一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑的製作方法
2023-06-16 03:33:01 5
專利名稱：一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種滴鼻劑，尤其是涉及一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑。
背景技術：
辛夷揮髮油含有多種成分，其中除了含有主要有效成分桉葉素外，還含有α-蒎烯、芳樟醇，香葉醇，α-松油醇、耗牛兒醇，金合歡醇、丁香油酚，香豆素類，木脂素類等成分。辛夷性味辛、溫，具有發散風寒，通鼻竅的功效。辛夷花的提取精油-辛夷揮髮油對過敏性鼻炎治療的靶點較多，可以通過抗組胺，抗過敏，抗炎和對肥大細胞的保護作用等多個環節而對過敏性鼻炎發生影響，對過敏性鼻炎的治療是幾種機理的協同作用，從而可以獲得較好的治療效果。
脂質體是一個描述由化學和物理性質變化範圍很寬的一些化合物的不同排列術語。它與膠束、微乳液、液晶、單分子膜、多分子膜、主客體系等統稱為「分子有序組合體」，脂質體實際上是一種兩親性分子在水中能自發形成由雙分子膜包裹的球狀小完全封閉的囊的膜材料。它可以將水溶性或者脂溶性藥物都可以製成包封率較高的脂質體，藥物包封在這種納米級微粒具有類細胞結構，從而達到減小毒性、緩釋、持續療效等效果，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。
由於脂質體易製備，具有很好的生物適應性和低毒性，所以近年來被廣泛地用作生物模型和藥物載體。脂質體包裹藥物為物理過程，不改變藥物分子結構，當藥物被包裹後可降低藥物毒性，減小藥物使用量，具有緩釋和控釋作用，而且各種分子大小的藥物都可被包裹。可製備特殊性能的脂質體，如免疫脂質體、各種條件敏感性脂質體進行靶向給藥，提高藥物效果。
脂質體的主要原料磷脂是脂質體雙分子膜的主要構成材料，其中卵磷脂是構成人體細胞膜的主要成份，是保持細胞正常形態和功能的生命基礎物質之一。脂質體與人體的相容性好，在人體內被酶分解後產物完全無毒性。脂質體的直徑一般在25-1000nm範圍，根據脂質體形態結構不同，主要結構有兩種單層脂質體和多層脂質體。單層脂質體組成脂質體只有單層分子膜，多層脂質體有多層單分子膜組成。單層脂質體又分為小單層脂質體、中單層脂質體和大單層脂質體三種。
脂質體的在藥物包封材料方面已經引起了科學界很大的興趣。在脂質體鼻腔給藥研究中，國內已有人開展這方面的研究，董澤民[(董澤民賴氨匹林脂質體鼻腔給藥的研究[J]中國醫藥工業雜誌1995，26(5)199-202)]用凍融法製備了重建型賴胺匹林脂質體，平均粒徑為1.29μm。家兔20mg/kg連續鼻腔給藥20天，對鼻黏膜無損害。
中華人民共和國專利公開號為1200668的G格雷戈裡埃蒂斯等發明了一種包含水不溶性或不溶解的顆粒性物質的形成直徑0.1μm至50μm具有單層或多層結構的脂質體。
中華人民共和國專利公開號為1446534介紹了一種中藥生物鹼類脂質體及其製劑，它能夠提高有效血藥濃度。
中華人民共和國專利公開號為1080523介紹了一種鼻腔給藥的緩釋劑型，是用中空的海綿狀載體吸附藥物與輔料的混合液，經乾燥處理後而製成。
目前，國內外還沒有關於辛夷揮髮油脂質體的專利報導。現在的市面上辛夷滴鼻劑都是採用常見的方式，直接作用於鼻黏膜，不同點在於成分和製備方法不同。
發明內容
本發明的目的在於提供一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑。
本發明的目的是通過以下技術方法來實現的本發明採用常見的逆向蒸發法和注射法及超聲處理製備納米脂質體，使脂質體及納米技術和在中國傳統治療方式中藥滴鼻劑方面的應用開創了廣闊的應用前景。
一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑，通過下列方法製得a辛夷揮髮油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質體膜調節劑混合，溶於溶解溶劑中；b將步驟a得到的混合溶劑恆溫減壓蒸發；c將步驟b得到的類脂膜加入緩衝液中震蕩溶解，調節PH值，加入輔料；d將步驟c得到的脂質體分散液，冰水浴超聲處理，經過微孔濾膜過濾；
e將步驟d得到的脂質體混懸液，在濾液中加入穩定劑製備成鼻腔給藥製劑；其中所述的溶解溶劑選自氯化物烷烴類、醇類溶劑及醚類中的一種或幾種溶劑，其中所述的輔料選自控緩釋製劑、防腐劑一種或幾種。
在步驟a中辛夷揮髮油、磷脂、膽固醇比例為15-8∶6-1∶2-1。
磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂中的一種或幾種。
在步驟a中抗氧化劑選自膠原蛋白、維生素A醋酸酯、維生素E中的一種或幾種，抗氧化劑加入量佔磷脂重量的0.1-5％。
在步驟a中脂質體膜調節劑選自膽酸鈉、去氧膽酸鈉、Triton-100，脂質體膜調節劑加入量佔磷脂重量的0.001-2.5％。
在步驟b中蒸發的溫度為28-65℃。
在步驟c中調節PH值為5.5-7.5。
在步驟c中控緩釋劑選自硬脂酸胺、二乙醯磷酸中的一種或幾種，控緩釋劑加入量佔磷脂重量的3-25％。
在步驟c中防腐劑選自聚山梨酯80、甲基羥苯甲酯、苯基羥苯甲酯中的一種或幾種，防腐劑加入量佔磷脂重量比小於0.025％。
在步驟d中超聲的溫度在0-10℃，超聲頻率在200-1000Hz，超聲的有效時間0.5-20min。
在步驟e中穩定劑選自磷脂醯甘油、磷脂酸、硬脂胺中的一種或幾種，穩定劑加入量佔磷脂重量的0.9-4.25％。
本發明所公開一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑，其優點表現在(1)本發明採用滴鼻劑的形式，比常規滴鼻劑有更大的比表面積，增大了它與鼻腔黏膜的接觸面積，相對延長了它與鼻腔黏膜的接觸時間和黏膜吸收速度，而且使用方便，同時可以避免由於使用的過程中造成的藥物損失，提高有效利用率。
(2)本發明採用的脂質體滴鼻劑，比常規滴鼻劑與機體的相容性更好，可以促進吸收，並可以隔離藥物與吸收機體，防止對吸收部位造成的藥物損傷，同時可以減少藥物在吸收過程中的被分解損失。
(3)本發明脂質體具有一定的柔性和變形性，比相同粒徑的普通脂質體更容易通過黏膜吸收，因而具有更好的通透性。
(4)本發明脂質體的粒徑在一定的範圍內可以方便通過改變一兩個條件進行調節。經研究發現，辛夷揮髮油脂質體中粒徑的在納米尺度下可以藥物吸收更迅速，要求的黏膜吸收速度，粒徑在100nm以下時效果較好。
圖1顯示TEM觀察下包覆辛夷揮髮油的脂質體形貌圖。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步描述。
實施例1包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑的製備(一)
200mg大豆卵磷脂、750mg辛夷揮髮油、100mg膽固醇、0.2mg膽酸鈉、1mg膠原蛋白，溶於20ml的2∶1甲醇/氯仿的混合溶劑。38℃恆溫、減壓蒸發形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩衝液震蕩溶解，調節PH值為5.5，加入10mg硬脂酸胺、0.05mg聚山梨酯80，得到大多室脂質體分散液。在超聲溫度10℃，超聲頻率200Hz條件下冰水浴超聲處理20分鐘，經過0.15μm微孔濾膜過濾形成均勻的單層的脂質體混懸液，在濾液中加入8.5mg磷脂醯甘油製備成鼻腔給藥製劑。測定混懸液中包封藥物載體脂質體平均粒徑為73nm，包封率為94.8％，常溫下保存60天，溶液物理化學性質穩定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩定無分層和變質現象。
實施例2包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑的製備(二)200mg蛋黃卵磷脂、330mg辛夷揮髮油、66mg膽固醇、0.01mg去氧膽酸鈉、10mg維生素A醋酸酯，溶於30ml甲醇的混合溶劑。28℃恆溫、減壓蒸發形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩衝液震蕩溶解，調節PH值為7.0，加入100mg二乙醯磷酸、0.1mg甲基羥苯甲酯，得到大多室脂質體分散液。在超聲溫度1℃，超聲頻率600Hz條件下冰水浴超聲處理10分鐘，經過0.15μm微孔濾膜過濾形成均勻的單層的脂質體混懸液，在濾液中加入4mg磷脂酸製備成鼻腔給藥製劑。測定混懸液中包封藥物載體脂質體平均粒徑為56nm，包封率為93.6％，常溫下保存60天，溶液物理化學性質穩定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩定無分層和變質現象。
實施例3包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑的製備(三)
200mg大豆卵磷脂、1600mg辛夷揮髮油、200mg膽固醇、5mgTriton-100、5mg維生素E溶於40ml氯仿混合溶劑，65℃減壓蒸發形成類脂膜，加入20ml的磷酸緩衝液震蕩溶解，調節PH值為7.5，加入20mg硬脂酸胺、50mg二乙醯磷酸、0.1mg苯基羥苯甲酯，得到大多室脂質體分散液，在超聲溫度5℃，超聲頻率1000Hz條件下冰水浴超聲處理1分鐘，經過0.15μm微孔濾膜過濾形成均勻的單層的脂質體混懸液，在濾液中加入2mg硬脂胺製備成鼻腔給藥製劑。測定混懸液中包封藥物載體脂質體平均粒徑為66nm，包封率為95.8％，常溫下保存60天，溶液物理化學性質穩定，低溫4℃下保存150天，溶液均勻穩定無分層和變質現象。
實施例4對過敏性鼻炎豚鼠的影響豚鼠過敏性鼻炎模型製備 取300～350g豚鼠40隻，雌雄各半，均分5組，每組8隻，除留一組作正常對照外，其餘四組，以24二異氰酸甲苯酯(TDL)滴鼻致敏。即將10％TDL橄欖油溶液10μl，用加樣器滴入豚鼠雙側鼻孔(每側5μl)，每日一次，連續7d，模型判定成功後，改為隔日維持1次，直至觀察藥物結束；對照組滴橄欖油的方法、劑量同模型組。
模型判定 以出現鼻癢抓撓、噴嚏、流涕為判定指標，首次給致敏物TDL始，30min內可見不同程度鼻癢抓撓、噴嚏，3d後見流涕，隨致敏時間延長，症狀漸加重，始發時間縮短，呈現典型以上症狀。治療藥作用效果以鼻癢抓撓次數，噴嚏次數、流涕程度(流至鼻前孔為1分，超過鼻前孔為2分，流涕滿為3分)作為觀察指標，觀察時間為末次給TDI後30min內。
實驗方法及結果模型建立後，於第8天分組給藥，每日二次，用加樣器於豚鼠雙側鼻孔給藥，對照組給予蒸餾水，連續7d，末次給藥後30min，給予TDL，觀察30min內各組豚鼠鼻癢抓撓及噴嚏次數、流涕程度，結果見表1。
表1辛夷揮髮油納米脂質體鼻腔給藥對豚鼠過敏性鼻炎症狀的作用(x±s；n＝8)
注與正常對照組比較△P＜0.01，與模型組比較*P＜005，**P＜001上述實驗的結果表明辛夷揮髮油納米滴鼻液能有效對抗豚鼠過敏性鼻炎所產生的鼻癢、噴嚏、流涕的症狀。治療效果優于于常規辛夷揮髮油藥物。
權利要求
1.一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑，其特徵在於通過下列方法製得a、辛夷揮髮油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質體膜調節劑混合，溶於溶解溶劑中；b、將步驟a得到的混合溶劑恆溫減壓蒸發；c、將步驟b得到的類脂膜加入緩衝液中震蕩溶解，調節PH值，加入輔料；d、將步驟c得到的脂質體分散液，冰水浴超聲處理，經過微孔濾膜過濾；e、將步驟d得到的脂質體混懸液，在濾液中加入穩定劑製備成鼻腔給藥製劑；其中所述的溶解溶劑選自氯化物烷烴類、醇類溶劑及醚類中的一種或幾種溶劑，其中所述的輔料選自控緩釋製劑、防腐劑一種或幾種。
2.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟a中辛夷揮髮油、磷脂、膽固醇比例為15-8∶6-1∶2-1。
3.根據權利要求3所述的滴鼻劑，其特徵在於磷脂選自大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂中的一種或幾種。
4.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟a中抗氧化劑選自膠原蛋白、維生素A醋酸酯、維生素E中的一種或幾種，抗氧化劑加入量佔磷脂重量的0.1-5％。
5.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟a中脂質體膜調節劑選自膽酸鈉、去氧膽酸鈉、Triton-100，脂質體膜調節劑加入量佔磷脂重量的0.001-2.5％。
6.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟b中蒸發的溫度為28-65℃。
7.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟c中調節PH值為5.5-7.5。
8.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟c中控緩釋劑選自硬脂酸胺、二乙醯磷酸中的一種或幾種，控緩釋劑加入量佔磷脂重量的3-25％。
9.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟c中防腐劑選自聚山梨酯80、甲基羥苯甲酯、苯基羥苯甲酯中的一種或幾種，防腐劑加入量佔磷脂重量比小於0.025％。
10.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟d中超聲的溫度在0-10℃，超聲頻率在200-1000Hz，超聲的有效時間0.5-20min。
11.根據權利要求1所述的滴鼻劑，其特徵在於在步驟e中穩定劑選自磷脂醯甘油、磷脂酸、硬脂胺中的一種或幾種，穩定劑加入量佔磷脂重量的0.9-4.25％。
全文摘要
本發明涉及一種包覆辛夷揮髮油納米脂質體滴鼻劑，該滴鼻劑通過下列方法製得a辛夷揮髮油、磷脂、膽固醇、抗氧化劑、脂質體膜調節劑混合，溶於溶解溶劑中；b將步驟a得到的混合溶劑恆溫減壓蒸發；c將步驟b得到的類脂膜加入緩衝液中震蕩溶解，調節pH值，加入輔料；d將步驟c得到的脂質體分散液，冰水浴超聲處理，經過微孔濾膜過濾；e將步驟d得到的脂質體混懸液，在濾液中加入穩定劑製備成鼻腔給藥製劑。該滴鼻劑優點表現在(1)本發明使用方便，同時可以避免由於使用的過程中造成的藥物損失，提高有效利用率。(2)外包磷脂為機體組分，與機體相容性好，促進藥物吸收，同時可以避免藥物對吸收機體毒副作用；(3)本發明脂質體具有一定的柔性和變形性，比相同粒徑的普通脂質體更容易通過黏膜吸收，因而具有更好的通透性；(4)本發明滴鼻劑為納米尺度。
文檔編號A61P11/04GK1813905SQ20051011134
公開日2006年8月9日 申請日期2005年12月9日 優先權日2005年12月9日
發明者吳敏, 王雪梅, 張 雄 申請人:上海交通大學醫學院附屬新華醫院