一種慶大黴素Cla的製備方法

2023-05-26 13:44:06 2

專利名稱：一種慶大黴素Cla的製備方法
技術領域：
本發明涉及藥品原料的製備方法，具體地說是屬於慶大黴素C1a的提取精製方法。
慶大黴素是由絳紅小單孢菌(Micromonospora purpurea NRRL 2953)產生的一族多組分的氨基糖甙類抗生素。《中華人民共和國藥典》2000年版規定慶大黴素C組分包括C1、C1a、C2a、C2，其中慶大黴素C1a可作為合成抗菌藥物依替米星的前體藥物。慶大黴素C1a最常採用的製備方法是從小諾黴素的發酵液中分離得到。該方法通常包括有發酵、過濾、脫色濃縮、樹脂吸附、洗脫、解吸、濃縮、噴霧乾燥工序，即將所得的小諾黴素發酵液經過濾得到濾液，濾液再經脫色濃縮，所得小諾黴素濃縮液用大孔樹脂吸附，用三種不同比例的乙醇-氨水進行洗脫、解析，解析液經濃縮、噴霧乾燥得慶大黴素C1a。
這種方法存在許多不足之處，例如，生產工藝周期長(480小時/批)；生產工藝複雜，樹脂吸附後需用混合溶劑經過三次洗脫、解析才能得到慶大黴素C1a；混合洗脫劑和解析劑中的乙醇採用蒸餾塔回收，設備複雜，需耗費大量蒸汽；所用大孔樹脂吸附量小；產品含量低(一般為85％-90％)；原材料消耗大，生產成本高。
本發明的目的在於提供一種製備慶大黴素C1a的新方法，該方法生產效率高、成本低、產品質量好。
本發明的目的是這樣實現的本發明的製備方法包括以下步驟a、將慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮；b、將慶大黴素濃縮液加水稀釋，調PH值到6.0-7.5，經弱酸性陽離子交換樹脂吸附後，水洗；c、將吸附後的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫，銨鹽溶液PH值為7.0-9.5，洗脫液納濾回收；d、用1.5-3.5M氨水對洗脫後的飽和樹脂進行解析；e、對解析液進行濃縮、脫色、噴霧乾燥。
其具體方法為將慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮製備成慶大黴素濃縮液，其過濾、脫色、濃縮的具體方法與現有技術中製備慶大黴素時的過濾、脫色、濃縮方法相同；慶大黴素濃縮液用水稀釋，以既可保證上樣速度不至於過慢，又避免了因濃度過高在上樣過程中有結晶析出，造成樹脂吸附不均。稀釋後的慶大黴素液，調pH值到6.0-7.5；慶大黴素稀釋液經弱酸性陽離子樹脂吸附後，用水洗，除去部分雜質。弱酸性陽離子樹脂可選用HD-2弱酸性陽離子交換樹脂(上海華東理工大學華震科技貿易有限公司)，也可選用D151、D152、110等弱酸性陽離子交換樹脂(南開大學化工廠)。但最好選用HD-2弱酸性陽離子交換樹脂。
樹脂吸附的流速可依據慶大黴素稀釋液的濃度大小來控制，當慶大黴素稀釋液濃度高時，選用低流速，反之，選用高流速。這樣既可使樹脂充分吸附慶大黴素單位，又可提高慶大黴素C1a的品質。當慶大黴素稀釋液的濃度在3-5.5萬單位/毫升時，樹脂吸附的流速可控制在1/80/分-1/150/分。
將吸附後的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫。銨鹽溶液PH值為7.0-9.5，當銨鹽溶液PH值過低時，可用氨水調整，當銨鹽溶液PH值過高時，可用稀鹽酸調整。銨鹽濃度優選範圍為0.4M-0.7M。銨鹽溶液可選用氯化銨溶液(為市售產品)，也可選用硫酸銨(為市售產品)溶液。但最好選用氯化銨。洗脫液採用納濾處理，納濾處理得到的濃縮液可用於提取慶大黴素，納濾處理得到的透過液可直接套用下批洗脫工序。
對洗脫後的飽和樹脂用1.5-3.5M氨水進行解析；氨水優選濃度為2.0-3.0M。解析液經過濃縮、脫色、噴霧乾燥，製成半成品，再經檢驗、包裝即為慶大黴素C1a成品。該步驟中的脫色、濃縮、噴霧乾燥方法與現有技術中製備慶大黴素時的方法相同，如解析液可用薄膜濃縮至25萬單位/毫升以上，所得濃縮液用活性炭脫色(按0.5公斤/百億單位加入活性炭)，脫色液噴霧乾燥，得慶大黴素C1a。
該方法是按照慶大黴素各組分與樹脂的吸附力不同，先用銨鹽洗脫劑將部分雜質及C1、C2a、C2和約50％的C1a組分洗脫下來，樹脂上剩餘的C1a組分，用與C1a竟合力較強的氨水將慶大黴素C1a組分解析下來。
本發明方法的重要創新之處在於採用慶大黴素發酵液為原料，並將脫色後的慶大黴素濃縮液在進行樹脂吸附、洗脫和解析時，所採用的樹脂為弱酸性陽離子交換樹脂，提高了樹脂吸附選擇性；本發明方法中採用單一銨鹽進行洗脫，單一氨水進行解析使洗脫解析經過一道工序即可完成，大大縮短了提取時間，並使洗脫劑、解析劑的回收更簡單、更容易，同時節省了大量回收用蒸汽。同時採用納濾回收洗脫液，又可大大降低原材料成本。
本發明方法可有效提高慶大黴素C1a的品質，其產品含量可達90％以上。其工作效率比現有技術提高了4倍，降低了原材料及能源的消耗；其方法中的洗脫液經過納濾處理後可循環套用，又大大降低了生產製造成本。
實施例1慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮(即過濾後製得濾液，濾液用732強酸性陽離子交換樹脂(南開大學化工廠)吸附，用水洗2-3倍體積，然後用稀鹽酸洗10-15倍體積，最後用純水洗至中性，洗掉一些蛋白類雜質。按照慶大黴素類似物與慶大黴素竟和力的不同，先用稀氨水解析掉慶大黴素類似物，再用氨水將慶大黴素全部解析下來，解析液經過711強鹼性陰離子交換樹脂(南開大學化工廠)脫色，脫色液經薄膜濃縮得，該濃縮液中慶大黴素的總單位為26-30萬單位/毫升)。用純水將濃縮液稀釋成3-5.5萬單位/毫升，調pH6.0-7.5，稀釋液以1/80/分-1/150/分的吸附流速通過HD-2弱酸性陽離子交換樹脂柱，用純水洗2-3倍體積後，用0.5M的氯化銨進行洗脫(先用氨水調氯化銨溶液pH值為7.5)，洗脫流速為1/80/分-1/150/分，洗40-50倍樹脂體積，用矽膠TLC檢測至樹脂柱上只吸附有慶大黴素C1a，再用1.5M的氨水解析慶大黴素C1a，所得解析液用薄膜濃縮至27萬單位/毫升，向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色，壓濾，得到脫色液於75℃-80℃噴霧乾燥，得慶大黴素C1a(含量為96.4％)。將氯化銨洗脫液進行納濾，透過液氯化銨與下批洗脫劑合併使用，濃縮液轉入慶大黴素提取工序用於提取慶大黴素。
實施例2慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮(具體方法同實施例1)。製備成的慶大黴素濃縮液的總單位為30萬單位/毫升，用純水將濃縮液稀釋成5.5萬單位/毫升，調pH6.0-7.5，稀釋液以1/150/分的吸附流速通過D152弱酸性陽離子交換樹脂柱，用純化水洗3倍體積後，用0.70M的硫酸銨洗脫(先用氨水調硫酸銨溶液pH值為9.5)，洗脫流速為1/150/分，洗40-50倍樹脂體積，用矽膠TLC檢測至樹脂柱上只吸附有慶大黴素C1a，再用2M的氨水解析慶大黴素C1a，所得解析液用薄膜濃縮至26萬單位/毫升，向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色，壓濾，得到脫色液於75℃-80℃噴霧乾燥，得慶大黴素C1a(含量95％)。將硫酸銨洗脫液進行納濾，透過液硫酸銨與下批洗脫劑合併使用，濃縮液轉入慶大黴素提取工序用於提取慶大黴素。
實施例3慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮(具體方法同實施例1)。製備成的慶大黴素濃縮液的總單位為30萬/毫升單位，用純化水將濃縮液稀釋成4.5萬單位/毫升，用氨水調pH6.0-7.5，稀釋液以1/100/分的吸附流速通過110弱酸性陽離子交換樹脂柱，用純水洗2.5倍體積後，換0.6M的硫酸銨洗脫(先用氨水調硫酸銨溶液pH值為8.5)，洗脫流速為1/100/分，洗40-50倍樹脂體積，用矽膠TLC檢測至樹脂柱上只吸附有慶大黴素C1a，再用3M的氨水解析慶大黴素C1a，所得解析液用薄膜濃縮至28萬單位/毫升以上，向濃縮液中按0.5公斤/百億單位加入活性炭脫色，壓濾，得到脫色液於75℃噴霧乾燥，得慶大黴素C1a(含量92％)。將硫酸銨洗脫液進行納濾，透過液硫酸銨與下批洗脫劑合併使用，濃縮液轉入慶大黴素提取工序用於提取慶大黴素。
權利要求
1.一種慶大黴素C1a的製備方法，其特徵在於它包括以下步驟a、將慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮；b、將慶大黴素濃縮液加水稀釋，調PH值到6.0-7.5，經弱酸性陽離子交換，樹脂吸附後，水洗；c、將吸附後的飽和樹脂用0.2-0.9M銨鹽溶液洗脫，銨鹽溶液PH值為7.0-9.5，洗脫液納濾回收；d、用1.5-3.5M氨水對洗脫後的飽和樹脂進行解析；e、對解析液進行脫色、濃縮、噴霧乾燥。
2.根據權利要求1所述的慶大黴素C1a的製備方法，其特徵在於所說的弱酸性陽離子交換樹脂為HD-2弱酸性陽離子交換樹脂。
3.根據權利要求1所述的慶大黴素C1a的製備方法，其特徵在於所說的銨鹽為氯化銨。
4.根據權利要求3所述的慶大黴素C1a的製備方法，其特徵在於所說的銨鹽濃度為0.4M-0.7M。
5.根據權利要求1所述的慶大黴素C1a的製備方法，其特徵在於所說的氨水濃度為2.0-3.0M。
全文摘要
本發明公開一種慶大黴素C1a的製備方法，它包括以下步驟a、將慶大黴素發酵液過濾、脫色、濃縮；b、將慶大黴素濃縮液加水稀釋，調pH值到6.0－7.5，經弱酸性陽離子交換樹脂吸附後，水洗；c、將吸附後的飽和樹脂用0.2－0.9M銨鹽溶液洗脫，洗脫液納濾回收；d、用1.5－3.5M氨水對洗脫後的飽和樹脂進行解析；e、對解析液進行濃縮、脫色、噴霧乾燥。本發明可有效提高慶大黴素C1a的品質，降低了原材料及能源的消耗。
文檔編號C07H1/00GK1511839SQ0215902
公開日2004年7月14日 申請日期2002年12月27日 優先權日2002年12月27日
發明者周佩豔, 孫海遠, 段修禮, 成青山, 宋義林, 魯敬肖 申請人:華北製藥集團有限責任公司