一類葛根素衍生物的合成方法

2023-06-16 18:41:01 2

專利名稱：：一類葛根素衍生物的合成方法
技術領域：
：本發明涉及化合物的合成領域，尤其涉及葛根素衍生物的合成。
背景技術：
：葛根素是由豆科植物野葛(Puerarialobata(wild.)0hwi)或甘葛藤(PuerariathomsoniiBenth.)的乾燥根中提取出的一種黃酮苷，化學名為4'，7-二羥基一8—D—葡萄糖基異黃酮。藥理實驗表明葛根素具有降低血管阻力，改善腦及冠脈循環，降低心肌耗氧量等作用，對視網膜栓塞、心肌梗塞等疾病有良好的防治作用。但由於其異黃酮結構水溶性和脂溶性都較差，生物利用度低，限制了其生物活性的發揮和臨床應用。因此，尋求合適的方法提高葛根素的脂溶性和水溶性，對提高其生物利用度，增強藥理活性具有重要意義。大部分藥物的療效是由藥物分子與生物受體分子間的相互作用而產生的，因此，藥物分子的大小、形狀、空間結構及其溶解性能對藥效影響很大。所以除了設計新劑型外，還可以通過結構修飾改變其空間構型，以改善葛根素的水溶性和脂溶性，從而增強葛根素的藥理活性和藥效。目前關於葛根素結構改造與修飾的研究尚有報導，1999年楊若林等分別選擇了對葛根素脂溶性、水溶性有較大影響的基團，用醚化及醯化的方法對葛根素的酚羥基和糖C-6"醇羥基進行了修飾，得到了10個葛根素衍生物。為了進一步研究羥乙基化葛根素的生理活性，2002年候殿傑等用環氧乙垸法對葛根素的酚羥基進行了乙醯基化，隨後更多的學者進行了類似的研究。由上可知，葛根素的結構修飾目前主要集中在酚羥基和糖C一6〃醇羥基，但反應過程中結合或屏蔽了葛根素的主要官能團—酚羥基，從而降低了物質本身的生物活性。因此，尋求合適的化學修飾方法，得到生理活性更強的新一代葛根素具有重要的意義。
發明內容本發明目的為提供一種成本較低，操作簡單，水溶性和生物學活性高，相對產率較高的一類葛根素衍生物的合成方法。實現上述發明目的的技術方案如下仲胺先和甲醛發生Mannich反應生成Mannich鹼，Mannich鹼再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成葛根素衍生物。本發明所用的仲胺為鹽酸二甲胺或二乙胺或嗎啉或N—甲基哌嗪或六氫吡啶或四氫吡咯。本發明具有以下有益效果1、本發明的葛根素衍生物的合成方法不但避免了葛根素的主要官能團一酚羥基被結合或被屏蔽，也為異黃酮類化合物的結構修飾提供了一種新的方法。2、採用本發明的合成方法製備的6種葛根素衍生物經過藥理學試驗，表明其對兔眼內組織(脈絡膜、視網膜、睫狀體、虹膜)的血流量有明顯的促進作用。3、本發明的葛根素衍生物的合成方法操作簡單，成本低廉，產率高，易於工業化應用。圖1為3'—亞甲基一二甲胺一葛根素的紅外光譜圖圖2為3'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素的紅外光譜圖圖3為3'—亞甲基一嗎啉一葛根素的紅外光譜圖圖4為3'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素的紅外光譜5為3'—亞甲基一六氫吡啶-葛根素的紅外光譜圖圖6為3'—亞甲基一四氫吡咯-葛根素的紅外光譜圖具體實施例方式實施例13'—亞甲基一二甲胺一葛根素的合成鹽酸二甲胺先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一二亞胺，亞甲基一二亞胺再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一二甲胺一葛根素。(1)二甲胺水溶液的配製精密稱取30g鹽酸二甲胺(CH3)2NH,HCL，然後加入一定量的蒸餾水配製成50-70%的水溶液；(2)雙-(二甲胺)甲烷的合成在冰浴冷卻下，加入5-25ml37%-40%的甲醛水溶液於100mL的三口圓底燒瓶中，在攪拌的情況下，加入0.25-0.45mo1二甲胺水溶液(用滴液漏鬥滴加，維持反應溫度低於50°C)，滴加完畢，在室溫下攪拌15-45分鐘，然後加入固體NaOH至溶液形成兩相，分出上層，用固體氫氧化鈉乾燥，放置過濾，常壓蒸餾，收集83'C的餾分，其合成路線如下3(CH3》MH-CH3NCH3NCH3(3)3'—亞甲基一二甲胺一葛根素的合成精確稱取0.1-0.25g葛根素精品於lOOmL三口圓底燒瓶中，加入5_16ml無水吡啶使之溶解，用滴液漏鬥滴加0.1-0.25g雙-(二甲胺)甲烷，加熱回流，TLC跟蹤反應，至反應完全約需2-6小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經矽膠柱分離(CH3C1—CH30H，4:1)，得到固體結晶(66mg，收率45%)。合成路線如下formulaseeoriginaldocumentpage83'—亞甲基一二甲胺一葛根素的結構鑑定表13'—亞甲基一二甲胺一葛根素IR、1HNMR圖譜數據及結構式tableseeoriginaldocumentpage9該化合物的IRvmax(KBr)cm—1:3250—3450間的寬帶(3385)是由氫鍵締合的羥基的伸縮振動引起；1709處的強吸收峰是分子中存在的0=0的明顯例證；2921為飽和C-H伸縮振動；1600，1533,1512，1442是苯環的骨架振動引起的典型吸收;1386，1276，1111表明分子中存在C一0"C結構。^應R(CD30D-d4，400MHz，TMS內標)對照葛根素精品和該化合物的^NMR圖譜和數據，發現二者區別主要是在該化合物^NMR圖譜峰值2.662.50ppm處多一個四重峰，其S值為2.59，6H，為-CH廠上的質子信號；在3.94ppm有一個單峰，S值為3.94，2H，為Ar-CH2上的質子信號。在S為6.88處只有1H，說明葛根素3'或5'位的質子被取代。因此，該化合物'HNMR的結果如下S:8.196(1H，s;C2-H)，8.027(1H，d;C5-H)，7.37(2H，d,C2.,6.-H)，6.951(1H，d，C6-H)，6.88(1H，d，C5.-H)，5.07(1H，d，10Hz;Cr-H)，3.94(2H，s;Ar-CH2)，2.59(6H，q，-CH3-)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'—亞甲基一二甲胺一葛根素(結構見表1)。實施例23'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素的合成二乙胺先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一二乙胺，亞甲基一二乙胺再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素。(1)雙一(二乙胺)甲垸的合成在三口圓底燒瓶中，加入36%—40%的甲醛水溶液50-85mL,在冰浴冷卻的情況下滴加80-140g二乙胺，維持反應溫度在15°C—35°C，滴加完畢，室溫反應2-6小時，溶液出現分層現象，上層為有機層，下層為水層.將溶液移至分液漏鬥，分出上層有機層，用無水硫酸乾燥，放置，過濾，然後進行常壓蒸餾，收集158'C—16(TC的餾分；其合成路線如下2CH3CH2NH—脅纖訓。-i^CH3CH2NCH2NCH2CH3(2)3'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素的合成精確稱取0.5-1.4g葛根素精品加入100mL裝有回流冷凝管的三口圓底燒瓶中，加入5-15mL無水吡啶使之溶解，然後加入0.卜0.25g雙一(二乙胺)甲烷，加熱回流，TLC跟蹤反應，反應約需4-8小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經矽膠柱分離(CH3C1—CH30H—H20，95:40:1)，得到深紅色的固體結晶(208mg，收率25%)。其合成路線如下3'，b'業甲垂一一乙妝-曷很茶的結^1籤疋表23'，5'—亞甲基一二乙胺-葛根素工R、力NMR圖譜數據及結構式formulaseeoriginaldocumentpage10該化合物的IRvmax(KBr)cnT1:3250—3400或3380寬帶(一OH)，2970(C-H)，1709(C=0)，1623，1460，1383(苯環)，1270，1183，1075(C-0-C)。'HNMR(CD30D-d4，400MHz，TMS內標)對照葛根素精品(見附圖13)和該化合物'HNMR圖譜和數據(見附圖15，表2)，發現二者區別主要是在3.903.93ppm有一尖銳單峰，為Ar—CH2上的質子信號；在2.7532.702ppm有一四重峰，8H，為一NCH廠上的質子信號；在1.3571.252ppm有一三重峰，12H，為-CH3上的質子信號；在7.16.5ppra沒有C3.,5,H的特徵峰出現，提示葛根素3'或5'位質子同時被取代。因此，該化合物'HNMR的分析結果為S:8.3(1H，s;C2-H)，7.896(m，s,C5-H),7.28(2H，d，C2,,6.—H)，7.23(1H，d，J=9Hz;C6—H)，5.07(1H，d，10Hz;d,'-H)，3.905(4H，s，Ar—CH2)，2.72(8H，q，一跳一)，1.25(12H,t;2-CH3)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'，5'—亞甲基一二乙胺-葛根素(結構見表2)。實施例33'—亞甲基一嗎啉一葛根素的合成嗎啉先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一嗎啉，亞甲基一嗎啉再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一嗎啉一葛根素。(1)4一4'一亞甲基雙嗎啉的合成在三口圓底燒瓶中加入20-50g嗎啉，用滴液漏鬥緩慢滴加10-25g36%-40%的甲醛水溶液，同時水浴冷卻以控制反應溫度不超過5(TC，滴加完畢，室溫攪拌0.5-3.5小時，放置，溶液出現分層現象，上層為有機物，下層為水，移至分液漏鬥分出上層，加無水碳酸鉀乾燥，過濾，然後減壓蒸熘，收集9CTC一92'C的餾分，無色；其合成路線如下imageseeoriginaldocumentpage11(2)3'—亞甲基一嗎啉一葛根素的合成將0.5-1.2g葛根素精品加入至100mL三口圓底燒瓶中，加入10-30mL無水吡啶使之溶解，用滴液漏鬥緩慢滴加0.25-0.55g4—4'一亞甲基雙嗎啉，加熱攪拌，TLC跟蹤反應，約需5-12小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經矽膠柱分離(CH3C1—CH30H—H20，95:30:4)，得到深紅色的固體結晶(124mg，收率15%)。其合成路線如下imageseeoriginaldocumentpage11頁3'—亞甲基一嗎啉一葛根素的結構鑑定表33'—亞甲基一嗎啉一葛根素IR、'H麵R圖譜數據及結構式16263385111414451264107228581300863910234847183279970965336606275188,20(1H，s)7.98(1H,d)7.18(2H，d)6.921(1H，d)6.85(1H,d)5.07(1H，d)4.04(2H，d)3.823.89(8H,t)結構式該化合物IRvmax(KBr)c—、3250—3400或3385寬帶(一0H)，2858(C-H)，1709(C=0)，1626，1500，1445(苯環)，1264，1114，1072(C-0-C)'HNMR(CD30D-d4，400MHz，TMS內標)對照葛根素精品和該化合物的'HNMR圖譜和數據，發現二者區別主要是在4.04ppm有一個單峰，2H，為Ar-CH2—上的質子信號；在3.823.89卯m有一個三重峰，S為3.67，8H，為-恥恥1120120上的質子信號；在S值為6.88處只有1H，說明葛根素3'或5'位的質子被取代。因此，該化合物'H醒R的結果如下:S:8.20(1H，s;C廠H)，7.98(1H，d，J=9Hz;C5-H)，7.18(2H，d，C2.,6'-H)，6.921(1H，d，QrH),6.85(1H，d,C5-H)，5.07(1H，d，d.'-H)，4.04(2H，d;Ar-CH廠)，3.67(8H，t，-NCH線CH線O)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'或5'—亞甲基一嗎啉一葛根素(結構見表3)。實施例43'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素的合成N—甲基哌嗪先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一N—甲基哌嗪，亞甲基一N—甲基哌嗪再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素。(1)4—4'一亞甲基雙N—甲基哌嗪的合成在三口圓底燒瓶中加入36X甲醛水溶液l-5mL,在冰浴冷卻下用滴液漏鬥滴加N—甲基哌嗪3-10g(0.06mo1)，維持反應溫度低於5CTC，滴加完畢，室溫攪拌半小時，靜置，溶液不分層，黃色的粘稠狀液體，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸餾，收集10(TC—102t:的餾分；其合成路線如下m鵬,O僕(2)3'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素的合成精密稱取0.2-0.6g葛根素精品加入三口圓底燒瓶中，加入5-15mL吡啶使之溶解，溶液顯黃色，精確稱取0.2-0.8g4—4'一亞甲基雙N—甲基哌嗪用滴液漏鬥緩慢加入三口圓底燒瓶中，加熱回流，TLC跟蹤反應，約需4-ll小時，所得反應液用薄層層析板進行分離和製備(CH3C1—CH30H，2:1),得到淡黃色的晶體G64nig，收率40%)。其合成路線如下:3'—亞甲基一N—甲基哌嗪-葛根素的結構鑑定表43'—亞甲基一N—甲基哌嗪-葛根素IR、加MR圖譜數據及結構式IR(cm-1)^NM財S)結構式162512811441337713871080l柳2924155016598.163(IH,,s)8.0(1H，d)7.30(2H，d)6.94(1H,d)6.80(1H,d)5.07"H,d)3.742(2H,s)2.4752.309(IIH，t)早該化合物的IRvmax(KBr)era—1:3250—3400或3377寬帶(一0H)，2924(C_H)，1659(C=0)，1625，1550,1499，1441，1387(苯環)，1281，1080(C-0-C)'H醒R(CD30D-d4，400MHz，TMS內標)對照葛根素精品(見附圖13)和該化合物的'HNMR圖譜和數據，發現二者區別主要是在3.742ppm有一尖銳單峰，2H，為Ar-CH2上的質子信號；在2.4752.309ppm有一三重峰，S值為2.359,IIH，為-N(CH2)4N-CH3上的質子信號；在S值為6.88處只有1H，說明葛根素3'或5'位的質子被取代。因此，該化合物力NMR的結果如下S:8.163(1H，s;C2-H)，8.0(1H，d;C「H)，7.30(2H，d，C2',6-H)，6.94(1H，d，C6-H)，6.80(1H，d，C5-H)，5.07(1H，d，C"-H)，3.742(2H，s，Ar-CH2)，2.359(IIH，t，-N(CH2)4N-CH3)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'—亞甲基一N—甲基哌嗪-葛根素(結構見表4)。實施例53一一亞甲基一六氫吡啶-葛根素的合成六氫吡啶先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一六氫吡啶，亞甲基一六氫吡啶再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一六氫吡啶-葛根素。(1)雙一(六氫吡啶)甲烷的合成在三口圓底燒瓶中加入37%—40%的甲醛溶液5-15mL，在冰浴冷卻的情況下，用滴液漏鬥滴加15-30mL六氫吡啶，維持反應溫度在25-55'C左右，同時用磁力攪拌器不停的攪拌，滴加完畢後，室溫繼續攪拌1-4小時，靜置，溶液出現分層現象，上層為淡黃色的有機層，下層為水，移至分液漏鬥，分出上層，加氫氧化鈉乾燥，過濾，減壓蒸餾，收集85'C—90'C的產物；其合成路線如下(2)3'—亞甲基一六氫吡啶—葛根素的合成精確稱取0.2-0.8g葛根素精品與三口圓底燒瓶中，力卩6-15mL無水吡唆溶解，溶液顯黃色，用滴液漏鬥緩慢滴加0.2-0.8g雙一(六氫吡啶)甲垸，加熱攪拌回流，TLC跟蹤反應，反應約需4-12小時，所得反應液用薄層層析板進行分離和製備(CH3C1—CH30H，2:1)，得到淡黃色的晶體(106mg，收率26%)。其合成路線如下六氫吡啶-葛根素的結構鑑定表53'—亞甲基一六氫吡啶-葛根素IR、力醒R圖譜數據及結構式tableseeoriginaldocumentpage15該化合物IRvmax(KBr)cm—1:3250—3400或3375寬帶(一OH)，2929(C_H)，1709(C=0),1626，1532，1550，1499，1441(苯環)，1280，1064(C-O-C)'HNMR(CD30D-d4，400腿z，TMS內標)對照葛根素精品和該化合物的WNMR圖譜和數據，發現二者區別主,要是在3.84ppm有一單峰，2H，Ar-CH2-上的質子信號；在2.719有一單峰，為一NCH2—上的質子信號；在1.6841.672卯m有一三重峰S值為1.67，2H，為一(^2(^2012-上的質子信號；在S值為6.88ppm處只有lH，說明葛根素3'或5'位的質子被取代。因此，該化合物'HNMR的結果如下S:8.144(1H，s;C廠H)，7.97(1H,d，C5-H)，7.30(2H，d，C2.,6'-H)，6.91(1H，d，C6—H)，6.81(1H，d，C5—H)，5.07(1H,d，d—H)，3.84(1H，s，Ar-CH2-)，2.72(4H，s，一NCH2—)，1.68(6H，t，一CH2CH2CH2-)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'—亞甲基一六氫吡啶-葛根素(結構見表5)。實施例63'—亞甲基一四氫吡咯-葛根素的合成四氫吡咯先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一四氫吡咯，亞甲基一四氫吡咯再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一四氫吡咯-葛根素。(1)雙一(四氫吡咯)甲垸的合成在三口圓底燒瓶中加入37%—40%的甲醛溶液5-15mL，在冰浴冷卻的情況下，用分液漏鬥滴加10-30niL四氫吡咯，溫度一直保持在5(TC以下，同時用磁力攪拌器攪拌，滴加完畢，室溫繼續攪拌0.5-3.5小時，靜置，溶液不分層，深紅色的液體，加氫氧化鈉乾燥，放置，過濾，減壓蒸餾，收集10(TC—105'C的餾分；其合成路線如下1:34—7(IH,.cl)30(2H,d)691('1H，d)681(、1H，d)507(m，cl)384(1H，s)272(4H，1腦1.672構式HO-(2)3'—亞甲基一四氫吡咯一葛根素的合成formulaseeoriginaldocumentpage15精確稱取0.5-1.5g葛根素精品與三口圓底燒瓶中，加10-30mL無水吡啶溶解，溶液顯黃色，用滴液漏鬥滴加0.15-0.50g雙一(四氫吡咯)甲烷，加熱攪拌回流，TLC跟蹤反應，反應約需2-8小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經矽膠柱分離(CH3C1—CH30H—H20，95:30:3)，得到深紅色的固體結晶(83mg，收率10%)。其合成路線如下3'—亞甲基一四氫吡咯一葛根素的結構鑑定表63'—亞甲基一四氫吡咯一葛根素IR、'HN服圖譜數據及結構式IR(cm-1)iHNMR(g)結構式112334041625127914411386155015126151531798170822821724371723488.249(1H,s)8.05(1H,d)7.42(2H，d)6.98(1H,d)&95(1H,d)5.07(1H,d)4.279(2H，s)2.0521.鵬(4H,t)1.3131.280(4H,t)羊該化合物的IRvmax(KBr)cm—S3250—3400或3404寬帶(一0H)，1708(C=0)，1625，1512，1550，1531，1441,1386(苯環)，1279，1123(C-0-C)。'HNMR(CD30D-d4，400MHz，TMS內標)對照葛根素精品和該化合物的醒R圖譜和數據，發現二者區別主要是在4.27卯m有一單峰，2H，Ar-CH2—上的質子信號；在2.0521.896ppra有一三重峰，S值為1.985，4H，為一NCH2-上的質子信號；，在1.3131.280ppm有一三重峰，S值為1.296，4H，為一CH2CH2-上的質子信號；在6.966.94處只有1H，說明葛根素3'或5'位的質子被取代。因此，該化合物'HNMR的結果如下S:8.249(1H，s;C2-H)，8.05(1H，d;C5-H)，7.43(2H，d，C2',6'-H)，6.98(m，d，C6-H)，6.95(1H，d,C5-H)，5.07(1H，d，C「-H),4.279(2H，s，Ar-CH2—)，1.985(4H，t，一NCH廠)，1,296(4H，t，一CH,CH廣)。綜合以上波譜特徵，可判斷該化合物為3'—亞甲基一四氫吡咯一葛根素(結構見表6)。實施例l一6中6種葛根素衍生物藥效學試驗結果1.實驗動物分組及模型製作健康紐西蘭兔45隻，雌雄不限，體重2.03.7(2.42土0.41)kg，將其隨機分為6組。每隻兔子耳靜脈注射lg/ml的葛根素衍生物0.ljil，禁食。給藥8-12h後3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)經耳緣靜脈注入，麻醉後取平臥位，經右頸動脈插管至左心室，導管接生理記錄儀，觀察到明顯的心室波型時固定心導管以用於注射微球。模型建立完畢後將等量生理鹽水通過靜脈回輸入動物體內以保證血容量恆定。2.主要試劑及來源彩色微球(DyeTrakMicrospheres):TritonTechnologyInc，SanDiego,USA;曲拉通XIOO(TritonX100);吐溫80(Tween80);無水乙醇；氫氧化鉀；37%鹽酸；乙氧乙酸乙酯(CellosolveAcetate)等。3.主要儀器八道生理記錄儀PowerLab/8SP，ADInstruments;離心機802型，上海紅彬器械廠；離心機Megafugel.O，Heraeus;電熱鼓風乾燥箱..銀河，重慶銀河機械公司；全波長酶標儀MultiskanSpectrum,1500型，芬蘭。4.血流量檢測於給藥8-12h內將定量彩色微球按黃(yellow)、紅(persimmon)、橘(orange)、檸檬(lemon)色的順序注入左心室。注射時將事先配好的微球溶液充分混勻，抽取定量溶液，通過心導管快速注入左心室，並用lml0.05y。吐溫80/生理鹽水溶液沖管。實驗結束後，取部分胃組織放入離心管內並精確稱重，通過強鹼溶解，反覆離心、清洗後，最後回收到乾燥的微球。使用酸化乙氧乙酸乙酯萃取微球表面的染料，通過全波長酶標儀測定各組樣品在670、545、495、450、390nm波長下的吸光度值。將所得實驗數據輸入TritonTechnology公司提供的軟體，計算出兔眼球血流量。用彩色微球法(Coloredmicrospheres)研究了實施例l一6中6種葛根素衍生物1，2，3，4，5，6對兔眼內組織(脈絡膜、視網膜、睫狀體、虹膜)血流量的影響(見表7)，結果表明化合物4、5、6對眼內各組織的血流量有顯著的增加作用(以葛根素為陽性對照)。表7葛根素及其衍生物對兔子脈絡膜等血流量的影響(x士s，n=6)血流量(y1/min)脈絡膜視網膜睫狀體虹膜對照組1.71±0.510.03±0.020.83±0.310.47±0.14衍生物14.47±0.640.14±0.041.89±0.641.52±0.2123.90±0.460.11±0.032.14±0.731.06±0.2233.57±0.890.ll土O.051.38±0.240.70±0.1647.26±1.200.17±0.023.16±0.671.41±0.3056.18±0.740.11±0.032.20±0.441.41±0.3267.98±1.310.18±0.043,89±0.541.54±0.36葛根素3.89±0.800.06±0.020.68±0.510.71±0.2權利要求1、一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為仲胺先和甲醛發生Mannich反應生成Mannich鹼，Mannich鹼再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成葛根素衍生物。2、根據權利要求1所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為所用的仲胺為鹽酸二甲胺或二乙胺或嗎啉或N—甲基哌嗪或六氫吡啶或四氫吡咯。3、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為鹽酸二甲胺先和甲醛發生Marmich反應生成亞甲基一二亞胺，亞甲基一二亞胺再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一二甲胺一葛根素。4、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為二乙胺先和甲醛發生Marmich反應生成亞甲基一二乙胺，亞甲基一二乙胺再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素。5、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為嗎啉先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一嗎啉，亞甲基一嗎啉再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'一亞甲基一嗎啉一葛根素。6、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為N—甲基哌嗪先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一N—甲基哌嗪，亞甲基一N—甲基哌嗪再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素。7、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為六氫吡啶先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一六氫吡啶，亞甲基一六氫吡啶再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一六氫吡啶-葛根素。8、根據權利要求2所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為四氫吡咯先和甲醛發生Mannich反應生成亞甲基一四氫吡咯，亞甲基一四氫吡咯再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成3'—亞甲基一四氫吡咯-葛根素。9、根據權利要求3所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)二甲胺水溶液的配製精密稱取30g鹽酸二甲胺，然後加入一定量的蒸餾水配製成50-70%的水溶液；(2)雙-(二甲胺)甲垸的合成在冰浴冷卻下，加入5-25ml37%-40%的甲醛水溶液於lOOmL的三口圓底燒瓶中，在攪拌的情況下，用滴液漏鬥滴加0.25-0.45mo1二甲胺水溶液，維持反應溫度低於5(TC，滴加完畢，在室溫下攪拌15-45分鐘，然後加入固體NaOH至溶液形成兩相，分出上層，用固體氫氧化鈉乾燥，放置過濾，常壓蒸餾，收集83'C的餾分；(3)3'—亞甲基一二甲胺一葛根素的合成精確稱取0.1-0.25g葛根素精品於100mL三口圓底燒瓶中，加入5-16ml無水吡啶使之溶解，用滴液漏鬥滴加0.1-0.25g雙-(二甲胺)甲垸，加熱回流，TLC跟蹤反應，至反應完全約需2-6小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經CH3Cl—CH30H為2-4:1矽膠柱分離，得到固體結晶。10、根據權利要求4所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)雙一(二乙胺)甲烷的合成在三口圓底燒瓶中，加入36%—40%的甲醛水溶液50-85mL，在冰浴冷卻的情況下滴加80-140g二乙胺，維持反應溫度在15'C—35'C，滴加完畢，室溫反應2-6小時，溶液出現分層現象，上層為有機層，下層為水層.將溶液移至分液漏鬥，分出上層有機層，用無水硫酸乾燥，放置，過濾，然後進行常壓蒸餾，收集158'C—16(TC的餾分；(2)3'，5'—亞甲基一二乙胺一葛根素的合成精確稱取0.5-1.4g葛根素精品加入100mL裝有回流冷凝管的三口圓底燒瓶中，加入5-15mL無水吡啶使之溶解，然後加入0.卜0.25g雙一(二乙胺)甲烷，加熱回流，薄層層析法跟蹤反應，反應約需4-8小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經CH3C1—CH30H—仏0為75-95:40:1矽膠柱分離，得到深紅色的固體結晶。11、根據權利要求5所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)4一4'一亞甲基雙嗎啉的合成在三口圓底燒瓶中加入20-50g嗎啉，用滴液漏鬥緩慢滴加10-25g36%-40%的甲醛水溶液，同時水浴冷卻以控制反應溫度不超過5(TC，滴加完畢，室溫攪拌0.5-3.5小時，放置，溶液出現分層現象，上層為有機物，下層為水，移至分液漏鬥分出上層，加無水碳酸鉀乾燥，過濾，然後減壓蒸餾，收集9CTC一92'C的餾分，無色；(2)3'—亞甲基一嗎啉一葛根素的合成將0.5-1.2g葛根素精品加入至100mL三口圓底燒瓶中，加入10-30mL無水吡啶使之溶解，用滴液漏鬥緩慢滴加0.25-0.55g4_4'—亞甲基雙嗎啉，加熱攪拌，薄層層析法跟蹤反應，約需5-12小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經CH3C1—CH30H—H20為95:30:4矽膠柱分離，得到深紅色的固體結晶。12、根據權利要求6所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)4一4'一亞甲基雙N—甲基哌嗪的合成在三口圓底燒瓶中加入36X甲醛水溶液l-5mL，在冰浴冷卻下用滴液漏鬥滴加N—甲基哌嗪3-10g，維持反應溫度低於5(TC，滴加完畢，室溫攪拌半小時，靜置，溶液不分層，黃色的粘稠狀液體，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，減壓蒸餾，收集10(TC—102i:的餾分；(2)3'—亞甲基一N—甲基哌嗪一葛根素的合成精密稱取0.2-0.6g葛根素精品加入三口圓底燒瓶中，加入5-15mL吡啶使之溶解，溶液顯黃色，精確稱取0.2-0.8g4—4'一亞甲基雙N—甲基哌嗪用滴液漏鬥緩慢加入三口圓底燒瓶中，加熱回流，TLC跟蹤反應，約需4-11小時，所得反應液用CH3C1—CH30H為2:1薄層層析板進行分離和製備，得到淡黃色的晶體。13、根據權利要求7所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)雙一(六氫吡啶)甲烷的合成在三口圓底燒瓶中加入37%—40%的甲醛溶液5-15mL，在冰浴冷卻的情況下，用滴液漏鬥滴加15-30mL六氫吡啶，維持反應溫度在25-55'C左右，同時用磁力攪拌器不停的攪拌，滴加完畢後，室溫繼續攪拌l-4小時，靜置，溶液出現分層現象，上層為淡黃色的有機層，下層為水，移至分液漏鬥，分出上層，加氫氧化鈉乾燥，過濾，減壓蒸餾，收集85。C一90'C的產物；(2)3'—亞甲基一六氫吡啶一葛根素的合成精確稱取0.2-0.8g葛根素精品與三口圓底燒瓶中，加6-15mL無水吡啶溶解，溶液顯黃色，用滴液漏鬥緩慢滴加0.2-0.8g雙一(六氫吡啶)甲垸，加熱攪拌回流，TLC跟蹤反應，反應約需4-12小時，所得反應液用CH3C1—CH30H為0.5-2:1薄層層析板進行分離和製備，得到淡黃色的晶體。14、根據權利要求8所述的一類葛根素衍生物的合成方法，其特徵為合成步驟如下(1)雙一(四氫吡咯)甲垸的合成在三口圓底燒瓶中加入37%—40%的甲醛溶液5-15mL，在冰浴冷卻的情況下，用分液漏鬥滴加10-30mL四氫吡咯，溫度一直保持在5(TC以下，同時用磁力攪拌器攪拌，滴加完畢，室溫繼續攪拌0.5-3.5小時，靜置，溶液不分層，深紅色的液體，加氫氧化鈉乾燥，放置，過濾，減壓蒸熘，收集10(TC—105'C的餾分；(2)3'—亞甲基一四氫吡咯一葛根素的合成精確稱取0.5-1.5g葛根素精品與三口圓底燒瓶中，加10-30mL無水吡啶溶解，溶液顯黃色，用滴液漏鬥滴加0.15-0.50g雙一(四氫吡咯)甲烷，加熱攪拌回流，TLC跟蹤反應，反應約需2-8小時，停止反應後減壓蒸除溶劑，所得產物經CH3C1—CH30H—H20為75-95:30:3矽膠柱分離，得到深紅色的固體結晶。全文摘要本發明為一類葛根素衍生物的合成方法，涉及化合物的合成領域。目前關於葛根素結構改造與修飾中結合或屏蔽了葛根素的主要官能團-酚羥基，降低了物質本身的生物活性。本發明利用仲胺先和甲醛發生Mannich反應生成Mannich鹼，Mannich鹼再和葛根素酚羥基鄰位發生縮合反應生成葛根素衍生物。本發明不但避免了葛根素的主要官能團-酚羥基被結合或被屏蔽，也為異黃酮類化合物的結構修飾提供了一種新的方法。文檔編號C07H17/07GK101591370SQ20081009746公開日2009年12月2日申請日期2008年5月27日優先權日2008年5月27日發明者宇劉,華蘭英,尚若峰,梁劍平,王學紅,王曙陽,郭延生,郭志廷,郭文柱申請人:中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所