一種含有β-葡聚糖酶的小麥日糧酶及其製備方法

2023-05-26 18:28:11 2

一種含有β-葡聚糖酶的小麥日糧酶及其製備方法
【專利摘要】本發明涉及含有β-葡聚糖酶的一種小麥日糧酶及其製備方法，屬於飼料酶製劑領域。所述小麥日糧酶由以下重量份數的酶製劑組成：木聚糖酶100-140份，纖維素酶8-12份，β-葡聚糖酶15-20份，中溫α-澱粉酶6-10份，中草藥粉劑0.5-2份。其中其中β-葡聚糖酶產自地衣芽孢桿菌（Βacillus?licheniformis）β-10-25，保藏編號CCTCC?NO：M2013538，製備方法如下：斜面菌種活化培養獲得液體種子；發酵階段採用低溫培養基補入和分批接種相結合的方法；發酵液經過濾、濃縮、精濾、乾燥得獲得熱穩定性好的β-葡聚糖酶。所得複合酶能提高飼料轉化率，降低飼料成本。
【專利說明】一種含有β-葡聚糖酶的小麥日糧酶及其製備方法【技術領域】
[0001]本發明屬於酶製劑【技術領域】，具體涉及一種含有β-葡聚糖酶的小麥日糧酶及其製備方法。
【背景技術】
[0002]隨著近代酶技術及生物技術的發展，高效能生物活性物質——酶製劑已能大規模地工業化生產，並被應用於飼料工業中，許多實驗和實際應用結果都表明，飼用酶製劑作為一種飼料添加劑能有效地提高飼料的利用率、促進動物生長和防治動物疾病的發生，與抗生素和激素類物質相比，具有卓越的安全性，引起了全球範圍內飼料行業的高度重視。
[0003]飼料酶製劑是為了提高動物對飼料的消化、利用或改善動物體內的代謝效能而加入飼料中的酶類物質。目前可以在飼料中添加的酶製劑包括澱粉酶、α-半乳糖苷酶、纖維素酶、β -葡聚糖酶、葡萄糖氧化酶、脂肪酶、麥芽糖酶、甘露聚糖酶、果膠酶、植酸酶、蛋白酶、角蛋白酶、木聚糖酶等。由於飼料原料結構的複雜性，目前飼料工業生產中更多使用的是複合酶製劑。小麥日糧酶是一種新型的飼料添加劑，在國外其應用始於20世紀70年代，而我國的飼料工業在20世紀90年代才開展酶製劑的應用。因此，加大對飼料酶製劑的研究對於我國的養殖業發展具有非常重要的意義。
[0004]飼用酶種類繁多，在畜禽生產中均取得了相當好的效果。前蘇聯科學家在早期斷奶仔豬日糧中添加澱粉糊精酶，使得日增重提高14.6%，碳水化合物消化率提高77.2%。據美國有關資料報導，Collier在早期斷奶仔豬日糧中補充酶製劑(含蛋白酶、澱粉酶、葡聚糖酶)，結果實驗組比對照組日增重提高了 25%，飼料轉化率提高了 15.5%。西德學者曾多次進行育肥豬添加複合酶製劑的實驗研究，在以大麥為主的日糧中，添加0.1%的複合酶製劑，結果為:實驗組比對照組生長速度提高5.1%，飼料利用率提高4.1%。可見，酶製劑能顯著提高畜禽對飼料的消化吸收，促進`生長，降低飼料成本，並且作為一種綠色飼料添加劑，它的使用具有安全性，有利於畜牧業生產走上經濟節約型的發展道路。
[0005]長期以來，人們習慣以玉米作為能量飼料，但隨著養殖業發展對玉米需求量加大和國際市場上玉米行情的變化，造成玉米採購難和價格上揚，尤其在非玉米主產區，玉米的短缺成為限制當地畜牧業發展的重要因素。而在非玉米主產區往往小麥的來源較廣，其價格也較為穩定，而且在小麥收穫季節，其價格和玉米相比往往具有一定的優勢，特別是隨著我國小麥產量的逐漸增大，以及WTO的加入，進口小麥湧入帶來的衝擊，使得小麥價格呈下降趨勢。同時，畜牧業發展迅速，飼料用量不斷增大，製造澱粉和賴氨酸也消耗掉大量的玉米，以前主要用作能量飼料的玉米價格不斷上漲，小麥以其種植面積廣、產量高、價格低等優點成為替代玉米的首選。
[0006]目前，糧食的短缺是困擾我國飼料工業發展的主要因素。因此，要選擇有利於節約糧食資源的畜牧業發展道路，提高飼料利用率，充分利用有限的糧食資源獲得儘可能多的畜產品。β_葡聚糖酶等酶製劑的使用，能有效的解決這個問題，但目前在生產、實驗中的實際應用的酶製劑酶活力大多較低，因此也成為改善飼用酶應用現狀的瓶頸之一。
【發明內容】

[0007]本發明的目的在於提供一種多酶種復配的含有P -葡聚糖酶的小麥日糧酶及其製備方法。
[0008]本發明的目的可以通過以下技術方案來實現:
[0009]一種含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶，由以下重量份數的組分組成:中草藥粉劑0.5-2份，木聚糖酶100-140份，纖維素酶8-12份，^ -葡聚糖酶15-20份，中溫a -澱粉酶6-10 份。
[0010]所述木聚糖酶、纖維素酶和中溫a -澱粉酶均為湖南鴻鷹翔生物工程股份有限公司產品；
[0011]所述中草藥粉劑的製備方法如下:
[0012]稱取黃芪20-30份；黨參10-18份；柴胡10-15份；麥冬10_15份；分別將上述中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然後於容器中均勻混合併添加3-6倍重量的水，控制溫度70°C~90°C保持2~4h，然後降溫至45-60°C，加入混合酶製劑進行酶解，用乳酸調節pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最後添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，IlOff功率下超聲萃取0.5~1.5h，過濾；濾液真空濃縮後冷凍乾燥獲得中草藥粉劑；
[0013]所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10% ；
[0014]所述混合酶的重量份數組成為:P -葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，普魯蘭酶20-30份，(6-澱粉酶10-15份，果膠酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，木瓜蛋白酶5-10份，葡萄糖氧化酶5-10份，酸性磷酸酶5-10份；
`[0015]所述乙醇和丙醇的質量比例為1:1-1.5。
[0016]所述0 -葡聚糖酶製備方法如下:
[0017](I)種子培養
[0018]將地衣芽孢桿菌斜面菌種經三級搖瓶發酵及一級種子罐發酵；
[0019]所述種子培養的培養基為:酵母粉0.5%，蛋白腖I %，可溶性澱粉1%，NaCll %,pH4.5-7.0，121-123°C滅菌 30_40min。
[0020](2)發酵罐發酵
[0021]將一級種子罐發酵液以3%接種量接入含有3L發酵培養基的發酵罐中，培養溫度35-45 °C，攪拌速度200-300r/min，通風量(V/V) 1:1-3，培養時間10_15h ;然後將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養15-20h ;此時，將一級種子罐發酵液以2%接種量追加接入發酵罐，恆溫培養10-15h ;繼續將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養10-15h ;
[0022]所述發酵培養基組成為:麥麩75g，玉米粉55g，米糠25g，豆餅粉20g，^ -葡聚糖2g，中草藥劑粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀2g，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.5g,純淨水1000mL, pH值4.5-7.0，121°C滅菌20min ；
[0023]所述發酵培養基的調配方法為:按比例準確稱取原料，將原料中的純淨水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調節PH值3-7，加入中溫澱粉酶(3u/g玉米粉)與高溫澱粉酶(30u/g玉米粉)，同時邊攪拌邊升溫至70°C保溫15-30min，然後緩慢升溫至90°C保溫15-30min進行液化，最後加入其它原料，攪拌均勻，pH3_7，121_123°C滅菌30_40min備用。
[0024]溶解氧控制:通過調整攪拌轉速及通風量，控制溶解氧15-30% ；
[0025]PH控制:通過補氨水或稀磷酸，控制發酵過程中pH值保持在3-7 ；
[0026]補料控制:當發酵液中的還原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml時,開始添加補料培養基，補料量以維持發酵液還原糖含量為2mg/ml-5mg/ml ；
[0027]放罐標準:60-80%菌體衰老自溶，酶活力增長緩慢。
[0028](3)發酵液經過濾、濃縮、精濾、乾燥得β -葡聚糖酶。
[0029]所述地衣芽孢桿菌具體為地衣芽孢桿菌(B acillus Iicheniformis) β-10-25。該菌株已於2013年11月3日保藏於中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC，地址為:湖北省武漢市武昌區珞珈山武漢大學生命科學學院)，保藏號為CCTCC NO:Μ2013538ο
[0030]該菌株特點如下:
[0031]所述菌株在固體平板上菌落為白色，邊緣不整齊，表面乾燥不透明，鏡檢為革蘭氏陽性細菌，細胞形態呈短杆狀，芽孢中生，橢圓形，不膨大。
[0032]所述菌株生理生化特徵:V-P試驗( + )，澱粉水解( + )，酪素水解( + )，明膠水解( + )，硝酸鹽還原( + )，吲哚試驗(_)，利用檸`檬酸鹽( + )，硝酸還原( + )，甘露醇( + )，木糖(+ )。
[0033]優選的，一種小麥日糧酶由如下重量份數原料組成:木聚糖酶120份，纖維素酶10份，β -葡聚糖酶18份，中溫澱粉酶8份，中草藥粉劑1份。
[0034]所述小麥日糧酶適用於飼料加工廠和養殖場自配飼料，使用時應與飼料中的其它原料混合均勻。建議每噸全價料添加量為80-150g (飼料中小麥用量低於30%，添加量為80-100g/t，小麥用量超過30%，添加量為100-150g/t)。
[0035]有益效果:
[0036]1、本發明所使用的β -葡聚糖酶酶活力高達8000-10000u/ml，是原始菌株的2.5倍；在50-70°C條件下具有較高酶活，最適反應溫度為65°C ;適用反應pH值範圍為5.0 ;在室溫下保存6個月後酶活損失小於25%，4°C保存12個月後酶活損失小於20%。比現有的β -葡聚糖酶酶活力高，酶作用最適PH值範圍寬泛，熱穩定性及儲存穩定性均較高，特別適合反應溫度高、液化工藝與糖化工藝並存的工業化需求。
[0037]2、本發明所使用的β-葡聚糖酶具有良好的熱穩定性，在60°C條件下保存Ih後仍能保持80%以上酶活，70°C條件下保存IOmin後保持20%以上酶活。
[0038]3、相較於添加有普通β_葡聚糖酶的小麥日糧酶，在同樣的用量下本發明對β -葡聚糖的酶解率更高，從而提高飼料轉化率，降低飼料成本。
[0039]4、本發明中添加了中草藥粉劑，其具有天然抗菌和增強免疫力的作用，可以有效的提高畜禽動物的抗應激能力、免疫功能以及抗病防禦機能。另外，中草藥粉劑中添加了具有抗熱應激原作用的黃芩、柴胡，使得本發明產品具有更好的穩定性和保存活性，較沒有添加中草藥粉劑的產品在長時間高溫條件下的保存活性提高了 15%。
【具體實施方式】
[0040]實施例1中草藥粉劑的製備方法
[0041]一種中草藥粉劑的製備方法如下:[0042]稱取黃芪25份；黨參15份；柴胡12份；麥冬12份；分別將上述中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然後於容器中均勻混合併添加5倍重量的水，控制溫度80°C保持3h，然後降溫至50°C，加入混合酶製劑進行酶解，用乳酸調節pH值為6，酶解3h，最後添加混合物料2倍重量乙醇和丙醇的混合物，IlW超聲萃取lh，過濾；濾液真空濃縮後冷凍乾燥獲得中草藥粉劑。
[0043]所述混合酶添加量為混合物料總重量的8%。
[0044]所述混合酶的重量份數組成為:β -葡萄糖苷酶12份，木聚糖酶18份，戊聚糖酶18份，普魯蘭酶25份，β -澱粉酶18份，果膠酶12份，酸性蛋白酶12份，木瓜蛋白酶8份，葡萄糖氧化酶8份，酸性磷酸酶8份。
[0045]所述乙醇和丙醇的質量比例為1:1.2。
[0046]實施例2 —種β -葡聚糖酶的製備方法
[0047]一種β -葡聚糖酶的製備方法，包括如下步驟:
[0048](I)液體種子擴大培養
[0049]①一級種子培養:將活化後的斜面菌種2環接入500毫升搖瓶中，培養基裝量100毫升，旋轉式搖床180轉/分，培養溫度40°C，培養時間IOh ；
[0050]②二級種子培養:將一級種子按照10%的接種量接入500毫升二級種子搖瓶中，培養條件與一級種子相同；
[0051]③三級種子培養:將二級種子以10%接種量接入5000毫升三級種子搖瓶中，培養基裝量1000毫升，旋轉式搖`床100轉/分，培養溫度40°C，培養時間12h ；
[0052]④一級種子罐培養:將三級種子以10%接種量接入總容積為150L的一級種子罐，發酵培養基裝量100L，培養溫度41 °C，攪拌速度300rpm，通風量(V/V) 1: 1.5，罐壓0.05Mpa,培養時間15h ；
[0053]所述種子培養基重量組成為:酵母粉0.5%，蛋白腖I %，可溶性澱粉I %，NaCl I %ρΗ5.5，121°C 滅菌 35min。
[0054](2)發酵罐發酵
[0055]將一級種子罐發酵液以3%接種量接入含有3L發酵培養基的發酵罐中，培養溫度37°C，攪拌速度250r/min，通風量(V/V) 1:1-3，培養時間12h ;然後將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至37°C時恆溫培養18h ;此時，將一級種子罐發酵液以2%接種量追加接入發酵罐，恆溫培養12h ;繼續將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至37°C時恆溫培養12h ；
[0056]所述發酵培養基組成為:麥麩75g，玉米粉55g，米糠25g，豆餅粉20g，β -葡聚糖2g，中草藥劑粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀2g，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.5g,純淨水1000mL, pH值5.5，121°C滅菌20min ；
[0057]所述發酵培養基的調配方法為:按比例準確稱取原料，將原料中的純淨水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調節PH值5.5，加入中溫澱粉酶(3u/g玉米粉)與高溫澱粉酶(30u/g玉米粉)，同時邊攪拌邊升溫至70°C保溫20min，然後緩慢升溫至90°C保溫20min進行液化，最後加入其它原料，攪拌均勻，PH5.5，121°C滅菌35min備用。
[0058]所述中草藥粉劑的製備方法同實施例1.[0059](3)發酵液經過濾、濃縮、精濾、乾燥得β -葡聚糖酶。[0060]經上述製備方法得到的P -葡聚糖酶液體酶活力為10000u/ml。
[0061]實施例3 —種飼用複合酶製劑的製備方法
[0062]一種小麥日糧酶，由以下重量份數的酶製劑組成:
[0063]木聚糖酶120份，纖維素酶10份，^ -葡聚糖酶18份，中溫a -澱粉酶8份，中草藥粉劑1份。
[0064]取產自湖南鴻鷹翔生物工程股份有限公司的木聚糖酶120份，纖維素酶10份，中溫a -澱粉酶8份，以及實施例1所得的中草藥粉劑1份，實施例2所得的P -葡聚糖酶18份於25°C條件下在混合機中攪拌均勻，攪拌時間為5分鐘。攪拌均勻裝箱後於常溫或冷室中保存。
[0065]實施例4 一種飼用複合酶製劑的製備方法
[0066]一種小麥日糧酶，由以下重量份數的酶製劑組成:
[0067]木聚糖酶100份，纖維素酶8份，P -葡聚糖酶20份，中溫a -澱粉酶10份，中草藥粉劑0.5份。
[0068]按上述重量份數取產自湖南鴻鷹翔生物工程股份有限公司的木聚糖酶，纖維素酶，中溫a-澱粉酶，以及實施例1所得的中草藥粉劑，實施例2所得的(6-葡聚糖酶於25°C條件下在混合機中攪拌均勻，攪拌時間為5分鐘。攪拌均勻裝箱後於常溫或冷室中保存。
[0069]實施例5 —種飼用複合酶製劑的製備方法
[0070]—種小麥日糧酶，由`以下重量份數的酶製劑組成:
[0071]木聚糖酶140份，纖維素酶12份，^ -葡聚糖酶15份，中溫a -澱粉酶6份，中草藥粉劑2份。
[0072]按上述重量份數取產自湖南鴻鷹翔生物工程股份有限公司的木聚糖酶，纖維素酶，中溫a-澱粉酶，以及實施例1所得的中草藥粉劑，實施例2所得的(6-葡聚糖酶於25°C條件下在混合機中攪拌均勻，攪拌時間為5分鐘。攪拌均勻裝箱後於常溫或冷室中保存。
[0073]實施例6效果對比實驗
[0074]選取120頭育肥前期豬，按體重、血統及性別無差異分為實驗組和對照組，每組3個重複，每個重複20頭豬。實驗期為28天，實驗組每噸飼料添加本實施例3所述複合酶製劑120g,對照組不添加複合酶製劑，於試驗期的始末日早晨空腹稱重，計算日增重和料肉比，並給毛色進行打分。實驗結果如下表所示:
[0075]
【權利要求】
1.一種含有3-葡聚糖酶的小麥日糧酶，由以下重量份數的組分組成:木聚糖酶100-140份，纖維素酶8-12份，P -葡聚糖酶15-20份，中溫a -澱粉酶6-10份，中草藥粉劑0.5-2份； 所述P -葡聚糖酶由地衣芽孢桿菌(B acillus licheniformis) ^ -10-25經生物發酵制的，所述菌株保藏編號為CCTCC N0:M2013538o
2.如權利要求1所述一種含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶，其特徵在於，所述中草藥粉劑的製備方法如下: 稱取黃芪20-30份；黨參10-18份；柴胡10-15份；麥冬10-15份；分別將上述中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然後於容器中均勻混合併添加3-6倍重量的水，控制溫度70°C~90°C保持2~4h，然後降溫至45-60°C，加入混合酶製劑進行酶解，用乳酸調節pH值為5.5-6.8，酶解2-4h，最後添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，IlOff功率下超聲萃取0.5~1.5h，過濾；濾液真空濃縮後冷凍乾燥獲得中草藥粉劑。
3.如權利要求2所述的一種含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶，其特徵在於，混合酶製劑組成如下:3 -葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，普魯蘭酶20-30份，(6-澱粉酶10-15份，果膠酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，木瓜蛋白酶5-10份，葡萄糖氧化酶5-10份，酸性磷酸酶5-10份。
4.如權利要求1所述一種含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶，其特徵在於，(6-葡聚糖酶的製備方法，包括如下 步驟: 地衣芽孢桿菌3-10-25經斜面菌種活化培養後進行一、二、三級液體種子和種子罐培養；將一級種子罐發酵液以3%接種量接入含有3L發酵培養基的發酵罐中，培養溫度35-45°C，攪拌速度200-300r/min，通風量(V/V) 1:1-3,培養時間10_15h ;然後將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養15-20h ;此時，將一級種子罐發酵液以2%接種量追加接入發酵罐，恆溫培養10-15h ;繼續將IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養10-15h ; 發酵液經過濾、濃縮、精濾、乾燥得3 -葡聚糖酶。
5.如權利要求4所述的一種含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶，其特徵在於，所述種子培養的組成為:酵母粉0.5 %，蛋白腖I %，可溶性澱粉I %，NaCl I %，pH4.5-7.0 ； 所述發酵培養基組成為:麥麩75g，玉米粉55g，米糠25g，豆餅粉20g，3 -葡聚糖2g，中草藥劑粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀2g，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.5g,純淨水1000mL, pH值4.5-7.0，121°C滅菌20min ； 所述發酵培養基的調配方法為:按比例準確稱取原料，將原料中的純淨水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調節PH值3-7,加入中溫澱粉酶(3u/g玉米粉)與高溫澱粉酶(30u/g玉米粉)，同時邊攪拌邊升溫至70°C保溫15-30min，然後緩慢升溫至90°C保溫15_30min進行液化，最後加入其它原料，攪拌均勻，PH3-7，。
6.一種製備如權利要求1所述的含有(6-葡聚糖酶的小麥日糧酶的方法，包括如下步驟: 按照原料組成將木聚糖酶，纖維素酶，^ -葡聚糖酶，中溫a -澱粉酶，中草藥粉劑混合均勻即可；所述木聚糖酶，纖維素酶，中溫α-澱粉酶為湖南鴻鷹祥生物工程股份有限公司產品； 所述中草藥粉劑的製備方法如下: 稱取黃芪20-30份；黨參10-18份；柴胡10-15份；麥冬10-15份；分別將上述中草藥粉碎至粒徑為2毫米以下，然後於容器中均勻混合併添加3-6倍重量的水，控制溫度70°C~.90°C保持2~4h，然後降溫至45-60°C，加入混合酶製劑進行酶解，用乳酸調節pH值為.5.5-6.8，酶解2-4h，最後添加混合物料0.5-3倍重量乙醇和丙醇的混合物，IlOff功率下超聲萃取0.5~1.5h，過濾；濾液真空濃縮後冷凍乾燥獲得中草藥粉劑； 所述混合酶添加量為混合物料總重量的5-10% ； 所述混合酶的重量份數組成為:β -葡萄糖苷酶10-15份，木聚糖酶15-20份，戊聚糖酶15-20份，普魯蘭酶20-30份，β-澱粉酶10-15份，果膠酶10-15份，酸性蛋白酶10-15份，木瓜蛋白酶5-10份，葡萄糖氧化酶5-10份，酸性磷酸酶5-10份； 所述乙醇和丙醇的質量比例為1:1-1.5 ； 所述β-葡聚糖酶製備方法如下: (1)種子培養 將地衣芽孢桿菌β -10-25斜面菌種經三級搖瓶發酵劑一級種子罐發酵； 所述種子培養的培養 基為:酵母粉0.5%，蛋白腖1%，可溶性澱粉1%，NaCll %,ρΗ4.5-7.0,121-123°C滅菌 30_40min ； (2)發酵罐發酵 將一級種子罐發酵液以3%接種量接入含有3L發酵培養基的發酵罐中，培養溫度.35-45°C，攪拌速度200-300r/min，通風量(V/V) 1:1-3,培養時間10_15h ;然後將IL經過.121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養.15-20h ;此時，將一級種子罐發酵液以2%接種量追加接入發酵罐，恆溫培養10-15h ;繼續將.IL經過121°C滅菌20min，溫度為10°C的發酵培養基補入發酵罐，待溫度升至35_45°C時恆溫培養10-15h ; 所述發酵培養基組成為:麥麩75g，玉米粉55g，米糠25g，豆餅粉20g，β -葡聚糖2g，中草藥劑粉40g，海藻糖35g，酵母粉6g，玉米漿3g，硫酸銨2g，磷酸氫二鉀2g，磷酸二氫鉀.2g，檸檬酸鈉3g，消泡劑0.5g,純淨水1000mL, pH值4.5-7.0,121°C滅菌20min ； 所述發酵培養基的調配方法為:按比例準確稱取原料，將原料中的純淨水、玉米粉、豆餅粉投入配料罐中，調節PH值3-7,加入中溫澱粉酶(3u/g玉米粉)與高溫澱粉酶(30u/g玉米粉)，同時邊攪拌邊升溫至70°C保溫15-30min，然後緩慢升溫至90°C保溫15_30min進行液化，最後加入其它原料，攪拌均勻，調初始PH3-7，121-123°C滅菌30_40min備用； 溶解氧控制:通過調整攪拌轉速及通風量，控制溶解氧15-30% ； PH控制:通過補氨水或稀磷酸，控制發酵過程中pH值保持在3-7 ； 補料控制:當發酵液中的還原糖含量降至3mg/ml-8mg/ml時,開始添加補料培養基,補料量以維持發酵液還原糖含量為2mg/ml-5mg/ml ； 放罐標準:60-80%菌體衰老自溶，酶活力增長緩慢； (3)發酵液經過濾、濃縮、精濾、乾燥得β-葡聚糖酶。
7.如權利要求1所述的一種含有葡聚糖酶的小麥日糧酶，其特徵在於:由以下重量份數的組分組成:木聚糖酶120份，纖維素酶10份，β -葡聚糖酶18份，中溫α -澱粉酶8份，中草藥粉劑1份。
8.如權利要求1 所述的一種含有P -葡聚糖酶的小麥日糧酶在動物飼養中的應用。
【文檔編號】A23K1/14GK103805583SQ201310738348
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2013年12月27日 優先權日:2013年12月27日
【發明者】李洪兵, 李海清, 胡永明, 向左東, 楊中秋 申請人:湖南鴻鷹生物科技有限公司