增強記憶的組合物及其應用的製作方法
2023-06-10 23:06:01 3
增強記憶的組合物及其應用的製作方法
【專利摘要】增強記憶的組合物及其應用，組合物的有效成分為雲芝多糖和銀杏黃酮。分別提取藥用真菌雲芝多糖，天然藥用植物銀杏葉中的黃酮類化合物，雲芝多糖與銀杏黃酮聯合用藥時，可顯著性縮短痴呆小鼠的逃避潛伏期、提高空間記憶能力、增加正確反應次數、延長首次犯錯潛伏期、減少錯誤次數及減輕腦組織細胞狀態異常及，並顯著降低膠原纖維酸性蛋白GFAP的表達，對痴呆模型小鼠的記憶有一定的改善作用。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發明屬於生物醫學和食品保健【技術領域】，具體涉及一種增強記憶的組合物及其 應用。 增強記憶的組合物及其應用
【背景技術】
[0002] 老年痴呆症，主要表現為阿茲海默症（Alzheimer's disease, AD)，或稱腦退化症， 是一種持續性神經功能障礙。AD是一種以進行性認知障礙和記憶力損害為主的中樞神經 系統退行性疾病，主要病理特徵為大腦萎縮、腦組織內老年斑，腦血管沉積物和神經元纖維 纏結。後期主要為中樞一些部位膽鹼能功能不足，故膽鹼能增強藥是目前主要的治療藥物， 如膽鹼酯酶抑制劑多奈哌齊、石杉鹼甲、加蘭他敏、卡巴拉汀等。然而，膽鹼酯酶（AChE)抑 製劑只是一種能夠暫時性改善認知功能的姑息性治療策略，隨著對AD病理生理的分子和 細胞學機制研究的深入，尋找其他可能延緩病程進展的藥物幹預手段顯得尤為重要。AD的 發生包括遺傳因素、慢性感染、免疫缺陷和環境毒素等多種原因，臨床表現為進行性精神狀 態衰退，包括記憶、智力、定向、判斷能力、情感障礙和行為失常甚至發生意識模糊等。患者 通常在發病後5-6年內死於繼發感染和全身衰竭。建立合理的病癥結合動物模型對於抗 AD藥物篩選具有重要意義。單因素造模法模型基礎較簡單，以D-半乳糖注射、Α β誘發、化 學性膽鹼能神經損傷、慢性鋁中毒為主要的造模方法。常見的複合因素造模法有D-半乳糖 致衰老為基礎的及Α β注射聯合其他因素建立的AD中醫病證模型，其中，以D-半乳糖聯合 A1C13可誘導模擬腎虛痰阻型AD模型。
[0003] 雲芝多糖是雲芝提取物中的主要活性成份，是含有蛋白質的葡聚糖。雲芝多糖的 抗腫瘤作用、免疫增強作用和保護肝臟的作用已普遍用於臨床。近年來有研究顯示雲芝多 糖對小鼠和大鼠的學習記憶功能亦有一定的改善作用。而銀杏黃酮是銀杏葉的提取物，研 究證明銀杏黃酮具有改善人體心血管功能，降血脂，提高機體免疫機能和增強記憶力作 用。多種生物活性物質的復配經常能進一步提高其作用，但到目前為止，還沒有利用雲芝多 糖和銀杏黃酮復配物來進行改善記憶的研究被報導。本專利主要對雲芝多糖和銀杏黃酮復 配物對增強記憶作用進行了研究。
【發明內容】
[0004] 解決的技術問題：本發明提供了一種增強記憶的組合物及其應用，旨在彌補現有 技術提供的用於增強記憶的藥物依賴性強、副作用大、姑息性治療等不足。
[0005] 技術方案：增強記憶的組合物，有效成分為雲芝多糖和銀杏黃酮。
[0006] 優選的，所述雲芝多糖和銀杏黃酮的質量比為（1-9) : (9-1)。
[0007] 進一步優選的，所述雲芝多糖和銀杏黃酮的質量比為1:1。
[0008] 上述組合物在製備治療阿茲海默症藥物中的應用。
[0009] 上述組合物在製備增強記憶藥物中的應用。
[0010] 治療阿茲海默症藥物，有效成分為上述組合物。 toon] 有益效果：本發明提供的一種雲芝多糖與銀杏黃酮的復配物及其增強記憶的應 用，該組合物採用雲芝多糖與銀杏黃酮聯合經口給藥，增強痴呆模型小鼠的記憶能力。分別 提取藥用真菌雲芝多糖，天然藥用植物銀杏葉中的黃酮類化合物。雲芝多糖與銀杏黃酮聯 合用藥時，可顯著性縮短痴呆小鼠的逃避潛伏期、提高空間記憶能力、增加正確反應次數、 延長首次犯錯潛伏期、減少錯誤次數及減輕腦組織細胞狀態異常及，並顯著降低膠原纖維 酸性蛋白GFAP的表達，對痴呆模型小鼠的記憶有一定的改善作用。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0012] 圖1為第六天各組小鼠第四象限停留時間百分率、穿越原平臺次數對照示意圖 Gdzsm η = 8);其中A為第四象限停留時間百分率對照示意圖；B為穿越原平臺次數對 照示意圖；註：與正常對照組比較，*#P〈〇. 001 ;與痴呆模型組比較，#P〈〇. 05, ##p〈0. 01， ###p<0. 001 ；
[0013] 圖2為Y迷宮試驗各組小鼠正確反應次數對照示意圖（x=tsemii η = 8);註：與正 常對照組比較，*#P〈〇. 001 ;與痴呆模型組比較，#P〈〇. 05, ###p〈0. 001 ;
[0014] 圖3為避暗試驗各組小鼠潛伏期和錯誤次數對照示意圖G:tsem，η = 8);其 中A為潛伏期對照示意圖，B為錯誤次數對照示意圖；註：與正常對照組比較，、〈0. 01， _ρ〈0· 001 ;與痴呆模型組比較，#ρ〈0· 05, ·ρ〈0· 001 ;
[0015] 圖4為各組小鼠腦組織形態學變化對照圖（200Χ);
[0016] 圖5為各組小鼠腦組織GFAP表達情況對照圖（400 X);
[0017] 圖6為各組小鼠腦組織GFAP表達量對照圖；
[0018] 圖7為各組小鼠腦組織GFAP表達量對照柱狀圖；註：與正常對照組比較， ***p〈0. 001 ;與痴呆模型組比較，###p〈0. 001。
【具體實施方式】
[0019] 為了使本發明的目的、技術方案及優點更加清楚明白，以下結合附圖及實施例，對 本發明進行進一步的詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發明， 並不用於限定發明。
[0020] 本發明的目的在於提供一種增強痴呆模型小鼠記憶的方法，該方法採用雲芝多糖 與銀杏黃酮聯合經口給藥，改善痴呆模型小鼠的記憶功能。
[0021] 在本發明實施例中，雲芝多糖中多糖含量為30wt. %，銀杏黃酮中黃酮含量為 25wt. % 〇
[0022] 在本發明實施例中，雲芝多糖與銀杏黃酮聯合用藥時的用藥劑量為：雲芝多糖 150mg/kg/d、銀杏黃酮 150mg/kg/d。
[0023] 在本發明實施例中，雲芝多糖與銀杏黃酮聯合用藥時，可顯著性縮短痴呆小鼠的 逃避潛伏期、提高空間記憶能力、增加正確反應次數、延長首次犯錯潛伏期、減少錯誤次數 及減輕腦組織細胞狀態異常及，並顯著降低膠原纖維酸性蛋白GFAP的表達。
[0024] 在本發明實施例中，雲芝多糖與銀杏黃酮聯合經口給藥對痴呆模型小鼠記憶有改 善作用。
[0025] 實施例1 :
[0026] 下面結合附圖及具體實施例對本發明的應用原理作進一步描述。
[0027] -、實驗目的
[0028] 觀察雲芝多糖與銀杏黃酮聯合經口給藥對痴呆模型小鼠記憶的改善作用。
[0029] 二、實驗材料
[0030] 1.受試藥物
[0031] 雲芝多糖：多糖含量：30wt. %
[0032] 銀杏黃酮：黃酮含量：25wt. %
[0033] 陽性對照藥：氫溴酸加蘭他敏（西安楊森製藥有限公司，規格：28片/盒，8mg/片， 批號：111012730,適應症：用於治療輕度到中度阿爾茨海默型痴呆症狀。）
[0034] 2.實驗動物
[0035] 2. 1來源、種屬、品系、合格證：揚州大學比較醫學中心，清潔級ICR小鼠，96隻，動 物合格證號：SCXK (蘇）2012-0004。
[0036] 2.2體重：20±2區
[0037] 2. 3性別：雌雄各半
[0038] 2. 4各組動物數：8隻/組
[0039] 2. 5飼養：動物飼養於22±3°C，相對溼度40-75%，晝夜明暗交替時間12h，動物自 由攝食、飲水，適應性飼養7天後用於實驗。
[0040] 3.主要試劑
[0041] D-半乳糖，中國惠興生化試劑有限公司，規格：25g/瓶，批號：120916 ;無水氯化鋁 (A1C13)，國藥集團化學試劑有限公司，規格：500g/瓶，批號：20120106。
[0042] 4.主要儀器
[0043] Sartorius BT12?分析天平：賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；Morris水迷 宮：上海吉量軟體科技有限公司；Y迷宮：淮北正華實驗儀器公司；避暗儀：淮北正華實驗 儀器公司；電泳儀：北京市六一儀器廠。
[0044] 三、實驗方案
[0045] 1.動物分組：將96隻ICR小鼠，雌雄各半，隨機分為6組，每組16隻。分別為：
[0046] 正常對照組：自來水；
[0047] 痴呆模型組：自來水；
[0048] 雲芝多糖單用組：300mg/kg/d,多糖含量：30wt. % (英駿生物技術有限公司）；
[0049] 銀杏黃酮單用組：300mg/kg/d,黃酮含量：25wt. % (英駿生物技術有限公司）；
[0050] 雲芝多糖與銀杏黃酮聯合用藥組（聯合用藥組）：雲芝多糖150mg/kg/d+銀杏黃 酮 150mg/kg/d ;
[0051] 陽性對照組：氫溴酸加蘭他敏6mg/kg/d ;
[0052] 2.造模和給藥：除正常對照組給予普通飲用水，其他各組每天給予0. 50mg/ml的 八1(：13溶液作為飲用水，同時每日上午腹腔注射10. Omg/ml的D-半乳糖生理鹽水溶液（給藥 體積，0. lml/10g ;給藥劑量，100mg/kg/d)，連續造模54天後，進行水迷宮測試，連續6天， 確定模型。
[0053] 3.檢測指標：每日下午灌胃給予受試藥物，第54天開始，每日給藥後2h，各組小 鼠進行水迷宮測試，連續6天。第7天進行Y迷宮測試，連續2天。第9天進行避暗試驗， 連續2天。第11天給藥後2h後處死動物，取腦組織，每組3隻福馬林固定，腦組織切片 後免疫組化檢測膠質細胞原纖維酸性蛋白GFAP表達，其餘組織勻漿作Western blot檢測。
[0054] 四、統計學處理方法
[0055] 實驗數據用SPSS11. 5軟體處理，多組樣本均數間比較用Dunnett t檢驗，不符合t 檢驗條件的樣本用Tamhane-T2檢驗。所有數據均用均數土標準差G±sem )表示。p〈0. 05 表示有顯著性差異，P〈〇. 01表示有極顯著性差異。
[0056] 五、實驗結果
[0057] 1.受試藥各組對實驗性痴呆模型小鼠認知障礙的影響
[0058] 表1可見平臺訓練各組小鼠潛伏期G±sem, η = 8)
【權利要求】
1. 增強記憶的組合物，其特徵在於有效成分為雲芝多糖和銀杏黃酮。
2. 根據權利要求1所述的增強記憶的組合物，其特徵在於所述雲芝多糖和銀杏黃酮的 質量比為（1_9) : (9-1)。
3. 根據權利要求1所述的增強記憶的組合物，其特徵在於所述雲芝多糖和銀杏黃酮的 質量比為1:1。
4. 權利要求1~3任一所述組合物在製備治療阿茲海默症藥物中的應用。
5. 權利要求1~3任一所述組合物在製備增強記憶藥物中的應用。
6. 治療阿茲海默症藥物，其特徵在於有效成分為權利要求廣3任一所述的組合物。
【文檔編號】A61P25/28GK104082659SQ201410264474
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年6月13日 優先權日:2014年6月13日
【發明者】趙林果, 房仙穎, 姜豔, 曹福亮, 裴建軍, 吳彩娥, 王佳宏, 張旭暉 申請人:南京林業大學