一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法
2023-06-11 02:38:06
專利名稱：一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法
技術領域：
本發明涉及一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，採用有機溶劑提取，
活性炭脫色和矽膠柱分離純化等工序製備東北貫眾素的方法。
背景技術：
東北貫眾素，又名綿馬貫眾素，是一種四環間苯三酚衍生物。 英文名稱Dryocrassin ; 分子式C43H48016 ; 分子量820. 83 ;
分子結構式
物理性質為黃色結晶(丙酮)，熔點201-203 °C (也有報導207-214 °C 、 215-218°C );難溶於水，可溶於苯，乙醚，四氯化碳，戊醇，丙酮，冰醋酸等多數有機溶劑及 鹼性水溶液。 東北貫眾素是綿馬貫眾抗瘧活性及抗腫瘤活性的主要有效成分，有研究證明其具 有抗日本血吸蟲作用。 綿馬貫眾為鱗毛蕨科植物粗莖鱗毛蕨(東北貫眾)Dryopteris
crassirhizomaNakai的乾燥根莖及葉柄殘基。呈倒卵形，上端鈍圓或截形，下端較尖，表面
黃棕色至黑褐色，密被排列整齊的葉柄殘基及鱗片，並有彎曲的鬚根。具有清熱解毒、驅蟲
的功效，用於蟲積腹痛、瘡瘍。其炭品止血，用於崩漏。主要化學成分為東北貫眾素、綿馬酸
類、黃綿馬酸類以及微量白綿馬素、粗蕨素、綿馬三萜、鞣質、揮髮油、樹脂等。 目前還未見有關於東北貫眾素提取純化工藝的相關研究。吳壽全等發表了《綿馬
貫眾化學成分研究I》，提取分離得到了東北貫眾素單體，但此方法只適合實驗室。王海寧等
優選出適合分離綿馬貫眾中東北貫眾素的大孔樹脂為匿130，並對優選出的大孔樹脂分離
綿馬貫眾時的工藝條件和參數進行研究，但是東北貫眾素水溶性很差，大孔樹脂分離難度
較大，不易操作。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法， 該法能有效提取高純度產品，便於工業化操作。
本發明是採用以下技術方案實現的
將原料粉碎，加入乙醇溶液和氫氧化鈣，加熱提取2-3次，合併提取液濾過調節pH5-7，回收乙醇至濃度30-50%，放置8-12小時，濾出沉澱物，氯仿溶解加活性炭加熱脫色，濾後注入矽膠柱，先用4-6柱體積甲醇洗去雜質，再用乙酸乙酯洗脫，TLC監測，收集洗脫液，減壓回收洗脫劑；用丙酮溶解結晶，濾出低溫乾燥即得產品。 所述的提取條件乙醇濃縮度80_90%，用量為物料的5-7倍，氫氧化鈣和物料比1 : 1000-2 : IOOO，溫度50-75。C，提取時間1-3小時。 所述活性炭脫色條件為活性炭為767針劑活性炭，加入量為溶液體積量的1_2%，回流脫色1-2小時。 所述矽膠柱分離條件矽膠用量為沉澱物的15-20倍，4-6柱體積甲醇洗去雜質。
所述重結晶條件丙酮加熱飽和溶解粗晶，冷卻靜置析晶，結晶2-3次。
綜上所述，本發明存在以下優點 1)鹼醇提取，試劑損耗少，低濃度乙醇結晶除雜效果好；
2)767針劑活性炭脫色效果好，矽膠柱洗脫試劑單一易回收。 下面將結合具體實施方式
進一步說明本發明，但本發明要求保護的範圍並不局限於下列實施方式。
具體實施例方式
下述實施例中東北貫眾素的監測採用薄層色譜法(參照馬國祥等"薄層色譜掃描法測定7種貫眾中東北貫眾素及綿馬酸ABA的含量")
薄層色譜條件 薄層板製備取矽膠G10g，加磷酸氫二鈉-檸檬酸的緩衝液(pH二7)10ml，維生素C100mg及0. 5% CMC-Na溶液20ml，調勻，鋪在20cmX20cm的薄層板上，晾乾，於50。C活化2h。 展開劑正己烷-氯仿-甲醇(30 : 15 : 1); 先將點上樣的板放在展開缸中飽和2h後，展開，展距為18cm，0. 3X固蘭B鹽的
50%乙醇溶液為顯色劑，多次噴霧，晾乾後，於4(TC條件下顯色，保持lh顯色完全。 下述實施例中東北貫眾素的檢測採用高效液相色譜法(參照肖國君等"HPLC測定
綿馬貫眾中綿馬貫眾素的含量") 高效液相色譜條件色譜柱VP-ODS (4. 6mmX 150mm， 5 ii m); 流動相乙腈_氯仿_異丙醇-0. 3 %磷酸-0. 1 %十二烷基硫酸鈉
(50 ! 10 ! 35 ! 10 D ; 流速1. OmL min—1 ; 檢測波長286nm ; 柱溫25。C。
實施例1 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入70L90X乙醇和20g氫氧化鈣攪拌加熱至50°C ，提取兩次，每次提取2小時，合併提取液濾過，鹽酸調節pH至5，減壓回收至乙醇濃度40%，放置12小時，濾出沉澱物lkg。氯仿回流溶解加入2% 767針劑活性炭脫色2小時，濾過，加入20kg矽膠中，回收氯仿，乾燥後裝短粗柱，先用120L甲醇衝洗雜質，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測，收集流分回收至原體積的1/10，放置結晶，濾出結晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結晶物再溶解結晶一次，低溫乾燥得產品340g，含量98. 2%。 實施例2 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入70L90X乙醇和10g氫氧化鈣攪拌加熱至75°C ，提取兩次，每次提取2小時，合併提取液濾過，鹽酸調節pH至7，減壓回收至乙醇濃度30%，放置8小時，濾出沉澱物1. lkg。氯仿回流溶解加入1% 767針劑活性炭脫色1小時，濾過，加入18kg矽膠中，回收氯仿，乾燥後裝短粗柱，先用72L甲醇衝洗雜質，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測，收集流分回收至原體積的1/15，放置結晶，濾出結晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結晶物再溶解結晶一次，低溫乾燥得產品335g，含量98%。 實施例3 : 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入50L80X乙醇和20g氫氧化鈣攪拌加熱至60°C ，提取三次，每次提取1. 5小時，合併提取液濾過，硫酸調節pH至6，減壓回收至乙醇濃度50%，放置10小時，濾出沉澱物1. lkg。氯仿回流溶解加入1. 5% 767針劑活性炭脫色2小時，濾過，加入19kg矽膠中，回收氯仿，乾燥後裝短粗柱，先用100L甲醇衝洗雜質，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測，收集流分回收至原體積的1/8，放置結晶，濾出結晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結晶物再溶解結晶兩次，低溫乾燥得產品330g，含量98. 5%。
實施例4: 取綿馬貫眾藥材，粉碎，取10kg投入提取罐，加入60L80X乙醇和10g氫氧化鈣攪拌加熱至70°C ，提取三次，提取時間為3、2、 1小時，合併提取液濾過，鹽酸調節pH至5，減壓回收至乙醇濃度50%，放置10小時，濾出沉澱物1. lkg。氯仿回流溶解加入1% 767針劑活性炭脫色l小時，濾過，加入22kg矽膠中，回收氯仿，乾燥後裝短粗柱，先用90L甲醇衝洗雜質，再用乙酸乙酯洗脫流分，薄層檢測，收集流分回收至原體積的1/12，放置結晶，濾出結晶物丙酮回流飽和溶解，冷卻靜置析晶，濾出結晶物再溶解結晶兩次，低溫乾燥得產品325g，含量98. 6%。
權利要求
一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，其特徵在於包含以下步驟將原料粉碎，加入乙醇溶液和氫氧化鈣，加熱提取2-3次，合併提取液，濾過，調節pH5-7，回收乙醇至濃度30-50％，放置8-12小時，濾出沉澱物，氯仿溶解，加活性炭加熱脫色，濾後注入矽膠柱，先用4-6柱體積甲醇洗去雜質，再用乙酸乙酯洗脫，TLC監測，收集洗脫液，減壓回收洗脫劑；用丙酮溶解結晶，濾出低溫乾燥即得產品。
2. 如權利要求l所述的提純方法，其特徵在於所述的提取條件乙醇濃縮度80-90%用 量為物料的5-7倍，氫氧化鈣和物料比1 : 1000，溫度50-75t:，提取時間1-3小時。
3. 如權利要求1所述的提純方法，其特徵在於所述活性炭脫色條件為活性炭為767 針劑活性炭，加入量為溶液體積量的1_2%，回流脫色1-2小時。
4. 如權利要求1所述的提純方法，其特徵在於所述矽膠柱分離條件矽膠用量為沉澱 物的15-20倍，4-6柱體積甲醇洗去雜質。
5. 如權利要求1所述的提純方法，其特徵在於所述重結晶條件丙酮加熱飽和溶解粗 晶，冷卻靜置析晶，結晶2-3次。
全文摘要
本發明涉及一種從植物綿馬貫眾中提純東北貫眾素的方法，工藝以綿馬貫眾藥材為原料，用鹼醇提取，調酸，濃縮結晶，氯仿溶解，活性炭脫色，矽膠柱分離，丙酮溶解重結晶。該工藝簡單可行，所得產品純度高，成本低，所用有機溶劑回收後可重複利用。
文檔編號A61K125/00GK101732365SQ201010103120
公開日2010年6月16日 申請日期2010年2月1日 優先權日2010年2月1日
發明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司