一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法

2023-05-31 22:55:56

一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法
【專利摘要】本發明研究了一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法，包括白鮮皮無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根誘導、煉苗移栽等步驟，本發明方法採用組織培養可以直接誘變和篩選出具抗病、抗鹽、抗蟲等優良性狀的品種，保存種質資源，避免優良基因的丟失。
【專利說明】 一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法

【技術領域】
[0001]本發明涉及白鮮皮組織培養的快繁方法，屬於植物【技術領域】。

【背景技術】
[0002]白鮮皮，coriez又稱白蘚皮、八股牛、山牡丹、羊鮮草,芸香科,多年生草本,生於山地灌木叢中及森林下，山坡陽坡。白鮮生於土坡灌木叢中，山地灌木叢中及森林下，山坡陽坡。白鮮喜歡溫暖溼潤，耐寒，怕旱，怕澇，怕強光照。東北、華北、華東及陝西、甘肅、河南、四川、貴州、新疆，以伊犁、阿勒泰地區最多。白鮮皮地上部分含補骨脂素，花椒毒素，東莨菪素，槲皮素，異槲皮素，根含白鮮鹼，Y -崖椒鹼，前茵芋鹼，茵芋鹼，白鮮明鹼，胡蘆巴鹼，膽鹼，O-乙基-降-白鮮鹼，O-乙基-降1-崖椒鹼，O-乙基-降-茵芋鹼，異斑點沸林草鹼，吳茱萸苦素，白鮮醇，娠烯酸酮，秦皮酮，黃柏酮，檸檬苦素，β-谷留醇，萊油甾醇，皂甙等，功能:清熱燥溼；祛風止癢；解毒，主治:風熱溼毒所致的風疹；溼疹；疥癬；黃疸；溼熱痺。目前主要是採用塊莖繁殖，組培技術尚無研究。


【發明內容】

[0003]本發明所要解決的技術問題是提供一種白鮮皮植株再生的快速繁殖方法，本發明方法採用組織培養可以直接誘變和篩選出具抗病、抗鹽、抗蟲等優良性狀的品種，保存種質資源，避免優良基因的丟失。
[0004]本發明所要解決的技術問題是通過以下方案來實現的:
取白鮮皮幼嫩的葉片，流水衝洗23min，超淨工作檯上次氯酸鈉消毒處理8min，無菌水衝洗6次，消毒處理過的白鮮皮幼嫩葉片接入RM+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的誘導培養基中，置於水浴恆溫箱中進行高溫熱擊處理，36°C熱擊處理20h，取出進行愈傷組織的誘導，PH5.8，暗光照培養，溫度23±2°C，誘導出來的愈傷組織放入培養基RM+NAA0.8-1.2mg/L+ZT2.0-2.5mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照22001x，溫度24±2°C，分化出來的芽苗接入1/2MS培養基中進行生根誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照50001x，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時，取出放入高溫滅菌過的泥炭:碎陶粒=3:1的基質中，使用高壓彌霧裝置，保持室內空氣相對溼度90%，二氧化碳發生裝置保持二氧化碳濃度為500ppm，自動噴霧定期噴水，每隔十五天噴施代森錳鋅90mg/L，每隔兩天噴施3/4田園式標準營養液，溫度控制在25°C，遮陰率65%，一個月後統計成活率。
[0005]採用本發明製備的白鮮皮成活率較高，周期短，產量大，能耗少，利於大規模種植。
[0006]下面將結合【具體實施方式】對本發明作進一步闡述，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。

【具體實施方式】
[0007]實施例1 取白鮮皮幼嫩的葉片，流水衝洗23min，超淨工作檯上次氯酸鈉消毒處理8min，無菌水衝洗6次，消毒處理過的白鮮皮幼嫩葉片接入RM+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的誘導培養基中，置於水浴恆溫箱中進行高溫熱擊處理，36°C熱擊處理20h，取出進行愈傷組織的誘導，PH5.8，暗光照培養，溫度23±2°C，誘導出來的愈傷組織放入培養基RM+NAA0.8mg/L+ZT2.0mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照22001x，溫度24±2°C，分化出來的芽苗接入1/2MS培養基中進行生根誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照50001x，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時，取出放入高溫滅菌過的泥炭:碎陶粒=3:1的基質中，使用高壓彌霧裝置，保持室內空氣相對溼度90%，二氧化碳發生裝置保持二氧化碳濃度為500ppm，自動噴霧定期噴水，每隔十五天噴施代森錳鋅90mg/L，每隔兩天噴施3/4田園式標準營養液，溫度控制在25°C，遮陰率65%，一個月後統計成活率，成活率89%。
[0008]實施例2
取白鮮皮幼嫩的葉片，流水衝洗23min，超淨工作檯上次氯酸鈉消毒處理8min，無菌水衝洗6次，消毒處理過的白鮮皮幼嫩葉片接入RM+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的誘導培養基中，置於水浴恆溫箱中進行高溫熱擊處理，36°C熱擊處理20h，取出進行愈傷組織的誘導，PH5.8，暗光照培養，溫度23±2°C，誘導出來的愈傷組織放入培養基RM+NAA1.2mg/L+ZT2.5mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照22001x，溫度24±2°C，分化出來的芽苗接入1/2MS培養基中進行生根誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照50001x，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時，取出放入高溫滅菌過的泥炭:碎陶粒=3:1的基質中，使用高壓彌霧裝置，保持室內空氣相對溼度90%，二氧化碳發生裝置保持二氧化碳濃度為500ppm，自動噴霧定期噴水，每隔十五天噴施代森錳鋅90mg/L，每隔兩天噴施3/4田園式標準營養液，溫度控制在25°C，遮陰率65%，一個月後統計成活率，成活率88%。
[0009]實施例3
取白鮮皮幼嫩的葉片，流水衝洗23min，超淨工作檯上次氯酸鈉消毒處理8min，無菌水衝洗6次，消毒處理過的白鮮皮幼嫩葉片接入RM+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的誘導培養基中，置於水浴恆溫箱中進行高溫熱擊處理，36°C熱擊處理20h，取出進行愈傷組織的誘導，PH5.8，暗光照培養，溫度23±2°C，誘導出來的愈傷組織放入培養基RM+NAA1.2mg/L+ZT2.0mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照22001x，溫度24±2°C，分化出來的芽苗接入1/2MS培養基中進行生根誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照50001x，溫度26±2°C，待試管苗長約5cm，根長約2cm時，取出放入高溫滅菌過的泥炭:碎陶粒=3:1的基質中，使用高壓彌霧裝置，保持室內空氣相對溼度90%，二氧化碳發生裝置保持二氧化碳濃度為500ppm，自動噴霧定期噴水，每隔十五天噴施代森錳鋅90mg/L，每隔兩天噴施3/4田園式標準營養液，溫度控制在25°C，遮陰率65%，一個月後統計成活率，成活率90%。
【權利要求】
1.一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法，包括白鮮皮無菌葉片的獲得、愈傷組織的誘導、愈傷組織的分化、生根誘導、煉苗移栽，其主要步驟如下: (1)取白鮮皮幼嫩的葉片，對其進行消毒處理； (2)取步驟(I)消毒處理過的白鮮皮幼嫩葉片接入RM+6-BA1.3mg/L+NAA0.2mg/L+0.7%瓊脂+30g/L蔗糖的誘導培養基中，置於水浴恆溫箱中進行高溫熱擊處理，36°C熱擊處理20h，取出進行愈傷組織的誘導，pH5.8，暗光照培養，溫度23±2°C ； (3)取步驟(2)誘導出來的愈傷組織放入培養基RM+NAA0.8-1.2mg/L+ZT2.0-2.5mg/L進行愈傷組織分化培養，附加蔗糖30g/L，瓊脂7g/L，pH5.8，光照22001x，溫度24±2°C ； (4)取步驟(3)分化出來的芽苗接入1/2MS培養基中進行生根誘導，附加蔗糖30g/L，瓊脂 7g/L, ρΗ5.8，光照 50001χ，溫度 26±2°C ； (5)取步驟(4)的試管苗進行煉苗移栽。
2.按照權利要求1所述的一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(I)中所述白鮮皮無菌葉片的獲得為，取白鮮皮幼嫩的葉片，流水衝洗23min，超淨工作檯上次氯酸鈉消毒處理8min，無菌水衝洗6次。
3.按照權利要求1所述的一種白鮮皮再生植株的快速繁殖方法，其特徵在於:步驟(5)中白鮮皮煉苗移栽的方法為待試管苗長約5cm，根長約2cm時，取出放入高溫滅菌過的泥炭:碎陶粒=3:1的基質中，使用高壓彌霧裝置，保持室內空氣相對溼度90%，二氧化碳發生裝置保持二氧化碳濃度為500ppm，自動噴霧定期噴水，每隔十五天噴施代森錳鋅90mg/L,每隔兩天噴施3/4田園式標準營養液，溫度控制在25°C，遮陰率65%，一個月後統計成活率。
【文檔編號】A01H4/00GK104255516SQ201410540510
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月14日 優先權日:2014年10月14日
【發明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京帝道農業科技有限公司