胡蘆巴黃酮提取物製備方法及其降血糖應用的製作方法
2023-06-10 23:45:51
專利名稱：胡蘆巴黃酮提取物製備方法及其降血糖應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種黃酮提取物的製備方法，尤其涉及胡蘆巴黃酮提取物製備方法及其降血糖應用。
背景技術：
胡蘆巴(Trigonella foenum-graecum L.)是豆科蝶形花亞科胡蘆巴屬的一種一年生草本植物，其乾燥成熟種子作為常用中藥被收入《中華人民共和國藥典》。研究表明胡蘆巴含有多種生物活性物質，如黃酮、皂苷、生物鹼、香豆素和多糖等多種活性成分。其中， 黃酮作為一大類活性物質，具有降血糖和抗氧化等作用。黃酮類化合物的提取方法現在一般採用水煮提取、有機溶劑提取和超聲提取等方法。水煮和超臨界CO2流體提取的方法存在諸多局限，沒有被廣泛應用。超聲提取是在相對較低的溫度下進行的，節省能源，也有利於對熱不穩定黃酮化合物的提取，並且超聲提取由於空化效應、機械效應和熱效應等的作用，加強了溶劑的擴散和有效成分的溶解，從而縮短提取時間。同時超聲法節省溶劑，操作步驟簡化，提高工作效率。此外，超聲提取過程無化學反應，被浸提的生物活性物質在短時間內保持不變，生物活性不減。因此，超聲提取是一種快速、高效、易於放大、綠色安全的方法。高血糖是糖尿病的臨床表現之一，持續的高血糖會引起起糖代謝、脂肪和蛋白質代謝紊亂，並導致一系列心腦血管疾病、腎功能衰竭等，近年來研究發現，中藥降糖作用溫和持久、副作用小，且作用機理具有多效應、多位點、多功能的綜合作用。因此，開發具有降血糖的中藥提取物及其製劑具有重要意義。
發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種快速、高效、易於放大、綠色安全的胡蘆巴黃酮提取物製備方法。本發明所要解決的另一個技術問題是提供該提取物在降血糖藥物或保健食品中的應用。為解決上述問題，本發明所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，包括以下步驟(1)將乾燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子用質量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質量體積比為1 5 1 20、提取時間為0.5 池的條件下進行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經濃縮後用質量濃度為70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，並過濾， 得到濃縮液；該濃縮液依次通過質量濃度為95%的乙醇、純水、質量濃度為5%的鹽酸、純水、質量濃度為2%的氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用質量濃度為10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脫至無黃酮流出並收集洗脫液；(4)蒸發回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；
(5)經所述黃酮溶液經濃縮、真空乾燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。用下述製備方法代替權利要求1中所述步驟(1)將乾燥、粉碎成粒度為20 60 目的胡蘆巴種子先用超臨界(X)2萃取提取油脂後，再用質量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質量體積比為1 5 1 20、提取時間為0. 5 池的條件下進行超聲提取，得到提取液。所述步驟(3)中極性大孔吸附樹脂為DM130型。所述步驟O)中的濃縮溫度為50 60°C。所述步驟(4)中的蒸發回收溫度為45 60°C。所述步驟(5)中的真空乾燥溫度為50 60°C。如上所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖藥物中的應用。所述降血糖藥物中含有質量30 60%的胡蘆巴黃酮提取物和藥學可接受的輔料。如上所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖保健食品中的應用。所述降血糖保健食品中含有質量20 50%的胡蘆巴黃酮提取物和保健食品可接受的添加劑。本發明與現有技術相比具有以下優點1、本發明首次對胡蘆巴種子的黃酮類化合物的超聲提取製備過程進行了研究，對影響提取得率及黃酮含量的各個參數進行了優化，從而確定了最優條件；同時提高了黃酮類物質得率，並減小了工業消耗、降低了生產成本。2、本發明採用乙醇為溶劑，安全可靠、易於工業化生產。3、本發明是在相對較低的溫度下進行的，節省能源，也有利於對熱不穩定黃酮化合物的提取。4、本發明節省溶劑，操作步驟簡化，提高了工作效率，是一種快速、高效、易於放大、綠色安全的方法。5、本發明胡蘆巴黃酮提取物經實驗證明具有顯著的降血糖的生物學活性，可明顯降低糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量、改善小鼠和大鼠的葡萄糖耐量、提高糖尿病小鼠胰腺重量指數、促進肝糖原的合成，可廣泛應用於各種胡蘆巴黃酮類降血糖的藥物及保健食品開發需求。降血糖的生物學活性實驗(1)糖尿病小鼠和大鼠血糖的含量實驗①昆明種小鼠，雌雄各半，體重為18 22g，隨機分為對照組和造模組。待造模組小鼠禁食(不禁水)1 後，尾靜脈快速注射四氧嘧啶生理鹽水溶液。3d後尾尖取血測定小鼠血糖，選定血糖值> 20. Ommol/L，同時伴有多飲、多尿症狀的小鼠為糖尿病小鼠。灌胃途徑給予糖尿病小鼠胡蘆巴黃酮提取物，劑量為250mg Ag4，連續14d。陽性對照組給予格列齊特40mg/kg。給藥第7天和第14天時分別測定血糖1次，結果發現糖尿病小鼠血糖顯著降低(P < 0.01)，結果見表1。表1胡蘆巴黃酮提取物對糖尿病小鼠血糖的影響(n = 10,x±s)
權利要求
1.胡蘆巴黃酮提取物製備方法，包括以下步驟(1)將乾燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子用質量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質量體積比為1 5 1 20、 提取時間為0. 5 池的條件下進行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經濃縮後用質量濃度為70 95%的乙醇醇沉除去蛋白，並過濾，得到濃縮液；該濃縮液依次通過質量濃度為95%的乙醇、純水、質量濃度為5%的鹽酸、純水、質量濃度為2%的氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用質量濃度為 10 90%的乙醇以2 4BV/h的流速洗脫至無黃酮流出並收集洗脫液；(4)蒸發回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；(5)經所述黃酮溶液經濃縮、真空乾燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。
2.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，其特徵在於用下述製備方法代替權利要求1中所述步驟(1)將乾燥、粉碎成粒度為20 60目的胡蘆巴種子先用超臨界 CO2萃取提取油脂後，再用質量濃度為10 90%的乙醇溶液在提取溫度為20 60°C、超聲功率為100 600W、料液質量體積比為1 5 1 20、提取時間為0.5 池的條件下進行超聲提取，得到提取液。
3.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，其特徵在於所述步驟(2)和(3) 中極性大孔吸附樹脂為DM130型。
4.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，其特徵在於所述步驟O)中的濃縮溫度為50 60°C。
5.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，其特徵在於所述步驟中的蒸發回收溫度為45 60°C。
6.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法，其特徵在於所述步驟(5)中的真空乾燥溫度為50 60°C。
7.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖藥物中的應用。
8.如權利要求7所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖藥物中的應用，其特徵在於所述降血糖藥物中含有質量30 60 %的胡蘆巴黃酮提取物和藥學可接受的輔料。
9.如權利要求1所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖保健食品中的應用。
10.如權利要求9所述的胡蘆巴黃酮提取物製備方法所得的胡蘆巴黃酮提取物在製備降血糖保健食品中的應用其特徵在於所述降血糖保健食品中含有質量20 50%的胡蘆巴黃酮提取物和保健食品可接受的添加劑。
全文摘要
本發明涉及一種胡蘆巴黃酮提取物製備方法，該方法包括以下步驟(1)將乾燥、粉碎的胡蘆巴種子用乙醇溶液進行超聲提取，得到提取液；(2)所述提取液經濃縮後用乙醇醇沉、過濾，得到濃縮液；該濃縮液依次通過乙醇、純水、鹽酸、純水、氫氧化鈉和純水處理的中極性大孔吸附樹脂；(3)先用水洗脫中極性大孔吸附樹脂至流出的溶液為無色或淡棕色，再用乙醇洗脫至無黃酮流出並收集洗脫液；(4)蒸發回收所述洗脫液中的乙醇，得到黃酮溶液；(5)經所述黃酮溶液經濃縮、真空乾燥即得粉狀胡蘆巴黃酮提取物。本發明具有快速、高效、易於放大、綠色安全的特點，所得提取物具有顯著的降血糖生物學活性，可廣泛應用於各種胡蘆巴黃酮類降血糖的藥物及保健食品開發需求。
文檔編號A23L1/29GK102441026SQ201110375609
公開日2012年5月9日 申請日期2011年11月22日 優先權日2011年11月22日
發明者楊仁明, 王洪倫, 索有瑞 申請人:中國科學院西北高原生物研究所