分清五淋丸的質量控制方法

2023-05-30 03:21:21 2

專利名稱：：分清五淋丸的質量控制方法
技術領域：
：本發明涉及一種中藥的質量控制方法，具體地本發明涉及一種分清五淋丸的質量控制方法。
背景技術：
：分清五淋丸處方來源於《中國藥典》2005年版一部393頁，其功能主治為清熱瀉火，利尿通淋。用於溼熱下注所致的淋症，症見小便黃赤、尿頻尿急、尿道灼熱澀痛。該分清五淋丸處方如下-木通80g車前子(鹽炒)40g黃芩80g茯苓40g豬苓40g黃柏40g大黃120g葸蓄40g瞿麥40g知母40g澤瀉40g梔子40g甘草20g滑石80g製備方法為-以上十四味，除滑石外，其餘關木通等十三味粉碎成細粉，過篩，混勻。用水泛丸，乾燥，將滑石粉碎成極細粉包衣，打光，乾燥，即得。質量控制方法為取本品，置顯微鏡下觀察不規則分枝狀團塊無色，遇水合氯酸液溶化；菌絲無色或淡棕色，直徑46um。菌絲粘結成團，大多無色；草酸朽方晶正八面體形，直徑3260wm。種皮內皮細胞表面觀類長方形，壁微波狀，以數個細胞為一組，略作鑲嵌狀排列。韌皮纖維淡黃色，梭形，壁厚，孔溝細。纖維束鮮黃色，周圍細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細胞的壁木化增厚。纖維束周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。草酸鈣簇晶大，直徑60140um。草酸鈣針晶成束或散在，長26110um。纖維束周圍薄壁細胞含草酸轉簇晶，形成晶纖維，含晶細胞縱向成行。葉表皮細胞平周壁有角質線紋，氣孔不等式，副衛細胞3個；上下表皮均可見柵欄組織。薄壁細胞類圓形，有橢圓形紋孔，集成紋孔群；內皮層細胞垂周壁波狀彎曲，較厚，木化，有細疏細孔溝。種皮石細胞黃色或淡棕色，多破碎，完整者長多角形、長方形或不規則形，壁厚，有大的圓形紋孔，胞腔棕紅色。該處方雖有該分清五淋丸的質量控制方法，但只限於顯微鑑別，該方法只能從原藥材的細胞水平上控制產品質量，不能從有效成分的水平上控制產品質量，這會影響產品的質量和療效，不利於藥品的標準化生產及提高生產效率，也不符合現代中藥發展的趨勢。
發明內容本發明的目的是提供一種對所述的分清五淋丸進行質量控制的方法，以保證藥品的安全性和有效性，提高產品質量，便於藥品的標準化、現代化生產。為了達到上述目的，本發明提供了一種分清五淋丸的質量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d、e五種檢測中的至少一種檢測a.大黃的定性檢測取本品，加乙醚超聲處理，濾過，濾液濃縮製成供試品溶液；另取大黃對照藥材，加乙醚提取製成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一薄層板上，以石油醚(3060°C)一甲酸乙酯一甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察。供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點。b.鹽酸小檗鹼的定性檢測取a項下提取本品後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇超聲處理，濾過,濾液蒸乾，殘渣加甲醇作為供試品溶液。另取鹽酸小檗鹼加甲醇製成對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，點於同一薄層板上，以乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點。C.梔子苷的定性檢測取梔子苷對照品，加甲醇製成對照品溶液；取b項下的供試品溶液作為供試品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，點於同一薄層板上，分別點於同一薄層板上，以乙酸乙脂一甲酸一水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。d.馬兜鈴酸的定性檢測取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製備成對照品溶液；取本品，加乙醇水浴回流提取，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各，分別點於同一薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-水-甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與馬兜鈴酸對照品色譜相應的位置上沒有相同顏色的斑點。e.大黃素的定量檢測精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇製成每溶液，即得。精密取本品，加5%鹽酸甲醇溶液，精密稱定總重，加熱回流2小時，放冷，用5%鹽酸甲醇溶液補失重量，搖勻濾過，即得。分別吸取對照品溶液與供試品溶液,注入液相色譜儀，測定，即得。優選的，本發明的一種分清五淋丸的質量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d、e五種檢測中的至少一種檢測a.大黃的定性檢測取本品，研細，稱取2g,加乙醚30rai，超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至lm:i作為供試品溶液；另取大黃對照藥材0.lg，加乙醚Lml浸漬2小時，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各23tx1，分別點於同一矽膠G薄層板.匕以石油醚〔3060r)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:L)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察。供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點；b.鹽酸小檗鹼的定性檢測取a項下提取本品後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇30ml超聲處理30分鐘，濾過,濾液蒸乾，殘渣加甲醇lml'作為供試品溶液；另取鹽酸小檗鹼加甲醇製成每lm]含lmg的溶液作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各12u1，點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水(5:5:1:1)為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點；C.梔子苷的定性檢測取梔子苷對照品，加甲醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液與b項下的供試7品溶液各23ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙脂一甲酸一水(10:0.5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105i:加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點；d.馬兜鈴酸的定性檢測-取本品，研細，稱取10g，加乙醇50ml，水浴回流提取lh，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製成0.2mg/ml的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照品溶液2nl、樣品溶液5W，分別點於同一薄層板上，以20:10:1:1比例的甲苯-醋酸乙酯_水-甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與馬兜鈴酸對照品色譜相應的位置上沒有相同顏色的斑點；e.大黃素的定量檢測用十八垸基矽垸鍵合矽膠為填充劑；以84:20比例的甲醇一0.1%磷酸混合溶液為流動相；檢測波長為254nm;流速1.Orol/min;柱溫室溫；理論板數按大黃素峰計算應不低於2000;精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇製成每lml含15yg的溶液，即得對照品溶液；取本品，粉碎成細粉，取粉末0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加5%鹽酸甲醇溶液50ml，精密稱定總重，加熱回流2小時，放冷，用5%鹽酸甲醇溶液補失重量，搖勻濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5yl，注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含大黃以大黃素(dA。05)計，不得少於0.50mg。本發明的分清五淋丸質量控制方法，便於藥品的標準化、現代化生產，有利於提高生產效率，保證了藥品的安全性和有效性。為了更好地理解本發明，現在結合具體實施方式對本發明進行詳細的說明。具體實施例方式下述實驗例和實施例進一步說明但不限於本發明實驗例1大黃的定性檢測方法研究1、本發明檢測方法a樣品溶液的製備中乙醚超聲提取時間的優選取分清五淋丸(按實施例1處方及方法製備)5g共5份，研細，用乙醚超聲提取不同時間，濾過，測定其中大黃素含量，結果見下表表l乙醚超聲時間優選實驗結果超聲時間(min)5101520大黃素含量(mg)63.395.295.695.7由表l可以看出，乙醚超聲10min就可以將其中的大黃素提取完全，所以本實驗樣品溶液的製備優選超聲時間為10min。2、本發明檢測方法a中展開劑用量配比的優選-取供試品溶液、同法製備的對照藥材溶液各5!U點於不同的矽膠G薄層板上，分別用石油醚(306(TC)—甲酸乙酯一甲酸配比為25:5:1、20:5:1、15:5:1、10:5:1、5:5:1的展開劑展開，取出，晾乾，置日光下下檢視，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表-表2展開劑用量配比優選實驗結果展開劑配比25:5:120:5:115:5:110:5:15:5:1展開效果很差差好較差出現拖尾從表2可以看出展開劑配比為15:5:l時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。3、本發明檢測方法a中樣品溶液點樣量的優選-取供試品溶液liU、2ii1、3wl、4ixl，對照品溶液4wl，點於同一矽膠G薄層板上，用石油醚(306CTC)—甲酸乙酯一甲酸配比為15:5:l的展開劑展開，取出，晾乾，置日光下下檢視，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表-表3樣品溶液點樣量優選實驗結果點樣量2y114w1效果供試品在相應對照品位置無斑點供試品在相應對照品位置斑點顯色效果好供試品在相應對照品位置斑點顯色效果好供試品在相應對照品位置斑點分離不好從表3可以看出供試品點樣量在23ul時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。4、陰性對照試驗取缺大黃的陰性樣品，照上述檢測方法a中供試品溶液製備方法製備陰性對照溶液，展開後在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的監測實驗專屬性強。9實驗例2.鹽酸小檗鹼的定性檢測方法研究1.本發明檢測方法b樣品溶液的製備中甲醇超聲提取時間的優選-取實驗例1中乙醚提取後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇30ml超聲處理不同時間，濾過，測定其中鹽酸小檗鹼含量，結果見下表-表4甲醇超聲時間優選實驗結果超聲時間(min)10203040鹽酸小檗鹼含量(mg)10.315.919.219.5由表4可以看出，乙醚超聲30min就可以將其中的鹽酸小檗鹼提取完全，所以本實驗優選超聲時間為30min。2.本發明檢測方法b中展開劑用量配比的優選取供試品溶液、同法製備的對照藥材溶液各2ul點於不同的矽膠G薄層板上，分別用乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水配比為3:5:1:1、4:5:1:1、5:5:1:1、6:5:1:1、7:5:1:1的展開劑展開，取出，晾乾，置外光燈(365rai)下檢視，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表表5展開劑用量配比優選實驗結果展開劑配比3:5:1:14:5:1:15:5:1:16:5:1:17:5:1:1展開效果主斑點難以分離差好較差出現拖尾從表5可以看出展開劑配比為5:5:1:1時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、等現象。3、本發明檢測方法b中樣品溶液點樣量的優選取供試品溶液lwl、2yl、3ul、4ul,對照品溶液2ul，點於同一矽膠G薄層板上，用乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水配比為5:5:1:1的展開劑展開，取出，晾乾，置紫外燈(365nm)下檢視，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表-表6樣品溶液點樣量優選實驗結果點樣量2u13u14ti1效果供試品在相應對照品位置顯供試品在相應對照品位置斑點顯供試品在相應對照品位置斑點顯供試品在相應對照品位置斑點分10tableseeoriginaldocumentpage11從表6可以看出供試品點樣量在l2iil時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。4、陰性對照試驗取缺黃柏的陰性樣品，照上述供試品溶液製備方法製備陰性對照溶液，展開後在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的監測實驗專屬性強。實驗例3.梔子苷的定性檢測試驗研究1、本發明檢測方法C中展開劑用量配比的優選取實驗例2項下供試品溶液、同法製備的對照藥材溶液各5p1點於不同的矽膠G薄層板上，分別用乙酸乙脂_甲酸_水配比為10:2:0.5、10:1.5:0.5、10:0.5:0.5、10:0.3:0.5的展開劑展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105。C加熱，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表表7展開劑用量配比優選實驗結果tableseeoriginaldocumentpage11從表7可以看出展開劑配比為10:0.5:0.5時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。2、本發明檢測方法C中樣品溶液點樣量的優選取實驗例2項下供試品溶液1y1、1、3u1、1，對照品溶液2y1，點於同一矽膠G薄層板上，用乙酸乙脂一甲酸一水配比為10:0.5:0.5的展開劑展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105'C加熱，觀察薄層板上供試品主斑點顯色的效果，結果見下表表8樣品溶液點樣量優選實驗結果tableseeoriginaldocumentpage11從表8可以看出供試品點樣量在23yl時，在薄層板上顯色效果好，適合試驗要求。3、陰性對照試驗取缺梔子的陰性樣品，照上述檢測方法c中供試品溶液製備方法製備陰性對照溶液，展開後在對照品溶液對應位置上沒有出現相應斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強。實驗例4馬兜鈴酸的的定性檢測木通是一味易混亂使用的藥材，主要表現為科屬品種混亂，有木通科木通，毛莨科木通及馬兜鈴科木通的多種不同科屬的品種。而馬兜鈴科木通含有可引起腎臟損害的馬兜鈴酸，故本實驗對木通中是否含有馬兜鈴酸進行了薄層定性檢測研究。1.本發明檢測方法馬兜鈴酸提取方法的優選取分清五淋丸(按實施例1處方及方法製備)10g共3份，研細，每份加入馬兜鈴酸2mg，用不同方法處理後，測定所提取出的馬兜鈴酸含量，結果見下表表9不同提取方法馬兜鈴酸的含量測定結果方法加乙醇50ml，水浴回流提取1h，濾過用醋酸溼潤後，加乙醇50ml超聲提取30min，濾過用醋酸溼潤後，加甲醇50ml冷浸過液濾過馬兜鈴酸的含量(mg)1.961.551.34由表l可以看出，乙醇加熱回流法就可以將其中的馬兜鈴酸提取完全，所以本實驗樣品溶液的製備優選加乙醇50ral，水浴回流提取lh，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。2、薄層色譜條件試驗採用O.6%CMC-Na矽膠G薄層板，薄層厚度O.3mm，105。C活化0.5h;取供試品溶液、同法製備的關木通對照藥材溶液各5y1點於不同的矽膠G薄層板上，分別用以下展開劑(1)氯仿-丙酮-甲酸(7:3:0.1)，紫外燈(365iM)下觀察；(2)甲苯-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(20:10:1:1)，紫外燈(365咖)下觀察；(3)甲苯-醋酸乙酯-水-甲酸(20:10:1:l)上層溶液，日光、紫外燈(365nm)下觀察，觀察各薄層板上供試品各斑點展開的效果，結果見下表tableseeoriginaldocumentpage12tableseeoriginaldocumentpage13從表2可以看出展開劑為甲苯-醋酸乙酯-甲醇-甲酸(20:10:1:1)時，供試品溶液展丌效果最好，沒有出現拖尾、主斑點分離不好等現象。3、馬兜鈴酸最低檢測限試驗取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製成O.199g，L—'的溶液，作為對照品溶液。精密吸取0.5、1、2、4、8、16W，分別點於同一矽膠G薄層板上，以上述條件展開，取出，晾乾，日光下檢視，2、4、8、16W顯亮黃色斑點，0.5，1W末檢出斑點；紫外光365nm下檢視，2、4、8、16W顯黃棕色螢光斑點，0.5、1W末檢出螢光斑點。結果表明以本法實驗，馬兜鈴酸最低檢測限為O.398Pg。4、對照試驗取分清五淋丸(按實施例1處方及方法製備)6g，將處方中的木通替換為等量的關木通照實施例1處方及方法製得陽性對照藥，十.述馬先鈴酸溶液作為對照品溶液，取上述分清五淋丸、陽性對照藥液各10W、對照品溶液2W照上述檢測方法，點樣於同一矽膠G薄層板上，展開後在對照品溶液對應位置上上述分清五淋丸沒有出現相應斑點，陽性對照藥出現相應斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強。實驗例5大黃素的定量檢測研究(1)穩定性試驗取供試品(按實施例1處方及方法製備)按含量測定下方法處理，分別於配製後O、2、4、6、8、24小時，依法測定，進樣體積5rt，結果表明，其在24小時內基本穩定，結果見下表表ll穩定性考察tableseeoriginaldocumentpage13(2)線性關係考察取對照品溶液(14.8Pg/ml)搖勻，分別精密吸取1、2.5、5、10、15、17.注入高效液相色譜儀，測定峰面積，結果見下表，並繪製標準曲線，表明大黃素在0.0148Pg-0.259^間呈線性關係，其回歸方程為Area=3689858.916*Amt+1443.748(r=0.9995)表12線性關係考察進樣量0.01480.0370.0740.1480.2220.25945924136248284679555680827825971811峰面積44889128129290540561165826823913823平均峰面積45406.5132188.5287609.5558422.5827324942817(3)精密度試驗精密吸取對照品溶液5W，重複進樣5次，求得相對標準偏差〈2%，結果見下表表13精密度試驗_峰面積312217311042308741310528297769RSD(%)1.91(4)重複性試驗按正文方法，取同一批號(批號05071101)樣品5份，對每份進行測定，求得相對標準偏差〈2%，結果見下表表14重複性試驗次數12345含量1.25381,25911.24611.24521.2440(mg/g)平均含量(mg/g)1.2496RSD(%)0.53(5)回收率試驗稱取樣品(批號05071101)0.2g，精密稱定，精密加入大黃素對照品溶液(25Pg/ml)10ml，精密加入15ml的5%鹽酸甲醇溶液，按正文供試品溶液的製備方法操作，測定其含量，並計算其回收率，測定結果見下表表15回收率試驗14試驗號稱取樣品量(mg)樣品中大黃素量(mg)加入大黃素量(mg)測出大黃素量(mg)回收率(%)平均回收率(％)RSD(%)10.20060.25070.250.5040100.2720.20040.25040.250.4889100.1730.20050.25050.250.4980嵐22100.020.3040.19920.2489O.250.436199.5750.19980.24970.250.477599.87從以上試驗結果可以看出，本發明所採用的含量測定方法其線性關係、穩定性、精密度、重現性、回收率均良好，能夠有效控制分清五淋丸中大黃素的含量。實施例l稱取下列重量份(kg)的原料藥:木通80車前子(鹽炒)40黃芩80茯苳40豬苓40黃柏40大黃120萵蓄40瞿麥40知母40澤瀉40梔子40甘草20滑石80以上十四味，除滑石外，其餘木通等十三味粉碎成細粉，過篩，混勻。用水泛丸，乾燥，將滑石粉碎成極細粉包衣，打光，乾燥，即得。實施例2稱取下列重量份(kg)的原料藥木通80車前子(鹽炒)40黃芩80茯苳40豬苓40黃柏40大黃120萵蓄40瞿麥40知母40澤瀉40梔子40甘草20滑石80以上十四味，除滑石外，其餘木通等十三味粉碎，過100目篩，混勻。用水泛丸，乾燥，將滑石粉碎，過200目篩，包衣，打光，乾燥，即得。實施例3-615按照實施例2相同的方法和用量，中試生產4批本分清五淋丸。實施例7.本發明的質量控制方法(1)取分清五淋丸，研細，稱取2g，加乙醚30ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至lml作為供試品溶液。另取大黃對照藥材O.lg，加乙醚lml浸漬2小時，取上清液作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各23ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以石油醚(3060°C)—甲酸乙酯一甲酸(15:5:1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察。供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點。(2)本實施例(1)項下的乙醚提取後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇30ml超聲處理30分鐘，濾過,濾液蒸乾，殘渣加甲醇lml作為供試品溶液。另取鹽酸小檗鹼加甲醇製成每lml含lmg的溶液作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各l2iil，點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水(5:5:1:1)為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點。(3)取梔子苷對照品，加甲醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液與本實施例(2)項下的供試品溶液各23ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙脂一甲酸一水(10:0.5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105。C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。(4)取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製備成0.200g.L—'對照品溶液；取分清五淋丸，精密稱取10g加乙醇水浴回流提取lh,濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各，分別點於同一薄層板上，以20:10:1:1比例的甲苯-醋酸乙酯-水-甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與馬兜鈴酸對照品色譜相應的位置上沒有相同顏色的斑點。含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統適用性試驗用十八垸基矽垸鍵合矽膠為填充劑；甲醇_0.1%磷酸(84:20)為流動相；檢測波長為254nm;流速1.Oml/min;柱溫室溫；理論板數按大黃素峰計算應不低於2000。對照品溶液的製備精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇製成每lml含15wg的溶液，即得。供試品溶液的製備取本品適量，粉碎成細粉，取粉末0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加5X鹽酸甲醇溶液50ml，精密稱定總重，加熱回流2小時，放冷，用5%鹽酸甲醇溶液補失重量，搖勻濾過，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5yl,注入液相色譜儀，測定，即得。本品每克含大黃以大黃素(C!5fU)5)計，不得少於0.50mg。本發明實施例1-6所製得的分清五淋丸進行了上述質量控制，證明實施例1-6所製得的丸劑完全符合本發明的質量控制標準。表16實施例1-6的大黃素含量測定結果實施例樣品含量(mg/g)10.6220.6530.6440.6150.6660.65另外，也以處方原料藥的比例和製備工藝分別製成了不含大黃、梔子和黃柏的陰性樣品，按照質量控制方法中供試樣品的製備方法製備了陰性對照溶液，在矽膠G薄層板上，所述的3種陰性樣品在相應位置上未出現斑點；且以處方原料藥的比例和製備工藝製成了以關木通代替木通的陽性對照藥，在矽膠G薄層板上，在相同位置上顯示和馬兜靈酸相同顏色的斑點，而分清五淋丸在該位置未見斑點；經反覆試驗，該質量控制方法專屬性、重複性好，因此做為分清五淋丸的質量控制定性檢測方法，對分清五淋丸進行質量控制。1權利要求1、一種分清五淋丸的質量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d、e五種檢測中的至少一種檢測a.大黃的定性檢測取本品，加乙醚超聲處理，濾過，濾液濃縮製成供試品溶液；另取大黃對照藥材，加乙醚提取製成對照藥材溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各，分別點於同一薄層板上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點；b.鹽酸小檗鹼的定性檢測取a項下提取本品後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇超聲處理，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇作為供試品溶液；另取鹽酸小檗鹼加甲醇製成對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，點於同一薄層板上，以乙酸乙脂-丙酮-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點；c.梔子苷的定性檢測取梔子苷對照品，加甲醇製成對照品溶液；取b項下的供試品溶液作為供試品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，點於同一薄層板上，分別點於同一薄層板上，以乙酸乙脂-甲酸-水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點；d.馬兜鈴酸的定性檢測取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製備成對照品溶液；取本品，加乙醇水浴回流提取，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇使溶解，作為供試品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各，分別點於同一薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯-水-甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與馬兜鈴酸對照品色譜相應的位置上沒有相同顏色的斑點；e.大黃素的定量檢測精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇製成對照品溶液，即得；精密取本品，加5％鹽酸甲醇溶液，精密稱定總重，加熱回流2小時，放冷，用5％鹽酸甲醇溶液補失重量，搖勻濾過，即得；分別吸取對照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，即得。2、如權利要求l所述的一種分清五淋丸的質量控制方法，該方法包括下列a、b、c、d、e五種檢測中的至少一種檢測a.大黃的定性檢測取本品，研細，稱取2g，加乙醚30ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液濃縮至lml作為供試品溶液；另取大黃對照藥材O.lg，加乙醚lml浸漬2小時，取上清液作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各23yl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以15:5:1比例的石油醚(306(TC)—甲酸乙酯一甲酸混合液的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應的位置上顯相同顏色的斑點；b.鹽酸小檗鹼的定性檢測取a項下提取本品後的藥渣，揮幹乙醚，加甲醇30ml超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加甲醇lml作為供試品溶液；另取鹽酸小檗鹼加甲醇製成每lml含lmg的溶液作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各l2y1，點於同一矽膠G薄層板上，以5:5:1:1比例的乙酸乙脂一丙酮一甲酸一水為展開劑，展開，取出，晾乾，置波長為365nm的紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上顯相同顏色的螢光斑點；C.梔子苷的定性檢測取梔子苷對照品，加甲醇製成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照品溶液與b項下的供試品溶液各23ul，分別點於同一矽膠G薄層板上，以10:0.5:0.5比例的乙酸乙脂一甲酸一水為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點；d.馬兜鈴酸的定性檢測取本品，研細，稱取10g，加乙醇50ml，水浴回流提取lh，濾過，濾液水浴蒸乾，殘渣加乙醇lml使溶解，作為供試品溶液；取馬兜鈴酸對照品，精密稱定，加乙醇製成0.2mg/ml的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法試驗，吸取上述對照品溶液2nl、樣品溶液5W，分別點於同一薄層板上，以20:10:1:1比例的甲苯-醋酸乙酯_水-甲酸上層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，日光下觀察；供試品色譜中，在與馬先鈴酸對照品色譜相應的位置上沒有相同顏色的斑點；e.大黃素的定量檢測用十八垸基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以84:20比例的甲醇一0.l%磷酸混合溶液為流動相;檢測波長為254nm;流速1.0ml/miri;柱溫室溫；理論板數按大黃素峰計算應不低於2000;精密稱取大黃素對照品適量，加甲醇製成每lml含15ug的溶液，即得對照品溶液取本品，粉碎成細粉，取粉末0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加5%鹽酸甲醇溶液50ml，精密稱定總重，加熱回流2小時，放冷，用5%鹽酸甲醇溶液補失重量，搖勻濾過，即得供試品溶液；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5yl,注入液相色譜儀，測定，即得；本品每克含大黃以大黃素(d孔。Os)計，不得少於0.50mg。全文摘要本發明公開了一種分清五淋丸的質量控制方法，增加了對大黃、鹽酸小檗鹼、梔子苷、馬兜鈴酸的薄層定性檢測，還增加了大黃素含量的定量檢測，保證了藥品的安全性和有效性，提高了產品質量，便於藥品的標準化生產。文檔編號A61K36/8964GK101491630SQ20081005663公開日2009年7月29日申請日期2008年1月23日優先權日2008年1月23日發明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物製藥有限公司