大菱鮃選擇育種個體標記方法

2023-06-10 08:05:21

專利名稱：：大菱鮃選擇育種個體標記方法
技術領域：
：本發明屬於在魚類育種、種群估算、資源評估、以及洄遊與分布調查領域中魚類個體標記技術，是一種在大菱鮃育種中實現識別大數量檢測每一條魚的技術方法。
背景技術：
：大菱鮃(ScophthalmusmaximusL.)是大西洋東北部，歐洲沿海特有的一種比目魚。我國於1992年首次從英國引進大菱鮃苗種，由於在我國大菱鮃苗種生產過程中採用的親魚通常未經科學選育，加之累代養殖和近親交配，造成後代苗種的種質退化現象比較嚴重，已經出現孵化率和出苗率降低、生長速度減慢、抗逆性變差等性狀退化現象，為此需要開展大菱鮃的選擇育種工作。在大菱鮃的育種中，通過標記可以追蹤每條魚的群體來源、父母本、系譜、生產表現以及魚的出廠和銷售去向等情況，同時在進行與經濟性狀相關的檢測時，需要將不同來源的、於同一環境直至養成的大菱鮃幼體，實現在同一養殖環境下的檢測，以便提高遺傳參數估計的準確性。中國水產科學研究院黃海水產研究所馬愛軍等申請的'基於大菱鮃選擇育種的一種親魚標記方法'(申請號200810083837.1)，主要用紅銅為材料做成標記數字放入液氮罐內靜置3分鐘，取出後放置在魚體標記部位2分鐘；本發明所需費用低、操作簡便，效果顯著、且易於觀察；但本專利也要求在魚體長到一定的規格後進行標記，並且由於大菱鮃生長快，很難保證時間長後標記數字清晰可見，從而降低標記的有效識別率；而且紅銅為材料做成標記數字(每個個體的標記數字不同，因而需要帶標記數字的紅銅模具數量非常大)成本較高。中國科學院水生生物研究所張堂林等的"魚類標誌技術的研究進展"(中國水產科學/2003年/第10巻/第3期)和中國水產科學研究院淡水漁業研究中心董在傑等申請的專利"一種羅非魚個體標記的方法"(申請號200810018667.9)，其中大數量的個體標記方法主要是把PIT標記晶片注射入魚體內進行個體標記；但是受PIT標記晶片大小的影響，這種標記方法要求在魚體長到一定的規格(一般應用於魚成體的標記)；並且PIT標記晶片目前市場價格較高(價格一個PIT標記晶片，國產20元人民幣左右；國外進口30元人民幣以上)，對於大規模大菱鮃的選育育種無疑成本也太高。
發明內容本發明的目的是在大菱鮃的育種中，通過標記追蹤每條魚的群體來源、父母本、系譜、生產表現以及魚的出廠和銷售去向等情況，同時在進行與經濟性狀相關的檢測時，對混養的不同個體和家系進行識別，提高遺傳參數估計的準確性，同時為魚的留種親本提供身份標記，實現大菱鮃交配可控性，避免近交衰退。本發明所採用的技術方法包括1、標記前的準備；2、魚的選擇；3、魚體的標記。1、標記前的準備選取膠針、吊牌槍和標識牌，膠針為10mm，平頭、呈"工"字型，型號為MUXP-25，同時準備瓢網、毛巾、裝有新鮮海水的池子和充氣的氣石，並用濃度為75%的酒精對吊牌槍、膠針、標識牌、手進行酒精消毒；32、魚的選擇大菱鮃為活體幼魚，體長大於5cm;標記前，大菱鮃必須先池養1_2天，幼魚不能進食；標記時用溼毛巾將其頭部整個包埋；3、魚體標記在用吊牌槍槍針插入魚體前，用百多邦或紅黴素藥膏塗抹消毒槍針，然後將標識牌套入到槍針上，吊牌槍型號為SAGA70L;在吊牌槍槍針插入魚體時，將膠針穿入魚體內的肌肉中，插入點在魚體頭部(頭部朝向操作人員)左眼後側肌肉較多處，針要仔細地穿透肌肉組織，不要碰到骨頭或靜脈，用百多邦或紅黴素藥膏塗抹穿針的傷口處、膠針應留有長度28mm以供魚體生長，調整標記使其呈45度角斜向魚體後端，將標記的魚安置在有充氣設備的海水池中；標記後氟苯尼考藥浴2小時，每天藥浴一次，連續藥浴三天。氟苯尼考藥浴濃度為10卯m。標記為標識牌材料為貝迪牌白色聚酯複合紙，雙層覆膜，形狀為長2釐米，寬0.8釐米，拴繩孔徑為3.0毫米左右；在白色聚酯複合紙上列印標識碼，為5位的標識符第一位標識符為英文大寫字母，第2-5位為阿拉伯數字，如A0001-A9999。本發明的特點是1、本發明操作簡單，自動化高，對魚體的損傷程度較小，標記的保留率90%以上，有效識別率90%以上，不影響大菱鮃的正常活動，能夠滿足大規模大菱鮃的選育育種標記的需要；2、本發明對魚幼體和成體都可以標記，標記對大菱鮃的生長無影響；3、所用的大菱鮃個體標記成本非常低，每條魚的成本為0.2元人民幣，而且檢測的魚只需在幼體期標記一次，將可終身攜帶，既節約了成本，也減少了多次標記對魚體的傷害。圖1:魚類標識牌示意圖；圖2:魚類標記方法和過程A:將吊牌槍槍針插入肌肉組織；B:調整標記使其呈45度角斜向魚體後端。具體實施例方式下面通過實例結合附圖對本發明技術進行詳細敘述本實驗是在山東省海陽市黃海水產有限公司海珍品場進行的，本發明其技術方法包括1、標記前的準備；2、大菱鮃幼魚的選擇；3、苗體的標記。1、標記前的準備選取一種小的、平頭、呈"工"字型的膠針(10mm，型號MUXP-25，材料為聚乙烯)、帶槍針的吊牌槍(型號SAGA70L)。使用的標識牌材料為貝迪牌白色聚酯複合紙，雙層覆膜，形狀為長2釐米，寬0.8釐米，拴繩孔徑為3.0毫米左右。在白色聚酯複合紙上列印標識碼，為5位的標識符第一位標識符為英文大寫字母，第2-5位為阿拉伯數字，如A0001-A9999，見附圖1。同時準備瓢網、毛巾、裝有新鮮海水的池子和充氣的氣石，並用75%的酒精對吊牌槍、膠針、標識牌進行消毒。2、大菱鉀幼魚的選擇4取規格相近的大菱鮃家系活體幼魚608條，體長在16cm左右，體重170g左右，其中304條準備標記，在培育水池先暫養幾天，使試驗魚適應標記後生長環境；標記前對水池中暫養的魚停食兩天；為了減少和消除在標記過程中魚體所受的脅迫以及由於脅迫致使魚體過於劇烈運動造成的損傷，大菱鮃必須在標記前用毛巾將其頭部整個包埋麻醉，之後對幼魚進行標記。。3、苗體的標記在同一養殖環境下對魚類準確的檢測，需要魚體本身具有一種特有的識別標記。魚體識別標記較多，包括附加物、插入物，或外部注射進魚體。本方法在大菱鮃類育種技術中採用了體外掛牌的個體標記方法，獨特地識別大數量檢測魚中的每一尾。具體標記程序是1)、使魚苗保持遊泳的姿勢；2)、插入點在魚體頭部(頭部朝向操作人員)左眼後側肌肉較多處；3)、在用吊牌槍槍針插入魚體前，將百多邦(或紅黴素藥膏)塗抹消毒槍針，然後將標識牌套入到槍針上；4)、將吊牌槍槍針插入在一個標度之下，針要仔細地插入肌肉組織，不要碰到骨頭或靜脈，見附圖2的A圖；5)、直接將膠針插入魚體肌肉中，用百多邦(或紅黴素藥膏)塗抹消毒穿針後的傷□;6)、膠針應該留有5mm長，以供魚體生長。其膠針的長度是根據被期望魚體的最大生長(即依照收穫的年齡或重量確定)來決定預留膠針的長度；7)、調整標記使其呈45度角斜向魚體後端，見附圖2的B圖，並且立刻將標記的魚苗安置在有充氣設備的海水池中；8)、標記後用氟苯尼考10卯m(10X水溶性氟苯尼考粉)藥浴2小時，每天藥浴一次，連續藥浴三天。已標記組與對照組(未標記)各304條，放置到同一池中進行養殖，分別在初始、養殖30天和90天後測量其體長、體重生長指標，統計標記後的各項參數，並測量所有魚生長性狀指標。在整個標記魚與未標記魚養殖期間，在304尾標記大菱鉀中，魚的成活率為98.03%，未感染所佔比例為96.05%，標記的保持率為94.08%，有效識別率100%。標記組和對照組的大菱鮃初始、30天和90天的平均體長和體重如表1所示。單因素方差分析的結果表明，標記組和對照組的大菱鉀在30、90天的生長中，體長和體重不存在顯著差異。表1標記大菱鉀與對照組的體長和體重(平均值±標準差)初始30天90天生長性狀---對照組標i己組對照組標"i己組對照組標記組體長平均值.16.5816.9217.1917.7918.9719.825tableseeoriginaldocumentpage6從上述表中可看出，標記魚與未標記魚在平均體重、平均體長等生長性狀的變化幾乎無差別，從而通過對標記與不標記魚的生長對比發現，標記對大菱鮃的生長無影響。2007年和2008年在山東省海陽市黃海水產有限公司海珍品養殖場對本發明方法進行了大規模的應用，每年標記大菱鮃苗種2萬以上，標記的保留率90%以上，有效識別率90%以上，而且不影響大菱鮃的正常活動。同時表明該發明操作簡單，自動化高，對魚體的損傷程度較小，能夠滿足大規模大菱鮃育種標記的需要。權利要求一種大菱鮃選擇育種個體標記方法，包括1)、標記前的準備；2)、魚的選擇；3)、魚體的標記，其特徵在於1)、標記前的準備選取膠針、吊牌槍和標識牌，膠針為10mm，平頭、呈「工」字型，型號為MUXP-25，同時準備瓢網、毛巾、裝有新鮮海水的池子和充氣的氣石，並用濃度為75％的酒精對吊牌槍、膠針、標識牌、手進行酒精消毒；2)、魚的選擇大菱鮃為活體幼魚，體長大於5cm；標記前，大菱鮃必須先池養1-2天，幼魚不能進食；標記時用溼毛巾將其頭部整個包埋；3)、魚體標記在用吊牌槍槍針插入魚體前，用百多邦或紅黴素藥膏塗抹消毒槍針，然後將標識牌套入到槍針上，吊牌槍型號為SAGA70L；在吊牌槍槍針插入魚體時，將膠針穿入魚體內的肌肉中，插入點在魚體頭部左眼後側肌肉較多處，針要仔細地穿透肌肉組織，不要碰到骨頭或靜脈，用百多邦或紅黴素藥膏塗抹穿針的傷口處、膠針應留有長度2～8mm以供魚體生長，調整標記使其呈45度角斜向魚體後端，將標記的魚安置在有充氣設備的海水池中；標記後氟苯尼考藥浴2小時，每天藥浴一次，連續藥浴三天；氟苯尼考藥浴濃度為10ppm。2.根據權利要求1所述的一種大菱鮃選擇育種個體標記方法，其特徵在於所述的標識牌材料為貝迪牌白色聚酯複合紙，雙層覆膜，形狀為長2釐米，寬0.8釐米，拴繩孔徑為3.0毫米左右；在白色聚酯複合紙上列印標識碼，為5位的標識符第一位標識符為英文大寫字母，第2-5位為阿拉伯數字，如A0001-A9999。全文摘要一種大菱鮃選擇育種個體標記方法，首先選取膠針、吊牌槍和標識牌。膠針為10mm，呈「工」字型，型號為MUXP-25；吊牌槍型號為SAGA70L；標識牌材料為貝迪牌白色聚酯複合紙，長2釐米，寬0.8釐米，標識碼，為5位的標識符；其次選擇體長大於5cm的大菱鮃幼魚。標記時要保持魚為遊泳姿勢；插入點定位在魚體頭部左眼後側肌肉較多處；體外膠針應該留有2～8mm長；最後將標記魚放在10ppm氟苯尼考藥浴2小時，每天藥浴一次，連續藥浴三天。本發明操作簡單，成本低，自動化高，對魚體的損傷程度較小，標記的保留率90％以上，有效識別率90％以上，不影響大菱鮃的正常活動，能夠滿足大規模大菱鮃育種標記的需要。文檔編號A01K61/00GK101731167SQ200910255819公開日2010年6月16日申請日期2009年12月28日優先權日2009年12月28日發明者孔傑,張天時,張慶文,曹寶祥,欒生,王偉繼,羅坤申請人:中國水產科學研究院黃海水產研究所