初乳肽及其用途的製作方法

2023-06-15 00:57:26

專利名稱：初乳肽及其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及初乳肽(colostrinin)及其作為藥物的用途。
背景技術：
初乳是由雌性哺乳動物乳房在分娩後最初數天內產出的黃色粘稠液體。分娩4至5天後它將被成熟母乳替代。與成熟母乳相比，初乳含糖較低。然而，初乳中卻含有豐富的脂類、蛋白質、無機鹽、維生素和免疫球蛋白。並且它還含有多種飄浮細胞，例如粒細胞、基質細胞、嗜中性白細胞、單核細胞、巨噬細胞、淋巴細胞，以及生長因子、激素和細胞因子。
已從哺乳動物初乳中分離並定性了多種因子。1974年，Janusz等人(FEBS Lett.，49，276-279)從綿羊初乳中分離出一種高脯氨酸含量的多肽(PRP)。該參考文獻的內容在此引入作為參考。業已發現，除綿羊以外的哺乳動物都以PRP的類似物作為初乳的組分。PRP也因此稱作初乳肽，並且被暫定成一類新的細胞因子。
Janusz等人在「高脯氨酸含量的多肽(PRP)-綿羊初乳中的一種免疫調製肽」(Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis，1993，41，275-279)中指出，綿羊初乳的PRP對小鼠具有親免活性。然而，該文獻卻沒有報導PRP對其他動物有任何治療作用。事實上應承認，從一種對小鼠有治療作用的組合物並不能預見到它也對其他任何動物有治療作用。

發明內容
本申請人發現，初乳肽具有許多前所未知的治療功效。具體而言，我們發現初乳肽可顯現出親免作用和精神病治療作用。
作為本發明的一個方面，本申請人提供了用作藥物的初乳肽。所述初乳肽可作為藥物用於非齧齒動物；我們還發現，所述初乳肽特別適合作為治療人類的藥物。
另一方面，本發明提供了初乳肽在製備治療中樞神經系統疾病或免疫系統疾病用藥物中的應用。


圖1顯示女性早老性痴呆患者(J.M)中對於γ-幹擾素(IFN-γ)誘導作用的低反應性狀態部分耐受的出現以及自然消失。
具體實施方案在本發明的一個優選實施例中，所述初乳肽被用來治療中樞神經系統的疾病，尤其是中樞神經系統的慢性疾病。可以用初乳肽治療的中樞神經系統病包括神經病和精神病。
適合用初乳肽治療的神經病的例子包括痴呆，誘發痴呆的疾病，例如神經變性疾病。神經變性疾病包括，例如老年性痴呆和運動神經元病；帕金森氏病是一個可用初乳肽治療的運動神經元疾病的實例。現已發現，初乳肽在治療稱作早老性痴呆的神經變性疾病中特別有效。
適合用初乳肽治療的精神病的例子包括精神病和神經官能症。例如，可用初乳肽治療情緒紊亂，特別是治療處於抑鬱狀態的精神病患者的情緒紊亂-已發現初乳肽幫助患者改善感覺安寧和心境安定。初乳肽還可以在藥物癖嗜者、解毒期以後以及興奮劑依賴性人群中用作輔助性戒除治療劑。
在本發明的另一個優選實施例中，所述初乳肽被用於治療免疫系統的疾病，尤其是慢性免疫系統疾病。因此我們發現，可在需要免疫調節的疾病治療中採用所述初乳肽。特別是，初乳肽適合治療包括人類在內的非齧齒動物的上述疾病。初乳肽在治療許多基於免疫和感染的疾病中十分有效。例如，用初乳肽治療與細菌病原和病毒病原有關的慢性疾病，還可以治療繼發的，例如腫瘤化療和放療繼發的獲得性免疫缺損。本發明特別適合治療需要非特異性免疫刺激和免疫校正的細菌性和病毒性慢性傳染病。
通常，慢性病是一種持續時間較長的疾病，常常至少一周，更常見至少一個月，並且經常是至少3個月或至少6個月。
本發明的特徵之一是用初乳肽改善新生兒免疫系統的發育。本發明的另一特徵在於用初乳肽校正兒童的免疫缺乏。所述初乳肽的這些用途特別適合未曾獲得初乳的嬰兒或兒童。而這種情況發生在，例如，出生後沒有母乳餵養的嬰兒和兒童中；在給這些嬰兒和兒童的人工食物中不含有初乳肽。
本發明的另一方面中，我們提供了初乳肽作為食品強化劑的用途。所述初乳肽特別適合用作嬰兒和幼童的食品強化劑，以校正其免疫系統發育中的缺乏。正如上文所述，這種缺乏發生在出生後未母乳餵養的嬰兒和兒童中。所述初乳肽也可以作為接受化療或患有惡病質或因慢性病而體重減輕的成人的食品強化劑。作為本發明的一個方面，我們提供了一種含有與生理可接受載體合用的口服可攝取初乳肽結合物的食品強化劑。該食品強化劑是液體或固體的形式；也適於將其以片劑形式供給。
本發明中可預防性給予所述初乳肽，以便有助於預防中樞神經系統疾病和免疫系統疾病的發展。
本發明上述初乳肽可以是綿羊初乳肽，或者是非綿羊產的初乳肽。非綿羊產的初乳肽可以從，例如人、母牛、馬、山羊、豬、犛牛、美洲駝和驢的初乳中獲得。初乳肽通常存在於上述動物分娩後1至4天後的初乳中。
此處的術語「初乳肽」是指一種從哺乳動物初乳中獲得的天然形式的多肽。有時初乳肽也稱作「colostrinine」，並且具有下列性質(i)分子量在16,000至26,000道爾頓之間；(ii)它是亞單位的二聚體或三聚體，各亞單位的分子量是5,000至10,000道爾頓，優選6,000道爾頓；(iii)它含有脯氨酸，並且脯氨酸的含量高於其他任何一種胺基酸的量。
我們發現，所述初乳肽以及組成它的亞單位都是非極性的。
在SDS(十二烷基硫酸鈉)存在下採用電泳法可對所述初乳肽的分子量進行測定；這種技術也可顯示出存在的二聚體和三聚體。還原或非還原條件的電泳皆表明，亞單位之間的鍵是非共價鍵。通過常規的胺基酸分析技術可以確定存在的脯氨酸。非極性色譜可能夠證實初乳肽的非極性。
本發明所用初乳肽可以是綿羊初乳肽或非綿羊初乳肽。綿羊初乳肽的分子量約為18,000道爾頓，並且由三個非共價鍵合亞單位組成，每個亞單位的分子量分別是約6,000道爾頓，其中含有22％重量的脯氨酸。每個亞單位的胺基酸組成由數量如下的殘基構成賴氨酸-2、組氨酸-1、精氨酸-0、天門冬氨酸-2、蘇氨酸-4、絲氨酸-3、穀氨酸-6、脯氨酸-11、甘氨酸-2、丙氨酸-0、纈氨酸-5、蛋氨酸-2、異亮氨酸-2、亮氨酸-6、酪氨酸-1、苯丙氨酸-3和半胱氨酸-0。
如上所述，天然形式的初乳肽來源於哺乳動物的初乳。通過除去初乳中的脂類和多數蛋白質可以獲取哺乳動物初乳的初乳肽。廣義上，初乳肽是從例如大型畜牧動物的初乳中通過柱色譜技術和其他生物技術獲得，或者通過基因工程技術來製得。
具體而言，可以通過下列步驟從哺乳動物初乳中分離出初乳肽(i)脫脂，例如通過離心法；(ii)去除蛋白質(例如酪蛋白)，例如通過降低pH；(iii)分離出與免疫球蛋白鍵合的初乳肽，例如通過(a)對脫脂和除蛋白後的乳清進行離子交換色譜；和(b)用磷酸鹽緩衝鹽水洗脫，並收集含有與免疫球蛋白，例如綿羊的IgG2鍵合的初乳肽的餾分；(iv)從免疫球蛋白上分離初乳肽，例如採用篩分色譜法；和(v)提純初乳肽，優選通過(a)將分子量低於30,000道爾頓的部分進行脫鹽；和(b)為免疫球蛋白引入抗體，由此除去此類蛋白質，得到終產物。
儘管上述定義是指天然的哺乳動物初乳肽，但此處的術語「初乳肽」也包括其生物活性基本相同的類似物和片斷，以及通過DNA重組技術生產的哺乳動物初乳肽、其類似物或片斷。此處的初乳肽還包括通過多肽合成技術製備的、組成與天然初乳肽基本相同的生物活性多肽。
本發明另一方面提供了一種用初乳肽治療中樞神經系統疾病或免疫系統疾病的方法。上文已對適合用本發明所述方法治療的疾病作了描述。在本發明一個優選實施例中，患者接受初乳肽的第一階段給藥，該第一階段中每天給予約1至2個治療單位，隨後是沒有初乳肽給藥的第二階段。所述第一階段優選是約2至4周，更優選約3周；並且，第二階段優選約2至5周，更優選約4周。優選至少重複一次這種治療循環，並且更優選重複不止一次。
本發明方法中所用的治療單位優選25至1,000微克，更優選50至100微克的初乳肽。
可以將初乳肽製成適當的形式來給藥。例如，製成口服、直腸或非腸道給藥的形式。具體而言，可將初乳肽配製成注射劑給藥，或者優選配製成適合通過口腔/鼻咽腔黏膜、食道或其他黏膜表面吸收的形式給藥。所述口服製劑可以是適於吞咽的形式；或優選溶於唾液的形式，這種製劑是在口腔/鼻咽腔黏膜內吸收。所述口服製劑也可以是口服給藥的片劑、糖錠(即適合留在口腔內含服的甜片)、可咀嚼成口膠的粘性凝膠。還可將所述初乳肽配製成膠用粘性硬膏或貼劑。所述初乳肽還可以是塗敷在生殖泌尿器官黏膜上的製劑。
當然，儘管能夠以完整初乳的形式給予所述初乳肽，但這並不可取，因為完整的初乳具有不適的味道並且難以儲存。
本發明所用初乳肽可以來源於任何哺乳動物，例如取自人類或動物，例如母牛、馬、山羊、豬、犛牛、綿羊、美洲駝或驢、駱駝等。
對綿羊初乳肽和人初乳肽進行試驗。綿羊的初乳肽以ColostrininTM的商標出售。
在動物試驗中發現，初乳肽的特徵是其體內外親免作用，這種親免作用是基於對胸腺細胞向活性T細胞分化和成熟的發展的調節性質，基於對免疫反應的刺激或抑制作用，並且基於對胸腺細胞上多種表面標記的表達的誘導作用。在對小鼠腹膜內給藥中，初乳肽可抑制NZB系小鼠溶血性貧血的發展，也抑制小鼠肉瘤180的生長，並且對於受到γ射線照射的小鼠，初乳肽可以保護該動物對抗放射病。小鼠的毒理學試驗表明，口服和非腸道給藥後毒性極低，這是由於LD50高於1.25g/kg體重。初乳肽還表現出對人和試驗動物中免疫活性細胞的生長、成熟和分化的刺激能力。在人外周血液的淋巴細胞培養物(包括從臍帶血中分離出的淋巴細胞的培養物)中，初乳肽的特徵在於它可刺激細胞因子，特別是γ-幹擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子(TNF-α)、白介素類(例如IL-6和IL-10)以及多種生長因子的產生。通過已知方法可以定量測定所生產的細胞因子。
在自然狀況下，分娩後1至4天內，人的初乳和所有哺乳動物，尤其是大型畜牧動物(例如母牛、馬、山羊、豬、犛牛、綿羊、美洲駝或驢、駱駝等)的初乳中都存在具有該生化活性的綿羊初乳肽類似物。初乳肽在新生動物吸吮和吞咽母體初乳的過程中進入到體內。由於初乳肽分子量較低，初乳肽可以在口腔/鼻咽腔黏膜上通過細胞受體起作用，甚至進行簡單擴散(ordinary diffusion)。研究表明，由於消化道上段的黏膜和上皮含有某些免疫調製劑的受體，所述初乳肽可以以片劑和舌下含片、吞咽用片劑和膠囊、粘性凝膠形式以及與樹膠固定在一起的粘性硬膏形式來給藥。也可以將初乳肽塗敷在生殖泌尿器官的黏膜上。
以弄清初乳肽所誘導的生化活性為目的的科學試驗還揭示了，來源於產後1至7天婦女的人類初乳具有類似生物活性。人體原料中初乳肽的分離方法類似於從畜牧動物的初乳，尤其是綿羊初乳中獲取初乳肽的方法。由產後1至7天婦女乳腺分泌的初乳含有多肽類的初乳肽，它的量取決於泌乳作用，並且在2至3天內最佳，此時1升初乳中可檢測出300mg初乳肽。這樣的人初乳肽產量可見於綿羊初乳中。現已證明，人初乳肽具有許多與例如綿羊產類似物相似的生物性質。來源於人初乳的初乳肽可刺激初乳所含淋巴細胞以及臍血淋巴細胞分泌細胞因子，所述細胞因子主要包括幹擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子TNF-α、白介素類(IL-10和IL-6)或其它細胞因子。這些細胞因子參與體液和細胞的免疫反應。
採用公開在波蘭專利(PL 170592B1)和歐洲專利EP-B-0609225中的性能試驗免疫學方法，可對人和動物來源的初乳肽的生物活性進行測定。
在對人類志願者的研究中發現，用至少含有25μg初乳肽的含片以每天至少一片的劑量給藥約3周後，沒有觀察到任何副作用；另一方面，卻形成一種對誘導IFN-γ以及部分腫瘤壞死因子TNF-α的低反應狀態。在停止初乳肽給藥後，這種低反應性狀態將恢復正常。這些反應的結果是Th1和Th2淋巴細胞和輔助細胞產生細胞因子。
臨床試驗還表明，初乳肽具有免疫調節作用以及對中樞神經系統的作用，它可以預防性和治療性地應用於下列疾病，例如，用於預防早老性痴呆的出現和進行，並緩解這種疾病；也可應用於一些其它起因的老年性痴呆，並可治療與免疫和感染有關的慢性疾病。
可用具有下列組成和胺基酸序列的、縮寫為NP的九肽取代初乳肽Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro。通過糜蛋白酶的消化作用和柱色譜的分離，可從初乳肽中獲取NP，或者通過化學合成法來製得NP。NP是初乳肽有效片段的一個例子。現已發現，NP具有與初乳肽相似的生物作用，特別是，它適合治療上述慢性免疫疾病和中樞神經系統疾病(尤其是早老性痴呆)。可以用NP治療上述任何一種疾病。也可以將它應用於食品強化劑中。可以按照與初乳肽相同的方法來配製它。NP適合治療哺乳動物，尤其是人類。
為了更全面地理解本發明，可以參考下列僅作說明作用的實施例。
實施例1分子量18,000道爾頓的綿羊初乳肽是由三個非共價連接的亞單位構成，亞單位的分子量為6000道爾頓，各亞單位具有下列胺基酸組成

所用初乳肽來源於在綿羊分娩至多24小時後泌乳開始後的綿羊初乳。將原料在35000×g離心，以便除去脂肪及部分酪蛋白。將所得部分的1g置於DEAE-纖維素柱中，從而分離出與免疫球蛋白IgG2絡合的多肽初乳肽，利用葡聚糖膠凝G-100柱色譜法以及用葡聚糖凝膠G-75再次進行的色譜，可從柱中洗脫出與IgG2分離的初乳肽。隨後，將一部分多肽通過結合有綿羊IgG2抗體的瓊脂糖膠凝柱，以除去痕量的IgG2雜質。所得製備物通過葡聚糖膠凝G-25的方式脫鹽並冷凍乾燥，此後將其儲存在+4℃或-20℃下。
所得初乳肽的商標名被命名為ColostrininTM。
在有SDS存在的聚丙烯醯胺凝膠電泳中，在與分子量5800道爾頓相對應處可以觀察到一個強帶，同時還出現兩個弱帶，它們分別與分子量12400道爾頓和18200道爾頓相對應。
實施例II從實施例1所述初乳肽中可以得到九肽NP，NP的組成和胺基酸序列為Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro。
通過10個活性單位的蛋白水解酶糜蛋白酶在30℃的溫度下對50mg初乳肽進行20小時的消化。對消化產物的分離應通過至少一個循環的葡聚糖凝膠G-10柱色譜。凍幹所得製備物，隨後儲存在+4℃或-20℃的溫度下。通過測定N-末端胺基酸對九肽進行分離。
實施例III吸吮片形式的劑量單位具有下列組成活性成分 實施例1所得的Colostrinin多肽0.0001g穩定劑 白蛋白，無雜質，主要I.P.S 0.000135g潤滑劑/粘合劑硬脂酸鎂 0.003g載體 甘露糖醇 0.1g(0.1497g)
將上述組分懸浮在0.0001M NaCl中。吸吮片主要用於治療早期和晚期痴呆症(包括早老性痴呆)以及不同時期的老年性痴呆；還可以治療慢性細菌性及病毒性感染、所需的非特異性免疫刺激和免疫校正以及由多種試劑誘發的獲得性免疫缺乏。此外，也可用它治療情緒紊亂，特別是治療不同抑鬱狀態的精神病患者，從而改善他們的全身安全感和心境穩定性；初乳肽還可以在藥物癖嗜者、解毒期以後以及興奮劑依賴性人群中用作輔助性戒除治療劑。ColostrininTM也可以作為人工食品來校正新生兒和幼童的營養缺乏。
實施例IV製備具有下列組成的黏膜塗敷用凝膠形式活性成分實施例1所得ColostrininTM多肽穩定劑 白蛋白膠凝載體Orabase-Plain，它含有果膠、膠凝、羧甲基纖維素鈉和碳氫化合物膠每1ml凝膠載體使用0.0003g多肽ColostrininTM和0.0015g白蛋白。如此配製的劑量單位主要用於口腔和上呼吸道細菌性及病毒性感染的循環治療。
實施例V肌肉內、皮下或靜脈內注射形式的製劑。
活性成分實施例1所得ColostrininTM多肽穩定劑 人白蛋白，無雜質膠凝載體滅菌的無熱原水每1ml安瓿中使用0.0003g ColostrininTM多肽、0.0015g白蛋白、作為抗菌劑的0.001％硫柳汞(即乙汞硫代水楊酸鈉鹽)。這種劑量單位主要用於細菌性和病毒性感染的循環治療。
實施例VI肌肉內、皮下或靜脈內注射形式的製劑。
活性成分實施例II所得NP穩定劑 白蛋白，無雜質膠凝載體滅菌的無熱原水每1ml安瓿中使用0.0003gNP、0.0015g白蛋白、作為抗菌劑的0.001％硫柳汞(即乙汞硫代水楊酸鈉鹽)。這種劑量單位主要用於細菌性和病毒性感染的循環治療。
實施例VII按照下列方法從接受實施例III所述藥物形式循環治療的健康和患病志願者中採集血液，分析血中多肽ColostrininTM對體外細胞因子的誘導作用。
將不含防腐劑但每1ml含有10個單位肝素的全血以1∶10的配比稀釋在RPMI1640培養基中。在37℃和含有5％二氧化碳的條件下於相同培養基中孵育20小時，孵育所用培養基不含有誘導物(陰性對照)，或者含有1至100μg/ml多肽ColostrininTM，或含有2μg/ml血的植物凝集素(PHA)和2μg/ml血的脂多糖(LPS)。含有PHA和LPS的混合物的樣品作為陽性對照物，原因在於它們可以刺激最高量的細胞因子。表1和2中列出了試驗結果。結果表明，ColostrininTM在1至100μg/ml的濃度下以劑量依賴方式刺激細胞因子的產生。與陰性對照物(不含誘導物)比較，這些結果有統計學意義(p＜0.0001)。早老性痴呆患者的IFN生產能力降低，並且TNF的也較小程度地降低。
表1綿羊ColostrininTM(系列A 1993)在健康志願者或早老性痴呆患者的全血淋巴細胞培養物中的細胞因子誘導作用

健康志願者組(22人)的年齡各不相同(年齡在20至64歲間)。早老性患者組(50人)年齡也不相同(年齡63±7.5歲)。儘管不含(無)誘導物的空白對照組之間的標準偏差(±SD)差異性較大，但ColostrininTM有統計學意義(p＜0.001)。
表2綿羊ColostrininTM(A系列1993)在用健康志願者和多種疾病患者全血進行的試驗中對幹擾素(IFN)生產的刺激例供血者 誘導物劑量(μg/ml)IFN的效價，其測定通過(診斷)抗病毒 ELISA IFN-γ生物試驗 pg/ml(單位/ml)Z.B.ColostrininTM1003002920健康ColostrininTM10 3003402年輕士兵ColostrininTM1 1001413PHA+LPS2+22003308空白對照 - ＜324C.D.ColostrininTM1006003941健康ColostrininTM10 2003778年輕士兵ColostrininTM1 1002690PHA+LPS2+26004631空白對照 - 5 55M.J.ColostrininTM10040 400早老性 ColostrininTM10 20 427痴呆患者PHA+LPS2+23003757空白對照 - 3 46S.E.ColostrininTM1006 29精神ColostrininTM10 6 29分裂症 PHA+LPS2+230 243空白對照 - 3 19F.W.ColostrininTM10070 523乳腺癌 ColostrininTM10 50 307PHA+LPS2+26002833空白對照 - 40 150
附註對存在的IFN進行的生物試驗可以測出不同類型幹擾素的含量，而ELISA試驗僅檢測免疫活性IFN-γ的水平。
實施例VIII從Wroclaw的地區專業醫院的婦產科獲得臍帶血。在產後4至6小時獲取的臍帶血的淋巴細胞中，ColostrininTM通過下列途徑體外有效誘導細胞因子。
用每100ml含有5.7g Ficoll 400和9.0g泛影酸鈉的Ficoll-Paque梯度物分離淋巴細胞。以每1ml培養基2×106個淋巴細胞的密度將分離的淋巴細胞懸浮在RPMI-1640培養基中。向該淋巴細胞懸浮液中加入濃度為1至20μg/ml的ColostrininTM或10μg/ml植物凝集素。將該培養物在37℃下孵育20小時。隨後通過生物學方法對培養液中細胞因子的水平進行檢測。表3中給出了一個典型實例。1至100μg/ml濃度的ColostrininTM所具有的細胞因子(IFN和TNF)刺激作用與傳統IFN-γ誘導物-植物凝集素的相類似。
表3ColostrininTM(A系列1996)在臍帶血淋巴細胞培養物(CBL)中的細胞因子誘導作用N 誘導物 劑量(μg/ml)細胞因子(單位/ml±SD)IFN TFN32 ColostrininTM20 89±7959±4139 ColostrininTM10 78±8037±3517 ColostrininTM1 38±6616±1750 PHA 10 75±6683±6950 空白對照 - 3±3 3±4N-被檢測CBL樣品數學生t-檢驗中，ColostrininTM的顯著性差異機率(p)-IFN和TNF中所用的「無」是p＜0.0001。
由於臍帶血中富含未成熟幹細胞，而這種細胞能夠繁殖成造血細胞和多種免疫活性細胞，所以ColostrininTM極大地加快了幹細胞的成熟。結果還表明，ColostrininTM可以有效治療不同類型的免疫缺陷，也可以在例如外傷、感染、化療和放療後用於刺激造血系統。在生物醫學研究中，具有類似作用的天然產物很罕見。
實施例IX對一組患有早期和中期早老性痴呆症的志願者進行中樞神經系統疾病療法的試驗。所用劑量單位以吸吮片形式在兩餐之間給藥，該劑量單位含有0.00015實施例I和III所述的ColostrininTM。首先，每天使用一片並持續3周，隨後中止治療達2至4周，此後再次進行治療並且每天服用2片且持續3周。發現ColostrininTM療法可誘導一種低反應性或耐受的狀態。這表明沒有合成IFN及腫瘤壞死因子TNF-α的能力。可以用這種現象對活性劑的功效進行定量測定。
在中止上述藥物的給藥後，這種耐受狀態也發生自發性逆轉。ColostrininTM的這種暫時性耐受狀態歸因於由Th1和Th2淋巴細胞、輔助細胞所產生的細胞因子，所述輔助細胞例如是單核細胞、巨噬細胞、樹狀細胞、內皮細胞及其產物。其結果是，可在早老性痴呆患者中觀察到人際關係的改善和心境高漲。
附圖1圖示了女性早老性痴呆患者(J.M)中的對於γ-幹擾素(IFN-γ)誘導作用的低反應性狀態部分耐受的出現以及自然消失，這些患者每隔一天服用100μg的ColostrininTM片劑並持續3周。隨後將治療中止3周(在暫定期間，對誘導物的耐受性恢復正常)。每周採集血樣以用於檢測ColostrininTM和空白對照(PHA-10μg/ml)的IFN-γ刺激作用。上文部分已描述了進行細胞因子誘導試驗及其定量測定的方法。
被誘導IFN-γ水平的檢測結果表明，低反應性早在服用ColostrininTM(每2天100μg/片)的第一周即出現並在治療的第三周達到最高值。在中止治療的3周內(即治療開始後第6周內)，對IFN-γ誘導作用的耐受狀態發生自發性逆轉。並且，該附圖表示，「特別是」綿羊ColostrininTM(OvCal)，這種低反應性在觀察的第6周仍能夠維持，而PHA低反應性卻完全消失。
實施例X對一組患有早期早老性痴呆症的志願者進行中樞神經系統疾病療法的試驗。所用劑量單位以吸吮片形式在兩餐之間給藥，該劑量單位含有0.00015實施例II所述NP。首先，每天使用一片並持續3周，隨後中止治療達3周，此後再次進行治療並且每天服用2片且持續3周。發現NP療法可誘導一種低反應性或耐受的狀態。這表明沒有合成IFN及腫瘤壞死因子TNF-α的能力。可以用這種現象對活性劑的功效進行定量測定。
在中止上述藥物的給藥後，這種耐受狀態發生自發性逆轉。NP的這種暫時性耐受狀態歸因於由Th1和Th2淋巴細胞、輔助細胞所產生的細胞因子，所述助細胞例如是單核細胞、巨噬細胞、樹狀細胞、內皮細胞及其產物。其結果是，可在早老性痴呆患者中觀察到人際關係的改善和心境高漲。
權利要求
1.一種包含口服劑型的藥物組合物，所述口服劑型含有預先選擇的量的初乳肽和生理學可接受的載體。
2.權利要求1的藥物組合物，其中初乳肽為非綿羊初乳肽。
3.權利要求1或2的藥物組合物，其為適於經口腔/鼻咽腔黏膜吸收的形式，和/或為適於在消化道中吸收的形式。
4.權利要求1、2或3的藥物組合物，其為片劑、糖錠、凝膠、貼劑或硬膏劑的形式。
5.權利要求1至4之任一項的藥物組合物，包含25～1000微克初乳肽。
6.權利要求1至5之任一項的藥物組合物，包含50～100微克初乳肽。
7.權利要求1至6之任一項的藥物組合物，其中所述初乳肽為分離的形式。
8.包含口服劑型的食品強化劑，所述口服劑型含有與生理學可接受的載體一起配方的分離形式的初乳肽。
9.包含口服劑型的藥物組合物，所述口服劑型含有組成和胺基酸序列為Val-Glu-Ser-Tyr-Val-Pro-Leu-Phe-Pro的九肽和生理學可接受的載體。
全文摘要
本發明涉及包含含有初乳肽和生理學可接受的載體的口服劑型的藥物組合物和食品強化劑，以及包含含有特定九肽和生理學可接受的載體的口服劑型的藥物組合物。
文檔編號C07K14/47GK1535722SQ03146609
公開日2004年10月13日 申請日期1997年10月3日 優先權日1996年10月3日
發明者馬林·雅努什, 約瑟夫·利索夫斯基, 安娜·杜博夫斯卡－因格洛特, 利索夫斯基, 杜博夫斯卡-因格洛特, 馬林 雅努什 申請人:喬治亞季斯生物技術有限公司