌——雙歧桿菌增殖的含益生元的液態奶。
本發明所提供的含益生元的液態奶，每100g含有如下重量的組分牛奶50-95g，低聚異麥芽糖0.01-10.0g，低聚木糖0.01-0.7g，低聚果糖0.01-5.0g，
穩定劑0.1-1.0g，加水至100g。
其中，所述低聚異麥芽糖的添加量是以50％純度的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖的添加量是以70％純度的低聚木糖為標準計量的；所述低聚果糖的添加量是以50％純度的低聚果糖為標準計量的。穩定劑為乳化劑或增稠劑，或由乳化劑和增稠劑兩者組合而成；其中，所述乳化劑可選自蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、分子蒸餾單甘酯和聚甘油酯中的一種或幾種的組合；增稠劑可選自卡拉膠、瓜兒豆膠、羧甲基纖維素鈉、明膠、微晶纖維素、結冷膠、黃原膠、海藻酸丙二醇酯、魔芋膠、瓊脂、刺槐豆膠和果膠中的一種或幾種的組合。優選的，穩定劑包括分子蒸餾單甘酯、聚甘油酯、卡拉膠和黃原膠，這幾種組分可以以任意比混合，只需要使穩定劑用量達到要求即可。
雙歧桿菌發酵低聚糖能產生短鏈脂肪酸(主要是醋酸和乳酸)和一些抗菌素物質，從而抑制外源致病菌和腸內固有腐敗菌的生長繁殖。通過大量篩選各種配比，本發明提供的含有活性益生元液態奶中添加有一定含量的低聚異麥芽糖、低聚木糖和低聚果糖，與現有同類產品相比，具有以下優點和有益的效果1)本發明中的低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖和牛奶、腸道中所含有的各種有益菌(比如雙歧桿菌、乳酸菌等)相互協調，相得益彰，可以更好的發揮有益菌群的作用；2)可使體內多種有益菌(特別是雙歧桿菌)增殖，進而起到改善人體腸胃環境、促進腸道蠕動、減少有毒發酵產物及有害細菌、防止便秘、保護肝臟功能、降低血清膽固醇、降低血壓、提高人體免疫力、促進B族維生素合成、幫助鈣、鐵、鋅等營養元素吸收的功效。人體試驗表明攝入功能低聚糖可促使雙歧桿菌增殖，抑制有害細菌，特別產氣莢膜梭狀芽孢桿菌的生長，每天攝入一定量低聚糖持續數周后，腸內雙歧桿菌活菌增加7-8倍，而產氣莢膜梭狀芽孢桿菌總數減少了81％。
具體實施例方式
下面結合具體實施例對本發明做進一步詳細說明。以下實施例中百分含量如無特殊說明均為質量百分含量，所用的方法如無特殊說明均為常規方法。液態奶配方中低聚異麥芽糖的添加量是以50％純度的低聚異麥芽糖(IMO)為標準計量的，低聚木糖的添加量是以70％純度的低聚木糖為標準計量的，低聚果糖(FOS)的添加量是以50％純度的低聚果糖為標準計量的，其它純度的低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖可以按照含量的不同進行折算。
實施例1、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求 添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％50％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 2％低聚木糖 0.3％低聚果糖(FOS) 2％穩定劑0.2％水45.5％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.13％，聚甘油酯0.04％，卡拉膠0.01％，黃原膠0.02％。所述低聚異麥芽糖是以IMO-50型糖粉的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖是以70％純度的低聚木糖粉為標準計量的；所述低聚果糖是以G型糖漿，50％純度的低聚果糖為標準計量的。
製備過程工藝的具體操作如下1.牛奶製備工藝牛奶進行標準化後要求各項指標符合生產要求，標準化後脂肪為3.4％-4.1％，蛋白質為2.95％-3.45％。原料奶要求4℃以下冷藏。使用的原奶的具體要求如下a.感官指標色澤呈均勻一致的乳白色或稍帶黃色。
滋氣味具有新鮮牛乳固有的香味，無其它異味。
組織狀態呈均勻的膠態流體，無沉澱，無凝塊，無肉眼可見雜質和其它異物。
b.理化指標相對密度d2041.028-1.032脂肪，％≥3.2蛋白質，％ ≥2.90非脂乳固體，％ ≥8.3酸度，0T ≤18.0雜質度，mg/kg ≤4.0c.衛生指標汞(以Hg計)，mg/kg ≤0.01砷(以As計)，mg/kg ≤0.2
鉛(以Pb計)，mg/kg≤0.05鉻(以Cr6+計)，mg/kg ≤0.3硝酸鹽(以NaNO3計)，mg/kg≤8.0亞硝酸鹽(以NaNO2計)，mg/kg ≤0.2六六六，mg/kg≤0.05滴滴涕，mg/kg≤0.02黃麴黴毒素M1，μg/kg≤0.2抗生素 不得檢出d.微生物指標菌落總數，cfu/ml ≤500000e.摻假項目不得在生鮮牛乳中摻入鹼性物質、澱粉、食鹽、蔗糖等非乳成分2.配料在化糖鍋中加入適量的牛奶，緩慢升溫到40℃-45℃，將乳化增稠劑、低聚異麥芽糖、低聚木糖、低聚果糖加入，保持原料分散均勻一致，然後升溫到70℃，在此溫度下保持15分鐘-20分鐘，使原料充分溶解後，降溫到20℃後打入混合罐，混合15分鐘。
3.定容用少量的原料奶將化糖鍋中的原料以及管路中殘留的原料全部頂入混合罐中，進行定容。
4.預熱通過板式換熱器將混合物料預熱到60℃-75℃。
5.均質將混合物料均質，均質壓力為22-25MPa，一級均質壓力為12-14MPa，二級均質壓力為8-10MPa，均質溫度為55℃-75℃。
6.預殺菌將均質後的物料預殺菌，殺菌溫度應控制在85℃-90℃/15秒。
7.閃蒸濃縮將物料在閃蒸罐中閃蒸濃縮，閃蒸罐真空度控制在-0.055Mpa--0.085Mpa，閃蒸濃縮出的水分佔物料總重的0.6-0.8％，物料出閃蒸溫度為60℃；8.冷卻將閃蒸後的物料降溫到8℃以下。
9.超高溫瞬時滅菌將經閃蒸濃縮、冷卻後的物料在137℃±2℃下滅菌4秒。
10.無菌灌裝，得到產品檢驗結果如下項目指標總固體 7.2％
乳糖2.1％蛋白質 1.00％脂肪1.50％實施例2、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求 添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％80％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 5％低聚木糖 0.4％低聚果糖(FOS) 3％穩定劑0.2％水11.4％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.1％；聚甘油酯0.06％；卡拉膠0.02％；黃原膠0.02％。所述低聚異麥芽糖是以IMO-50型糖粉的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖是以70％純度的低聚木糖粉為標準計量的；所述低聚果糖是以G型糖漿，50％純度的低聚果糖為標準計量的。
製備過程與實施例1相同，產品檢驗結果如下項目指標總固體 11.3％乳糖4.2％蛋白質 2.73％脂肪3.20％實施例3、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求 添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％70％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 7％低聚木糖 0.6％低聚果糖(FOS) 4％穩定劑0.17％水18.23％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.1％；聚甘油酯0.04％；卡拉膠0.01％；黃原膠0.02％。所述低聚異麥芽糖是以IMO-50型糖粉的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖是以70％純度的低聚木糖粉為標準計量的；所述低聚果糖是以G型糖漿，50％純度的低聚果糖為標準計量的。
製備過程與實施例1相同，產品檢驗結果如下項目指標總固體 10.3％乳糖4.0％蛋白質 2.67％脂肪3.00％實施例4、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％ 90％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 3％低聚木糖0.7％低聚果糖(FOS) 5％穩定劑 0.2％水 1.1％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.13％；聚甘油酯0.04％；卡拉膠0.015％；黃原膠0.015％。所述低聚異麥芽糖是以IMO-50型糖粉的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖是以70％純度的低聚木糖粉為標準計量的；所述低聚果糖是以G型糖漿，50％純度的低聚果糖為標準計量的。
製備過程與實施例1相同，產品檢驗結果如下項目指標總固體 12.60％乳糖4.6％蛋白質 2.85％脂肪3.41％實施例5、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％ 55％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 9％
低聚木糖0.6％低聚果糖(FOS) 4％穩定劑 0.2％水 31.2％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.1％；聚甘油酯0.06％；卡拉膠0.02％；黃原膠0.02％。所述低聚異麥芽糖是以IMO-50型糖粉的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖是以70％純度的低聚木糖粉為標準計量的；所述低聚果糖是以G型糖漿，50％純度的低聚果糖為標準計量的。
製備過程與實施例1相同，產品檢驗結果如下項目指標總固體 7.6％乳糖2.4％蛋白質 1.10％脂肪1.31％實施例6、含益生元液態奶的製備配方原料原料要求添加量牛奶脂肪≥3.3％，蛋白質≥2.9％ 57％非脂乳固體≥8.1％低聚異麥芽糖(IMO) 9％低聚木糖0.1％低聚果糖(FOS) 0.9％穩定劑 0.3％水 32.7％其中，穩定劑的配方(佔液態奶的百分含量)為分子蒸餾單甘酯0.15％；聚甘油酯0.08％；卡拉膠0.04％；黃原膠0.03％。其中，低聚異麥芽糖是50％純度白色粉末，低聚木糖是70％純度白色粉末，低聚果糖(FOS)是50％純度G型糖漿。
製備過程與實施例1相同，得到含益生元的液態奶。
下述實施例中所用方法如無特別說明均為常規方法。下述實施例中所用百分比含量如無特別說明均為質量百分含量，下述實施例中低聚糖特指低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)的混合物。
實施例7、低聚糖調節腸道菌群功能的動物實驗受試樣品低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)，低聚異麥芽糖是50％純度白色粉末，低聚木糖是70％純度白色粉末，低聚果糖(FOS)是50％純度糖漿，陰涼、乾燥、通風處保存。
實驗動物選用購自中國醫學科學院實驗動物研究所(許可證號SCXK-(京)2004-0001)的18-22g，BALB/C健康清潔級雄性小鼠48隻，分為四組，每組12隻。
劑量低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)的比例為9∶0.1∶0.9，推薦量為成人(按60kg體重計)每日10g、20g和30g。分別依照三個推薦劑量的10倍設置小鼠實驗劑量，即每日劑量分別為1.67g/kgBW(低劑量組)、3.33g/kgBW(中劑量組)、5.00g/kgBW(高劑量組)。受試物用水(已消毒)配製，經口每日一次給予小鼠受試物，連續灌胃14天後測試各項指標。小鼠灌胃體積為0.10mL/10g鼠重。同時設空白對照組(0g/kgBW)，用水(已消毒)代替受試物，每日灌胃體積與各受試物組相同。
給予受試樣品前，無菌取小鼠糞便數粒，放到無菌的器皿中，用分析天平稱量，記錄重量。然後，在潔淨工作檯中，無菌操作，加入稀釋液(二次蒸餾水)，稀釋至10-2，充分振蕩混勻，依10倍系列稀釋至10-8，每種測定菌選擇合適的稀釋度，接種平板，檢測腸道五種典型菌(雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產氣莢膜梭菌)的菌群數量。培養基、培養和鑑定方法如表6所示，然後計算出每克溼便中的菌落數(cfu/g)，除產氣莢膜梭菌外，均取對數進行統計處理。在最後一次給予受試樣品之後24h，再次檢測上述腸道五種典型菌的菌群數量，方法步驟同上。
數據處理用SPSS軟體對各實驗組的原始數據進行數據處理，採用方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F值＜F0.05，結論各組均數間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計；對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態或方差齊要求後，用轉換後的數據進行統計；若變量轉換後仍為達到正態或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統計。
結果判定最後，根據《保健食品檢驗與評價技術規範》(2003年版)的判定標準，比較實驗前後自身與組間雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產氣莢膜梭菌的數量變化情況，實驗組實驗前後自身比較差異有顯著性，或實驗後實驗組與對照組組間比較差異有顯著性、且實驗組實驗前後自身比較差異有顯著性，符合以下一項，可以判定該組受試樣品動物實驗結果陽性(1)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌無明顯變化。(2)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌明顯增加，但增加的幅度低於雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。
低聚糖對小鼠體重影響的檢測結果如表7所示，小鼠的初始體重和實驗後體重在各劑量組與0g/kgBW組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)，表明低聚糖對小鼠的體重無不良影響。
實驗前後小鼠腸道中腸桿菌菌群數量的檢測結果如表8所示，給受試物前各劑量組與0g/kgBW組間比較，腸桿菌的數量均無顯著差異(P＞0.05)，而給受試物14天後與0g/kgBW組比較，5.00g/kgBW組腸桿菌的數量減少，有顯著差異(P＜0.05)。實驗前後各劑量組自身比較腸桿菌數量均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中腸球菌菌群數量的檢測結果如表9所示，給受試前各劑量組與0g/kgBW組間比較，腸球菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)，給受試物14天後與0g/kgBW組比較，5.00g/kgBW組腸球菌的數量減少，有顯著差異(P＜0.05)。實驗前後各劑量組自身比較腸球菌均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中乳桿菌菌群數量的檢測結果如表10所示，給受試物前、後各劑量組與0g/kgBW組間比較，乳桿菌的數量無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前、後各劑量組自身比較，乳桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中產氣莢膜梭菌菌群數量的檢測結果如表11所示，給受試前、後各劑量組與0g/kgBW組間比較，產氣莢膜梭菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前後各組自身比較，產氣莢膜梭菌的數量均無顯著差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中雙歧桿菌菌群數量的檢測結果如表12和表13所示，由表12可知，給受試前、後各劑量組與0g/kgBW組間比較，雙歧桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前後0g/kgBW、1.67g/kgBW組經自身比較，雙歧桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)；3.33g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數量增加，有顯著性差異(P＜0.05)；5.00g/kgBW實驗組自身比較，雙歧桿菌的數量增加，有顯著性差異(P＜0.01)。由表13可知，給受試前、後各劑量組與0g/kgBW組間比較，雙歧桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前後3.33g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數量增加1.4倍；5.00g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數量增加2.0倍。
綜上所述，小鼠經口給予低聚糖14天前後，3.33g/kgBW組自身比較，小鼠腸內雙歧桿菌的數量增加1.4倍，有顯著性差異(P＜0.05)；5.00g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數量增加2.0倍，有顯著性差異(P＜0.01)。小鼠經口給予低聚糖14天後，與0g/kgBW組比較，5.00g/kgBW組腸桿菌數量減少(P＜0.05)；腸球菌數量顯著減少(P＜0.05)。給低聚糖前後，各組小鼠產氣莢膜梭菌數量均無顯著變化。低聚糖對小鼠體重無不良影響。
上述實驗結果表明，低聚糖調節腸道菌群功能實驗結果為陽性，證明低聚糖能夠明顯增殖腸道雙歧桿菌。
表6腸道菌群檢驗用培養基、培養和鑑定方法

表7實驗前後各組小鼠的體重(x±SD)

表8小鼠腸道中腸桿菌菌群數量的檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

a與0g/kgBW組比較有顯著差異表9小鼠腸道中腸球菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)


a與0g/kgBW組比較有顯著差異表10小鼠乳桿菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

表11小鼠產氣莢膜梭菌菌群數量檢測結果(cfu/g，x±SD)

表12小鼠腸道中雙歧桿菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

b與本組給受試物前比較有顯著差異表13小鼠腸道中雙歧桿菌菌群數量檢測結果(×108cfu/g，x±SD)

實施例8、低聚糖調節腸道菌群功能的人體實驗受試樣品低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)，低聚異麥芽糖是50％純度白色粉末，低聚木糖是70％純度白色粉末，低聚果糖(FOS)是50％純度糖漿，陰涼、乾燥、通風處保存。
受試人群經臨床體檢指標全部正常的成年人60名，男女各半。受試者中部分為便秘者。
腸道細菌培養方法如下雙歧桿菌BBL瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，48-72小時厭氧培養；乳桿菌LBs瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，48小時培養；腸桿菌EMB瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，24-48小時培養；腸球菌疊氮鈉-結晶紫-七葉苷瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，24-48小時培養；擬桿菌Bd瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，24小時厭氧培養；產氣莢膜梭菌TSC瓊脂培養基(青島海博生物技術有限公司)，37℃，24小時厭氧培養。
隨機抽取上述60例受試者，分為3組(低、中、高劑量組)，每組20人，男女各半。在試食受試樣品之前，無菌採取受試者糞便，放到無菌的器皿中，用分析天平稱量，記錄重量。然後，在潔淨工作檯中，無菌操作，加入稀釋液(二次蒸餾水)，稀釋至10-2，充分振蕩混勻，依10倍系列稀釋至10-8，每種測定菌選擇合適的稀釋度，接種平板，檢驗上述六種腸道菌群數(雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、腸球菌、擬桿菌、產氣莢膜梭菌)。然後，低、中、高劑量組受試者每日分別服用5g、10g、15g，低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)的比例為9∶0.1∶0.9，連續14d。分別於服用受試物3d、7d、10d、14d，及停服後3d、7d、14d時，無菌採取受試者糞便檢測並用相同方法檢測上述六種腸道菌群數。觀察、記錄受試者食用前後自覺症狀。
數據處理方法與實施例6相同。
每日服用5g受試物(低劑量組)，服用14d，腸道菌群數量檢測結果如表14所示，5g/d實驗組的腸桿菌、腸球菌、產氣莢膜梭菌服用前、後數量無顯著變化(p＞0.05)；擬桿菌在服用後第10d和停服後第3d較服用前數量增加，差異有顯著性(p＜0.05；雙歧桿菌在服用後第7d、第10d數量增加，差異有顯著性(p＜0.05)；乳桿菌在停服後第7d數量降低，差異有極顯著性(p＜0.01)。
每日服用受試物10g(中劑量組)，服用14d，腸道菌群數量檢測結果如表15所示，10g/d實驗組的腸肝菌、乳桿菌數量無明顯差異(p＞0.05)；腸球菌在停服後第14d數量增加，差異有顯著性(p＜0.05)；擬桿菌在服用後第10d及停服後第3d數量增加，其中，服用後第10d差異具極顯著性(p＜0.01)，停服後第3d差異具顯著性(p＜0.05)；產氣莢膜梭菌在服用後第7d、第10d、第14d數量下降，其中第10d差異具極顯著性(p＜0.01)，第7d、第14d差異具顯著性(p＜0.05)；雙歧桿菌在服用後第7d、第10d及停服後第7d數量增加，服用後第10d差異具極顯著性(p＜0.01)，服用後第7d及停服後第7d差異具顯著性(p＜0.05)。
每日服用受試物15g(高劑量組)，服用14d，腸道菌群數量檢測結果如表16所示，15g/d實驗組的腸球菌、乳桿菌數量無顯著的變化(p＞0.05)；腸桿菌在服用後第14d及停服後第3d數量減少，差異有顯著性(p＜0.05)；擬桿菌在服用後第7d、第14d停服後第7d、14d數量減少，其中服用後第7d和停服後第14d差異有極顯著性(p＜0.01)，服用後第14d和停服後第7d差異有顯著性(p＜0.05)；產氣莢膜俊菌在服用後第7d和第10d數量下降，其中第10d差異有極顯著性(p＜0.01)，第7d差異有顯著性(p＜0.05)；雙歧桿菌在服用後第3d、第10d數量增加，差異均具極顯著性(p＜0.01)。
綜上所述，以5g/d、10g/d、15g/d劑量的低聚糖連續服用14d，雙歧桿菌有明顯增加。5g/d實驗組經自身比較，雙歧桿菌的數量增加10倍(P＜0.05，差異有顯著性)；10g/d實驗組和15g/d實驗組經自身比較，雙歧桿菌的數量增加10倍，差異具極顯著性(P＜0.01)。上述實驗結果表明，各劑量組的雙歧桿菌數量都有明顯提高，進一步證明低聚糖能夠明顯促進腸道內雙歧桿菌增殖。
實驗期間每天記錄受試者的主訴症狀，結果受試者服用受試物-低聚異麥芽糖(IMO)、低聚木糖、低聚果糖(FOS)後，排便次數規律，糞便性狀正常，排便通暢，飲食、睡眠及精神狀態均保持良好，證明低聚糖對人無不良影響，服用安全。
表14服用低聚糖人體腸道菌群動態觀察結果I(5g/d)(logCFU/g，x±S，n＝10)


*表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.05，**表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.01。
表15服用低聚糖人體腸道菌群動態觀察結果II(10g/d)(logCFU/g，x±S，n＝10)

*表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.05，**表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.01。
表16服用低聚糖人體腸道菌群動態觀察結果III(15g/d)(logCFU/g，x±S，n＝10)

*表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.05，**表示服用受試物後與服用受試物前比較p＜0.01。
實施例9、含益生元液態奶與市售純牛奶調節腸道菌群功能的動物實驗受試樣品實施例6所得含益生元的液態奶作為實驗組材料，市售純牛奶作為空白對照組材料。
實驗動物選用購自中國醫學科學院實驗動物研究所(許可證號SCXK-(京)2004-0001)的18-22g，BALB/C健康清潔級雄性小鼠24隻，分為兩組，每組12隻。
劑量將含益生元的液態奶濃縮至原重量的五分之一，推薦量為成人(按60kg體重計)每日20g。分別依照推薦劑量的10倍設置小鼠實驗劑量，即每日劑量3.33g/kgBW。受試物用水(已消毒)配製，經口每日一次給予小鼠受試物，連續灌胃14天後測試各項指標。小鼠灌胃體積為0.10mL/10g鼠重。同時設空白對照組(0g/kgBW)，用市售純牛奶(已消毒)代替受試物，每日灌胃體積與受試物組相同。
數據處理用SPSS軟體對各實驗組的原始數據進行數據處理，採用方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F值＜F0.05，結論各組均數間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數的兩兩比較方法進行統計；對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態或方差齊要求後，用轉換後的數據進行統計；若變量轉換後仍為達到正態或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統計。
結果判定最後，根據《保健食品檢驗與評價技術規範》(2003年版)的判定標準，比較實驗前後自身與組間雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產氣莢膜梭菌的數量變化情況，實驗組實驗前後自身比較差異有顯著性，或實驗後實驗組與對照組組間比較差異有顯著性、且實驗組實驗前後自身比較差異有顯著性，符合以下一項，可以判定該組受試樣品動物實驗結果陽性(1)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌無明顯變化。(2)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌明顯增加，但增加的幅度低於雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。
實驗前後小鼠腸道中腸桿菌菌群數量的檢測結果如表17所示，給受試物前與0g/kgBW組間比較，腸桿菌的數量均無顯著差異(P＞0.05)，給受試物14天後與0g/kgBW組比較，3.33g/kgBW組腸桿菌的數量減少，有顯著差異(P＜0.05)。實驗前後各組自身比較腸桿菌數量均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中腸球菌菌群數量的檢測結果如表18所示，給受試前與0g/kgBW組間比較，腸球菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)，給受試物14天後與0g/kgBW組比較，3.33g/kgBW組腸球菌的數量減少，有顯著差異(P＜0.05)。實驗前後自身比較腸球菌均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中乳桿菌菌群數量的檢測結果如表19所示，給受試物前、後與0g/kgBW組間比較，乳桿菌的數量無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前、後自身比較，乳桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中產氣莢膜梭菌菌群數量的檢測結果如表20所示，給受試前、後與0g/kgBW組間比較，產氣莢膜梭菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。給受試物前後自身比較，產氣莢膜梭菌的數量均無顯著差異(P＞0.05)。
實驗前後小鼠腸道中雙歧桿菌菌群數量的檢測結果如表21，由表21可知，給受試前與0g/kgBW組間比較，雙歧桿菌的數量均無顯著性差異(P＞0.05)。受試後與0g/kgBW組間比較，雙歧桿菌的數量有顯著性差異(P＜0.05)。3.33g/kgBW組自身比較，雙歧桿菌的數量增加，有顯著性差異(P＜0.05)。
上述實驗結果表明，本發明調節腸道菌群功能實驗結果為陽性，證明該含益生元的液態奶能夠明顯增殖腸道雙歧桿菌。
表17小鼠腸道中腸桿菌菌群數量的檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

a與0g/kgBW組比較有顯著差異表18小鼠腸道中腸球菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

a與0g/kgBW組比較有顯著差異表19小鼠乳桿菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

表20小鼠產氣莢膜梭菌菌群數量檢測結果(cfu/g，x±SD)

表21小鼠腸道中雙歧桿菌菌群數量檢測結果(log10cfu/g，x±SD)

權利要求
1.一種含益生元的液態奶，每100g含有如下重量的組分牛奶50-95g，低聚異麥芽糖0.01-10.0g，低聚木糖0.01-0.7g，低聚果糖0.01-5.0g，穩定劑 0.1-1.0g，加水至100g。
2.根據權利要求1所述的含益生元的液態奶，其特徵在於所述低聚異麥芽糖的添加量是以50％純度的低聚異麥芽糖為標準計量的；所述低聚木糖的添加量是以70％純度的低聚木糖為標準計量的；所述低聚果糖的添加量是以50％純度的低聚果糖為標準計量的。
3.根據權利要求1或2所述的含益生元的液態奶，其特徵在於所述穩定劑為乳化劑或增稠劑，或由乳化劑和增稠劑兩者組合而成；其中，所述乳化劑可選自蔗糖脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、分子蒸餾單甘酯和聚甘油酯中的一種或幾種的組合；增稠劑可選自卡拉膠、瓜兒豆膠、羧甲基纖維素鈉、明膠、微晶纖維素、結冷膠、黃原膠、海藻酸丙二醇酯、魔芋膠、瓊脂、刺槐豆膠和果膠中的一種或幾種的組合。
4.根據權利要求3所述的含益生元的液態奶，其特徵在於所述穩定劑包括分子蒸餾單甘酯、聚甘油酯、卡拉膠和黃原膠。
全文摘要
本發明公開了一種含益生元的液態奶。本發明所提供的含益生元的液態奶，每100g含有如下重量的組分牛奶50－95g，低聚異麥芽糖0.01－10.0g，低聚木糖0.01－0.7g，低聚果糖0.01－5.0g，穩定劑0.1－1.0g，加水至100g。通過大量篩選各種配比，本發明提供的含有活性益生元液態奶中添加有一定含量的低聚異麥芽糖、低聚木糖和低聚果糖，可使體內多種有益菌(特別是雙歧桿菌)增殖，進而起到改善人體腸胃環境、促進腸道蠕動、減少有毒發酵產物及有害細菌、防止便秘、保護肝臟功能、降低血清膽固醇、降低血壓、提高人體免疫力、促進B族維生素合成、幫助鈣、鐵、鋅等營養元素吸收的功效。
文檔編號A23C9/152GK101066071SQ20071010023
公開日2007年11月7日 申請日期2007年6月6日 優先權日2007年6月6日
發明者母智深, 張剛, 張冬潔 申請人:內蒙古蒙牛乳業(集團)股份有限公司 被以下專利引用 (6),