一種低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法
2023-05-30 07:59:11 2
專利名稱：一種低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法
技術領域：
本發明涉及利用南極磷蝦製備蛋白基料的方法。
背景技術：
南極磷蝦(Euphausia superba)是地球上最大的單種生物資源之一，其現存量的估計值約為4 15億噸，成熟蝦年產量為3 5億噸，年可捕獲量可達1億噸左右，形成巨大的潛在漁業資源。近年來，隨著世界性傳統漁業資源的逐漸衰竭，以及200海裡專屬經濟區的提出，使南極水域中巨大的南極磷蝦資源受到一些遠洋漁業發達國家的關注。我國也已把南極磷蝦資源列入今後遠洋漁業發展的主要開發品種之一。南極磷蝦中含有11. 9%至15. 4%蛋白(溼基)，是現已查明的人類可利用的最大蛋白資源之一。南極磷蝦被譽為人類的蛋白資源寶庫，這是由於南極磷蝦不但蛋白質含量高，且蛋白質的營養價值也高。世界衛生組織曾將南極磷蝦、對蝦、牛乳和牛肉的胺基酸綜合營養價值比較評分，結果磷蝦得100分，牛肉96分，牛乳91分，對蝦71分。據分析，人體所必需的8種胺基酸，磷蝦中均有，且合起來佔蛋白質含量的40%以上。因此，南極磷蝦可作為人類重要的優質動物蛋白資源而加以利用。南極洲地處遙遠、南極磷蝦捕撈後需長期運輸、保藏。南極磷蝦殼中含有高濃度的氟，在保藏過程中會向蝦肉遷移，汙染蝦肉，影響蝦肉蛋白產品的安全性。同時，南極磷蝦中富含多不飽和脂肪酸，易腐敗變質。因此，南極磷蝦捕撈需迅速冷凍、超低溫保存才能保證蝦的原有品質，這大大提高了南極磷蝦的運輸保藏成本，成為制約南極磷蝦資源開發利用的瓶頸。要解決南極磷蝦運輸、保藏困難的問題，最好的辦法就是在捕撈後迅速將南極磷蝦加工以製備蛋白，但目前尚缺乏南極磷蝦蛋白的船上加工製備方法。
發明內容
本發明旨在提供一種簡易方法在南極磷蝦捕撈後立即製成南極磷蝦蛋白基料的方法，具有低氟特性，尤其適合捕撈船上操作，可以為南極磷蝦的開發利用提供技術支持。為了達到上述目的，本發明公開了一種低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於，依次包括如下步驟Step 1、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙幹後直接勻漿獲得勻漿液，用功率 20 40瓦、波長200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之後將所述勻漿液置於0 4°C下自溶0. 1 1小時。Step 2、蛋白提取向所述勻漿液中加入與1 4倍體積的水，混勻，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉澱。Step 3、蛋白製備將所述的第一次上層液相通過調節PH值至4. 8 5. 8，或者 80 100°C下加熱10 30分鐘後離心的方法，得第二次上層液相和第二次沉澱，將所述第二次沉澱經噴霧乾燥即獲得南極磷蝦蛋白質基料。優選方式下，在步驟乂印2中，向勻漿液加水的同時，加入終濃度為0.01% 0.03%的氯化鈣，以促進蛋白質溶解。此外，步驟^ep 2中在離心分離之前調節勻漿液的 pH值至2 3. 5。為了提高南極磷蝦蛋白質基料的質量，針對第二次沉澱可進一步提純後再進行噴霧乾燥。具體說，在步驟乂印3中，可向所述第二次沉澱中加入2 4倍體積的水，混勻， 調節混合液PH值為4. 8 5. 8，離心分離得第三次上層液相和第三次沉澱，所述第三次沉澱經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。優選方式下，步驟乂印3中，可在捕撈船上，將第一次上層液相凍存於-15 至_25°C或經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於-15至_25°C保存；而後運至操作間，再將所述凍存的第一次上層液相融化或者將所述凍存的乾粉溶解於2 4倍體積的水中恢復為液態， 作為上述步驟乂印3中的第一次上層液相完成步驟乂印3及後續步驟。為了提高南極磷蝦蛋白質基料的產量，在步驟^ep 2中，向所述第一次沉澱加入 2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離， 得第四次上層液相和第四次沉澱；混合所述第一次液相和所述第四次液相作為步驟Mep 3中使用的第一次液相。上述步驟中，調節勻漿的pH值可選用1 6M的HCl或NaOH。此外乂印1中「浙幹」目的是將鮮活南極磷蝦附著的水清除，浙幹後蝦本身仍保持鮮蝦狀態。本發明整個製備過程均在0 4°C下完成，該溫度為捕撈季節南極地區的平均環境溫度，操作步驟均可在船上完成，其優勢在於利用了鮮活南極磷蝦自溶能力強的特點，增加結構蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。鮮活南極磷蝦中氟主要集中於蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時以水提取，氟主要分布在沉澱中，對水溶性粗蛋白的汙染較輕。另外，水溶性南極磷蝦粗蛋白經噴霧乾燥後運輸，增加運輸能力，節約運輸成本。本發明具有以下優佔.
^ \\\ ·1、本發明涉及的操作過程簡單，不需要複雜的設備，整個製備過程均在0 4°C下完成，該溫度為捕撈季節南極地區的平均環境溫度，適合在捕撈船上進行操作。2、本發明利用鮮活南極磷蝦自溶能力強的特點，增加結構蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。3、本發明將捕撈的鮮活南極磷蝦浙幹後直接勻漿進行操作，由於鮮活南極磷蝦中氟主要集中於蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時以水提取，氟主要分布在沉澱中，大大減少了對水溶性粗蛋白的汙染。4、本發明的方法涉及將水溶性南極磷蝦粗蛋白凍幹或噴霧乾燥的步驟，增加了對南極磷蝦粗蛋白的運輸能力，節約運輸成本。本發明的方法簡便有效能使南極磷蝦的粗蛋白回收率為46% 51%，粗脂質回收率為 60%。製備的低氟南極磷蝦蛋白質基料氟含量低於1. 5ug/g ；營養價值高， 產品中蛋白質含量為70 78g/100g幹基，脂肪含量為25 31g/100g幹基，磷脂含量為 400 440mg/g;用途廣，適合工業化應用，本發明可以為南極磷蝦的有效利用提供技術支持。此外，根據本發明方法的工藝參數，能夠提高生產效率，同時產品純度及質量較好，具有較高的經濟效益。
具體實施例方式發明公開了一種低氟南極磷蝦蛋白基料的船上加工製備方法，依次包括如下步驟1、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙幹後直接勻漿，用功率20 40瓦、波長 200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 1 1小時。此步驟利用了鮮活南極磷蝦自溶能力強的特點，增加結構蛋白的自身溶解，提高水溶性蛋白的得率。2、蛋白提取向低溫自溶後的勻漿液中加入與1 4倍體積的0 4°C水，混勻， 在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉澱。由於鮮活南極磷蝦中氟主要集中於蝦殼，尚未向蝦肉遷移，此時以水提取，氟主要分布在沉澱中，對水溶性粗蛋白的汙染較輕。3、穩定蛋白將步驟2中得到的第一次上層液相直接凍存或經噴霧乾燥後得乾粉後凍存。此步驟增加了運輸能力，並節約運輸成本。4、蛋白製備將步驟3中得到的凍存液融化或者將所述凍存乾粉溶解於2 4倍體積的水中，通過調節PH值至4. 8 5. 8，或者在80 100°C下加熱10 30分鐘後離心的方法，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。上述步驟2中，向勻漿液加水的同時，加入終濃度為0. 010% 0. 030%的氯化鈣。 通過調節勻漿液的pH值至2 3. 5，增加蛋白得率。上述步驟4中製備蛋白質的方法，根據步驟3的產物不同，具體來說有以下四種情況方法1 將凍存的液相融化後，調節pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻後靜置5 15分鐘，離心分離得沉澱A ；向沉澱A中加入2 4倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液pH值為 4. 8 5. 8，攪拌混勻後靜置5 15分鐘，離心分離得沉澱B ；沉澱B經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。方法2 將凍存的液相融化後，80 100°C下加熱10 30分鐘，攪拌混勻後靜置 5 15分鐘，離心分離得沉澱A ；沉澱A經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。方法3 將凍存的乾粉溶解於2 4倍體積的水，調節pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻後靜置5 15分鐘，離心分離得沉澱A ；向沉澱A加入2 4倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液PH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻後靜置5 15分鐘，離心分離得沉澱B ；沉澱B經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。方法4 將凍存的乾粉溶解於2 4倍體積的水，80 100°C下加熱10 30分鐘， 攪拌混勻後靜置5 15分鐘，離心分離得沉澱A ；沉澱A經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例1 本發明以南極磷蝦為原料，採用現代蛋白質的提取分離技術，製備了低氟南極磷蝦蛋白質基料的船上加工製備工藝。捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率20 40瓦、波長200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 1 1小時。 向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 01% 0. 03%，用1 6M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的pH值為2 3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 01 %至0. 03%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2 3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置 5 15分鐘，離心分離得沉澱C ；向沉澱C加入2 4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為4. 8 5. 8，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置 5 15分鐘，離心分離得沉澱D ；沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例2 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率40瓦、波長200納米、距離1米的紫外線照射處理10分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶1小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 03%，用6M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向沉澱A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 03%，用6M鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提 15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入6M鹽酸或氫氧化鈉調節PH值為5. 8，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉澱C ；向沉澱C加入4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入6M鹽酸或氫氧化鈉調節PH值為5. 8，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉澱D ；沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例3 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率30瓦、波長250納米、距離0. 8米的紫外線照射處理7分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 5小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 02%，用2M 鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 02%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；向液相C加入2M 鹽酸或氫氧化鈉調節PH值為5，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉澱C ；向沉澱C加入3倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入2M鹽酸或氫氧化鈉調節PH值為5，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉澱D ；沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例4 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率20瓦、波長210納米、距離0. 5米的紫外線照射處理5分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0.2小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.01%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為4. 8，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置5分鐘，離心分離得沉澱B ；向沉澱B加入2倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為4. 8，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置5分鐘，離心分離得沉澱C ；沉澱C經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例5 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與4倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率40瓦、波長280納米、距離1米的紫外線照射處理5分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地CN 102524510 A區環境溫度下自溶0. 1小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用4M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為5. 8，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置15分鐘，離心分離得沉澱B ；向沉澱B加入4倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為5. 2，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置15分鐘， 離心分離得沉澱C ；沉澱C經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例6 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與3倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率30瓦、波長300納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 4小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 020%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向液相A加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為5，攪拌混勻後在0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉澱B ；向沉澱B加入3倍體積的0 4°C的水，攪拌混勻，向混合液中加入IM鹽酸或氫氧化鈉調節pH值為5，攪拌混勻後0 4°C條件下靜置10分鐘，離心分離得沉澱C ；沉澱C經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例7 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率25瓦、波長220納米、距離0. 6米的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 7小時。在0 4°C條件下攪拌浸提6分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提8分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於_15°C保存；融化凍存液，調節PH值至4. 8後離心，得到沉澱，將沉澱噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例8 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與4倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率35瓦、波長290納米、距離0. 7米的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0.3小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.015%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為2. 4，在0 4°C條件下攪拌浸提11分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 015%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提11分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於-20°C保存；融化凍存液，調節PH值至5. 2後離心，得到沉澱C，向沉澱C中加入2倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液PH值為5. 2，離心分離得液相D和沉澱D，沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例9 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與3倍體積的0 4°C水混合後勻漿， 用功率35瓦、波長255納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 4小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 025%，用2M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提12分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向沉澱A加2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 025%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提12分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於_25°C保存；融化凍存液，調節PH值至5後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。
實施例10 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2. 5倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率觀瓦、波長230納米、距離0. 9米的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 5小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用3M 鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加3倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於_22°C保存；融化凍存液，調節PH值至5. 5後離心，得到沉澱C，向沉澱C中加入4倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液PH值為5. 5，離心分離得液相D和沉澱D，沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例11 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與3. 5倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率36瓦、波長205納米、距離1米的紫外線照射處理9分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 6小時。在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A 和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於_21°C保存；將所述凍存乾粉溶解於2倍體積的水中，調節PH 值至4. 9後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例12 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2 4倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率30瓦、波長245納米、距離0. 8米的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 7小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用 4M鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用4M鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於_18°C保存；將所述凍存乾粉溶解於4倍體積的水中，調節PH值至5. 1後離心，得到沉澱C，向沉澱C中加入4倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液pH值為 5. 1，離心分離得液相D和沉澱D，沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例13 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與3倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率30瓦、波長265納米、距離0. 8米的紫外線照射處理6分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 8小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 030%，用5M 鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用5M鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為3，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於保存；將所述凍存乾粉溶解於2倍體積的水中，調節PH值至 5. 0後離心，得到沉澱，將沉澱噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例14 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與4倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率40瓦、波長260納米、距離0. 5米的紫外線照射處理9分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0.9小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.025%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於_16°C保存；將所述凍存乾粉溶解於2 4倍體積的水中，調節PH 值至5. 8後離心，得到沉澱C，向沉澱C中加入2倍體積的水，攪拌混勻，調節混合液pH值為 5. 0，離心分離得液相D和沉澱D，沉澱D經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例15 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率30瓦、波長275納米、距離0. 5米的紫外線照射處理9分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 2小時。在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於-20°C保存；融化凍存液，100°C下加熱10分鐘後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例16 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與3倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率30瓦、波長285納米、距離0. 8米的紫外線照射處理9分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0.3小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.010%，用IM 鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為2. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C凍存於_19°C保存；融化凍存液，80°C下加熱30分鐘後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例17 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與2倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率20瓦、波長295納米、距離0. 5米的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0. 6小時。在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相 A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提10分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於_21°C保存；將所述凍存乾粉溶解於2倍體積的水中，90°C下加熱20分鐘後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。實施例18 捕撈後的鮮活南極磷蝦浙幹水分，與4倍體積的0 4°C水混合後勻漿，用功率40瓦、波長225納米、距離0. 5的紫外線照射處理8分鐘，之後將勻漿液置於捕撈地區環境溫度下自溶0.2小時。向勻漿液中加入氯化鈣使其終濃度為0.010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節勻漿液的PH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提5分鐘，離心分離得液相A和沉澱A ；向沉澱A加2倍體積的0 4°C水，攪拌混合，向混合液中加入氯化鈣使其終濃度為0. 010%，用IM鹽酸或氫氧化鈉調節混合液的pH值為3. 5，在0 4°C條件下攪拌浸提15分鐘，離心分離得液相B和沉澱B ；合併液相A和液相B，得到液相C ；將液相C經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於_23°C保存；將所述凍存乾粉溶解於2倍體積的水中，85°C下加熱 30分鐘後離心，得到沉澱，經噴霧乾燥即得南極磷蝦蛋白質基料。
以上所述，僅為本發明較佳的具體實施方式
，但本發明的保護範圍並不局限於此， 任何熟悉本技術領域的技術人員在本發明披露的技術範圍內，根據本發明的技術方案及其發明構思加以等同替換或改變，都應涵蓋在本發明的保護範圍之內。
權利要求
1.一種低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於，依次包括如下步驟51、低溫自溶將捕撈的鮮活南極磷蝦浙幹後勻漿獲得勻漿液，用功率20 40瓦、波長 200 300納米、距離0. 5 1米的紫外線照射處理5 10分鐘，之後將所述勻漿液置於 0 4°C下自溶0. 1 1小時；52、蛋白提取向所述勻漿液中加入1 4倍體積的水，混勻，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第一次上層液相和第一次沉澱；53、蛋白製備將所述的第一次上層液相通過調節PH值至4.8 5. 8或者80 100°C 下加熱10 30分鐘，而後離心的方法得第二次上層液相和第二次沉澱，將所述第二次沉澱經噴霧乾燥即獲得南極磷蝦蛋白質基料。
2.如權利要求1所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於在步驟S2 中，向勻漿液加水的同時，加入終濃度為0. 01% 0. 03%的氯化鈣。
3.如權利要求2所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於在步驟S2中在離心分離之前調節所述勻漿液的pH值至2 3. 5。
4.如權利要求3所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於在步驟S3 中，向所述第二次沉澱中加入2 4倍體積的水，混勻，調節混合液pH值為4. 8 5. 8，離心分離得第三次上層液相和第三次沉澱，所述第三次沉澱經噴霧乾燥後即得南極磷蝦蛋白質基料。
5.如權利要求4所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於在步驟 S3中，將所述第一次上層液相凍存於-15至_25°C或經噴霧乾燥後得乾粉後凍存於-15 至-25°C保存；而後運至操作間後，將所述凍存的第一次上層液相融化或者將所述凍存的乾粉溶解於2 4倍體積的水中恢復為液態，完成步驟S3及後續步驟。
6.如權利要求1 5任一所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於步驟S2中，向所述第一次沉澱加入2 4倍體積的0 4°C水，攪拌混合，在0 4°C條件下攪拌浸提5 15分鐘，離心分離，得第四次上層液相和第四次沉澱；混合所述第一次液相和所述第四次液相作為步驟S3中使用的第一次液相。
7.如權利要求1 5任一所述的低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，其特徵在於調節所述勻漿的PH值選用1 6M的HCl或NaOH。
全文摘要
本發明公開一種低氟南極磷蝦蛋白基料的製備方法，步驟為1、低溫自溶將鮮活南極磷蝦勻漿，用紫外線照射處理後自溶。2、蛋白提取向勻漿液中加水，攪拌浸提，離心分離，得上層液相和沉澱。3、穩定蛋白將上層液凍存或乾燥後凍存。4、蛋白製備將凍存物恢復液態；通過調節pH值至4.8～5.8，或者80～100℃下加熱10～30分鐘後離心的方法，得產物沉澱，經噴霧乾燥獲得南極磷蝦蛋白質基料。本發明操作簡單，尤其適合捕撈船現場操作，能使蛋白質回收率達46％～51％，脂肪回收率達54％～60％。產品中蛋白質含量為70～78g/100g幹基，脂肪含量為25～31g/100g幹基，氟含量低於1.5ug/g幹基。
文檔編號A23J1/04GK102524510SQ20101058682
公開日2012年7月4日 申請日期2010年12月14日 優先權日2010年12月14日
發明者吳海濤, 朱蓓薇, 李冬梅, 李明, 楊靜峰, 陳躍文 申請人:大連工業大學