藿香油的新用途的製作方法

2023-05-30 16:17:06

專利名稱：藿香油的新用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及藿香油的新的製藥用途，具體說是藿香油在製備治療腦血管病藥物中的應用，以及藿香油在製備治療血管痙攣所引起的多種疾病藥物中的應用。
藿香用於治療疾病已有2000多年的歷史，但主要用於治療消化系統的疾病，如嘔吐，腹瀉，感冒，食慾下降等。具有芳香化濁，開胃止嘔，發表解暑的功效(《中華人民共和國藥典》2000年版)。《藥品化義)》記載「藿香，其氣芳香，善行胃氣，以此調中，治嘔吐霍亂。且香能和合五臟，若脾胃不和，用之助胃而進飲食，有醒脾開胃之功」。《本草圖經》記載藿香「治脾胃吐逆，為最要之藥」。《本草再新》記載藿香「解表散邪，利溼除風，清熱止渴」。
儘管藿香作為藥用已有悠久歷史，但未見報導藿香或藿香油及其主要成分藿香醇、藿香酮治療腦血管痙攣，以及血管痙攣所引起的頭痛，偏頭痛，腦缺血，痴呆，腦疲勞，腦缺氧，冠狀動脈痙攣，心肌供血不足等疾病的作用。
在多年的研究中，本發明人發現了藿香油具有擴張腦血管，改善血管痙攣的作用，可以用來治療由於血管收縮障礙所致的腦血管痙攣，頭痛，偏頭痛，腦缺血，血管性痴呆，腦疲勞，腦缺氧，冠狀動脈痙攣，心肌供血不足等病症，發現了藿香油的一些新的可靠的用途。
本發明提供的藿香油是在製備治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物中的應用。
具體的說，本發明所述的藿香油是在製備治療頭痛的藥物中的應用；是在製備治療偏頭痛的藥物中的應用；是在製備治療腦缺血的藥物中的應用；是在製備治療血管性神經精神障礙的藥物中的應用；是在製備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用；是在製備治療心肌供血不足的藥物中的應用。
在治療血管痙攣及其由此引起的疾病時，以藿香油為活性成分，以常規的製劑工藝，單獨使用或與其他藥物配合製備成在臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。如滴鼻劑，滴眼劑，及其它五官科藥劑，散劑，丸劑，膠囊劑，片劑，微囊劑，軟膠囊劑，膜劑，栓劑，注射劑，膏劑，酊劑，散劑，衝劑，氣霧劑以及各種外用製劑等。
本發明的實驗結果表明，藿香油對小鼠腦膜血流量有明顯增加的作用。一般在給藥後1分鐘即有腦血流升高，並表現出一定的量效關係。如大劑量(25mg/kg)給藥後與對照組相比，可使腦膜血流量增加15-20％。表明藿香油對腦血管有直接地擴張作用，對於血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。藿香油給藥後5分鐘對小鼠大腦皮質一氧化氮(NO)含量有明顯增加的作用。這一現象與小鼠腦膜血流量的結果有一定的吻合度。由於NO對血管平滑肌的收縮有一定的抑制作用，能擴張血管，抑制血管平滑肌痙攣，故藿香油對於血管性痙攣所引起的疾病有較好的。體外試驗結果表明，藿香油有較強地抑制ADP誘導血小板聚集的作用，最低有效濃度為3.31×10-6g/ml，由於血小板的聚集提高直接導致凝血過程加劇和血栓形成，所以本實驗結果提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
在藥劑應用上就是將藿香油單獨地或者加入複方中以常規的製劑工藝製備成藥劑。其藥劑可以是臨床上能夠使用的各種不同劑型。
下述藥物實驗資料使本發明所說的藿香油新的用途得以證實。
動物實驗例1對小鼠腦膜血流量的作用觀察本發明藿香油對小鼠腦膜血流量的作用。藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配製成所需濃度。試驗動物為雄性昆明種小鼠，非近交系封閉群，體重18-22g，合格證號醫動字01-3001，由中國醫學科學院實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對溼度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養，每籠8隻，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠烏拉坦(1.0g/kg)麻醉後，固定頭部，切開皮膚，於大腦皮質運動區(AP-1，L2)安置雷射探頭(JI-200雷射微循環儀，天津南開大學生產)，待穩定5-10分鐘後開始測試腦血流，記錄給藥前後腦膜血流量的變化。
本試驗觀察指標及指標表達所測結果直接經JI-200軟體處理，腦膜血流量以KHz(千赫茲)表示，腦膜血流量增加百分值[＝(給藥後血流量-給藥前血流量)/給藥前血流量]。
本試驗給藥劑量分別為25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；給藥途徑為尾靜脈給藥；給藥體積為0.05ml/10g小鼠。
本試驗空白對照為等體積生理鹽水，陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康製藥廠生產，批號9811191，京衛藥準字(1996)第157008號，小鼠用量為25mg/kg。
本試驗數據均以Excel軟體處理。
表1 藿香油對正常大鼠腦血流量的作用(x±s)分組劑量 腦血流量(KHz)(mg/kg) 0 1 3 5 10 15(分鐘)對照組 31.32 ± 31.67 ± 31.59 ± 31.45 ± 31.51 ± 31.53±2.71 2.02 2.58 2.69 2.63 2.27川芎嗪 25 30.91 ± 32.66 ± 33.52 ± 33.96 ± 33.32 ± 33.2 ±2.24 2.69 1.84 1.69* 1.99 1.95藿香油 25 31.02 ± 35.44 ± 37.02 ± 37.48 ± 37.38 ± 36.91±2.51 4.67 5.13* 4.08* 3.14* 3.02藿香油 12.5 31.64 ± 34.14 ± 37.44 ± 37.46 ± 36.55 ± 36.32±3.39 3.73 1.98* 2.46* 2.41 1.77藿香油 6.25 33.73 ± 35.31 38.05 38.45 38.4 36.8710.25 ±9.79±9.95±9.10*6±9.51±9.49與同時間對照組相比，P＜0.05。n＝8表2 藿香油對正常大鼠腦血流量增加百分比值(x±s)分組 劑量 腦血流量增加百分比值(％)(mg/kg) 0 135 10 15(分鐘)對照組 0 1.45±0.96±0.45± 0.65±0.78±6.04 2.95 3.00 3.07 1.73川芎嗪 25 0 5.75±8.64± 10.08± 7.93±7.56±2.67 4.20*4.41*3.22*3.89*藿香油 25 0 14.16± 19.34± 20.96± 20.61± 19.09±10.53* 12.78** 10.04** 5.42** 5.56**藿香油 12.5 0 7.98± 19.35± 19.09± 16.12± 15.61±4.80*12.38* 8.95** 7.40*9.36*藿香油 6.25 0 5.31± 13.74± 15.48± 15.18± 10.28±4.74 4.76*7.36** 6.98 5.61*與同時間對照組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8實驗結果顯示，藿香油對小鼠腦膜血流量有明顯增加的作用。一般在給藥後1分鐘即有腦血流升高，並表現出一定的量效關係；表明藿香油對腦血管有直接地擴張作用，對於血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。
動物實驗例2對小鼠腦內NO(一氧化氮)含量的作用觀察本發明藿香油對小鼠腦內NO含量的作用。本發明所用藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配製成所需濃度。試驗動物為雄性昆明種小鼠，非近交系封閉群，體重18-22g；合格證號醫動字01-3001，由中國醫學科學院實驗動物中心提供。實驗室室溫20-22℃，相對溼度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養，每籠8隻，每三日清掃籠舍一次。
取小鼠隨機分為5組，每組8隻，尾靜脈給與不同藥物。給藥後5分鐘脫頸處死小鼠，迅速取出全腦，分離大腦皮質部分，迅速投入液氮中固定。然後轉入-70℃冰箱保存，備測NO。測試時取小鼠大腦皮質，加入生理鹽水冰水浴製備成20％勻漿液(w/v)，12000轉/分鐘離心30分，取上清液0.3ml，分別加入1×10-6mol/L的硫酸奎寧(購自Sigma公司)液3ml，混勻。再加入1mol/L HCl 0.1ml，1.6×10-2mol/L N-乙醯半胱氨酸(購自Sigma公司)0.3ml，搖勻後於850螢光分光光度計測試並記錄螢光強度(激發波長為334nm，發射波長為445nm)。
本試驗NO測試方法為硫酸奎寧法，腦組織蛋白定量方法為雙縮脲法。
觀察指標及指標表達螢光值(f)/g蛋白。
所測結果經Excel軟體處理。
本試驗給藥劑量分別為25mg/kg，12.5mg/kg和6.25mg/kg；給藥途徑為尾靜脈給藥；給藥體積為0.05ml/10g小鼠。
本試驗空白對照為等體積生理鹽水，陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康製藥廠生產，批號9811191。京衛藥準字(1996)第157008號，小鼠用量為25mg/kg。
表3 藿香油對小鼠大腦皮質NO含量的影響(x±s)分組 給藥劑量(mg/kg) NO(f/g蛋白)生理鹽水3.94±1.38川芎嗪255.81±2.01*藿香油258.98±3.04**藿香油12.5 7.27±2.58**藿香油6.25 6.45±2.83**與生理鹽水組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝8實驗結果顯示，藿香油給藥後5分鐘對小鼠大腦皮質NO含量有明顯增加的作用.這一現象與小鼠腦膜血流量的結果有一定的吻合度。由於NO對血管平滑肌收縮有一定的抑制作用，能擴張血管，抑制血管平滑肌痙攣。故本實驗表明藿香油對於血管性痙攣所引起的疾病有較好的緩解作用。
動物實驗例3對大鼠血小板聚集的抑制作用觀察本發明藿香油對大鼠血小板聚集的抑制作用。本發明所用藿香油，批號990418。用時以生理鹽水配製成所需濃度。實驗所用動物為二級Wistar大鼠，雌雄各半，非近交系封閉群，醫動字(95)01-3008，中國醫學科學院實驗動物研究所提供，體重為230-260g。實驗室室溫20-22℃，相對溼度40％～60％，換氣扇通氣，自然光源12h/日，籠養，每籠5隻，每三日清掃籠舍一次。
取大鼠10％烏拉坦(1g/kg)麻醉，腹主動脈採血(3.8％枸櫞酸鈉抗凝)，每分鐘1000轉離心3-5分鐘，分離富含血小板血漿，取富含血小板血漿0.15ml，置B1202血小板聚集儀(北京生化儀器廠生產)的比色池中，分別加入不同濃度的藿香油20ul，1mmol/L ADP(血小板聚集誘導劑，Sigma產品)20ul。觀察並記錄5分鐘內吸光值最大變化數值，以反映血小板聚集程度。每個濃度做3個平行管。
本試驗觀察指標及指標表達所測結果直接經B1202軟體處理，血小板聚集程度以血小板聚集百分率表示。
本試驗藿香油給藥終濃度分別為3.31×10-6g/ml，3.31×10-5g/ml，3.31×10-4g/ml，3.31×10-3g/ml，3.31×10-2g/ml。
本試驗為體外實驗。本試驗空白對照為等體積生理鹽水.陽性藥對照為川芎嗪注射液，40mg/2ml。北京市永康製藥廠生產，批號9811191，京衛藥準字(1996)第157008號。川芎嗪終濃度為3.31×10-2g/ml。
本試驗數據均以Excel軟體處理。
表4 藿香油體外對ADP誘導血小板聚集作用的影響(x±s)分組 藥物終濃度 血小板聚集百分率(g/ml)(％)生理鹽水 70.11±2.06川芎嗪 3.31×10-227.26±3.66**藿香油 3.31×10-231.26±2.70**藿香油 3.31×10-337.92±2.53**藿香油 3.31×10-445.68±2.53**藿香油 3.31×10-557.33±4.08*藿香油 3.31×10-662.49±2.07*與生理鹽水組相比，* P＜0.05，** P＜0.01。n＝3本實驗結果顯示，藿香油體外有較強地抑制ADP誘導血小板聚集的作用，最低有效濃度為3.31×10-6g/ml，提示藿香油具有一定的抗凝血或抑制血栓形成的作用。
權利要求
1.藿香油在製備治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物中的用途。
2.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療頭痛的藥物中的應用。
3.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療偏頭痛的藥物中的應用。
4.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療腦缺血的藥物中的應用。
5.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療血管性神經精神障礙的藥物中的應用。
6.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用。
7.按照權利要求1所述的藿香油的用途，其特徵在於所述的用途是在製備治療心肌供血不足的藥物中的應用。
8.以藿香油為活性成分治療血管痙攣及其由此引起的疾病的藥物。
9.按照權利要求8所述的藥物，其特徵在於所述的藥物是以常規的製劑工藝製備的，在臨床上可以使用的各種不同劑型。
全文摘要
藿香油的新用途，涉及藿香油在製備治療血管痙攣及由此所引起的多種疾病的藥物中的應用。具體的說，本發明所述的藿香油是在製備治療頭痛的藥物中的應用、製備治療偏頭痛的藥物中的應用、製備治療腦缺血的藥物中的應用、製備治療血管性神經精神障礙的藥物中的應用、製備治療腦缺氧疲勞的藥物中的應用以及在製備治療心肌供血不足的藥物中的應用。在治療上述疾病時，以藿香油為活性成分，單獨使用或與其他藥物配合製備成在臨床上可以使用的各種不同劑型的藥物。經藥理研究表明，藿香油對實驗動物腦膜血流量有明顯升高作用，有升高實驗動物腦一氧化氮含量的作用，體外有抑制ADP誘導的血小板聚集活性的作用。
文檔編號A61P9/00GK1442197SQ0312114
公開日2003年9月17日 申請日期2003年3月28日 優先權日2003年3月28日
發明者邢東明, 杜力軍, 丁怡, 王雪莉, 王偉 申請人:清華大學