一種具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用的胸腺素複合製劑的製作方法

2023-06-01 06:26:56 2

專利名稱：一種具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用的胸腺素複合製劑的製作方法
一種具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用的胸腺素複合製劑
玟術領壤
本發明涉及一種具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用的胸腺素複合製劑含有效
量的胸腺素ai及胸腺素e，其藥物組合物可用於各種免疫性疾病的治療、各種免疫性損傷的 再生修復。
鮭
免疫系統是機體的重要系統之一，是由胸腺、骨髓、脾臟、淋巴組織等免疫器官和巨噬 細胞、自然殺傷細胞、淋巴細胞等免疫細胞組成。健全的免疫系統有三大功能， 一是防禦功 能。免疫力強能幫助機體消滅外來的細菌、病毒以及避免發生疾病，有保護機體不受損害的 防禦能力；二是穩定功能。免疫功能好，能幫助機體修復或消除人體內新陳代謝、受損傷或 衰老死亡的組織細胞，維持機體代謝的內環境始終處於穩定狀態；三是監控功能。免疫力強 可以幫助機體殺傷和消除異常突變細胞。當機體免疫系統受損、免疫功能減弱時，機體易遭 受細菌、病毒、真菌及其他各種微生物的感染，易患各種流行性和暴發性傳染病，.也是腫瘤 及癌症的高發人群。如果免疫系統過度活躍，會敵我不分，攻擊自身的細胞，就會導致自身 免疫性疾病，如類風溼性關節炎、紅斑狼瘡、銀宵病、胰島素依賴性糖尿病等等。
在人體發育早期，胸腺是調節人體免疫的中樞性器官，它所分泌的胸腺肽內含有多種具 有生物活性的多肽細胞因子(如胸腺素a 、 e、 Y等)，能促使淋巴細胞的分化、發育和成熟， 使幼稚的淋巴細胞成熟變為具有免疫活性的淋巴細胞，參與細胞免疫反應，增強機體免疫能 力，提供人體抗病能力。胸腺肽在我國臨床應用己20餘年，治療功效經過多年的臨床實踐已 經得到證實。目前市售的產品主要是由小牛胸腺和豬胸腺提取的多肽混合物。因胸腺肽的質 控標準尚未規範，不同的製劑所含有效成分常不恆定，影響治療效果，而且成分不純也可能 導致過敏反應的發生。胸腺素al是胸腺肽中存在的一種活性多肽，其含量尚不足1%，卻有 很強的免疫調節功能，可促進T淋巴細胞分化、增殖，破壞其感染的靶細胞，還可激活NK 細胞活性，促進與免疫相關的細胞[大]子的產生，具有提高細胞免疫功能的作用。1997年美國 賽生公司經化學合成方法獲得了高純度的胸腺素a 1,並作為免疫增強劑用於臨床治療重症肝 炎等疾病，效果良好，己成為治療慢性B肝、C肝、非小細胞肺癌和惡性黑色素瘤的重要藥 物之一，已被批准在20多個國家上市。隨著胸腺素al在臨床中的大量應用，也發現單獨使 用胸腺素a l來調節機體免疫力，存在成分過度單一而治療效果不如具有混合成分的胸腺肽等 不足。人體作為一個統一整體，其免疫調節機能是個複雜的機理和過程。在漫長的進化過W 中胸腺除分泌胸腺素al外還分泌胸腺素P、 Y等因子，實驗證明這些成分可通過不同途徑/f; 免疫調節中起重要作用。
免疫反應是機體的防禦功能，具有保護機體免患疾病的作用。但在免疫功能發生異常時， 又往往造成機體和組織的損傷，如免疫功能低下而感染肝炎病毒時引起肝細胞變性、壞死， 又如免疫功能紊亂而針對自身組織發生的免疫性攻擊(如系統性紅斑狼瘡等)可累及多個系統 和臟器，造成皮膚、槳膜、關節、腎及中樞神經系統等多種組織臟器的損傷。機體對損傷有 一定的再生修復能力。當內環境發生變化時，組織細胞或器官可通過改變自身的代謝、功能 和結構以避免環境改變所引起的損傷。對出現的病理性壞死、缺損等損傷，機體通過炎症反 應對損傷區內壞死、碎屑、異物和病原等進行吸收清除，損傷組織鄰近存留的實質細胞再生
進行修補恢復功能，或由新增生的富於小血管的纖維結締組iH來修補充填缺損。 一般情況下，
如損傷範圍較小或損傷較輕時可通過自然癒合過程達到修復。但損傷往往因受病人身體素質、 損傷大小及嚴重程度等因素的影響，多數情況下的損傷癒合需要醫療幹預。我們通過體內外
系列研究證明胸腺素eie具有明顯的促進新血管形成、促進上皮細胞角化、組織再生及{籽口 癒合等作用。越來越多的研究結果顯示胸腺素e除有一定的免疫調節功能外，是人體內具有 抗損傷、促進組織再生修復等多種功能的一組重要多肽分子。
胸腺素e現巳有16個成員，胺基酸序列具有高度同源性，其中最初由胸腺分離的胸腺 素e4含量最多、組織分布最廣，是胸腺素e的主要代表。胸腺素e不但參與調節機體免疫 功能和神經系統發宵，還與抗炎、機體創傷癒合、及肌動蛋白螯合密切相關。目前已知的胸 腺素e生理功能有i)增強胸腺細胞、骨髓細胞末端核苷醯轉移酶活性，抑制巨噬細胞遊走
活性；2)刺激血管內皮細胞遷移及新血管發生，促進創傷癒合；3)抑制炎症；4)與細胞內 肌動蛋白單體相結合，是細胞內一種主要的肌動蛋白調節蛋白，使肌動蛋白處於單體狀態，並
對細胞增殖、遷移和分化至關重要；5)影響T淋巴細胞分化，誘導T細胞系分型轉變，在 CD4細胞增殖抑制時激活CD8細胞；6)影響下丘腦和垂體，刺激下丘腦促黃體激素釋放激 素以及黃體激素的分泌。研究還顯示胸腺素e4能夠促進心肌細胞的遷移和存活，在實驗誘 導的心臟病發作後防止細胞的死亡並限制疤痕組織形成的程度。另外，我們通過體外實驗研 究表明胸腺素P 16能增強視網膜神經細胞的抗損傷能力，對雙氧水造成的神經細胞損傷具有
保護作用。胸腺肽中所含有的胸腺素e成分可通過上述多種功能參與機體的免疫調節，增強
人體組織抗損傷能力，對免疫反應造成的損傷具有再生修復作用。因此，我們首次提出了一種含有胸腺素a和胸腺素f3的胸腺素複合製劑。將胸腺素ci i與胸腺素e聯合使用，即遵循人體內固有的生物規律，冋時又人工增強其生物功效，比使 用單一的胸腺素al免疫調節及治療作用更強，更有效，確保從多途徑、多方式激發入體的 免疫功能、抗損傷功能及再生修復功能，從而達到良好的治療效果。胸腺素是正常機休內固
有的多肽成分，使用高純度的胸腺素ai和胸腺素e製劑安全、可靠。
本發明的描述
本發明提出的胸腺素複合製劑是基於人體免疫是個複雜的系統，對免疫系統的調節作用 是多種物質通過多種途徑共同完成的。胸腺作為調節人體免疫的中樞性器官，分泌多種活性 細胞因子，這是人類和其它動物在進化過程中保留下來的。胸腺素al是胸腺分泌的一種重 要活性多肽，具有很強的免疫調節功能，已成為免疫治療的重要藥物之一。但隨著胸腺素"1 在臨床中的大量應用，發現單獨使用胸腺素al來調節機體免疫力，治療效果不甚理想。實 踐證明單一物質對免疫系統的作用，不如多種物質對免疫系統的聯合作用。除胸腺素ci 1夕卜，
胸腺還分泌其它活性成分，如胸腺素e。近年來研究表明胸腺素e是人體內具有增強免疫、 抗損傷、促進組織再 復等多種功能的重要多肽。所以本發明的複合胸腺素製劑包含了胸
腺素ai和胸腺素e這兩種胸腺分泌的活性成分，二者合理配伍，聯合作用，可從多途徑、
多方式激發人體的免疫功能，增強人體抗病能力，增強人體抗損傷及再生修復能力，治療作
用比單獨使用胸腺素a 1更有效，更有保障。
本發明複合胸腺素製劑可以用來治療或預防自身免疫性疾病，包括系統性紅斑狼瘡、類 風溼性關節炎、銀宵病、多發性硬化症、風溼病、阿狄森病、兒章哮喘、纖維肌痛、慢性疲 勞症候群、白塞氏病、重症肌無力、甲狀腺炎、血管炎、克隆病、腸炎以及多發性肌炎和皮 肌炎等。
本發明複合胸腺素製劑還可以用來治療或預防過敏性疾病。主要涉及支氣管哮喘，過敏 性募炎，花粉症，蕁麻疹藥物過敏等常見過敏性疾病。
本發明複合胸腺素製劑還可以用來治療或預防感染性疾病。當機體免疫系統受損、免疫
功能jir弱時，機體易遭受病毒、細菌、真菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體等病原微 生物以及寄生蟲的侵犯而致局部或全身感染性疾病，如風疹、麻疹、流行性腮腺炎、水痘、
幼兒急疹、脊髄灰質炎、流行性乙型腦炎、猩紅熱、百FI咳、敗血症、流行性出血熱、結核
病、敗血病、傷寒、腦炎、中毒型細菌性痢疾、非傷寒沙門蘭感染等。
本發明還可以用來治療病毒性肝炎。病毒性肝炎是由多種肝炎病毒引起的常見傳染病， 分甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎五種。急性肝炎病人大多在6個月內恢復，乙型、丙 型和丁型肝炎易變為慢性，少數可發展為肝硬化，極少數呈重症經過。慢性乙型，C型肝炎 與原發性肝細胞癌的發生有密切關係。慢性B型肝炎患者細胞免疫功能大多低下，致使肝炎 病毒在體內持續存在，引起肝細胞壞死。本發明藥物組合物能使機體細胞免疫功能恢復，打 破機體對B肝病毒的免疫耐受狀態，激發機體對病毒的特異性反應，從而病毐有可能得以清 除，改善肝細胞功能，促進肝細胞的修復從而使肝細胞混濁腫脹、水腫樣病變得以修復，肝 細胞功能亦隨之恢復。
本發明還可以用來治療感染性休克。感染性休克由病原微生物及其毒素在人體引起的一 種微循環障礙狀態，致組織缺氧、代謝紊亂、細胞損害甚至多器官功能衰竭。感染性休克的 發病機理極為複雜，目甜的研究已深入到細胞、亞微結構及分子水平。當機體抵抗力降低時， 侵入機體或體內正常寄居的病原得以大量繁殖，釋放其毒性產物，並以其為動因激活人體體 液和細胞介導的反應系統，產生各種炎性介質和生物活性物質，叢而引起機體一系列病理生 理變化，使血液動力學發生急劇變化，導致循環衰竭。
本發明還可以用來治療肺癌、胃癌、結腸癌、膀胱癌、頭頸癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴 白血病等腫瘤疾病的免疫輔助治療，增強患者的免疫力，提高療效。
本發明複合胸腺素製劑的胸腺素a l指的是天然存在的、化學合成的、基因重組的胸腺素 al，以及他們的具有取代、缺失、延長、置換或其它修飾序列的具有生物活性的類似物。這 些類似物具有與胸腺素a l基本相似的生物功能，所述的化學合成胸腺素a l和重組胸腺素a 1 可具有天然胸腺素al的胺基酸序列，與大然胸腺素al基本相似的胺基酸序列，或者天然胸 腺素al縮短的胺基酸序列。
本發明複合胸腺素製劑的胸腺素p指的是胸腺素e家族，目前己發現有16個成員，其氨 基酸序列具有髙度同源性。複合製劑中的胸腺素e首選胸腺素ei6，還可以選用胸腺素P4， 或胸腺素pi5，或胸腺素eio。本發明的實施方案中，胸腺素e可以是從組織細胞中分離提 取，可以是直接化學合成，也可以是人工基因表達。另外，各種能夠調節胸腺素e基因表達,
.誘發或刺激機體組織細胞產生胸腺素P的生物活性物質及化合物也可以加進本發明的藥物組
合物中。這類試劑包括但不限於各類生長ra子，如胰島素樣生長因子(IGF-1)、血小板來源的 生長因子(PDGF)、表皮生長因子(EGF)、轉化生長因子(T(;F-e)、基本成纖維細胞生長因子 (BFGF)和血管內皮生長因子(VEGF)等。尤其優選的試劑為轉化生長因子e (T(;F-P )或TGI二
e家族的其它成員。除上述幾種人體內固有的胸腺素e外，複合胸腺素製劑中的胸腺素e還 可選用其它胸腺素e ，如胸腺素e 9、胸腺素e ii、胸腺素e 12、胸腺素e 13、胸腺素e w等。
胸腺素e4具有胺基酸序列LKKTET，胸腺素ei5及e 16具有胺基酸序列LKKTNT，該
序列與介導肌動蛋白的鰲合或結合相關。儘管不受任何特定理論的約束，胸腺素e及其同種 異型體的活性可能部分是由於具有調節肌動蛋白聚合的能力。因此，其它具有結合肌動蛋白
或調節肌動蛋白聚合功能的蛋白質，包括含胺基酸序列LKKTET或LKKTNT的胸腺素P的同 種異型體，也能夠促進血管形成、改善組織代謝、增強細胞的正常生理功能，增強神經細胞 的自我保護、抗損傷能力。因此含LKKTET或LKKTNT胺基酸序列的完整胸腺素e 、其變異 體及氧化型，以及含LKKTET或LKKTNT序列的不同大小的胺基酸片段及其氧化型也包括在本 發明中。
本發明用Boyden Chomber方法測試人臍靜脈內皮細胞及表皮細胞遷移，將胸腺素ei6 與胸腺素P4按各50W的比例組合使用，其促進細胞運動的能力明顯強於單獨使用胸腺素e 16
或胸腺素e4,說明兩種胸腺素e具有協同作用。如將幾種胸腺素e多肽按適當比例組成組合 製劑，其增強血管生成及促進損傷癒合的功能會有協同作用，優於單獨使用某一種胸腺素e， 幾種成分相互提攜支持，具有協同作用，町能使藥效得到進一步提升，因而治療效果更好。 因此，本發明複合胸腺素製劑中的胸腺素e還可以是幾種胸腺素P的組合製劑，可由胸腺素 ei6與胸腺素e4按各種比例組成，也可以由胸腺素ei6與胸腺素ei5按各種比例組成，還可 以由胸腺素Pi6與胸腺素e4及胸腺素ei5按各種比例組成。另外，該組合製劑還可由胸腺素
P16與胸腺素P16的多個同種異型體，如胸腺素P4、胸腺素P9、胸腺素eio、胸腺素eii、
胸腺素ei2、胸腺素fU3、胸腺素ei4、胸腺素ei5以及h述同種異型體的氧化型按各種比
例組成，也可以由胸腺素ei6與含LKKTET及LKKTNT序列的不同大小的胺基酸片段及其氧 化型按各種比例組成，還可以由含LKKTET及LKKTNT序列的不同大小的胺基酸片段及其氧
化型按各種比例組成。總之，胸腺素e組合製劑可由胸腺素e及其氧化型、含LKKTET序列
的胺基酸片段及其氧化型、以及含LKKTYT序列的胺基酸片段及其氧化型按各種方式、各種 比例組合。以上均屬於本發明範疇。.本發明複合胸腺素製劑中含有的胸腺素a 1與胸腺素P ,兩者的比例為 1000:0.1-0.1:1000，優選100:1-1:100，更優選10:1-1:10。其中胸腺素a l的含量可以為 O.OOlmg-lOOOmg,優選lmg-10mg，更優選1.6-3.2 mg。胸腺素P的含量可以為O.OOlmg -lOOOmg,優選0. 001-100 mg,更優選0.0L mg-10 rag。在對患者的聯合給藥中，所述劑量 單位可每日、隔日、每周、每月等方式給藥， 一天給藥一次或一天給藥多次，例如一天給藥2、 3、 4次或更多。
本發明所述的複合胸腺素製劑，可以是各自單獨製成的同一劑型或不同劑型(如胸腺素ci i注射劑、胸腺素e口服劑等)的組合產品，也可以是在生產過程中將兩種成分按最佳劑量、 最佳比例製成一個劑型(如含胸腺素al與胸腺素e的注射劑)。給藥方法可以是靜脈、腹腔、 肌肉、皮下、口服、吸入、局部外敷或任何其它可接受的方法。對於任何給藥途徑，均可釆 用胸腺素a l與胸腺素0分開的、前後的或兩者同時的給藥方法。
本發明的複合胸腺素製劑還可與各種甾族、非甾族類抗炎劑及各種抗素、具有抗感染作 用的各種化合物、具有抗感染作用的中藥配方、以及具有抗感染作用的其它天然物質合用。
本發明的複合胸腺素製劑還可與其它各種免疫調節劑，如胸腺肽、胸腺五肽、幹擾素(包 括幹擾素a-la、幹擾素a-2a、幹擾素a-2b、千擾素P 、千擾素Y和幹擾素中的一種或數種 的組合)合用。這些免疫調節劑在臨床己應用多年，治療功效經過臨床實踐已得到證實，與其 聯合使用治療效果會更好。
在本文中，"有效量"是指複合胸腺素組合製劑的需要量。在治療過程中這種組合製劑 使用到治療劑量時就會產生調節免疫、促進組織再生等效應。複合胸腺素製劑能夠能夠調節 免疫、促進及調理組織修復過程。組織修復過程常常發生在損傷性疾病之後。組織修復過程 出現障礙往往是由於在傷口處的各種細胞如成纖維細胞、幹細胞、血管內皮細胞、組織細胞 對生長的反映不足而造成的。因此，加入能誘導或刺激細胞生長的活性劑會有利於組織的修
復。本文使用的"促進" 一詞是指對細胞生長機制或過程具有激活作用、刺激作用、增強作 用、起始作用及維持作用。這些細胞生長機制或發生過程是組織形成，修復或發育所必須的。
本發明的複合胸腺素製劑可以是注射液組合物，用於靜脈內、腹腔內、肌肉內或皮下注射。製備注射液組合物的例子包括將有效劑量的複合胸腺素製劑和所需量的液體基質混合制 作而成，該基質的例子包括水或生理鹽水，其中還可添加其它有益成分或輔料。
本發明的複合胸腺素製劑可以是口服膠囊、片劑、粉劑等固體劑型組合物，包括將有效 劑量的複合胸腺素製劑乾粉和所需量的藥用輔料混合製作而成。本發明的複合胸腺素製劑還 可以是口服液組合物。製備口服液組合物的例子包括將有效劑量的複合胸腺素製劑和所需量 的液體基質混合製作而成，該基質的例子包括水或生理鹽水，其中還可添加其它有益成分或 輔料。
本發明複合胸腺素製劑可以是含有活性成分的敷貼、軟膏或霜。當製成軟膏時，活性成 分可以使用石蠟基或水混溶性軟膏基，或者，製成活性成分含水相油霜基的霜劑。製備塗液、 軟膏等外用型組合物的例子，包括將有效劑量的和所需量的添加劑混合而成。這些添加劑通 常選自外用藥物或化妝品的常用基質或輔料，例如凡士林、液體石蠟、羊毛脂、硬脂酸單甘 油脂、聚乙二醇、十六醇、甘油、乙醇和水等。
在本發明中，"載體"是指含有活性複合胸腺素製劑的基質或輔料，用來充當藥物輸送 系統。在本發明中，"藥物輸送系統"指當藥物組合物(藥物配製品或劑型)被使用時，可以 將活性複合胸腺素製劑呈遞給人或動物的機體。因此術語"藥物輸送系統"包括普通的藥物 組合物所能使用的所有形式的基質或輔料，如固體、半固體、和流體組合物。特殊相關的組 合物是，例如，軟膏、親水軟膏、乳膏、糊劑、霜、凝膠、水凝膠、溶液、乳液、懸浮液、 洗液、擦劑、洗髮劑、皂劑、粘貼物、噴霧劑、粉末、薄膜、墊料、敷劑、繃帶、膏藥等。
如果需要，霜的水相可以包括，例如，至少30%W/W的多元醇，即含有兩個或多個基的 醇，如丙二醇、丁-1， 3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇以及它們的混合物。局部 用製劑可以根據需要而增加或減少所含活性成分。
本發明還可以用可控制釋放混合劑的方式使用。本文屮的"可控制釋放混合劑"是指任
何一種複合物。這種複合物可以用來緩慢釋放包含其中的有效複合胸腺素製劑成分。這種復 合物含有生物有效成分可以是固狀的，滲透性的，半固狀的，膠性的或液狀的。實施例
實施例1 細胞培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVECS),用rpmi1640培養基培養。培養基內含有5%牛血清，IO 單位/毫升青/鏈黴素，50微克/毫升慶大黴素，2-7微克/毫升兩性黴素B， 5單位/毫升肝 素及200單位/毫升血管內皮細胞生長因子等補充劑。人表皮角化細胞及前額纖維母細胞 用DMEM及10%小牛血清培養。
實施例2
促進血管增生實驗
胸腺素p16對血管生成的促進作用採用雞胚絨毛尿囊膜(cam)實驗檢測，在孵育7大的 受精雞胚蛋殼上開一 lcm2左右窗口，將不同濃度的化學合成胸腺素ei6蛋白加樣於滅菌濾 紙片上，並放置於CAM ,然後在恆溫恆溼培養箱370C下繼續培養48小時，觀察血管生長情 況。本實驗以生理鹽水為測試對照，phorbo]. myr'statc acetate (PMA) 0.5微克/10微升 為陽性對照。實驗測定結果表明胸腺素e 16蛋白加樣組雞胚絨毛尿囊膜血管生長明顯旺盛， 管徑粗且分支多，呈葉狀分布。以生理鹽水組血管生長程度作為對照，胸腺素ei6 5微克/10 微升的血管增生程度比生理鹽水組顯著增多，10微克/10微升的血管增生程度與pma陽性 對照組血管增生程度相當或略多。這一實驗結果表明胸腺素eie具有明顯促進血管增生作 用。
實施例3 傷口癒合實驗
小鼠麻醉後，用4毫米的組織取樣器除去小鼠背部的皮膚，造成直徑約為4毫米大小 的傷口，隨後隨機將動物分成胸腺素ei6治療組和對照組(每組8隻動物)。50微升(含有5微克胸腺素eie)的藥液滴於傷口上，對照組使用生理鹽水。動物每隔一天接收--次治 r，
連續觀察7天後處死小鼠。傷口面積用於評估胸腺素e 16的療效。傷口皮膚固定於10%福 爾馬林溶液內。H & K和膠原染色法用於觀察皮膚的病理學變化。重複實驗結果相同。結果顯示，胸腺素ei6處理組的傷口面積比對照組縮小一倍，傷臼局部有完整的表皮再生，廣泛 的新血管形成，膠原合成也明顯增加。傷口癒合時間比對照組明顯縮短，統計學具有極其顯 著性差異(p < o.ooi)。這些結果表明胸腺素eie具有明顯的促進傷n癒合作用。
實施例4
視網膜神經細胞保護實驗
大鼠視網膜神經細胞被分離出鼠體後，可在培養液中存活一定時間，進療正常的新陳代 謝活動。首先，用不同濃度的胸腺素P16對實驗組神經細胞進行保護性預處理一個小時，以 未經處理的神經細胞為對照組。然後在實驗組及對照組神經細胞培養液中加入雙氧水，使雙 氧水在培養液中的終濃度為100uM，將實驗組與對照組神經細胞在37"C培養24小時。釆用 MTT和TUNEL分析法，以神經細胞的抗氧化能力及存活時間作為指標，觀察胸腺素ei6對大 鼠視網膜神經細胞的保護作用。結果顯示經胸腺素ei6保護性預處理後的視網膜神經細胞 死亡數量與對照組相比明顯減少，胸腺素P 16具有明顯的保護由過氧化引起的神經細胞死亡 的作用，並且這種保護作用隨著濃度的增加而加強。
實施例5 細胞遷移實驗
為了測試胸腺素ei6與胸腺素P4的組合製劑對刺激細胞遊走是否有協同作用，我們使 用Boyden Chomber方法對人臍帶靜脈內皮細胞進行了測試。先將Boyden Chamber兩室間 隔的硝膜(孔徑0.8 mm)兩側均覆蓋FibronecLion，濃度為15微克/毫升，37 "C下放置60 分鐘。上室加入細胞懸液，下室為完全培養液，5% C02孵箱內靜置4小時，取出濾膜，將上 室面細胞刮除，經固定染色後，在顯微鏡下細胞計數。每組3張膜。統計變量以均數標準差 表示。結果表明將胸腺素P16與胸腺素P4按各50%的比例組合使用，遊走細胞的數量與單 獨使用胸腺素P16或胸腺素e4相比明顯增多。其促進細胞運動的能力明顯加強，說明兩種
e胸腺素具有協同作用。
權利要求
1. 一種具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用的複合胸腺素製劑，含有效量的胸腺素α1和胸腺素β，其生物活性變體或鹽、和其可接受的藥用載體。
2 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑的胸腺素al指的是天然存在的、化學合 成的、基因重組的胸腺素al ，以及他們的具有取代、缺失、延長、置換或其它修飾序列的 具有生物活性的類似物。
3 按照權力要求i所述，本發明複合胸腺素製劑的胸腺素p指的是胸腺素e家族成員，可 選用目前已發現的胸腺素β4、胸腺素β9、胸腺素β10、胸腺素β11、胸腺素β12、胸腺素 β13、胸腺素β14、胸腺素β15、胸腺素β16等16個成員及其他們的氧化型，以及包括含LKKTET序列的胺基酸片段、含LKKTNT序列的胺基酸片段及其他們的氧化型。胸腺素0可以 是從組織細胞中分離提取，可以是化學合成，也可以是人工基因表達。
4 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑可以用來治療或預防自身免疫性疾病及過 敏性疾病，包括系統性紅斑狼瘡、類風溼性關節炎、銀宵病、多發性硬化症、風溼病、阿狄 森病、纖維肌痛、慢性疲勞症候群、白塞氏病、重症肌無力、甲狀腺炎、血管炎、克隆病、 腸炎、多發性肌炎、皮肌炎、支氣管哮喘、過敏性鼻炎、花粉症、蕁麻疹、藥物過敏等。
5 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑還可以用來治療或預防感染性疾病，包括 病毒、細菌、真菌、衣原體、支原體、立克次體、螺旋體等病原微生物以及寄生蟲的侵犯而 致局部或全身感染性疾病，如風疹、麻疹、流行性腮腺炎、水痘、病毒性肝炎、脊髓灰質 炎、流行性乙型腦炎、猩紅熱、百H咳、敗血症、流行性出血熱、結核病、敗血病、傷寒、 腦炎、中毒型細菌性痢疾、非傷寒沙門菌感染等。
6 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑還可以作為肺癌、.胃癌、結腸癌、膀胱 癌、頭頸癌、乳腺癌、卵巢癌、淋巴白血病等腫瘤疾病的免疫輔助治療。
7 按照權力要求1所述，本發明所述的複合胸腺素製劑，可以是各自單獨製成的同一劑型 或不同劑型的組合產品，也可以是在生產過程中將兩種成分按最佳劑量、最佳比例製成的合 劑。給藥方法可以是靜脈、腹腔、肌肉、皮下、口服、吸入、局部外敷或任何其它可接受的 方法。對於任何給藥途徑，均可採用胸腺素al與胸腺素e分開的、前後的或兩者同時的給藥方法。
8 按照權力要求7所述，本發明複合胸腺素製劑可以是注射液，用於靜脈滴注、靜脈注射、 腹腔注射、肌肉或皮下注射，可以是用於口服的膠囊、片劑、粉劑等固體劑型組合物，還可 以是外用的敷貼、軟膏或霜、還可以是用於吸入途徑給藥的霧化劑型。
9 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑還可與其它各種免疫調節劑，如胸腺肽、 胸腺五肽、幹擾素(包括幹擾素a-la、幹擾素a-2a、幹擾素a-2b、幹擾素e、千擾素Y和 千擾素中的一種或數種的組合)合用。
10 按照權力要求1所述，本發明複合胸腺素製劑中含有的胸腺素α1與胸腺素β,兩者的比例為1000:0.1-0.1:1000，優選100:1-1:100,更優選10:1-1:10。其中胸腺素al的 含量可以為0.00lmg-1000 mg，優選1 mg-10 mg,更優選1.6-3.2 mg。胸腺素P的含量可 以為0.0001 mg -1000 mg，優選0.001-100 mg，更優選0.01 mg-10 mg。在對患者的聯合 給藥中，所述劑量單位可每日、隔日、每周、每月等方式給藥，—-天給藥一次或一天給藥多 次，例如--天給藥2、 3、 4次或更多。
全文摘要
本發明提供一種含有胸腺素α1和胸腺素β的胸腺素複合製劑，該複合製劑具有調節免疫、抗組織損傷及再生修復作用，可用於預防及治療感染性疾病、自身免疫性疾病及過敏性疾病，以及用來作為各種腫瘤疾病的免疫輔助治療。
文檔編號A61K38/32GK101204578SQ20061016744
公開日2008年6月25日 申請日期2006年12月20日 優先權日2006年12月20日
發明者寶勒日, 幹春玉 申請人:幹春玉;寶勒日