摻入額外的長鏈脂肪酸的食品組合物的製作方法

2023-06-11 01:43:41

專利名稱：摻入額外的長鏈脂肪酸的食品組合物的製作方法
技術領域：
001本發明涉及轉基因得到的十八碳四烯酸(stearidonic acid)在功能食品開發中的應用。更具體地涉及通過使用源自轉基因植物的十八碳四烯酸在食品的營養品質和保存期限方面的改進。

背景技術：
002本發明涉及通過利用新型部分源自轉基因植物的長鏈多不飽和脂肪酸組合物(「LC-PUFA」)改進食品的方法，尤其是那些具有ω-3脂肪酸的正面特性以及通過減少亞麻酸使穩定性提高的脂肪酸組合物。具體地，本發明人提供在食品中利用源自植物的LC-PUFA的技術和方法，所述源自植物的LC-PUFA當與來自於常規改良品種的產油植物的油結合時改善營養品質。過去，食用脂肪被認為是沒有價值的或甚至是有害的飲食成分。許多研究已經在食用脂肪與肥胖症和其它病理例如動脈粥樣硬化之間建立生理聯繫。在這種低營養價值的認知下，在很多醫療機構是不鼓勵消耗脂肪的。。
003然而，最近的研究已經確定，儘管它們具有相對簡單的生物結構，但是存在一些類型的脂肪，其看來以某些方式改進身體機能，並且實際上對某些生理過程可能是必需的。更寬一類的脂肪分子包括脂肪酸、異戊二烯醇、類固醇、其它脂類和油溶維生素。脂肪酸位於其中。脂肪酸是羧酸，其在主鏈上具有2至26個碳，在它們的糖結構上沒有或具有各種數目的不飽和鍵。它們通常具有大約4.5的離解常數(pKa)，這表明在正常的身體環境(生理pH7.4)中，大多數脂肪酸將處於離解的形式。
004隨著脂肪以及特別是脂肪酸的營養程度上的改進，在食品業許多已經開始集中於脂肪酸和脂類技術作為食品生產的新中心。這種中心特別著重於生產ω-3脂肪酸並將其摻入食品中。ω-3脂肪酸是長鏈多不飽和脂肪酸(鏈長度為18-22個碳原子)，其中第一個雙鍵(「不飽和鍵」)始於第三個碳原子。它們被稱為「多不飽和的」的原因在於它們的分子在其醣鏈上有兩個或更多的雙鍵的「不飽和鍵」。它們被稱為「長鏈」脂肪酸，原因在於它們的碳主鏈具有至少18個碳原子。用於食品組合物的油類的LC-PUFA族包括α-亞麻酸(「ALA」)、十八碳四烯酸(「SDA」)、γ-亞麻酸(「GLA」)、亞油酸(「LA」)。ALA是「基礎(base)」ω-3脂肪酸，SDA在體內通過一系列酶催化反應從ALA製造，但是根據本發明，ALA被減少以便提供更健康的油類組合物。這種來自ALA的合成過程分別被稱為「延長」(通過引入新的碳原子分子變得更長)和「去飽和」(產生新雙鍵)。在自然界中，ALA最初發現於某些植物的種子(例如亞麻)中。
005除了僅僅確保用於社會消費的適當的LC-PUFA供應上的困難以外，將LC-PUFA加工到食品中的成本還通常是限制性的。這些ω-3脂肪酸以及一些其它的LC-PUFA可被快速氧化，產生不受歡迎的氣味和風味。為了降低氧化速率，食品加工機械因此必須在冷凍條件下分裝上述油脂或者將想要的脂肪酸裝入膠囊中，每一加工機械都大大地增加了加工成本，隨之增加了消費者的成本。儘管這種費用增加，但食品公司都對供應ω-3脂肪酸和通常更健康的食用油感興趣，因為他們相信如果能夠擴大可靠的供應，有健康意識的消費者可能願意花費一小筆額外費用來改善飲食。
006隨著食品公司轉向開發必需的脂肪和油作為健康飲食的重要成分，政府也已經開始制定條例來推進LC-PUFA在飲食中的採用。滿足這些需求的困難在於無能力擴大足夠大的ω-3油的供應來與增長的市場需求相一致。這些在供應、穩定性和來源上的限制極大增加了成本，並相應地限制了食用ω-3的可用性。因此，存在一種需求，即以商業上可接受的方式提供大規模穩定供應的ω-3脂肪酸，以包括在食品和飼料配製物中。
007此外，在美國，豆油佔消耗的所有食用油的2/3。因為豆油很多並且成本相對低，食品公司使用豆油。豆油的有害飽和脂肪通常較低並且具有消費者想要的風味和質感。當前，在美國所消費的油類中，豆油大約佔80％，或180億磅，並且被最廣泛地用於食品生產。然而，為了滿足保存期限的市場期望值，必須將氫加入到豆油中以增加其保存期限以及用於加工食品例如油炸食品、焙烤食品和點心產品的穩定性。這種氫化過程產生反式脂肪。
008遺憾的是，由於發現反式脂肪對人的膽固醇曲線具有負面影響，其已經與心臟病相關聯。鑑於此，自從2006年1月1日美國食品與藥物管理局(FDA)已經要求食品標籤要包括反式脂肪的含量。這造成對含有低含量反式脂肪的食用油供應的大量需求。因此，對含有較低反式脂肪的組合物存在市場需求，曲線還包括其它可識別的健康有益物例如ω-3脂肪酸，以滿足聯邦指南和消費者對更健康食品的需求。
009本發明提供了解決上述兩種需求的發明。本發明提供了魚或微生物供應的ω-3脂肪酸的替換物並且提供了具有更低亞麻酸含量的豆油，這改善了其風味分布曲線且在無需通過氫化產生反式脂肪的情況下增加了保存期限。所依賴的技術為常規的植物育種技術、油加工技術和轉基因開發的植物。可以滿足需求的具體包括在以下類型中的植物品種是大豆、玉米和低芥酸菜籽，但也可以根據需要包括其它的植物。一旦生產，本發明的LC-PUFA可用於改進很多種食品的保健特性。這種生產同樣可以根據需要按比例放大，以減少對捕獲野生魚種的需求和為水產養殖作業提供必需的脂肪酸成分，所述每一種都減輕對全球漁業的壓力。
0010令人吃驚的是，發明人已經發現，來自本發明轉基因植物來源的LC-PUFA的濃度在特定的食品或飲料產品中需要較低濃度在生理學上是重要的。這些範圍完全在典型食品的可接受的體積參數內並且可以用於很多種食品。
發明概述 0011本發明包括從被人工改造以包含大量LC-PUFA的轉基因大豆生產油，用於食品中以改善終端消費者的健康。已經種植足夠數量的富含LC-PUFA的大豆，以允許產出含有大量LC-PUFA成分的豆油。相對於其它來源的ω-3油，這種「LC-PUFA油」提供初始純正的風味、更長的保存期限穩定性和增強的營養品質。也開發了儲存期間保持油品質的方法。已經生產出幾種由LC-PUFA製成的食品，並且發現其與由常規油類如豆油生產的食品相比，具有相似的風味和感官性質。
0012同樣根據本發明，已經進行了食品的保存期限測試，並且相對於其它含ω-3的食品，植物來源的LC-PUFA油顯著地改進了保存期限特性。因此，本發明優選的實施方式是由轉基因植物生產的LC-PUFA油在用於人類消費的食品生產中的用途。
0013營養研究已經顯示，相比於α-亞麻酸，SDA在體內以大約5倍更有效地轉化為EPA。因此，在本發明的另一個實施方式中，植物來源的LC-PUFA由於具有較低的氧化速度而可以被用作具有延長保存期限的營養藥物補充劑(nutraceutical supplement)或某些病理狀況的食品添加劑。
0014根據本發明的另一個實施方式，植物來源的LC-PUFA組合物可以提供反式脂肪減少的油，其還可以通過釋放ω-3油的保健益處而增效地改善被遞送油的健康特性。
0015具體而言，本發明證實，可以用十八碳四烯酸生產可接受的食品，其增強了它們的保存期限，超過有競爭力的PUFA油類的保存期限。
0016此外，本發明的方法以可食用油、加工油或油組合物、用於豆漿配製物中的全豆提取物或作為部分提取粉狀組合物的形式，提供了優化的食品配製物以使終端消費者的健康改善最佳化。
0017在本發明的另一個實施方式中，由轉基因植物製備的LC-PUFA油可以形成水產養殖魚類的日糧基礎和/或來自這些魚的產品的基礎。
0018在本發明的另一個實施方式中，由轉基因植物製備的LC-PUFA油可以形成肉用牛(beef cattle)的日糧基礎以改善牛肉和/或牛肉產品的營養特性。本發明的其他實施方式還可以改善繁殖功能。
0019在本發明的另一個實施方式中，由轉基因植物製備的LC-PUFA油可以形成豬的日糧基礎以改善豬肉和/或豬肉產品的營養特性。本發明的其他實施方式還可以改善繁殖功能。
0020在本發明的另一個實施方式中，由轉基因植物製備的LC-PUFA油可以形成雞的日糧基礎以改善雞肉和/或雞肉產品的營養特性。本發明的其他實施方式還可以改善繁殖功能。
0021在本發明優選實施方式的下述詳細描述中，參考附圖，本發明的其它特徵和優點將會變得顯而易見。
附圖簡述 提到「SDA+VistiveTM」的附圖也包含本發明的LC-PUFA油。
0022

圖1顯示了PUFA代謝的生物合成途徑。
0023圖2顯示了義大利調料A-E的感官信息的時間點測試。
0024圖3顯示了牧場式(Ranch)調料A-E的感官信息的時間點測試。
0025圖4顯示了蛋黃醬A-D的感官信息的時間點測試。
0026圖5顯示了表示ω-3脂肪酸相對生物活性的圖。
0027圖6顯示了豆漿生產的工藝流程圖。
0028圖7顯示了香草豆漿生產的工藝流程圖。
0029圖8顯示了麥淇淋生產的工藝流程圖。
優選實施方式描述 0030下面的縮寫在說明書中有指定的意思 關鍵詞縮寫 AA 花生四烯酸 ALAα-亞麻酸 DHA二十二碳六烯酸 DNA脫氧核糖核酸 EPA二十碳五稀酸 GLAγ-亞麻酸 LA 亞麻酸 mRNA 信使核糖核酸 PUFA 多不飽和脂肪酸 SDA十八碳四烯酸 術語解釋 表達-產生相應的mRNA並翻譯該mRNA以產生相應的基因產物(即，肽、多肽、或蛋白)的基因轉錄過程。
飼料-可用於飼餵動物的物料，其非限制性地包括草料(forage)、粗飼料(fodder)和濃縮料。
食品-被人攝取並且含有可以代謝產生能量的營養素的物質。
基因-染色體DNA、質粒DNA；cDNA；合成DNA；或編碼肽、多肽、蛋白質的其他DNA、或RNA分子。
宿主或宿主有機體-細菌細胞、真菌、動物和動物細胞、植物和植物細胞、或任何植物部分或組織，包括原生質體、愈傷組織、根、塊莖、種子、莖、葉、苗、胚和花粉。
口感-是指物質在人口中的感覺如何。在口味測試特徵方面，這是指所測試物質的粘度、質地和光滑度。
營養食品條-如本文所用，術語「營養食品條」是指設計用於促進健康的食品棒。
轉化-是指將核酸引入接受宿主。
轉基因——通過技術插入細胞或其祖系體並成為由該細胞發育而來的植物或動物基因組的一部分的任何核酸分子片段。此類轉基因可以包括對轉基因植物或動物部分或完全外源(即，外來)的基因，或者可以代表與植物或動物的內源基因具有同一性的基因。
轉基因的-包括通過技術插入細胞或其祖系體並成為由該細胞發育而來的植物或動物基因組的一部分的核酸分子的任何細胞。
詳述 0031本發明涉及用於生產十八碳四烯酸以及將其摻入人和家畜的膳食中以努力改善人類健康的改進方法的系統。該生產是通過利用轉基因植物，其被基因工程以便以高收率生產LC-PUFA，以使其能商業摻入食品中。就本發明而言，脂肪酸的酸和鹽形式，例如，丁酸和丁酸鹽、花生四烯酸和花生四烯酸鹽，將被考慮考慮為可互換的化學形式。
0032本發明的油組合物提供了比已知的大豆組合物更低的亞麻酸曲線，同時提供了源自Ω-3的十八碳四烯酸的益處。與傳統豆油具有的8％亞麻酸相比，本發明的LC-PUFA組合物含有的豆油具有低於3％的亞麻酸。這產生了更穩定的豆油，這是由於亞麻酸越少，油本身將會氧化更慢，從而導致優良的保存期限。同樣亞麻酸的風味記錄使得利用此種化合物較低的組合物，所述油將具有更可口的風味特性。另外，含有較少亞麻酸的豆油需要較少的部分氫化或不需要部分氫化。因此，可以減少或消除不良的反式脂肪在加工豆油中產生，並且相應的油將具有更好的烹飪特性。
0033轉向圖1，所有高等植物都具有合成主要的18碳PUFA、LA和ALA，以及一些情況下合成SDA(C18:4n3，SDA)的能力，但是極少數能夠進一步將這些延長並去飽和，以產生AA、EPA或DHA。因此在高等植物中合成EPA和/或DHA需要引入數種編碼將LA轉化成AA、或將ALA轉化成EPA和DHA所需的所有生物合成酶的基因。考慮到PUFA在人類健康中的重要性，根據本發明，成功地製備轉基因含油種子中的PUFA(尤其是n-3類)可以提供這些用於膳食用途的必需脂肪酸的持續來源。在大多數合成PUFA的真核有機體中進行的「常規的」需氧途徑是以LA和ALA兩者的Δ6去飽和產生γ-亞麻酸(GLA，18:3n6)和SDA開始的。
確定油的組成 0034轉向表1a，提供相對於本發明的油組合物的構成油組成的「正常」範圍的基礎是重要的。用於建立食用油和重要的脂肪的基礎組成標準的數據重要來源為農業、漁業和食品部(Ministry of Agriculture，Fisheries and Food(MAFF))和位於英國的利茲海德食品研究協會(Leatherhead Food ResearchAssociation)的油、種子和脂肪協會聯盟(Federation of oil，Seeds and Fats)(FOSFA)同樣必須注意，提到「SDA+VistiveTM」的附圖也包含該發明的LC-PUFA油。
0035為了建立有意義的標準數據，必需從代表性地理起源收集足夠的樣本而且所述油相對於預期的組合物是純淨的。在MAFF/FOSFA工作中，針對11種植物油的每一種，研究了超過600個已知起源和歷史的植物含油種子的可信商品樣本，一般為十個不同的地理起源。分析所提取的油以測定它們的總脂肪酸組成(「FAC」)，適當時測定甘油三酯、固醇和生育酚組合物的2位FAC，甘油三酯碳數和碘值，油中的蛋白質值，熔點和固態脂肪含量。
00361981年之前，FAC數據不包含在公布的標準內，這是因為得不到足夠品質的數據。1981年，採用了包括FAC範圍來作為強制組成標準的標準。MAFF/FPSFA的工作提供了以後對這些範圍修訂的基礎。
0037一般來說，隨著更多數據變得可用，有可能提出比1981年所採用的那些窄得多並且因此更具體的脂肪酸範圍。表1a給出了在1981年食品法典委員會(Codex Alimentarius Commission(CAC))採用的油的FAC的實例和1993年舉行的脂肪和油法典委員會(Codex Committee on Fats and Oils(CCFO))會議所提出的相同油的範圍。
表1a-油類脂肪酸組成的標準

來源食品法典委員會，1983和1993。
0038鑑於上述和根據本發明，在重組含油種子植物中產生的富含LC-PUFA的油提供食品製造商先前得不到的油組合物。它提供在食品產品中摻入ω-3油，在本發明之前，該ω-3油不以明顯量存在於通常的植物油之中。此外，當這些油從魚類或藻類來源傳遞時，有可能使用這種ω-3油而沒有對食品感官品質或保存期限的傳統關心。在傳遞該油之後，可以使用和利用它來製備焙烤食品、乳製品、塗抹食品、麥淇淋、運動食品、營養條和嬰兒配方食品、飼料、水產養殖、營養藥物(neutrceutical)和醫療用途。每種都具有增強的營養含量。
轉向表1b，為舉例說明本發明的實用性，已選擇/正選擇代表寬範圍的食品種類的各種食品，以測定LC-PUFA和其他ω-3油對產品風味和保存期限的影響。
如由接受的保存期限感官測試所測定，氧化穩定性是確定脂肪和油的有效期和風味特徵的重要PUFA特徵。脂肪和油中的氧化變質可以通過溼化學法評估，如過氧化值(PV，其測量由初級氧化所得的過氧化物)和p-茴香胺值(AV，其主要測量由次級氧化所得的2-alkenal)；或者食品中的氧化變質可以通過感官品嘗測試來評估。所選的食品種類和產品如下 表1b
0041根據本研究，摻入轉基因LC-PUFA的食品產品的開發提供了一些配製物和方法。已進行的另外的開發和研究用於最優化風味和增強保存期限特徵。例如，可以含有本發明LC-PUFA組合物的食品或飲料包括焙烤食品和焙烤食品混合物(如，蛋糕、果仁巧克力蛋糕(brownies)、鬆餅、甜酥餅、發麵點心、餡餅和餡餅皮)、起酥油和油產品(如，起酥油、麥淇淋、煎炸油、烹調油和色拉油、爆米花油、色拉調料和蛋黃醬)、油炸食品(如，薯片、玉米片、玉米粉餅(tortilla)片、其他油炸的含澱粉小吃食品、炸薯條、煎麵團和炸雞)、乳製品和人造乳製品(如，黃油、冰淇淋和其他含脂肪冷凍甜品、酸奶和奶酪(包括天然奶酪、加工奶酪、奶油乾酪、酪農乾酪、奶酪食品和奶酪塗抹食品)、牛奶、奶油、酸奶油、酪乳、和咖啡奶精)、肉製品(如，漢堡、熱狗、維也納香腸、香腸、大紅腸(bologa)和其他午餐肉、罐頭肉(包括麵食/肉製品)、燉肉、三明治塗抹食品和罐頭魚)、人造肉、豆腐和各種蛋白塗抹食品、甜品和甜食(如，糖果、巧克力、巧克力糖果、糖霜和糖衣、糖漿、奶油餡和水果餡)、果仁油和各種湯、蘸料、沙司和肉湯。上述各實例包括本發明的不同實施方式。
0042本發明使其配方基於每種食品ω-3油的目標含量。這些含量基於LC-PUFA產品的生物等效性被鑑定。以下表2a中的信息以每一份為基礎鑑定了目標ω-3含量。
表2a 0043基於該信息，開發了本發明的LC-PUFA的優選配方，其具有適宜的油含量，以便以每份為基礎給予目標含量。由於一份大小存在差異，所添加的量在不同的應用之間有所變化。
0044下面為表2b-d，反映了本發明的LC-PUFA油組成的範圍。
表2b LC-PUFA油變體-1(由本發明轉基因植物生產)
表2c.LC-PUFA油變體-1(由本發明轉基因植物生產)

表2d.LC-PUFA油變體-1(由本發明轉基因植物生產)

表2e成品基礎油比較
＊本發明的LC-PUFA油是轉基因油「SDA」和Vistive油的混合物。
0045對於本發明，十八碳四烯酸的主要來源是從轉基因大豆中提取的油，所述轉基因大豆已經被人工改造以生產高含量的十八碳四烯酸。在油加工設備中加工這些大豆，並且按照美國專利申請2006/0111578和2006/0111254中描述的方法來提取油。
0046為了製備本發明的LC-PUFA組合物，使用一定量的轉基因得到的SDA油，並且任何液態大豆油用VistiveTM油代替。該油保留了富含SDA的ω-3油的好處，並具有許多另外存在於VistiveTM油的稠度的改善。
0047除油之外，從轉基因大豆和加工全脂豆粉時工業實施中的常用的對照大豆製備豆粉。利用本發明的LC-PUFA的食品配方的一個例子見下面的表3a-3c和圖2a-2e。表4a-4c提供了根據本發明的優選實施方式的義大利調料的一般特性。
表3a 義大利色拉調料-保存期限特性-
續表3a 義大利色拉調料-保存期限特性- 表6b接上表 LC-PUFA 金色義大利調料(GOLDENITALIAN DRESSINGS) 概況 等級範圍＝0至15 表3b義大利色拉調料-保存期限特性
表3b接上表義大利色拉調料-保存期特性-
表3c 義大利色拉調料-保存期特性
表4a義大利色拉調料

表4b義大利色拉調料 表4c義大利色拉調料 保存期限生產 分析/微生物結果 義大利調料 0048根據本發明的方法，將各種色拉調料樣品提交給合約食品實驗室用於本發明各實施方式的證實研究和分析。保存期限測試的一般方法是5個特性評味員品嘗所述調料並對於每種調料的特性和強度(15pt等級-0為沒有，15為極度)達成共識。評味員所鑑別的特性列表在所附的文件中。另外的特性根據保證鑑別。特性測試的特徵在下表5中提供，連同不同時間點的感官測試數據在下表6中提供。
0049下面的VISTIVE大豆油通過常規育種開發，與傳統大豆中發現的典型的8％的亞麻酸含量相比，其含有低於3％的亞麻酸。其結果是更穩定的豆油，對氫化的需求較少。因為具有較低亞麻酸含量的大豆減少了對部分氫化的需要，在加工豆油中應用它們將會減少反式脂肪在加工豆油中的存在。與本發明的轉基因SDA增效結合，已經開發了LC-PUFA油組合物，其滿足了對具有更健康特性的食用油的政府管理需求和商業需求。其維持較低含量的亞麻酸，同時提供ω-3油的益處和提高的生育酚含量。
表5SDA調料的感官特性定義 外觀 黃色 樣品中黃色的強度，從淡黃色到深黃色 香味/口味 總香味 樣品的總香味強度 總風味 樣品的總風味強度，包括基本味道。
總油任何類型油(包括氧化的油)的香味/風味強度 氧化的油氧化的油的香味/風味的強度，其被描述為已經歷過氧化的陳油，表 徵為紙板味、豆腥味、著色或魚腥味。
總臭味/風味 據信在產品中不希望的香味/風味的強度，包括氧化的油和其他臭味 記錄(off notes)。所述臭味記錄的性質將被描述 蛋黃醬/乳製品 與蛋黃醬或乳製品相關的香味/風味強度 醋 白醋或醋酸的香味/風味強度 洋蔥/大蒜/藥草 與洋蔥、大蒜和所有乾燥且新鮮的綠色藥草相關的香味/風味強度。
酸味四種基本味道之一，主要在舌的側面感知；一般指酸。
鹹味四種基本味道之一，主要在舌的側面感知；一般指氯化鈉(食鹽)。
感覺因素 辛辣通過嗅聞樣品(如辣根)所產生的鼻腔的灼燒或刺激的量 質感 口感粘度當在口中處理時感知到的樣品粘稠程度 油膩的口塗覆量(oily 在口的軟組織上感知到的塗覆量 mouthcoating) 餘味 總餘味 樣品總的餘味強度 實施例1 色拉調料 0050上面的表格表示開發用於本發明優選實施方式的數據。還請參見圖2a-2e關於至4個月(out to four months)的數據圖示。根據本文所提供的數據，含LC-PUFA的樣品的異味明顯比相應的魚和藻類ω-3油配製物小，其提供存在ω-3配製物的益處而沒有實質性縮短的保存期限和限制的穩定性。由於辛辣風味和極為討厭的氣味，源自魚和藻類的油完全不能被測試並且從3個月加速評價期移除，而本發明的LC-PUFA組合物則不是這樣。總體上，本發明LC-PUFA組合物表現出改進的穩定性、降低的降解和隨之增強的保存期限，用於與將有益的ω-3傳遞入膳食中相結合的商業應用。
關於具體的色拉調料實施方式，開發用於加強的牧場調料的本發明LC-PUFA組合物在室溫下儲存6個月之後比魚油和藻類油更長久保持其風味特徵。對於義大利調料，更複雜的風味系統確實起到一定的遮掩，但是本發明的含LC-PUFA的調料的異味同樣比同等(comparable)的基於魚/藻類的調料少。
義大利色拉調料 0052根據本發明，在室溫下的保存期限研究以及加速研究都通過四個月完成。在食品實驗室中，在0、2和4個月，室溫下，以及在1和2個月的加速溫度(95°F)下，由經訓練的特性評味員(attribute panel)評價每一個樣品。對於牧場式調料，魚油和藻類油樣品由於在兩個月時很大的異風味特徵，只能在3個月的時候聞味，並且之後不可測試。在2個月時評價包括那些含本發明的LC-PUFA油在內的所有其它樣品。這是加速保存期限評價所特有的。
0053根據本發明的方法，就風味而言，相對於其他含ω-3的測試對象，義大利調料顯示顯著的穩定性。通過在95°F下4個月的測試完成了加速測試。在這一點，所有產品都表現出異味，其中魚油顯示最強的異味記錄。值得注意的是，關於改進組成和保持適當的健康狀況本，發明的LC-PUFA配製物與大豆油參考物類似 0054根據本發明的方法，根據感官參數牧場型調料相對於含有其他ω-3的魚油和藻類油配製物顯示顯著的改善。同樣根據本發明，已完成加速測試。在兩個月時魚和藻類樣品中產生了高強度的異味，而本發明的LC-PUFA油和參考大豆油可以在3個月時根據感覺參數來評價。參考和亞麻樣品顯示比本發明LC-PUFA油更多的特徵風味和更少的異味。本發明的LC-PUFA油顯示比魚和藻類樣品更多的特徵風味和更少的異味。這表明LC-PUFA相對於魚油和藻類油具有改善的保存期限。此外，通過4個月完成根據本發明的配製物的室溫測試。結果顯示，本發明的LC-PUFA樣品表明相對於其他ω-3來源(包括魚油和藻類油)，本發明的LC-PUFA產品具有顯著較低的異味和討厭氣味特徵。
0055義大利和牧場型調料的數據和顯示評價特徵的圖表附在表1-11和圖2和3中。
實施例2 牧場式色拉調料 表6a-牧場式色拉調料保存期特性

等級＝0至15 注意顏色表明與初始時間點參考豆油的差異；黃色＝+/-1.0，橙色＝+/-1.5至2.0，紅色＝/＜2.5 表6a-牧場式色拉調料保存期特性

等級＝0至15 注意顏色表明與初始時間點參考豆油的差異；黃色＝+/-1.0，橙色＝+/-1.5至2.0，紅色＝/＜2.5 表6b本發明的組合物-與基於LC-PUFA的蛋黃醬比較 牧場式調料概況 等級＝0至15 表6b-牧場色拉調料保存期限特性
等級＝0至15 注意顏色表明與初始時間點參考豆油的差異；黃色＝+/-1.0 表7a LC-PUFA色拉調料配方——牧場式 表7b 牧場式調料製備方法
表7c 保存期限生產 分析/微生物結果 牧場式調料 0056保存期限測試的一般方法是5位經過訓練的特性評味員品嘗所述調料並並對於每種調料的特性和強度(15pt等級-0為沒有，15為極度)達成共識。評味員所鑑別的特性列表在所附的文件中。另外的特性根據保證鑑別。
奶油(Creamy)牧場式調料-初始時刻 與參考大豆油相比 對任何特性，SDA油樣品不相差1.0或更多。評味員的注釋是該樣品具有輕度氧化油、輕微豆腥味的記錄。
LC-PUFA樣品在總洋蔥/大蒜/藥草香味上稍低。評味員的注釋是該樣品具有輕度氧化油、輕微池塘味的記錄。
對任何特性，魚油樣品不相差1.0或更多。評味員的注釋是該樣品具有輕微豆腥味、輕度氧化油的記錄。
藻類油樣品在黃色上稍微較高。評味員的注釋是該樣品具有非常輕微的氧化油的記錄。
亞麻油樣品在總異味(滋味)上較高，以及在總異味和油膩口感上稍微較高。評味員的注釋是該樣品具有輕微的魚腥味。
0057對於本實施例，上面的表提供關於風味和稠度的重要數據。在牧場式調料的情況下，由於其更加敏感的風味，用LC-PUFA製成的調料和競爭的對應物之間的差異更加明顯。上面的表格表示開發用於本發明優選實施方式的數據。還請參見圖3a-3h關於使用牧場式調料的數據圖示。根據本文所提供的數據，含LC-PUFA的樣品的異味明顯比那些含魚油和藻類油的小，其提供存在ω-3配製物的益處而沒有實質性縮短的保存期限和限制的穩定性。由於辛辣風味和極為討厭的氣味，源自魚和藻類的油完全從3個月加速評價期移除，而LC-PUFA則不是這樣。證實了改進的穩定性、降低的降解和隨之增強的保存期限。
實施例3 蛋黃醬 0058根據本發明，用本發明的含ω-3的油製備蛋黃醬，並進行測試，所提供的數據適用於以各種方法(膠體磨、油炸磨等)製備的所有蛋黃醬和可以匙舀取色拉調料變體(variants)。
表8a LC-PUFA-蛋黃醬，配方
表8b本發明的組合物-與基於魚油的蛋黃醬比較 表8c 本發明的組合物-與基於藻類油的蛋黃醬比較 8d 本發明的組合物-與基於亞麻油的蛋黃醬比較 8e 本發明的組合物-與基於PUFA的蛋黃醬比較
表9a. LC-PUFA蛋黃醬配方和方法 注意 山梨酸鉀、檸檬汁濃縮物、調味劑是任選的成分。
通過降低脂肪含量以及添加澱粉和樹膠可以製備清淡且減少脂肪的形式。
HFCS和其它甜味劑可以用來代替糖。
公共資源 21CFR160.10 Standard of Identity for Mayonnasie 產品文獻(Product Literature)EGGSolutions，American Egg Board 產品文獻G.S.Dunn Ltd，Full Egg Mayonnaise 工藝來自G.S.Dunn Ltd的產品文獻和已知的行業實踐 1.在水中水合芥末粉5分鐘 2.將醋、檸檬汁(可選成分)、鹽、糖加入混合物中 3.加入蛋黃。混合。
4.向油中加入EDTA 5.向混合物中緩慢加入油，隨著其被加入增加攪拌速度。
6.利用膠體磨或替代物進行共混並均質化。
表9b 蛋黃醬工藝-中試設備 2.將膠體磨設置在30. 3.先加入水，再在EDTA中混合 4.加入蛋黃，混合3min 5.將芥末粉、糖和鹽預混合。緩慢加入預混物直到溶解並均勻分散 6.添加到油中混合3min，將Dixie混合槽速度設定在35hz 7.緩慢添加到醋中 8.混合直到所有成分都分散。關閉Dixie攪拌器的攪拌，使空氣逸出 9.開啟膠體磨。打開混合槽、閥門，將泵速設置在30hz. 10.包裝成單獨包裝 0059根據本發明，保存期限測試的一般方法是5位經過訓練的特性評味員品嘗所述調料並對於每種調料的特性和強度(15pt等級-0為沒有，15為極度)達成共識。評味員所鑑別的特性列表在所附的文件中。另外的特性根據保證鑑別。
表9c. 值 等級參考 外觀 顏色0.0 白色(紙) 7.5 馬尼拉紙夾(Manila Folder) 香味/口味 雞蛋味 8.0/6.0 碎的煮老的雞蛋 醋香味 6.5 100％亨氏(Heinz)蒸餾醋溶液 醋風味 4.0 2％亨氏蒸餾醋溶液 總臭味 3.5 毛豆、生大豆 氧化的乳製品/油(香味4.0 低芥酸菜子油(9/05打開) 和風味) 5.0 威臣(Wesson)植物油(11/22/04打開) 8.0 卡夫(Kraft)巴馬乾酪(有效期2001) 甜味2.0 2.0％蔗糖水溶液 5.05.0％蔗糖水溶液 酸味2.00.025％檸檬酸水溶液 5.00.04％檸檬酸水溶液 鹹味2.02.0％氯化鈉水溶液 5.05.0％氯化鈉水溶液 口感因素 辛辣(香味) 8.0100％亨氏蒸餾醋溶液 質地 口感粘度8.0Lucerne重奶油與卡夫(Kraft)蛋黃醬的 50∶50混合物 11.0 卡夫蛋黃醬 油膩口感8.0卡夫蛋黃醬 0060根據本發明，下列數據在初始評價之後所得。與色拉調料實施例類似，含LC-PUFA的蛋黃醬的初始風味與對照類物似。亞麻樣品與其他比較物的差異最大。
0061根據本發明的方法，完成室溫和加速儲存條件下的兩個月保存期限研究。在加速溫度研究中所有樣品都具有明顯的異味，其中藻類油樣品具有最高的異味記錄。LC-PUFA表現優於其他含ω-3的油來源。對於室溫研究，藻類油表現出比本發明的LC-PUFA油程度高得多的異味。參見上面表12-14和圖4a-4e中的數據。
實施例4 豆漿 0062根據本發明，可用兩種不同的方式製備豆漿。在第一種中，將富含LC-PUFA的大豆去皮，脫落成片，然後製成全脂豆粉。通過以下方法配製豆漿首先將豆粉溶解在水中，混合，並進行加工以滅活酶。將大豆基礎過濾，以去除額外的固體並脫氣。加入剩餘的成分，混合，然後在兩級勻漿器中使產品均質化，隨後通過超高溫(UHT)熱處理裝置處理。包裝所得產品並冷藏，其典型的保存期限為12周。下面表10中提供了配方，還參見圖6的工藝流程圖。
表10 0063所用的實例還可以應用於不同類型的均質化和熱處理裝置(直接蒸汽、間接蒸汽等)。可以相同方式製備不同的豆漿風味，包括普通(plain)、巧克力、蘋果、橘子、漿果等風味。
0064業已發現，與由經相同方法加工但未經本發明LC-PUFA強化的大豆粉製備的豆漿相比，所得產品具有可接受的風味和口「感」性質。根據9個月保存期限之後追蹤本發明所得的數據，在用轉基因LC-PUFA組合物強化的本發明實施方式與含有不含ω-3脂肪酸的非轉基因大豆油的對照組合物之間，風味上僅存在輕微差異。對豆漿和水果思木西都進行了該追蹤。注意，這些物質在大多數商業環境(commercial settings)中冷藏保存並且僅具有3個月的保存期限。
0065本實施例的第二種方式是使用大豆分離蛋白，並加入富含LC-PUFA的大豆油，以獲得新的產品組合物。下面是表11中提供的配方，其相應的流程圖在圖7中。
表11. 0066根據本發明，上面使用的所提供的實施例還可以應用於不同類型的均質化和熱處理裝置(直接蒸汽、間接蒸汽等)。可以相同方式製備不同的豆漿風味，包括普通、巧克力、蘋果、橘子、漿果等風味。業已發現，與用精製、漂白和脫臭的大豆油製備的豆漿相比，所得產品具有可接受的風味和口感性質。
實施例5 水果思木西 0067根據本發明的優選實施方式，從豆漿開發水果思木西。在另選實施方式中，LC-PUFA油的其他來源也可用於開發水果思木西。還根據本發明，開發用於製備水果思木西的方法考慮了LC-PUFA油增強健康和營養的獨特性質。開發了兩種思木西類型的產品，已確定兩種產品都具有延長的保存期限性質。在涉及使用超高溫巴氏滅菌法、冷藏儲藏的處理期間，具有其他冷藏飲料的典型的12周保存期限。儘管本文描述了混合漿果原樣(prototype)，但是可開發其他風味，包括草莓、葡萄、酸果蔓、橘子、檸檬、蘋果、菠蘿、芒果、草莓-香蕉風味和任何其他水果風味組合。
0068在第一種方法中，按照實施例4的第一部分所述使用富含LC-PUFA的大豆粉製備豆漿。其他成分(包括穩定劑、調味劑和水果)在均質化之前添加。下面是用於該產品的配方 表12. 混合漿果水果思木西-基於大豆 ％ 水 77.774 富含LC-PUFA的大豆粉 6.773 果膠0.300 纖維素凝膠/果膠混合物 0.400 蔗糖9.300 檸檬酸，無水0.450 檸檬酸鉀，粒狀 0.060 大豆卵磷脂 0.060 鹽 0.070 冷凍草莓泥 4.000 冷凍黑莓泥 0.500 紅葡萄汁濃縮物 0.123 天然調味劑 0.020 天然調味劑 0.060 天然漿果調味劑 0.050 天然和人造混合漿果調味劑0.040 天然和人造藍莓調味劑0.020 總計100.000 0069根據實施例4所述的方法製備大豆基礎(soybase)部分，產品的其餘部分的加工如下所述 表13 0070本發明開發的第二種方法是將富含LC-PUFA的油添加到含分離大豆蛋白的配製物中。在該實施方式中，開發了混合漿果產品，但是可以將其擴展到上述其他風味。下面是本發明實施方式中所用的基礎配方。
表14 混合漿果水果思木西-基於大豆 產品根據本發明的方法開發，並且具有下列配方 表15 0071從本實施例的兩個方法得到的產品代表本發明的水果風味的思木西實施方式，其具有如本發明所開發的12個月冷藏保存期限。
0072上面的數據和技術顯示了根據本發明的方法從豆漿生產混合漿果思木西。根據本發明的實施方式，本發明的LC-PUFA油相對於其它含ω-3的樣品提供顯著的差異。
實施例6 麥淇淋型塗抹食品 表16 70％脂肪的麥淇淋型塗抹食品 0073根據本發明的優選實施方式，典型的麥淇淋加工是將水、鹽、苯甲酸鈉和黃油調料混合成水相。轉向圖7，可以將乳成分(如乳清粉、酪蛋白酸鈉或奶粉)添加到水相中。混合油、卵磷脂、甘油單酯和甘油二酯、維生素、和調料，與水相合併，並混合。使混合乳液通過一系列刮板式表面換熱器(scraped surface heat exchangers)、銷釘式攪拌器(pin mixers)和靜止試管(resting tubes)(分別為A、B和C單元)以達到所需的填充溫度和稠度。
實施例7 甜酥餅麵團(cookie dough) 0074根據本發明，本發明的LC-PUFA油還可以開發包括甜酥餅的食品產品。下面提供用於此類應用的一種配方。
表17 重組植物生產 0075一種重組製備感興趣蛋白的方法可以將編碼轉基因蛋白的核酸引入宿主細胞。重組宿主細胞可以用於製備轉基因蛋白，包括可以在目標植物的種子、籽皮或其他部分中分泌或保持的合意的脂肪酸(如LC-PUFA)。編碼轉基因蛋白的核酸可以例如通過同源重組引入宿主細胞。在大多數情況下，將編碼感興趣的轉基因蛋白的核酸整合到重組表達載體中。
0076具體來說，本發明還涉及轉基因植物和轉化的宿主細胞，其包含以5』至3』方向的可操作連接到異源結構核酸序列的啟動子。還可以將額外的核酸序列與啟動子和結構核酸序列一起引入植物或宿主細胞。這些額外的序列可以包括3』轉錄終止子、多聚腺苷酸化信號、其他未翻譯核酸序列、轉運序列或靶向序列、可選擇的標記物、增強子和操作子。
0077上文描述了本發明的優選核酸序列，包括重組載體、結構核酸序列、啟動子和其他調控元件。製備此類重組載體的方法是本領域所熟知的。例如，製備特別適於植物轉化的重組載體的方法描述於美國專利No.4940,835和4,757,011中。
0078可用於在細胞和高等植物中表達核酸的典型載體在本領域內是熟知的，並且包括源自根癌土壤桿菌(Agrobacterium tumefaciens)的腫瘤誘導(Ti)質粒的載體。可用於植物轉化的其他重組載體也已在文獻中有所描述。
0079轉化的宿主細胞一般可以是與本發明相匹配的任何細胞。轉化的宿主細胞可以是原核細胞，更優選為細菌細胞，甚至更優選為土壤桿菌屬(Agrobacterium)、芽孢桿菌屬(Bacillus)、埃希氏菌屬(Escherichia)、假單胞菌屬(pseudomonas)細胞，並且最優選為大腸桿菌(Escherichia coli)細胞。或者，轉化的宿主細胞優選為真核細胞，更優選為植物、酵母或真菌細胞。酵母細胞優選為釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)或畢赤酵母(Pichia pastoris)。植物細胞優選為紫花苜蓿、蘋果、香蕉、大麥、豆、嫩莖花椰菜、捲心菜、油菜、胡蘿蔔、木薯、芹菜、柑橘、三葉草、椰子、咖啡、玉米、棉花、黃瓜、大蒜、葡萄、亞麻籽、瓜、燕麥、橄欖、洋蔥、棕櫚、豌豆、花生、胡椒、馬鈴薯、蘿蔔、菜籽(非低芥酸菜籽)、大米、黑麥、高粱、大豆、菠菜、草莓、甜菜、甘蔗、向日葵、菸草、西紅柿或小麥細胞。轉化的宿主細胞更加優選為油菜、玉米或大豆細胞；並且最優選為大豆細胞。大豆細胞優選為優良大豆細胞品系。「優良品系」是由育種和對優良農學性能的選擇而得到。
0080本發明的轉基因植物優選為紫花苜蓿、蘋果、香蕉、大麥、豆、嫩莖花椰菜、捲心菜、油菜、胡蘿蔔、木薯、芹菜、柑橘、三葉草、椰子、咖啡、玉米、棉花、黃瓜、大蒜、葡萄、亞麻籽、瓜、燕麥、橄欖、洋蔥、棕櫚、豌豆、花生、胡椒、馬鈴薯、蘿蔔、菜籽(非低芥酸菜籽)、大米、黑麥、紅花、高粱、大豆、菠菜、草莓、甜菜、甘蔗、向日葵、菸草、西紅柿或小麥植物。轉化的宿主植物更加優選為油菜、玉米或大豆細胞；並且這些中最優選的是大豆植物。
製備轉基因植物的方法 0081本發明還涉及製備能夠產生實質量的LC-PUFA的轉基因植物的方法，該轉基因植物包含5』至3』方向的與異源結構核酸序列可操作連接的啟動子。包含LC-PUFA序列的核酸序列被翻譯並轉錄成胺基酸形式。其他結構核酸序列也可以與啟動子和結構核酸序列一起引入植物。這些其他結構核酸序列可以包括3』轉錄終止子、3』多聚腺苷酸化信號、其他未翻譯核酸序列、轉運序列或靶向序列、可選擇的標記物、增強子和操作子。
0082該方法一般包括選擇合適的植物細胞，用重組載體轉化植物細胞，獲得轉化的宿主細胞，以及在有效產生植物的條件下培養轉化宿主細胞。
0083本發明的轉基因植物一般可以為任何類型的植物，優選具有農藝、園藝、觀賞、經濟或商業價值的植物，並且更優選為紫花苜蓿、蘋果、香蕉、大麥、豆、嫩莖花椰菜、捲心菜、油菜、胡蘿蔔、木薯、芹菜、柑橘、三葉草、椰子、咖啡、玉米、棉花、黃瓜、花旗松、桉樹、大蒜、葡萄、火炬松、亞麻籽、瓜、燕麥、橄欖、洋蔥、棕櫚、歐洲防風草(parsnip)、豌豆、花生、胡椒、白楊、馬鈴薯、蘿蔔、輻射松、菜籽(非低芥酸菜籽)、大米、黑麥、紅花、高粱、南方松、大豆、菠菜、草莓、甜菜、甘蔗、向日葵、楓香(Sweetgum)、茶、菸草、西紅柿、草皮或小麥植物。轉化的植物更優選為油菜、玉米或大豆細胞；並且最優選為大豆植物。大豆植物優選為優良大豆植物。優良植物是來自優良品系的任何植物。優良品系在上文有所描述。
0084從轉化的植物原生質體或外植體的再生、發育和培養植物在本領域中被充分教導(Gelvin等人，PLANT MOLECULAR BIOLOGY MANUAL，(1990)；以及Weissbach和Weissbach，METHODS FOR PLANTMOLECULAR BIOLOGY(1989))。在該方法中，轉化子一般在選擇性培養基的存在下培養，所述培養基選擇成功轉化的細胞並誘導所需植物枝條的再生。這些枝條通常在2個月至4個月內獲得。
然後將枝條轉移到適當的根誘導培養基中，該培養基含有選擇性試劑和防止細菌生長的抗生素。許多枝條將發育根。然後將這些移植到土壤或其他培養基中以使根繼續發育。所概述的方法一般根據具體所採用的植株而變化。
0086優選地，再生的轉基因植物為自花傳粉的，以提供純合的轉基因植物。或者，得自再生轉基因植物的花粉可以與非轉基因植物(優選經濟上重要物種的近交系)雜交。相反，來自非轉基因植物的花粉可用於對再生的轉基因植物授粉。
0087轉基因植物可以將編碼感興趣蛋白的核酸序列傳遞給其後代。轉基因植物優選就編碼感興趣蛋白的核酸而言是純合的，並且作為有性繁殖的結果將該序列傳遞給其所有的後代。後代可以由轉基因植物所產生的種子長成。然後這些另外的植物可以自花傳粉，以產生植物的純育品系。
0088對來自這些植物的後代評價基因表達等。基因表達可以通過一些常用方法檢測(如，蛋白質印記、免疫沉澱和ELISA)。
0089調控序列包括在許多類型的宿主細胞中指導(direct)核苷酸序列的組成性表達的那些；僅在某些宿主細胞中指導核苷酸序列的表達的那些(如，組織特異性調控序列)；和以可調控的方式(如，僅在誘導劑的存在下)指導表達的那些。本領域的技術人員將了解，表達載體的設計可以取決於諸如待轉化的宿主細胞的選擇、所需轉基因蛋白的表達水平等因素。可以將轉基因蛋白表達載體引入宿主細胞，從而產生核酸編碼的轉基因蛋白。
0090如本文所用，術語″轉化″和″轉染″是指用於將外來核酸(例如，DNA)引入宿主細胞中的各種本領域公認的技術，包括磷酸鈣或氯化鈣共沉澱、DEAE-葡聚糖-介導的轉染、脂質體轉染、電穿孔法、顯微注射和病毒介導的轉染。用於轉化或轉染宿主細胞的適當方法可以參見Sambrook等(Molecular CloningA Laboratory Manual，第2版，Cold Spring HarborLaboratory press(1989))以及其它實驗室手冊。
0091關於在此討論的已知技術或等效技術的詳細描述，本領域技術人員可以參考一般參考文獻文本。這些文本包括Ausubel等，CURRENTPROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY(編輯，John Wiley & Sons，N.Y.(1989))；Birren等，GENOME ANALYSISA LABORATORY MANUAL 1ANALYZING DNA，(Cold Spring Harbor Press，Cold Spring Harbor，N.Y.(1997))；Clark，PLANT MOLECULAR BIOLOGYA LABORATORY MANUAL，(Clark，Springer-Verlag，Berlin，(1997))；以及Maliga等，METHODS IN PLANTMOLECULAR BIOLOGY，(Cold Spring Harbor Press，Cold Spring Harbor，N.Y.(1995))。當然，在製備或使用發明的某一方面時也可以參考這些文本。應當理解，本發明的任何試劑可以是基本純化的和/或生物活性的和/或為重組體。
0092
減少亞油酸 0093已知ω-3和ω-6脂肪酸是人體營養所需的脂肪酸。ω-6脂肪酸包括亞油酸及其衍生物。這些油被認為是人體營養所必需的，因為這些脂肪酸必須在膳食中消費，這是由於人不能從其他的膳食脂肪或營養素製造它們，並且它們不能在體內儲存。這種脂肪酸提供能量，並且還是神經細胞、細胞膜的成分，且被轉化成稱為前列腺素的激素樣物質。
0094參見圖1，亞油酸是含有兩個雙鍵的18-碳長鏈多不飽和脂肪酸。其第一個雙鍵位於自ω端的第六個碳上，因而將其歸類為ω-6油。隨著亞油酸在人體內吸收和代謝，它被轉化成衍生脂肪酸，γ亞油酸(GLA)，該脂肪酸被轉化成二-高-γ-亞油酸(DGLA)和花生四烯酸(AA)。然後，DGLA和AA通過添加2個碳分子和去除氫分子而轉化成兩類前列腺素。存在三種前列腺素家族，PGE1、PGE2和PGE3。DGLA轉化成PGE1，而AA轉化成PGE2。PGE3通過ω-3脂肪酸的轉化生成。
0095在人類中，ω-6油相對於ω-3油消耗的過度消耗可能導致產生炎症的前列腺素(PGE2)的過量產生，以及抗炎性前列腺素(PGE1和PGE2)的缺乏。這繼而可能導致各種其他的健康問題。進一步講，由於在目前市售的普通烹調植物油和加工食品中存在ω-6脂肪酸，消費者對ω-6脂肪酸的日消耗量可能是過量的。在西方的膳食中，ω-6與ω-3脂肪酸的消耗比率通常可以達到20∶1。為達到更合意的比率，本發明的一個實施方式在轉基因含油種子植物中增加了LC-PUFA的產生，同時降低了LA的產生。所得的油含有較低含量的LA，同時提供顯著量的LC-PUFA，並且在食品工業中可用於從烹調油到食品成分的各種用途。
提高生育酚含量 0096生育酚是在植物油中發現的膳食中的天然抗氧化劑和必需營養素。這些抗氧化劑保護細胞膜和身體的其他脂溶性部分(如低密度脂蛋白(LDL)膽固醇)不受損害。其還似乎保護身體抵抗心血管疾病和某些形式的癌，並且顯示免疫增強作用。根據本發明，增強轉基因含油種子植物的油中生育酚的存在量對該油的消耗者將是有益的。相對於本發明的目的，在本發明各種實施方式中存在濃度提高的生育酚作為油產品的一部分將是有益的，並且還可以降低LC-PUFA的氧化。
0097儘管為了理解，上述發明已經通過具體說明和實施例較詳細地進行了描述，但是對本領域技術人員顯而易見的是，可以進行某些變化和修改。因此，說明和實施例不應理解為是對本發明範圍的限制，本發明的範圍由所附權利要求描述。
0098因此，應當理解，在此提供了用於食品的改進的LC-PUFA來源的本發明實施方式不應當限於具體的實施例。這些實施例說明本發明普遍適用於各種各樣食料。在包含LC-PUFA的情況下，這些食品以相同的或更好的感官品質製造，同時顯著提高了為人類消費而生產的食品的營養品質。
0099此外，本文所提供的實施例僅舉例說明本發明原則的應用。根據上述說明，顯然所公開的源自植物的要素的形式、使用方法和應用上的變化可用於不直接與人類消費有關的應用。包括在該領域中的是源自植物的LC-PUFA用於開發動物生產行業中使用的營養增強飼料的應用，其通常包括但不限於牛肉生產、家禽生產、豬肉生產；和或水產養殖。可以在不背離本發明的精神或所附權利要求的範圍下採取這些變體的應用。
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通過相關引用它們所提供的補充步驟或其他細節將這些參考文獻具體併入。
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