中藥製劑的質量控制方法

2023-05-26 10:34:11 6

專利名稱：中藥製劑的質量控制方法
技術領域：
本發明屬於中藥技術領域，涉及中藥的檢測方法，尤其是一種中藥製劑保幼化風 丹的質量控制方法。
背景技術：
保幼化風丹由膽南星、薄荷、羌活、獨活、天麻、荊芥穗、川芎、全蠍、甘草、人參、防 風組成，其製備方法為以上十一味，粉碎成細粉，混勻，過篩，每IOOg粉末加煉蜜105 115g，製成大蜜丸，即得。保幼化風丹具有清熱散風，止嗽化痰之功效，用於驚風裡熱，痰涎 壅盛，咳嗽發燒，頭痛身痛，四肢抽動，睡臥不安。隨著經濟的不斷發展，中藥受到世人更多的了解與矚目，中藥在傳統的中醫理論 指導下發展起來，原料多是草根樹皮、礦物、動物等天然材料，來源廣泛，成分複雜，使中藥 安全性標準具有特殊性，安全性標準問題也同樣成為中藥進入國際市場的一個難題。目前 國際上雖然尚無植物類中藥的國際標準，但是美國、歐盟、我國及傳統出口中藥的東南亞地 區均有提高中藥標準的趨勢，在此情況下，需要提出適合我國產品質量的標準以適應國際 標準，我國有數千年的中藥使用歷史，世界各國在制訂相應的植物藥產品質量標準中多參 考我國的中藥標準，所以完善、提高中藥的質量標準更已經迫在眉睫。薄層色譜法(TLC)鑑別中對照藥材的確定越來越多的運用在中藥製劑中，由於對 照品的限制或選擇對照品不夠專屬等原因，常選用對照藥材作為TLC鑑別的色譜對照品。高效液相色譜(HPLC)具有快速、靈敏、分離效能高等優點，在中藥鑑定中，採用 HPLC法分離特徵成分後，用紫外檢測器(UV)或質譜檢測器(MQ進行結構分析和定量分析， 是全面評價質量的有效方法。中國藥典(2000年版)一部中就有59種藥材和50種中成藥 採用HPLC法進行鑑定，而且還不斷有人用HPLC法對其它的中藥進行鑑定和成分分析研究。保幼化風丹現有質量標準表述「草酸鈣簇晶直徑20 68 μ m,稜角銳尖，纖維束 周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。厚壁細胞多角形或長多角形，直徑70 180 μ m， 壁較厚，微木化，紋孔明顯。橙皮甙結晶稍帶黃色，存在於葉肉組織中，柵欄細胞中尤多。油 管含棕黃色分泌物，直徑約100 μ m。體壁碎片淡黃色至黃色，有網狀紋及圓形毛窩，有時可 見棕褐色剛毛。據檢索，目前沒有關於保幼化風丹的質量控制方法的相關專利，現有專利主要集 中在保幼化風丹的重要配方和方法上。

發明內容
本發明的目的在於克服現有技術的不足之處，提供一種能夠定性、定量檢測藥物 成分的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，本方法具有檢測手段簡單、檢測結果準確的 特點。本發明的目的是通過以下技術方案實現的一種中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，步驟是
(1)顯微鑑別；(2)以羌活為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有羌活成分；(3)以防風為對照藥材、5-0-甲基維斯阿米醇苷為對照品，薄層色譜法鑑別保幼 化風丹處方中是否含有防風成分；(4)以川芎為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有川芎成分；(5)以人參皂苷Rbl、Re及Rgl為對照品，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否 含有人參成分；(6)以甘草為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有甘草成分；(7)以甘草酸銨為對照品，高效液相法測定保幼化風丹處方中的甘草含量。而且，所述顯微鑑別的顯微描述為本品為生粉入藥，草酸鈣簇晶直徑20 68μπι，稜角尖銳；纖維束周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維；厚壁細胞多角形或長 多角形，直徑70 180μπι，壁較厚，微木化，紋孔明顯；橙皮苷結晶稍帶黃色，存在於葉肉組 織中，柵欄細胞中尤多；油管含棕黃色分泌物，直徑約100 μ m;體壁碎片淡黃色至黃色，有 網狀紋理及圓形毛窩，有時可見棕褐色剛毛；油管含金黃色分泌物，直徑30 μ m。而且，所述薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中羌活的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研細，加乙醚 20ml，冷浸30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，作為供試品溶液；
②對照藥材溶液的製備取羌活對照藥材0. 5g，加乙醚5ml，冷浸30分鐘，濾過，濾 液揮幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，製成對照藥材溶液；③薄層條件及結果吸取供試品溶液10 μ 1、對照藥材溶液2 μ 1，分別點於同一矽 膠G薄層板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1為展開齊U，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙 醇溶液，加熱至斑點顯色，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有羌活成分。而且，所述薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中防風的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研細，加丙酮 20ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取防風對照藥材lg，加丙酮10ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；③對照品溶液的製備取5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品，加甲醇製成每Iml含 Img的溶液，作為對照品溶液；④薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述三種溶液各10 μ 1，分別點於同一矽 膠GF2M薄層板上，以三氯甲烷甲醇=4 1為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈 254nm下檢視，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有防風成分。而且，所述薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中川芎的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加乙醚 20ml，加熱回流30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取川芎對照藥材0. 5g，加乙醚10ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述兩種溶液各5 μ 1，分別點於同一矽 膠G薄層板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈365nm下檢視，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有川芎成分。而且，所述薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中人參的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加甲醇50ml，超聲處理1小 時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液， 水液用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次 20ml，棄去氨試液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；②對照品溶液的的製備取人參皂苷Rbl、Re及Rgl對照品，加甲醇製成每ml各含 2mg的溶液，作為對照品溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述供試品溶液6 μ 1，對照品溶液2 μ 1， 分別點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2在10°C以下放置分層 的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，根 據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有人參成分。而且，所述薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中甘草的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加乙醚 30ml，加熱回流1小時，濾過，藥渣揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣 加水40ml使溶解，用正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次 20ml，棄去洗液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取甘草對照藥材lg，加乙醚30ml，加熱回流1小時，濾過， 藥渣揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇 振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去洗液，正丁醇液蒸 幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為對照藥材溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述兩種溶液各6 μ 1，分別點於同一矽 膠G薄層板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸水=15 :1:1: 2為展開劑，展開，取出，晾 幹，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視， 根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有甘草成分。而且，所述高效液相法測定處方保幼化風丹中的甘草含量的方法為①色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相甲醇-0. 2mol/L醋酸銨 溶液-冰醋酸=62 38 1;檢測波長25011111;柱溫401;流速1.01111/分鐘，理論板數 按甘草酸峰計算不低於3000 ；②對照品溶液的製備取甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加流動相製成每Iml含 0. Img的溶液，搖勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色譜儀，每Iml甘草酸銨0. lmg，折合甘 草酸為0. 0980mg ；③供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品適量，剪碎，取3g，精密稱定，精密加入 流動相25ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失的重量，搖 勻，濾過，取續濾液，即得，精密吸取10μ 1，注入液相色譜儀；④檢測及結果測定分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液以及使用溶劑各 10 μ 1，注入液相色譜儀，測定處方中的甘草含量，根據國家規定每丸含甘草以甘草酸 (C42H62O16)計，不得少於 L7mg。本發明的優點和積極效果是
1、本發明的檢測方法在《衛生部藥品標準》中藥成方製劑第三冊原標準的基礎上， 增加了對照藥材和對照品的薄層鑑別檢驗方法，制定了高效液相色譜法進行含量測定的方 法，修訂後的質量標準控制方法，提高了保幼化風丹質量標準的可控性，進一步確保產品內 在質量和療效，對促進產品銷售、增加產品的市場競爭力、保證患者用藥安全意義重大。2、本發明對保幼化風丹的質量標準進行了提高、完善，在原標準基礎上，增加了防 風顯微特徵的描述，增加了處方中羌活、防風、川芎、人參及甘草的薄層鑑別方法，以及以甘 草酸銨為對照品，制定了甘草的含量測定方法，修訂後的質量標準提高了藥品的質量控制， 可更加準確地檢驗出假藥和劣藥，對中藥現代化和中藥走出國門具有重大意義。


圖1為本發明供試樣品中羌活的薄層色譜圖，其中條帶從左至右依次為樣品 1(批號200601)，樣品2 (批號200602)，樣品3 (批號200603)，羌活對照藥材(中檢所)， 陰性樣品；圖2為本發明供試樣品中防風的薄層色譜圖在紫外光燈OMnm)檢視圖，其中條 帶從左至右依次為樣品1 (批號200601)，樣品2 (批號20060 ，樣品3 (批號200603)， 防風對照藥材(中檢所)，5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品(中檢所)，陰性樣品；圖3本發明供試樣品中川芎的薄層色譜圖在紫外光燈(365nm)下的檢視圖，其 中條帶從左至右依次為樣品1(批號200601)，樣品2(批號200602)，樣品3(批號 200603)，川芎對照藥材(中檢所)，陰性樣品；圖4為本發明供試樣品中人參的薄層色譜圖在日光下的檢視圖，其中，其中條帶 從左至右依次為樣品1 (批號200601)，樣品2 (批號20060 ，樣品3 (批號200603)，人 參皂苷Rbl對照品(中檢所)，人參皂苷Re對照品(中檢所)，人參皂苷Rgl對照品(中檢 所)，陰性樣品；圖5、圖6為本發明供試樣品中甘草的薄層色譜圖在分別置日光及紫外光燈 (365nm)下檢視圖，從左至右依次為樣品1(批號200601)，樣品2 (批號200602)，樣品3 (批號200603)，甘草對照藥材(中檢所)，陰性樣品；圖7為本發明供試樣品中薄荷的薄層色譜圖在日光下的檢視圖，從左至右依次 為薄荷腦對照品(中檢所)，陰性樣品，樣品1(批號200601)，樣品2 (批號200602)，樣 品 3(批號200603)；圖8為本發明甘草酸銨對照品液相色譜圖；圖9為本發明保幼化風丹供試品液相色譜圖；圖10為本發明陰性樣品液相色譜圖；圖11為本發明天麻素對照品液相色譜圖；圖12為本發明保幼化風丹供試品液相色譜圖。
具體實施例方式下面結合實施例，對本發明進一步說明，下述實施例是說明性的，不是限定性的， 不能以下述實施例來限定本發明的保護範圍。一種中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其方法的步驟是
(1)顯微鑑別顯微描述為鑑於本品為生粉入藥，草酸鈣簇晶直徑20 68 μ m，稜角尖銳；纖 維束周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維；厚壁細胞多角形或長多角形，直徑70 180 μ m,壁較厚，微木化，紋孔明顯；橙皮苷結晶稍帶黃色，存在於葉肉組織中，柵欄細胞中 尤多；油管含棕黃色分泌物，直徑約100 μ m ；體壁碎片淡黃色至黃色，有網狀紋理及圓形毛 窩，有時可見棕褐色剛毛；油管含金黃色分泌物，直徑30 μ m。(2)採用薄層色譜法，以羌活為對照藥材，鑑別保幼化風丹處方中的羌活。①供試品溶液的製備取本品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研細，加乙醚20ml，冷浸30 分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，作為供試品溶液。②對照藥材溶液的製備取羌活對照藥材0. 5g，加乙醚5ml，冷浸30分鐘，濾過，濾 液揮幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，製成對照藥材溶液。③陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除羌活外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。④薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗， 吸取供試品溶液和陰性樣品溶液各10μ 1，對照藥材溶液2μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板 上，以正己烷乙酸乙酯=4 1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱 至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，表 明該供試樣品中含有羌活，陰性對照樣品無幹擾，結果見圖1。(3)採用薄層色譜法，以防風為對照藥材，鑑別保幼化風丹處方中防風。①供試品溶液的製備取本品10g，剪碎，加硅藻土 3g，研細，加丙酮20ml，超聲處 理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液。②對照藥材溶液的製備取防風對照藥材lg，加丙酮10ml，超聲處理20分鐘，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液。③對照品溶液的製備取5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品，加甲醇製成每Iml含 Img的溶液，作為對照品溶液。④陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除防風外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按上①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。⑤薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗，吸 取上述四種溶液各10μ1，分別點於同一矽膠GF2M薄層板上，以三氯甲烷甲醇=4 1 為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈254nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材及對 照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，表明該供試樣品中含有防風成分，陰性對照樣 品無幹擾，結果見圖2。(4)採用薄層色譜法，以川芎為對照藥材，鑑別保幼化風丹處方中川芎。①供試品溶液的製備取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加乙醚20ml，加熱回流 30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液。②對照藥材溶液的製備取川芎對照藥材0. 5g，加乙醚10ml，加熱回流30分鐘，濾 過，濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液。③陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除川芎外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。
④薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗， 吸取上述三種溶液各5μ1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1為 展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈365nm下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相 應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點，表明該供試樣品中含有川穹成分，陰性對照樣品無幹 擾，結果見圖3。(5)採用薄層色譜法，以人參皂苷Rbl、Re及Rgl為對照品，鑑別保幼化風丹處方 中人參。①供試品溶液的製備取本品10g，剪碎，加甲醇50ml，超聲處理1小時，濾過，濾液 蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水液用水飽和 的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄去氨試 液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。②對照品溶液的的製備取人參皂苷Rbl、Re及Rgl對照品，加甲醇製成每ml各含 2mg的溶液，作為對照品溶液。③陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除人參外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。④薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗， 吸取上述供試品溶液和陰性樣品溶液各6μ 1，對照品溶液2μ 1，分別點於同一矽膠G薄層 板上，以三氯甲烷甲醇水=13 7 2在10°C以下放置分層的下層溶液為展開劑，展 開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品 色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，表明該供試樣品中含有人參成分，陰性對照樣品無 幹擾，結果見圖4。(6)採用薄層色譜法，以甘草為對照藥材，鑑別保幼化風丹處方中的甘草。①供試品溶液的製備取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加乙醚30ml，加熱回流 1小時，濾過，藥渣揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水40ml使溶 解，用正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去洗液， 正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液。②對照藥材溶液的製備取甘草對照藥材lg，加乙醚30ml，加熱回流1小時，濾過， 藥渣揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇 振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去洗液，正丁醇液蒸 幹，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為對照藥材溶液。③陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除甘草外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。④薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗， 吸取上述三種溶液各6 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸 水=15 1 1 2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色 清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置 上，分別顯相同顏色的斑點或螢光斑點，表明該供試樣品中含有甘草成分，陰性對照樣品無 幹擾，結果見圖5、圖6。(7)採用薄層色譜法，以薄荷腦為對照品，鑑別保幼化風丹處方中的薄荷。
①供試品溶液的製備取本品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加石油醚(60 900C ) 15ml，浸泡1小時，濾過，濾液濃縮至^iil,作為供試品溶液。②對照品溶液的製備取薄荷腦對照品，加甲醇製成每Iml含Img的溶液，作為對 照品溶液。③陰性樣品溶液的製備按處方配比，取除薄荷外的其他藥材，按藥典中製法項 下的工藝製成丸劑，再按①供試品溶液製備方法製得陰性樣品溶液。④薄層條件及結果照薄層色譜法(《中國藥典》2005年版一部附錄VI B)試驗， 吸取上述供試品溶液和陰性樣品溶液各5 μ 1，對照品溶液2 μ 1，分別點於同一矽膠G薄層 板上，以甲苯乙酸乙酯=19 1為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以5%香草醛硫酸溶液，加 熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，不顯相同的斑點，表明 該供試樣品中不含有薄荷，陰性樣品無幹擾，結果見圖7，由於在相同位置上不顯示相同斑 點，則不納入質量控制當中。(8)採用高效液相法，以甘草酸銨為對照品，測定保幼化風丹處方中的甘草含量。①參照《中國藥典》2005年版一部有關含量測定方法制定。用十八烷基矽烷鍵合 矽膠為填充劑；流動相甲醇0. 2mol/L醋酸銨溶液-冰醋酸=62 38 1 ；檢測波長 250nm ；柱溫40°C ；流速1. Oml/分鐘，理論板數按甘草酸峰計算不低於3000。②對照品溶液的製備取甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加流動相製成每Iml含 0. Img的溶液，搖勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色譜儀，每Iml甘草酸銨0. lmg，折合甘 草酸為0. 0980mg，結果見圖8。③供試品溶液的製備取本品適量，剪碎，取3g，精密稱定，精密加入流動相25ml， 稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失的重量，搖勻，濾過，取 續濾液，即得，精密吸取 ο μ 1，注入液相色譜儀，檢測結果見圖9。④陰性樣品溶液的製備按處方取除甘草的各味藥材，按藥典中製法製得樣品， 再按②供試品溶液製備方法，製得陰性樣品溶液。精密吸取10 μ 1，注入液相色譜儀，與甘草 酸對照品色譜峰相對應的保留時間處，無色譜峰出現，結果陰性樣品溶液無幹擾，檢測結果 見圖10。⑤檢測及結果測定分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性樣品溶液以及使 用溶劑各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，處方中，甘草佔處方總量的7. 69 %，鑑於本品為生 粉入藥，按照國家藥典委員會要求(生粉入藥按80%轉移率計算)，參照《中國藥典》2005 年版一部甘草項下含量限度計算，每丸含甘草以甘草酸(C42H62O16)計，不得少於1.7mg。(9)處方中天麻含量測定①色譜條件參照《中國藥典》2005年版一部天麻項下含量測定方法，對本品處方 中天麻進行了研究，用十八烷基矽膠鍵合矽膠為填充劑；甲醇磷酸鹽溶液(O. lmol/L磷 酸二氫鉀與0. lmol/L磷酸氫二鈉等量混合)水=1.5 3 95為流動相；檢測波長為 270nm。②對照品溶液的製備取天麻素對照品適量，精密稱定，製成每Iml含0. 2mg的溶 液，即得。檢測結果見圖11。③供試品溶液的製備取本品6g(批號200601)，精密稱定，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。檢測結果見圖12。 ④試驗結果供試品溶液中，天麻素含量很低，僅為0. 10mg/g。處方中，天麻佔處 方總量的7. 69%，《中國藥典》2005年版一部天麻中天麻素含量限度為0. 20%，轉移率按照 80%計算，理論含量僅為0. 057mg/g。因此，在制定本品含量測定項中，未制定處方中天麻的含量。
權利要求
1.一種中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於其方法的步驟是(1)顯微鑑別；(2)以羌活為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有羌活成分；(3)以防風為對照藥材、5-0-甲基維斯阿米醇苷為對照品，薄層色譜法鑑別保幼化風 丹處方中是否含有防風成分；(4)以川芎為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有川芎成分；(5)以人參皂苷Rbl、Re及Rgl為對照品，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有 人參成分；(6)以甘草為對照藥材，薄層色譜法鑑別保幼化風丹處方中是否含有甘草成分；(7)以甘草酸銨為對照品，高效液相法測定保幼化風丹處方中的甘草含量。
2.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述顯 微鑑別的顯微描述為本品為生粉入藥，草酸鈣簇晶直徑20 68 μ m，稜角尖銳；纖維束周 圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維；厚壁細胞多角形或長多角形，直徑70 180 μ m，壁 較厚，微木化，紋孔明顯；橙皮苷結晶稍帶黃色，存在於葉肉組織中，柵欄細胞中尤多；油管 含棕黃色分泌物，直徑約100 μ m;體壁碎片淡黃色至黃色，有網狀紋理及圓形毛窩，有時可 見棕褐色剛毛；油管含金黃色分泌物，直徑30 μ m。
3.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述薄 層色譜法鑑別保幼化風丹處方中羌活的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加硅藻土3g，研細，加乙醚20ml， 冷浸30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取羌活對照藥材0.5g，加乙醚5ml，冷浸30分鐘，濾過，濾液揮 幹，殘渣加三氯甲烷2ml使溶解，製成對照藥材溶液；③薄層條件及結果吸取供試品溶液10μ 1、對照藥材溶液2 μ 1，分別點於同一矽膠G 薄層板上，以正己烷乙酸乙酯=4 1為展開齊U，展開，取出，晾乾，噴以10%硫酸乙醇溶 液，加熱至斑點顯色，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有羌活成分。
4.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述薄 層色譜法鑑別保幼化風丹處方中防風的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加硅藻土3g，研細，加丙酮20ml， 超聲處理20分鐘，濾過，濾液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取防風對照藥材lg，加丙酮10ml，超聲處理20分鐘，濾過，濾 液蒸乾，殘渣加乙醇Iml使溶解，作為對照藥材溶液；③對照品溶液的製備取5-0-甲基維斯阿米醇苷對照品，加甲醇製成每Iml含Img的 溶液，作為對照品溶液；④薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述三種溶液各10μ 1，分別點於同一矽膠 GF254薄層板上，以三氯甲烷甲醇=4 1為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈254nm 下檢視，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有防風成分。
5.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述薄 層色譜法鑑別保幼化風丹處方中川芎的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品6g，剪碎，加硅藻土 2g，研細，加乙醚20ml，力口熱回流30分鐘，濾過，濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取川芎對照藥材0.5g，加乙醚10ml，加熱回流30分鐘，濾過， 濾液揮幹，殘渣加乙酸乙酯2ml使溶解，作為對照藥材溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述兩種溶液各5μ1，分別點於同一矽膠G薄 層板上，以正己烷乙酸乙酯=9 1為展開劑，展開，取出，晾乾，置紫外光燈365nm下檢 視，根據顯色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有川芎成分。
6.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述薄 層色譜法鑑別保幼化風丹處方中人參的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品10g，剪碎，加甲醇50ml，超聲處理1小時，濾 過，濾液蒸乾，殘渣加水30ml使溶解，用乙醚振搖提取2次，每次20ml，棄去乙醚液，水液用 水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次20ml，棄 去氨試液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；②對照品溶液的的製備取人參皂苷Rbl、Re及Rgl對照品，加甲醇製成每ml各含2mg 的溶液，作為對照品溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述供試品溶液6μ1，對照品溶液2μ 1，分別 點於同一矽膠G薄層板上，以三氯甲烷甲醇水=I3 7 2在10°C以下放置分層的下 層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以10 %硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，根據顯 色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有人參成分。
7.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述薄 層色譜法鑑別保幼化風丹處方中甘草的方法為①供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品6g，剪碎，加硅藻土2g，研細，加乙醚30ml， 加熱回流1小時，濾過，藥渣揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水 40ml使溶解，用正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml， 棄去洗液，正丁醇液蒸乾，殘渣加甲醇2ml使溶解，作為供試品溶液；②對照藥材溶液的製備取甘草對照藥材lg，加乙醚30ml，加熱回流1小時，濾過，藥渣 揮幹，加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸乾，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇振搖 提取3次，每次20ml，合併正丁醇液，用水洗滌3次，每次20ml，棄去洗液，正丁醇液蒸乾，殘 渣加甲醇2ml使溶解，作為對照藥材溶液；③薄層條件及結果薄層色譜試驗，吸取上述兩種溶液各6μ1，分別點於同一矽膠G薄 層板上，以乙酸乙酯甲酸冰醋酸水=15 1 1 2為展開劑，展開，取出，晾乾，噴 以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點顯色清晰，分別置日光及紫外光燈365nm下檢視，根據顯 色斑點的位置判斷保幼化風丹樣品中是否含有甘草成分。
8.根據權利要求1所述的中藥製劑保幼化風丹的質量控制方法，其特徵在於所述高 效液相法測定處方保幼化風丹中的甘草含量的方法為①色譜條件用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；流動相甲醇-0.2mol/L醋酸銨溶 液-冰醋酸=62 38 1;檢測波長250nm;柱溫40°C;流速1.0ml/分鐘，理論板數按 甘草酸峰計算不低於3000 ；②對照品溶液的製備取甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加流動相製成每Iml含 0. Img的溶液，搖勻，即得，精密吸取10 μ 1，注入液相色譜儀，每Iml甘草酸銨0. lmg，折合甘草酸為0. 0980mg ；③供試品溶液的製備取保幼化風丹樣品適量，剪碎，取3g，精密稱定，精密加入流動 相25ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用流動相補足減失的重量，搖勻， 濾過，取續濾液，即得，精密吸取10μ 1，注入液相色譜儀；④檢測及結果測定分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液以及使用溶劑各10μ1，注 入液相色譜儀，測定處方中的甘草含量，根據國家規定每丸含甘草以甘草酸(C42H62O16)計， 不得少於1. 7mgo
全文摘要
本發明涉及一種中藥製劑的質量控制方法，步驟是首先進行顯微鑑別；其次採用薄層色譜法，鑑別保幼化風丹處方中是否含有羌活、防風、川芎、人參以及甘草成分；最後採用高效液相法，以甘草酸銨為對照品，測定處方保幼化風丹中的甘草含量。本發明的檢測方法在《衛生部藥品標準》中藥成方製劑第三冊原標準的基礎上，增加了對照藥材和對照品的薄層鑑別檢驗方法，制定了高效液相色譜法進行含量測定的方法，修訂後的質量標準控制方法，提高了保幼化風丹質量標準的可控性，進一步確保產品內在質量和療效，對促進產品銷售、增加產品的市場競爭力、保證患者用藥安全意義重大。
文檔編號A61P11/10GK102038869SQ20091007090
公開日2011年5月4日 申請日期2009年10月22日 優先權日2009年10月22日
發明者李妍, 李豔鈺, 江永萍, 榮子丹, 趙晨 申請人:天津中新藥業集團股份有限公司達仁堂製藥廠