一種複方蠶豆粉及其用途的製作方法

2023-07-02 07:20:36 2

本發明涉及保健品領域，具體涉及一種複方蠶豆粉及其用途。

背景技術：

目前，由於用腦過度、精神緊張等多種原因造成的記憶減退普遍存在於學生和其他腦力勞動者中。另一方面，隨著我國社會人口老齡化的到來，與年齡密切相關的認知障礙，尤其是痴呆的患病率近年來呈明顯增加的趨勢。因此，研究開發改善學習記憶能力和降血脂功能的天然保健食品，其價值和社會意義重大。

技術實現要素：

本發明的目的在於，提供一種複方蠶豆粉保健品，該保健品具有輔助降血脂，適用於高血脂症危險者，對高血脂症有輔助保護功能，另外，還具有改善記憶功能和抗帕金森症的作用。

本發明的目的是這樣實現的：

一種複方蠶豆粉，它是以下述重量配比的原料製成：去皮蠶豆10-18份、青稞8-12份、枸杞4-8份、木糖醇4-8份、果膠0.1-0.14份、麥芽糊精2-4份。

所述複方蠶豆粉，它是以下述重量配比的原料製成：去皮蠶豆14份、青稞10份、枸杞6份、木糖醇6份、果膠0.12份、麥芽糊精3份。

所述複方蠶豆粉，製作工藝步驟為：

a.原料清洗：對去皮蠶豆、青稞進行清洗，去除塵土、砂石以及蟲蛀；

b.乾燥：對清洗的原料進行乾燥，烘箱50℃烘乾；

c.粗粉碎：將去皮蠶豆、青稞、枸杞按比例混合，粉碎機打粉，過24目篩，得粗粉碎的原料；

d.擠出膨化：用擠壓膨化機對粗粉碎的原料進行膨化，以產品蓬鬆為宜；

e.細粉碎：對膨化後的物料進一步粉碎，使其全部通過80目篩；

f.調味混合：按比例加入木糖醇、果膠、麥芽糊精；

g.滅菌：對所得粉末進行滅菌；

h.包裝：在層流潔淨室內進行包裝。

所述複方蠶豆粉在製備具有調節血脂功能保健品中的應用。

所述複方蠶豆粉在製備具有抗帕金森症功能保健品中的應用。

所述複方蠶豆粉在製備具有改善記憶功能保健品中的應用與現有技術相比，本發明具有如下有益的技術效果：

傳統醫學認為蠶豆味甘、性平，入脾、胃經；可補中益氣，健脾益胃，清熱利溼，止血降壓，澀精止帶；主治中氣不足，倦怠少食，高血壓，咯血，衄血，婦女帶下等病症。枸杞子味甘、性平，具有滋陰補血，益精明目等作用。中醫常用於治療因肝腎陰虛或精血不足而引起的頭昏、目眩腰膝酸軟、陽痿早洩、遺精、白帶過多及糖尿病等症。青稞性平，味鹹，具有補脾、養胃、益氣、止瀉、強筋力之功效。青稞適宜脾胃氣虛、倦怠無力、腹瀉便溏等病症患者食用。三者性平，味偏甘，配伍使用，相輔相成，藥理學研究表明蠶豆、青稞、枸杞三者配伍具有降脂、抗帕金森症、改善記憶功能。

由於本發明的配方有效成分含有：胺基酸、微量元素、維生素、原花青素、左旋多巴、枸杞多糖、甜菜鹼、青稞β-葡聚糖等，具有輔助降血脂，改善記憶功能和抗帕金森症的保健功能。同時本發明為粉劑，粉劑工藝簡單、質量均勻穩定，具有便於服用、攜帶，使用者服用的依從性好的各種優點，並且粉劑在胃腸道中分散快、吸收快，生物利用度高。

具體實施方式

以下通過實施例形式對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。

實施例1：稱取去皮蠶豆1400g、青稞1000g、枸杞600g、木糖醇600g、果膠12g、麥芽糊精300g，製作工藝步驟為：

a.原料清洗：對去皮蠶豆、青稞進行清洗，去除塵土、砂石以及蟲蛀；

b.乾燥：對清洗的原料進行乾燥，烘箱50℃烘乾；

c.粗粉碎：將去皮蠶豆、青稞、枸杞按比例混合，粉碎機打粉，過24目篩，得粗粉碎的原料；

d.擠出膨化：用擠壓膨化機對粗粉碎的原料進行膨化，以產品蓬鬆為宜；

e.細粉碎：對膨化後的物料進一步粉碎，使其全部通過80目篩；

f.調味混合：按比例加入木糖醇、果膠、麥芽糊精；

g.滅菌：對所得粉末進行滅菌；

h.包裝：在層流潔淨室內進行包裝。

實施例2：稱取去皮蠶豆1000g、青稞1200g、枸杞400g、木糖醇800g、果膠10g、麥芽糊精400g，製作工藝步驟為：

a.原料清洗：對去皮蠶豆、青稞進行清洗，去除塵土、砂石以及蟲蛀；

b.乾燥：對清洗的原料進行乾燥，烘箱50℃烘乾；

c.粗粉碎：將去皮蠶豆、青稞、枸杞按比例混合，粉碎機打粉，過24目篩，得粗粉碎的原料；

d.擠出膨化：用擠壓膨化機對粗粉碎的原料進行膨化，以產品蓬鬆為宜；

e.細粉碎：對膨化後的物料進一步粉碎，使其全部通過80目篩；

f.調味混合：按比例加入木糖醇、果膠、麥芽糊精；

g.滅菌：對所得粉末進行滅菌；

h.包裝：在層流潔淨室內進行包裝。

實施例3：稱取去皮蠶豆1800g、青稞800g、枸杞800g、木糖醇400g、果膠14g、麥芽糊精200g，製作工藝步驟為：

a.原料清洗：對去皮蠶豆、青稞進行清洗，去除塵土、砂石以及蟲蛀；

b.乾燥：對清洗的原料進行乾燥，烘箱50℃烘乾；

c.粗粉碎：將去皮蠶豆、青稞、枸杞按比例混合，粉碎機打粉，過24目篩，得粗粉碎的原料；

d.擠出膨化：用擠壓膨化機對粗粉碎的原料進行膨化，以產品蓬鬆為宜；

e.細粉碎：對膨化後的物料進一步粉碎，使其全部通過80目篩；

f.調味混合：按比例加入木糖醇、果膠、麥芽糊精；

g.滅菌：對所得粉末進行滅菌；

h.包裝：在層流潔淨室內進行包裝。

實施例4：本發明降血脂的實驗研究

1.實驗材料

1.1受試藥物

按上述實施例1方法製備本發明複方蠶豆粉。

1.2藥物和試劑

阿託伐他汀：輝瑞製藥有限公司，批號：M08266。

金剛烷胺片：上海衡山藥業有限公司，批號：150801。

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)：東京化成工業株氏會社，批號：M2690。

石杉鹼甲：南京森貝伽生物科技有限公司，批號：102518-79-6。

總膽固醇(TC)試劑盒：南京建成生物工程研究所，批號：20160704。

甘油三酯(TG)試劑盒：南京建成生物工程研究所，批號：20160706。

低密度脂蛋白(LDL)試劑盒：南京建成生物工程研究所，批號：20160705。

高密度脂蛋白(HDL)試劑盒：南京建成生物工程研究所，批號：20160706。

多巴胺試劑盒：上海源葉生物科技有限公司，批號：16031606。

血糖試紙：強生(上海)醫療器材有限公司，批號：4014499。

脂肪乳配方：花生油500g，豬油80g，牛膽酸鹽5g，膽固醇30g。

高脂飼料：基礎飼料78.5％，豬油10％，蛋黃粉10％，膽固醇1％，膽酸鈉0.5％。

1.3實驗儀器

Thermo全波長酶標儀、島津分析天平、血糖儀：ONETOUCH SelectSimple，強生(中國)醫療器材有限公司、DT-200跳臺自動測試儀，成都泰盟科技有限公司。

1.4實驗動物

SPF級SD大鼠60隻，體重180-220g，雄性，由昭衍(蘇州)新藥研究中心有限公司提供，生產許可證：SCXK(蘇)2014-0001。

SPF級B6 60隻，體重18-22g，雄性，由北京維通利華實驗動物技術有限公司南京分公司提供，生產許可證：SCXK(蘇)2016-0003。

ICR種小鼠120隻，體重18-22g，雄性，由上海傑思捷實驗動物有限公司提供，生產許可證：SCXK(滬)2013-0006。

1.5實驗條件

給藥前後，SD大鼠分籠飼養，每籠5隻，餵以全價顆粒鼠飼料(南京協同生物工程有限公司)，自由飲水飲食，室溫20℃～25℃，每天人工光照12h，室內通風良好，實驗室相對溼度：65～70％。

1.6統計學處理

採用SPSS 11.0統計軟體進行統計學分析，正態分布的計量數據以表示，多組間比較採用方差分析，兩兩比較採用LSD法，以P<0.05為差異有統計學意義。

2.實驗方法與結果

2.1本發明對高脂大鼠的影響

2.1.1動物分組和造模方法

隨機將60隻雄性SD大鼠分為空白對照組、模型組、陽性藥阿託伐他汀組(2.5mg·kg-1)、本發明高(5.288g·kg-1)、中(2.644g·kg-1)、低(1.322g·kg-1)劑量組，每組10隻。適應性飼養一周後，除空白對照組外，其餘組每天灌胃給予10ml·kg-1脂肪乳，連續灌胃3周；三周後除空白對照組外，其餘組給予高脂飼料餵養，同時每組灌胃給予不同劑量的藥物，持續2個月。

2.1.2檢測指標

(1)體重測定 造模期間及給藥期間每周測定大鼠體重。

(2)肝臟稱重 大鼠麻醉取血後，迅速取出肝臟，用生理鹽水洗淨，再用濾紙吸乾肝臟表面的液體後稱重；

脂體稱重 大鼠麻醉取血後，迅速取出腎兩側脂肪，用濾紙吸乾脂肪表面的血液後稱重；

臟器係數(每百克鼠重臟器所佔的重量)＝臟器溼重/體質量×100

血糖測定 大鼠取血時，用血糖儀和血糖試紙進行血糖測定。

(3)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)取大鼠血液於3000r·min-1離心10min，取上清液保存用於測定TC、TG，用酶標儀按照試劑盒說明書進行檢測。

2.1.3實驗結果

2.1.3.1本發明對高脂大鼠體重的影響

模型組大鼠體重增長較快，但與空白對照組比較無顯著性差異，本發明高、中劑量組大鼠體重增長相對緩慢，但與模型組比較無顯著性差異。結果見表1。

表1.本發明對大鼠體重的影響(n＝10)

2.1.3.2本發明對高脂大鼠體長、臟器係數的影響

本發明高劑量組大鼠體長增加，與與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)。模型組大鼠肝臟重量增加，臟器係數升高，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.01)，本發明高組大鼠肝臟及腎兩側脂肪重量減少，臟器係數降低，但與模型組比較無顯著性差異。結果見表2。

表2.本發明對大鼠臟器係數的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較##P＜0.01，給藥組與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。

2.1.3.3本發明對高脂大鼠血糖的影響

本發明各劑量組大鼠血糖與模型組比較均無顯著性差異。結果見表3。

表3.本發明對大鼠血糖的影響(n＝10)

2.1.3.4本發明對高脂大鼠血脂的影響

模型組大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高，高密度脂蛋白降低，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.05，0.01)，本發明高、中劑量組大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白降低，高密度脂蛋白升高，其中總膽固醇、高密度脂蛋白與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05，0.01)。結果見表4。

表4.本發明對大鼠血脂的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較#P＜0.05，##P＜0.01，給藥組與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。

3.實驗結論

本發明5.288g·kg-1、2.644g·kg-1劑量組可以明顯降低總膽固醇(TC)含量，升高高密度脂蛋白(HDL)含量；本發明5.288g·kg-1劑量組可以顯著降低高脂大鼠的體長，與模型組比較差異顯著(P<0.05、P<0.01)。

實施例5：本發明對帕金森症小鼠的影響

1.動物模型的建立及分組給藥

60隻小鼠隨機分6組，每組10隻，分別為對照組、模型組、陽性藥金剛烷胺組(40mg·kg-1)、以及本發明高(2.2g·kg-1)、中(1.1g·kg-1)、低(0.55g·kg-1)劑量組，連續灌胃給藥14d。於第11天開始灌胃，給藥前1h腹腔注射MPTP 30mg/kg(對照組給予等體積的生理鹽水)，連續4d最後1次給藥後1d進行行為學指標測試，4d後脫頸處死，取小鼠腦紋狀體，於-80度保存，用於分別測定多巴胺含量。

2.檢測指標

2.1懸掛實驗

將受試小鼠懸掛於一水平電線上，如小鼠用兩前爪抓住電線記3分，用一前爪抓住電線記2分，兩前爪均抓不住電線記1分。最後計算得分情況。

2.2遊泳實驗

將受試小鼠放入一個20cm×30cm×20cm規格的水箱中，水溫為22-25C,在受試時間內(10min)能連續不斷遊泳者記3分，大部分時間遊泳偶爾漂浮者記2.5分，漂浮佔50％以上者記2分，偶爾遊泳者記1.5分，偶爾用後肢遊動並漂浮在一邊者記1分。最後計算得分情況。

2.3多巴胺含量ELISA檢測

(1)試劑盒應平衡至室溫(20-28℃)；

(2)將標準品按每孔各[50ul]，做好標記。

(3)將處理好的待測樣本每孔各[50ul]依次加入，做好標記。

(4)在標準品孔及待測樣本孔分別加入[50ul]酶聯親和物，充分混勻。

(5)將包被微孔板覆膜並在37℃孵育反應60分鐘後充分棄盡孔內剩餘殘夜，用預先稀釋好的清洗液反覆衝洗5次，並扣幹孔內剩餘液體。

(6)每孔依次加入底物Ⅰ和Ⅱ各[50ul]，充分混勻。在室溫下避光反應15分鐘。

(7)反應過後每孔分別加入終止液[50ul]，充分混勻，終止反應。

(8)在30分鐘內使用酶標儀在450nm下讀取OD值。

(9)以OD值為縱坐標，標準品濃度為橫坐標,繪製標準曲線。

(10)根據血清樣品的0D值可在標準曲線上查出其濃度。

3.實驗結果

3.1本發明對帕金森症小鼠懸掛實驗的影響

模型組小鼠前爪抓力下降，與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。本發明各劑量組前爪抓力相對於模型組小鼠有所增強，但與之比較沒有顯著性差異。結果見表5.

表5.本發明對帕金森症小鼠懸掛實驗的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較##P＜0.01。

3.2本發明對帕金森症小鼠遊泳實驗的影響

模型組小鼠在水中遊泳能力下降，與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.05)。本發明各劑量組遊泳能力有提高，但與模型組比較沒有顯著性差異。結果見表6.

表6.本發明對帕金森症小鼠遊泳實驗的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較##P＜0.01。

3.3本發明對帕金森症小鼠腦內多巴胺的影響

模型組小鼠腦內多巴胺含量明顯降低，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.05)。本發明各劑量組腦內多巴胺含量與模型組比較無顯著性差異。結果見表7.

表7.本發明對帕金森症小鼠腦內多巴胺的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較#P＜0.05。

4.實驗結論

本發明各劑量組有增強帕金森症小鼠前爪抓力，提高遊泳能力，增加腦內多巴胺含量的趨勢，但與模型組比較無顯著性差異。

實施例6：本發明對小鼠學習記憶障礙模型的改善作用研究

1小鼠水迷宮行為學實驗

1.1實驗方法

迷宮是80×50×20cm3雙層不透明有機玻璃箱，內設起始點、終點平臺和四個盲端，平臺附近為安全區並放檯燈標示。實驗時迷宮水深12cm，實驗時水溫保持24±1℃，迷宮周圍一切空間標誌在整個實驗過程中保持不變。取60隻ICR小鼠，隨機分為空白對照組、石杉鹼甲組(0.07mg·kg-1)、模型組及本發明高(2.2g·kg-1)、中(1.1g·kg-1)、低(0.55g·kg-1)6個劑量組。各組小鼠經口灌胃，灌胃量為0.2mL/10g，每日一次，連續灌胃25天。給藥第20天後，進行水迷宮訓練，每天2次。末次給藥40min後除正常組腹腔注射生理鹽水外，其餘各組均腹腔注射3mg·kg-1氫溴酸東莨菪鹼，20min後進行水迷宮測試。小鼠面向壁在起始點放入水中，記錄小鼠放入水中到達終點平臺時間(潛伏期)和進入盲端的次數，設置60s為最大潛伏期，60s後停止記錄。

1.2實驗結果

模型組小鼠到達終點平臺時間的時間延長，進入盲端的次數增加，與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.05，0.01)。本發明高劑量組小鼠到達終點平臺的時間縮短，進入盲端的次數也減少，與模型組比較有顯著性差異(P<0.05，0.01)。結果見表8。

表8本發明對小鼠水迷宮實驗潛伏期和進入盲端次數的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較#P＜0.05，##P＜0.01，給藥組與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01。

2.小鼠跳臺實驗

2.1實驗方法

取60隻ICR小鼠，隨機分為空白對照組、石杉鹼甲組(0.07mg·kg-1)、、模型組及本發明高(2.2g·kg-1)、中(1.1g·kg-1)、低(0.55g·kg-1)6個劑量組。各組均採用灌胃給予相應藥物，正常組和模型組給予等體積的蒸餾水，灌胃量為0.2mL/10g每日一次，連續灌胃30天。

各組小鼠於給藥29d用跳臺儀進行訓練(小鼠在通電的平板上能找到並跳上安全平臺)，第30天給藥40min後除正常組腹腔注射生理鹽水外，其餘各組均腹腔注射3mg·kg-1氫溴酸東莨菪鹼，20min後測定小鼠找到並跳上安全平臺所需時間(潛伏期)、3min內跳下平臺的次數(錯誤次數)。測驗時若小鼠停留在平臺的時間超過5min，其潛伏期以5min計。記錄、比較不同組間小鼠記憶成績的差異。

2.2實驗結果

模型組小鼠跳上安全平臺所需時間延長，3min內跳下平臺的次數增加，與空白對照組比較有顯著性差異(P<0.01)。本發明高劑量組小鼠跳上安全平臺所需時間縮短，3min內跳下平臺的次數也減少，與模型組比較有顯著性差異(P<0.01)。結果見表9。

表9本發明對小鼠跳臺實驗潛伏期和錯誤次數的影響(n＝10)

註：模型與空白對照組比較##P＜0.01，給藥組與模型組比較**P＜0.01。

3.實驗結論

本發明5.288g·kg-1劑量組小鼠水迷宮實驗到達終點平臺的時間縮短，進入盲端的次數也減少；小鼠跳臺實驗跳上安全平臺所需時間縮短，3min內跳下平臺的次數也減少，與模型組比較有顯著性差異(P<0.05、P<0.01)。