酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法
2023-06-30 12:00:36
專利名稱：酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法
技術領域：
本發明涉及一種酶及微生物的傳感測量技術中使用的壓電傳感介體的光固定化方法。
壓電石英晶體化學及生物傳感技術是近年發展起來的一種十分有前景的傳感技術，在分析化學、生命科學、生物工程、環境科學和臨床醫學領域有十分廣闊的應用前景。這種傳感檢測技術的核心部分是壓電石英晶體傳感介體的製備，尤其是如何對酶及微生物進行適當固定化。現有的固定化技術最主要的缺陷是酶及微生物活性損失較多、使用壽命短、穩定性、重現性不好。
本發明的目的在於克服現有技術之不足，提供一種使酶及微生物活性損失小，使用壽命長，測量的穩定性、重現性好的酶及微生物壓電傳感介體的紫外光固定化方法。
本發明的方法包括以下步驟(1)特種光固化塗料的製備A.光固化塗料由以下組分及重量百分比組成酶或微生物1～8，丙烯酸環氧酯20～40，丙烯酸聚酯10～20，三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15～25,1,6-己二醇二丙烯酸酯10～15，可由光引發自由基聚合的光引發劑3～5，有機矽附著力促進劑＜1，鹽類成孔劑3～13,聚氧乙烯烷基酚穩定劑0.5～1；B.製備方法如下在室溫條件下，依次加入丙烯酸環氧酯、丙烯酸聚酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂、1,6-己二醇二丙烯酸酯、光引發劑，充分攪拌均勻，然後依次加入鹽類成孔劑，聚氧乙烯烷基酚穩定劑，有機矽附著力促進劑，準備塗布前加入冰箱中保存的酶或微生物菌種，慢速攪拌均勻即得特種光固化塗料，低溫密閉乾燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，根據需要，單面或雙面真空噴塗或化學鍍上惰性金屬銀或金等，機械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗乾淨，乾燥；(3)塗膜將特種光固化塗料，塗在乾燥後的壓電石英晶體表面上，膜厚0.1～1mm；(4)光固定化處理將塗膜用350納米紫外線照射10～30秒固定化。
本發明由於將酶及微生物配入到特種光固化塗料中，並用紫外線固定化，固化速度快，固化後膜附著牢固，耐候性、耐溼性均好，可有效固定酶或微生物，而對其活性影響很小，從而大大降低了酶及微生物的活性損失，使介體使用壽命長，穩定性好，方法簡單。
實施例一(1)特種光固化塗料的製備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環氧酯40克，丙烯酸聚酯20克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15克、1,6-己二醇二丙烯酸酯15克，1-羥基環已基苯基酮光引發劑5克，充分攪拌均勻，然後依次加入醋酸鈉成孔劑3克，聚氧乙烯烷基酚穩定劑0.95克，環氧基矽烷附著力促進劑0.05克，準備塗布前加入冰箱中保存的澱粉酶1克，慢速攪拌均勻即得特種光固化塗料，低溫密閉乾燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，單面真空噴塗銀，機械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗乾淨，乾燥；(3)塗膜將特種光固化塗料，塗在乾燥後的壓電石英晶體表面上，膜厚0.5mm；(4)光固定化處理將塗膜在350納米紫外線照射10秒固定化。
該壓電傳感介體用於澱粉的測定，固化後膜附著牢固，耐候性、耐溼性均好，介體使用壽命長，穩定性好。
實施例二(1)特種光固化塗料的製備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環氧酯37.5克，丙烯酸聚酯15克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂20克、1，6-己二醇二丙烯酸酯10克，1-羥基環己基苯基酮光引發劑5克，充分攪拌均勻，然後依次加入氯化鈉成孔劑6克，聚氧乙烯烷基酚穩定劑1克，環氧基矽烷附著力促進劑0.5克，準備塗布前加入冰箱中保存的微生物菌種5克，慢速攪拌均勻即得特種光固化塗料，低溫密閉乾燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，雙面真空噴塗銀，機械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗乾淨，乾燥；(3)塗膜將特種光固化塗料，塗在乾燥後的壓電石英晶體表面上，膜厚0.6mm；(4)光固定化處理將塗膜在350納米紫外線照射下20秒固定化。
該壓電傳感介體用於微生物的培養，固化後膜附著牢固，耐候性、耐溼性均好，故對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩定性好。
實施例三(1)特種光固化塗料的製備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環氧酯20克，丙烯酸聚酯14克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂25克、1,6-己二醇二丙烯酸酯15克，光引發劑3克，充分攪拌均勻，然後依次加入硫酸鈉成孔劑13克，穩定劑1克，附著力促進劑1克，準備塗布前加入冰箱中保存的蛋白酶8克，慢速攪拌均勻即得特種光固化塗料，低溫密閉乾燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，單面真空噴塗銀，機械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗乾淨，乾燥；(3)塗膜將特種光固化塗料，塗在乾燥後的壓電石英晶體表面上，膜厚0.8mm；(4)光固定化處理將塗膜在350納米紫外線照射下10秒固定化。
該壓電傳感介體用於蛋白質的測定，固化後膜附著牢固，耐候性、耐溼性均好，故對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩定性好。
權利要求
1.本發明為酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法，其特徵在於包括以下步驟(1)特種光固化塗料的製備A.光固化塗料由以下組分及重量百分比組成酶或微生物1～8，丙烯酸環氧酯20～40，丙烯酸聚酯10～20，三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15～25,1,6-己二醇二丙烯酸酯10～15，可由光引發自由基聚合的光引發劑3～5，有機矽附著力促進劑＜1，無機鹽類成孔劑3～13，聚氧乙烯烷基酚穩定劑0.5～1；B.製備方法如下在室溫條件下，依次加入丙烯酸環氧酯、丙烯酸聚酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂、1,6-己二醇二丙烯酸酯、光引發劑，充分攪拌均勻，然後依次加入鹽類成孔劑，聚氧乙烯烷基酚穩定劑，有機矽附著力促進劑，準備塗布前加入冰箱中保存的酶或微生物菌種，慢速攪拌均勻即得特種光固化塗料，低溫密閉乾燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，根據需要，單面或雙面真空噴塗或化學鍍上惰性金屬銀或金等，機械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗乾淨，乾燥；(3)塗膜將特種光固化塗料，塗在乾燥後的壓電石英晶體表面上，膜厚0.1～1mm；(4)光固定化處理將塗膜用350納米紫外線照射10～30秒固定化。
全文摘要
本發明公開了酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法，是以壓電石英晶體為載體，在其上塗布包含酶及微生物的特種光固化塗料，塗布後經紫外光固化即得光固定化酶及微生物壓電傳感介體。本發明能有效固定酶或微生物，對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩定性好。
文檔編號G01N27/26GK1317574SQ0110683
公開日2001年10月17日 申請日期2001年1月15日 優先權日2001年1月15日
發明者魏萬之 申請人:湖南大學