雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯，其製備方法及應用的製作方法

2023-06-24 00:36:26 2

專利名稱：雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯，其製備方法及應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種人工合成化合物及其製備方法和應用，特別涉及一種通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯，還涉及它們的製備方法，以及其在作為免疫抑制劑中應用。本發明屬於生物醫藥領域。
背景技術：
數千年前，人們就曾設想用正常的器官組織來置換病變的器官組織，但20世紀前的移植除角膜移植外，大部分是失敗的。直到20世紀40年代，英國外科醫生Mdewaar應用
家兔皮膚移植的實驗模型，初次論證了器官組織移植中出現的排斥反應本質上是一種免疫應答反應，從而奠定了移植免疫學的基礎。80年代以後，有效的免疫抑制劑如環抱素A及FK506等的發現及應用，使移植器官的存活時間進一步延長，但是由於臨床用藥普遍存在易降解，生物利用度低，脂溶性差，難以透過生物膜等缺點，所以亟待研究藥劑納米包材去改善這些不足之處。兩親性肽因其能自組裝成明確的納米纖維結構而受到廣泛重視，從納米技術到組織工程，在許多領域得到應用。而且由於兩親性肽化學結構的多樣性和易於合成，必將成為生物醫藥和生物材料領域新的研究熱點。發明人認識到，具有免疫抑制活性的尿毒素肽是從人體內分離出來的具有免疫抑制活性的內源性肽。從結構修飾增加肽的脂溶性的設計思想出發以提高其在體內的生物利用度。按照這種構想，發明人發現尿毒素肽與脂肪鏈偶聯確實具有免疫抑制活性。於是，發明人提出本發明。

發明內容
本發明所要解決的的第一個技術問題是，提供通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯(用化合物9a_f表示);Glu-Asp-Gly-Asp [OCH2 (CH2) nCH3] -OCH2 (CH2) nCH3 I通式I 中的 n = 6、8、10、12、14 或 16 ;其中，9a中 n = 6 ；9b 中 n = 8 ；9c 中 n = 10 ；9d 中 n = 12 ；9e 中 n = 14 ；9f 中 n=16 ；本發明所要解決的的第二個技術問題是，提供通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四妝酯的製備方法,如圖I所不；具體的，包括以下步驟(I)在(Boc)2O和NaOH存在下將甘氨酸轉化為N-叔丁氧羰基甘氨酸；(2)在(Boc) 20和NaOH存在下將天冬氨酸轉化為N-叔丁氧羰基天冬氨酸；(3)在二環己基羰二亞胺(DCC)、N-羥基苯並三氮唑(HOBt)、無水四氫呋喃(THF)存在下將N-叔丁氧羰基天冬氨酸與兩倍量的飽和脂肪醇縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基天冬氨酸酯；(4)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰保護基，生成雙飽和脂肪醇天冬氨酸酯；(5)在DCC、HOBt、無水THF存在下將N° -叔丁氧羰基甘氨酸與雙飽和脂肪醇天冬氨酸酯縮合，生成雙飽和脂肪醇N° -叔丁氧羰基甘氨酸天冬氨酸酯；(6)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N°-叔丁氧羰基甘氨酸天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰保護基，生成雙飽和脂肪醇甘氨醯天冬氨酸酯；(7)在無水THF中，在DCC和HOBt存在下將雙飽和脂肪醇甘氨醯天冬氨酸酯與N-叔丁氧羰基苄基天冬氨酸縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基天冬氨醯苄氧基穀氨醯天冬氨酸酯；(8)在氯化氫-乙酸乙酯存在下將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰基，生成雙飽和脂肪醇苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯；(9)在無水THF中，在DCC和HOBt存在下將雙飽和脂肪醇苄基天冬氨醯甘氨醯天·冬氨酸酯與N-叔丁氧羰基-苄基穀氨酸縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯；(10)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰基，生成雙飽和脂肪醇苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯；(11)在無水乙醇中，在Pd/C存在下將雙飽和脂肪醇苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯氫解，生成雙飽和脂肪醇穀氨醯天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯，即得。本發明解決的第三個技術問題是，通過實驗研究，評價了 6種雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯對小鼠脾淋巴細胞對絲裂原的增殖反應的抑制作用；本發明解決的第四個技術問題是，通過實驗研究，評價6種雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯對巨噬細胞吞噬活性的抑制作用；本發明解決的的第五個技術問題是，通過實驗研究，評價6種雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯的自主裝性能；本發明解決的的第六個技術問題是，通過實驗研究，評價6種雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四妝酯小鼠耳後心肌組織移植存活時間；本發明通過研究所述的飽和脂肪鏈醇對脾淋巴細胞絲裂原增殖反應的抑制作用、對巨噬細胞吞噬活性的抑制作用以及對小鼠耳後心肌移植後的存活時間，進一步表明了本發明的化合物具有優秀的免疫抑制作用。在製備免疫抑制劑藥物中具有廣泛的應用前景。本發明的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯的用途之一是在製備免疫抑制劑中的用途；本發明的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯的用途之二是在製備免疫抑制藥質體中的用途。本發明的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四妝酯的用途之二是在製備微乳或脂質體靶向藥物中的用途。


圖I為通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯的合成路線；
i)無水THF、DCC、H0Bt和NMM ；ii)4N氯化氫-乙酸乙酯溶液；iii)無水乙醇、Pd/C 和 H2 ; I-9a n = 6、l_9b n = 8、l_9c n = 10，l_9d n = 12，l_9e n = 14，l-9f n = 16 ；圖2為9b在水溶液中形成的納米球的代表性透射電鏡照片。縮略術語THF四氫呋喃HOBt N-羥基苯並三氮唑DCC 二環己基羰二亞胺DCU 二環己基脲 NMM N-甲基嗎啉TLC薄層色譜Boc叔丁氧羰基
具體實施例方式為了進一步闡述本發明，下面給出一系列實施例。這些實施例完全是例證性的，它們僅用來對本發明進行具體描述，不應當理解為對本發明的限制。實施例I 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (Ia)將I. Ig(4. 8mmol)Boc-Asp-OH溶於20mL無水THF,冰浴下向得到的溶液中加入
I.5g(l. 2mmol)N-羥基苯並三氮唑(HOBt)，並使其完全溶解。10分鐘後加入2. 3g(l. 2mmol)二環己基碳二亞胺(DCC)。得到反應液(I)，待用。冰浴下把I. 5g(IJmmol)CH3(CH2)6CH2OH懸浮於20mL無水THF中，然後加入ImlN-甲基嗎啉(NMM)，調pH 8_9。攪拌35分鐘，得到反應液(II)，待用。冰浴下把反應液(I)加入反應液(II)中，冰浴條件下攪拌lh，再室溫攪拌12h,TLC(乙酸乙酯/石油醚=2 I)顯示Boc-Lys (Z)消失。濾除二環己基脲(DCU),減壓除去THF。殘留物用50mL乙酸乙酯溶解。得到的溶液依次用飽和NaHCO3水溶液洗、飽和NaCl水溶液洗、5% KHSO4水溶液洗和飽和NaCl水溶液洗。有機相用無水Na2SO4乾燥、過濾、濾液減壓濃縮至幹，得到1.6g(73.0% )本實施例的目標化合物，為米黃色油狀化合物。ESI-MS(m/e) 458[M+H]+；實施例2 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (Ib)按照實施例I 的製備方法由 0. 6g(2. 5mmol) Boc-Asp 和 0. Ig (6. I mmol)CH3(CH2)8CH2OH製得I. 2g(90. 2% )本實施例的目標化合物，為無色油狀物。ESI_MS(m/e)514[M+H]+；實施例3 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3(lc)按照實施例I 的方法由 2. 3g (10. Ommol) Boc-Asp 和 4. Ig (24. Ommol)CH3(CH2)ltlCH2OH製得5. Og(87.7% )本實施例的目標化合物，為白色固體。ESI_MS(m/e)570[M+H]+；實施例4 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (Id)按照實施例I 的方法由 2. 3g (10. Ommol) Boc-Asp 和 5. Og (23. 3mmol)CH3(CH2)6CH2OH製得5. 2g(83. 0% )本實施例的目標化合物，為白色固體。ESI_MS(m/e)626[M+H]+；實施例5 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (Ie)
按照實施例I 的方法由 5. 3g(22. 9mmol) Boc-Asp 和 13. 30g(54. 90mmol)CH3(CH2)6CH2OH製得14. 30g(91. 70% )本實施例的目標化合物，為白色固體。ESI-MS(m/e)682[M+H]+；實施例6 製備 Boc-Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3(lf)按照實施例I 的方法由 5. 4g (23. lmmol) Boc-Asp 和 15. Og (55. Bmmol)CH3(CH2)16CH2OH製得15.6g(91.5% )本實施例的目標化合物，為白色固體。ESI_MS(m/e)738[M+H]+；實施例7 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (2a)將I. 60g (3. 50mmol) Boc-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 溶解在 25ml4mol/L 氯化氫-乙酸乙酯溶液中，室溫攪拌2小時，TLC (乙酸乙酯/石油醚=I 2)顯示原料點消失，減壓濃縮除去乙酸乙酯，殘留物反覆加少量乙醚進行減壓濃縮以除去氯化氫氣。最後加少量乙醚將殘留物研磨成I. Sg(95. 2% )本實施例的目標化合物，為白色固體粉末，直接用於下一步反應。ESI-MS(m/e) 394[M+H]+ ；實施例8 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (2b)按照實施例7 的方法，從 3. OOg (5. 85mmol) Boc-Asp [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2)8CH3製得2. 13g(80.99% )本實施例的目標化合物，為米黃色固體粉末。ESI-MS(m/e)450[M+H]+；實施例9 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 (2c)按照實施例7的方法,從I. 8g(5. Ommol)Boc-Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 製得 2. 3g (92. I % )本實施例的目標化合物，為米黃色固體粉末。ESI-MS (m/e) :506 [M+H]+，實施例10 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (2d)按照實施例7的方法,從0. 6g(l. Ommol) Boc-Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 製得 0. 5g (89. 2 % )本實施例的目標化合物，為米黃色固體粉末。ESI-MS(m/e) 562[M+H]+ ；實施例11 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (2e)按照實施例7的方法,從0. 6g(l. Ommol)Boc-Asp [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 製得 0. 6g (96. 7 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 618[M+H]+ ；實施例12 製備 HCl Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (2f)按照實施例7的方法,從0. 7g(l. Ommol)Boc-Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 製得 0. 5g (88. 6 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 674[M+H]+ ；實施例13 製備 Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (3a)按照實施例I 的方法由 I. 6g(9. 3mmol)Boc-Gly 和 5. Og(11. lmmol)HCl Asp
-OCH2(CH2)6CH3製得4. 9g(92. 2% )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :515[M+H]+，[a]g =-12.6 (c = 0.5, CH3OH);實施例14 製備 Boc-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (3b)按照實施例I 的方法由 I. 8g(10. Bmmol)Boc-Gly 和 5. Og(12. 7mmo1)HCl Asp
-OCH2(CH2)8CH3製得4. 8g(91.7% )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :570_]+，
-OCH2 (CH2) 10CH3 (3c)按照實施例I 的方法由 2. Og(ll. 5mmol)Boc-Gly 和 7. Og(13. 8mmol)HCl Asp
-OCH2 (CH2) 10CH3製得6. 3g (87. 8 % )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :627[M+H]+，[a]g =-12.5 (c = 0.5, CH3OH);實施例16 製備 Boc-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (3d)按照實施例I 的方法由 I. 3g(7. 4mmol)Boc-Gly 和 5. Og(8. 9mmol)HCl Asp
-OCH2 (CH2)12CH3製得5. Ig (98.0% )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :684[M+H]+，[a]g = -8.9 (c = 0.5, CH3OH);
實施例17 製備 Boc-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (3e)按照實施例I 的方法由 I. 5g(4. 4mmoI)Boc-Glu(OBzl)和 3. Og(4. lmmol)HCl AsP [OCH2 (CH2) 14CH] -OCH2 (CH2) 14CH3製得2. Og (52. 6 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS (m/e) 902[M+H]+,[a]D = -2.7 (c = 0.5, CH3OH);實施例18 製備 Boc-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (3f)按照實施例I 的方法由 0. 9g (5. 6mmol)Boc_Gly 和 4. 5g (6. Bmmol) HCl *Asp [OCH2 (CH2) 16CH]-OCH2 (CH2) 16CH3製得3. 6g(93. 4% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS (m/e) :838 [M+H] +, [a] = -8.3 (c = 0.5, CH3OH);實施例19 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (4a)按照實施例7的方法,從4. Og (4. 7mmol)Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 製得 2. 2g (59. 4 % )本實施例的目標化合物，為米黃色液體。ESI-MS(m/e) 746[M+H]+,[a]^7 =22.1 (c = 0.5, CH3OH);實施例20 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (4b)按照實施例7的方法,從3. 82g(8. 5mmol)Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 製得 3. 8g (88. 4 % )本實施例的目標化合物，為米黃色液體。ESI-MS (m/e) :471 [M+H]+, [a] = 9.5 (c = 0.5, CH3OH);實施例21 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 (4c)按照實施例7的方法，從7. Og (II. lmmol)Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 製得 5. 8g (93. 5 % )本實施例的目標化合物，為米黃色液體。ESI-MS(m/e) 527[M+H]+,[a]^7 = 2.4 (c = 0.5, CH3OH);實施例22 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (4d)按照實施例7的方法,從5. Og (7. 3mmol) Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 製得 4. 5g (99. 6 % )本實施例的目標化合物，為米黃色液體。ESI-MS(m/e) 583[M+H]+,[a]^7 = 2.9 (c = 0.5, CH3OH);實施例23 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (4e)按照實施例7的法，從3. 8g (5. 7mmol)Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 製得 2. 8g (75. 0 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 583[M+H]+,[a]^7 = 2.6 (c = 0.5, CH3OH);
實施例24 製備 HCl Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (4f)按照實施例7的方法,從4. Ig (5. 6mmol)Boc-Gly-Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 製得 3. 5g (96. 2 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 583[M+H]+,[a]^7 = 4.5 (c = 0.5, CH3OH);實施例25製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (5a)按照實施例I 的方法由 2. 7g (8. 3mmol) Boc-Asp (OBzl)和 4. 50g (9. 97mmol) HCl *GIy-Asp [OCH2 (CH2) 6CH] -OCH2 (CH2) 6CH3製得5. 5g (93. 2% )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS(m/e) :719[M+H]+，[a]了 = -7.4 (c = 0.5, CH3OH);實施例26 製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (5b)按照實施例I 的方法由 2. 5g (7. 7mmo1) Boc-Asp (OBzl)和 4. 7g (9. 2mmol) HCl .Gly-Asp [OCH2 (CH2) 8CH] -OCH2 (CH2) 8CH3製得5. 6g (96. 2% )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :777[M+H]+，[a]g = -8.5 (c = 0.5, CH3OH);實施例27製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 (5c)按照實施例I 的方法由 2. 8g (8. Bmmol) Boc-Asp (OBzl)和 5. 80g (10. 30mmol) HCl Gly-Asp [OCH2 (CH2) 10CH] -OCH2 (CH2) 10CH3 製得 5. 4g (82. I % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) :832[M+H]+，[a]g = -7.5 (c = 0.5, CH3OH);實施例28製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (5d)按照實施例I 的方法由 2. Og (6. lmmol) Boc-Asp (OBzl)和 4. 5g (7. 3mmol) HCl .Gly-Asp [OCH2 (CH2) 12CH]-OCH2 (CH2) 12CH3製得4. 8g(89. 2% )本實施例的目標化合物，為白色固體。ESI-MS(m/e) :889[M+H]+，[a]g = -7.3 (c = 0.5, CH3OH);實施例29製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (5e)按照實施例I 的方法由 I. 4g (4. 4mmoI) Boc-Asp (OBzl)和 3. 60g (5. 30mmol) HCl *GIy-Asp [OCH2 (CH2) 14CH] -OCH2 (CH2) 14CH3 製得 4. 8g (87. 3 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS (m/e) :945[M+H]+，[a]g = -5.7 (c = 0.5, CH3OH);實施例30製備Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (5f)按照實施例I 的方法由 I. 5g (4. 5mmol) Boc-Asp (OBzl)和 3. 70g (5. 50mmoI) HCl *GIy-Asp [OCH2 (CH2) 16CH] -OCH2 (CH2) 16CH3 製得 3. 5g (77. 7 % )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 1001 [M+H]+,[a]=-3.7 (c = 0.5, CH3OH);實施例31製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 (6a)按照實施例7的方法,從5. 5g(7. lmmol)Boc-Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 製得 4. Og (80. 0 % )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) 620[M+H]+,[a]^7 = 1.8 (c = 0.5,CH3OH);實施例32製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)8CH3]-OCH2 (CH2)8CH3 (6b)按照實施例7的方法,從5. 5g(7. 6mmol)Boc-Asp (OBzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)8CH3]-OCH2 (CH2)8CH3 製得 4. 5g (90.0 % )本實施例的目標化合物，為淡黃色液體。ESI-MS (m/e) :677 [M+H] +，[a] 2D7 = 4.7 (c = 0.5,CH3OH);
實施例33製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)10CH3]-OCH2 (CH2)10CH3 (6c)按照實施例7的方法,從6. Og (7. 2mmol)Boc-Asp (OBzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)10CH3]-OCH2 (CH2)10CH3 製得 5. Og(90. 9% )本實施例的目標化合物，為淡黃色固體。ESI-MS (m/e) :732 [M+H] +，[a] 2J = 8.0 (c = 0.5,CH3OH);實施例34製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)12CH3]-OCH2 (CH2) 12CH3(6d)按照實施例7的方法,從5. 4g(6. lmmol)Boc-Asp (OBzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)12CH3]-OCH2 (CH2)12CH3 製得 5. Og (78. 4% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 789[M+H]+,[a]^7 = 4.8 (c = 0.5,CH3OH);實施例35製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)14CH3]-OCH2 (CH2) 14CH3(6e)按照實施例7的方法，從4. Og (4. 2mmol)Boc-Asp (OBzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)14CH3]-OCH2 (CH2)14CH3 製得 3. 2g(86. 4% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 845[M+H]+,[a]^7 = 7.4 (c = 0.5,CH3OH);實施例36製備HCl Asp (OBzl)-Gly-Asp-[OCH2 (CH2)16CH3]-OCH2 (CH2) 16CH3(6f)按照實施例7的方法,從3. 5g(3. 5mmol)Boc-Asp (OBzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)16CH3]-OCH2 (CH2)16CH3 製得 3. Ig(93. 9% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI-MS(m/e) 901 [M+H]+,[a]= 6.8 (c = 0.5,CH3OH);實施例37製備 Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (7a)按照Boc-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. 9g (5. 8mmol)Boc-Glu (OBzl)和 4. 5g(6. 9mmol)HCl Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3製得，所得化合物經柱層析純化得800mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=3 1，收率為 14. 5%。ESI-MS(m/e) 962[M+Na]+ ；mp 34-36°C [a]= -10.8 (c = 0.5, CH3OH).1H-Nmr(Cdci3JOOmHz) 8 /ppm = 7. 59 (s, m), 7. 51(d, J = 9Hz, IH), 7. 35(s,9H) ,7. 11 (m,1H)，5. 58 (s, 1H)，5. 12 (s，4H)，4. 84 (m, 5H)，4. 24 (m, 1H)，4. 04 (m, 6H)，3. 85 (m, 2H)，3. 09 (m,1H),2. 85(m,3H),2. 51(m,2H),2. 18 (m, 1H) ,2. 00 (m, 1H), I. 60-1. 18(m,46H) ,0. 88 (t, J =
6.6Hz,6H).實施例38
製備Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (7b)按照Boc-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. 9g (5. 8mmol)Boc-Glu (OBzl)和 5. Og (7. Ommol) HCl Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3製得，所得化合物經柱層析純化得600mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=3 1，收率為 8.9 %。ESI-MS(m/e) : 1017[M+H]+;mp 57-58 °C . [a]= -55.9 (c = 0.5, CH3OH).1H-匪R (CDCl3, 300MHz) 8 /ppm = 7. 54 (s，1H)，7. 40 (m，9H)，7. 10 (d，J = 8. IHz, 1H),
5.49 (s, 1H) ,5. 16 (d, J = 5. lHz，4H)，4. 84(m，2H)，4. 11 (m，5H)，3. 85(m，2H)，3. 14 (m,1H) ,2. 87(m，3H)，2. 54 (m, 2H), 2. 18 (m, 1H)，2. 02 (m, 1H)，I. 86 (s, 1H)，I. 62-1. 16(m，47H)，
0.89 (t, J = 6. 9Hz,6H).
實施例39製備Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 (7c)按照Boc-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. 7g (5. 4mmol)Boc-Glu (OBzl)和 5. Og (6. 5mmol)HCl Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3製得，所得化合物經柱層析純化得900mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=3 1，收率為 8. 9 %。ESI-MS (m/e) 1074 [M+H] + ；mp 54-55 V [a] = -9.6 (c = 0.5, CH3OH).1H-匪R (CDCl3, 300MHz) 8 /ppm = 7. 99 (s，1H)，7. 57 (m，1H)，7. 28 (m，9H)，7. 07 (s，1H)，5. 78 (s，1H) ,5. 29 (s，1H) ,5. 12 (d，J = 3. 9Hz，4H)，4. 84 (m, 1H)，4. 68 (s，1H)，4. 24 (s，1H)，4. 08 (m, 4H)，3. 88 (m, 2H)，2. 95 (m, 4H)，2. 50 (m, 2H)，2. 15 (m, 1H)，2. 11 (m, 1H)，
1.59-1. 09(m,51H) ,0. 88 (t, J = 6. 9Hz,6H).實施例40製備Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3(7d)按照Boc-Asp (OCH2 (CH2)6CH3)-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. 5g (4. 5mmol)Boc-Glu (OBzl)和 4. 5g(5. 5mmol)HCl Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3製得，所得化合物經柱層析純化得800mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=3 1，收率為 8. 9%0 ESI-MS(m/e) 1130[M+H]+ ；mp 63-65°C [a]= -20.6 (c = 0.5, CH3OH).1H-匪R (CDCl3, 300MHz) 8 /ppm = 7. 58 (s，1H)，7. 47 (d，J = 8. 7Hz，1H)，7. 35 (s，9H)，
7.18 (d，J = 7. 8Hz, 1H) ,5. 58 (s，1H) ,5. 14 (d, J = 5. 4Hz，4H)，5. 12 (m, 1H) ,4. 12 (m,5H) ,3. 98(m，2H)，3. 11 (m, 1H)，2. 85 (m, 3H)，2. 54(m，2H) ,2. 14 (m，1H) ,2. 05 (m, 1H)，I. 60-1. 16(m,59H) ,0. 89 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例41製備Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (7e)按照Boc-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. Ig (3. 3mmol)Boc-Glu (OBzl)和 3. 5g(3. 9mmol)HCl Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3製得，所得化合物經柱層析純化得1200mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=3 1，收率為 31.6%。ESI-MS(m/e) 1187[M+H]+ ；mp 60-60°C . [a]=-10.8 (c = 0.5, CH3OH).1H-匪R (CDCl3, 300MHz) 8 /ppm = 7. 59 (s，1H)，7. 50 (d，J = 8. 4Hz，1H)，7. 35 (s，9H)，
7.18 (d, J = 8. 1Hz, 1H) ,5. 56 (s, 1H), 5. I (d, J = 4. 5Hz，4H)，4. I (m，5H)，3. 85 (m，2H)，
3.17 (m, 1H)，2. 82 (m, 3H)，2. 53 (m, 2H) ,2.15 (m, 1H)，2. 03 (m, 1H)，I. 60-1. 12 (m, 65H)，8. 89 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例42製備Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp-[OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (7f)按照Boc-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3 的製備方法由 I. 4g (3. 9mmol)Boc-His(Boc)和 3. 9g(4. lmmol)HCl Gly-Glu (OBzl) -Asp- [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3製得，所得化合物經柱層析純化得700mg無色固體，純化條件石油醚丙酮=2 1，收率為 14.2%。ESI-MS(m/e) 1253[M+H]+ ；mp 59-60 °C . [a]= -19.4 (c = 0.5, CH3OH).1H-匪R (CDCl3, 300MHz) 8 /ppm = 8. 16 (s，1H)，7. 85 (s，1H)，7. 35 (m，4H)，7. 18 (m，2H)，7. 01 (s, 1H)，5. 75 (s, 1H)，5. 11 (s，2H)，4. 82 (m, 1H) ,4. 51 (m, 1H)，4. 42 (m, 1H)，4. 08 (m, 4H)，3. 96 (m, 2H)，3. 72 (m, 1H)，3. 48 (m, 1H)，3. 17 (m, 1H)，3. 00 (m, 2H)，2. 80 (m, 1H)，2. 50 (m, 2H)，2. 04 (m, 3H)，I. 91-1. 19(m，80H)，0. 87 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例43製備HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 (9a)按照HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 200mg (0. 2mmol) Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 製得 HCl Glu (OBzl) -Asp (0Bzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)6CH3]-OCH2 (CH2)6CH3,將所得化合物置於 IOOml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C (約20% )、通H2(0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得120mg(86. 9% )本實施例的目標化合物，為褐色固體。ESI_MS(m/e) 687[M+Na]+ ；mp 94-96 °C [a] = -34.8 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR (DMS0_d6，300MHz)8 /ppm = 9. 15 (m, 1H) ,8. 31 (m, 2H)，4. 46 (m, 2H)，4. 00 (m, 5H)，3. 77 (m, 2H)，3. 68 (m, 2H)，
2.82-2. 62 (m, 6H)，2. 36 (m, 2H)，2. 09 (m, 1H)，I. 94 (m, 1H)，I. 86 (m, 1H)，I. 54 (m, 5H)，
1.24-1. 17(m，25H)，0. 85 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例44製備HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 (9b)按照HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 2OOmg (0. 2mmol) Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 8CH3] -OCH2 (CH2) 8CH3 製得 HCl Glu (OBzl) -Asp (0Bzl)-Gly-Asp [OCH2 (CH2)8CH3]-OCH2 (CH2)8CH3,將所得化合物置於 IOOml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C (約20% )、通H2(0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得lllmg(79. 2% )本實施例的目標化合物，為褐色固體。ESI-MS(m/e) 716[M+H]+ ；mp 170-171 °C . [a]=-3.8 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR(DMS0_d6，300MHz)8 /ppm = 8. 89 (m, 1H)，8. 26 (m, 2H)，4. 62 (m, 2H) ,4. 01 (m, 4H)，3. 79 (m, 2H)，3. 65 (m, 1H)，
2.81-2. 58 (m, 4H)，2. 39 (m, 2H)，I. 98 (m, 2H)，I. 53 (m, 4H)，I. 24-1. 20 (m, 29H) ,0. 85 (t, J =5. 7Hz,6H).實施例45製備HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 (9c)按照HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3]-OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 200mg (0. lmmol)Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3 製得 HCl Glu (OBzl) -Asp(OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 10CH3] -OCH2 (CH2) 10CH3,將所得化合物置於 100ml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C(約20% )、通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得122mg(85. 3% )本實施例的目標化合物，為褐色固體。ESI_MS(m/e) 772[M+H]+ ；mp 172-173 °C . [a] = -4.6 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR (DMS0-d6,300MHz)8 /ppm = 8. 91 (m, 1H)，8. 40 (m, 2H)，8. 28 (m, 2H)，4. 55 (m, 2H)，4. 02 (m, 5H)，3. 79 (m, 2H)，
3.66 (m, 1H)，2. 81-2. 61 (m, 4H)，2. 39 (m, 2H)，I. 98 (m, 2H)，I. 54 (m, 4H)，I. 24-1. 16 (m, 36H)，
0.85 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例46製備HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 (9d)按照HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3]-OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 200mg (0. lmmol)Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3 製得 HCl Glu (OBzl) -Asp(OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 12CH3] -OCH2 (CH2) 12CH3，將所得化合物置於 100ml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C(約20% )、通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得123mg(83. 6% )本實施例的目標化合物，為褐色固體。ESI_MS(m/e) 828[M+H]+ ；mp 169-172 °C . [a] = -2.6 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR (DMS0-d6,30·0MHz)8 /ppm = 8. 82 (m, 1H)，8. 28 (m, 2H)，4. 63 (m, 2H)，4. 03 (m, 4H)，3. 79 (m, 2H)，3. 66 (m, 1H)，2. 81-2. 59 (m, 4H)，2. 39 (m, 2H)，I. 95 (m, 2H)，I. 54 (m, 4H)，I. 24-1. 15 (m, 45H) ,0. 85 (t, J =5. 7Hz,6H).實施例47製備 HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3 (9e)按照HCl Asp [OCH2 (CH2) 6CH3] -OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 200mg (0. 2mmol) Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 14CH3 [-OCH2 (CH2) 14CH3 製得 HCl .Glu (OBzl) -Asp (OBzI) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 14CH3] -OCH2 (CH2) 14CH3，將所得化合物置於 100ml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C(約20% )、通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得133mg(85. 2% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI_MS(m/e)828 [M+H]+ ；mp 160-161 °C [a] = -5.2 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR(DMS0_d6，300MHz) 8 /ppm = 8. 25 (m, 1H)，4. 58 (m, 2H)，4. 00 (m, 4H)，3. 82 (m, 2H)，3. 66 (m, 1H)，2. 81-2. 57 (m, 5H)，
2.39 (m, 3H)，I. 97 (m, 2H)，I. 54 (m, 8H)，I. 24-1. 15(m，53H)，0. 85 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例48製備HCl Glu-Asp-Gly-Asp- [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 (9f)按照HCl Asp (OCH2 (CH2) 6CH3) -OCH2 (CH2) 6CH3 的製備方法，從 200mg (0. 2mmol) Boc-Glu (OBzl) -Asp (OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3 製得 HCl Glu (OBzl) -Asp(OBzl) -Gly-Asp [OCH2 (CH2) 16CH3] -OCH2 (CH2) 16CH3，將所得化合物置於 100ml 茄形瓶中、用乙醇溶解、加入適量Pd/C(約20% )、通H2 (0. 02Mba)，室溫攪拌至原料點消失。濾除Pd/C、濾液減壓濃縮至幹。製得125mg(82. 7% )本實施例的目標化合物，為無色固體。ESI_MS(m/e) 940 [M+Na]+ ；mp 179-181。。
[a] = -7.0 (c = 0.5, CH3OH). 1H-NMR (DMS0-d6, 300MHz)8 /ppm = 8. 34 (m, 1H)，8. 00 (m, 1H)，4. 69 (m, 1H) ,4. 61 (m, 1H)，4. 05 (m, 4H)，3. 86 (m, 2H)，
3.66 (m, 1H) ,3.11 (m, 2H)，2. 85 (m, 4H)，2. 45 (m, 3H)，2. 02 (m, 3H)，I. 97 (m, 3H)，I. 76 (m, 2H)，
1.58 (m, 4H)，I. 42-1. 13(m，54H)，0. 85 (t, J = 5. 7Hz,6H).實施例49雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯對小鼠脾淋巴細胞絲裂原增殖的抑制作用
脫頸處死小鼠，無菌取脾，用200目鋼網和注射器芯研磨，用PBS液洗兩次，1500轉/分條件下離心10分鐘，計數後用完全RPMI-1640培養液配成脾細胞5 X IO6AiL的細胞懸液，加100 u L細胞懸液於96孔培養板中(每空含5 X IO5個細胞)。每孔加20 ii L刀豆蛋白(ConA終濃度為5 u g/mL)，該96孔細胞培養板置於體積分數為0. 05的CO2飽和溼度的培養箱內37°C培養4h。4h後按預設的濃度梯度加入待測、經滅菌處理的樣品(1X10_4，8 X 1(T5，5 X 1(T5，2 X 1(T5，I X 1(T5，8 X 10' 5 X 10' I X 1(T6)，每個濃度 3 個復孔，對照組加入等體積的溶解樣品的溶媒。同時設不含化合物對照孔和只含同量培養液無ConA的細胞空白孔。各個孔均重複3次(n = 3)。培養48h後用MTT法檢測化合物對脾淋巴細胞的抑制作用。按照公式「抑制率=(D對照-D含藥)/D對照X 100%」計算不同濃度的化合物對脾淋巴細胞增殖的抑制作用，根據細胞相對生存率和化合物的濃度繪製細胞生長曲線，利用該生長曲線求得半數抑制率(dxIC5ci)。結果列入表1，結果表明本發明的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯對小鼠脾淋巴細胞增殖有明確的抑制作用。表19a_f小鼠脾淋巴細胞絲裂原增殖的抑制作用
權利要求
1.通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯Glu-Asp-Gly-Asp [OCH2 (CH2) nCH3] -OCH2 (CH2) nCH3 I通式 I 中的 n = 6、8、10、12、14 或 16。
2.一種製備權利要求I的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯的方法，其特徵在於，包括以下步驟 (1)在(Boc)20和NaOH存在下將甘氨酸轉化為N-叔丁氧羰基甘氨酸； (2)在(Boc)20和NaOH存在下將天冬氨酸轉化為N-叔丁氧羰基天冬氨酸； (3)在二環己基羰二亞胺、N-羥基苯並三氮唑、無水四氫呋喃存在下將N-叔丁氧羰基天冬氨酸與兩倍量的飽和脂肪醇縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基天冬氨酸酯； (4)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰保護基，生成雙飽和脂肪醇天冬氨酸酯； (5)在二環己基羰二亞胺、N-羥基苯並三氮唑、無水四氫呋喃存在下將N°-叔丁氧羰基甘氨酸與雙飽和脂肪醇天冬氨酸酯縮合，生成雙飽和脂肪醇N°-叔丁氧羰基甘氨酸天冬氨酸酯； (6)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N°-叔丁氧羰基甘氨酸天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰保護基，生成雙飽和脂肪醇甘氨醯天冬氨酸酯； (7)在無水四氫呋喃中，在二環己基羰二亞胺和N-羥基苯並三氮唑存在下將雙飽和脂肪醇甘氨醯天冬氨酸酯與N-叔丁氧羰基苄基天冬氨酸縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基天冬氨醯苄氧基穀氨醯天冬氨酸酯； (8)在氯化氫-乙酸乙酯存在下將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰基，生成雙飽和脂肪醇苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯； (9)在無水四氫呋喃中，在二環己基羰二亞胺和N-羥基苯並三氮唑存在下將雙飽和脂肪醇苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯與N-叔丁氧羰基-苄基穀氨酸縮合，生成雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯； (10)在氯化氫-乙酸乙酯中將雙飽和脂肪醇N-叔丁氧羰基苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯脫除叔丁氧羰基，生成雙飽和脂肪醇苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯； (11)在無水乙醇中，在Pd/C存在下將雙飽和脂肪醇苄基穀氨醯苄基天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯氫解，生成雙飽和脂肪醇穀氨醯天冬氨醯甘氨醯天冬氨酸酯，即得。
3.權利要求I所述的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯在製備免疫抑制劑中的用途。
4.權利要求I所述的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯在製備免疫抑制藥質體中的用途。
5.權利要求I所述的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯在製備微乳或脂質體革巴向藥物中的用途。
全文摘要
本發明涉及通式I的6種具有免疫抑制活性的雙飽和脂肪鏈醇Glu-Asp-Gly-Asp四肽酯，在飽和脂肪鏈醇中n＝6、8、10、12、14或16，本發明還涉及它們的製備方法，本發明通過研究所述的飽和脂肪鏈醇對脾淋巴細胞絲裂原增殖反應的抑制作用、對巨噬細胞吞噬活性的抑制作用以及對小鼠耳後心肌移植後的存活時間，進一步表明了本發明的化合物具有優秀的免疫抑制作用。在製備免疫抑制藥物中具有廣泛的應用前景。Glu-Asp-Gly-Asp[OCH2(CH2)nCH3]-OCH2(CH2)nCH3I。
文檔編號A61K9/127GK102796169SQ201110141899
公開日2012年11月28日 申請日期2011年5月27日 優先權日2011年5月27日
發明者彭師奇, 趙明, 李婕 申請人:首都醫科大學