喜樹果提取物喜果苷的用途及製劑的製作方法

2023-06-08 13:46:26 3

專利名稱：：喜樹果提取物喜果苷的用途及製劑的製作方法
技術領域：
：本發明涉及一種中藥提取物的醫藥用途，特別是喜樹果提取物喜果苷的醫藥用途。本發明還涉及該用途的喜果苷製劑。技術背景喜果苷，中文名喜果苷、長春苷內醯胺；英文名Vincoside-lactam，VCS-LT，結構式自從1966年Wall等首次從喜樹中分離出喜樹鹼並發現其具有顯著抗癌活性後，至今己有20多種化學成分從中分離出來，包括喜樹鹼(camp-tothecine，CPT)、10-羥基喜樹鹼、11-羥基喜樹鹼、10-甲氧基喜樹鹼、喜樹次鹼、白樺脂酸、喜果苷(vincoside-lactam，VCS-LT)等。人工合成也取得了可喜的進展。研究發現喜樹果中喜果苷明顯高於喜樹鹼及其他類似物。喜樹鹼(CPT)及喜果苷(VCS-LT)具有顯著抗白血病和抑制腫瘤的活性，王瑞芳等人研究了胺化超高交聯吸附樹脂的製備及其對喜樹鹼和喜果苷的色譜分離，結果表明，超高交聯吸附樹脂胺化後，對喜樹鹼和喜果苷的吸附量及吸附選擇性顯著增大，可使喜樹鹼和喜果苷完全分離。申請號為200410072869.3號的中國專利申請公開了一種喜果苷的提取方法，採用將喜樹果用乙醇溶液滲渡或乙醇溶液25。C80'C熱提取、提取液通入裝有大孔吸附樹脂(AL-2吸附樹脂)的樹脂柱中吸附、用乙醇水溶液洗滌和解吸、流出液旋蒸濃縮和重結晶等步驟得到喜果苷產品。現有技術中沒有其它關於喜果苷醫藥用途的報導。
發明內容本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足，提供一種喜樹果提取物喜果苷的新的醫藥用途。本發明所要解決的另一個技術問題是提供了上述用途的喜果苷製劑。本發明所述的喜樹果提取物喜果苷的用途是它可以作為有效成份用來製備抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物；或者用來製備治療敏感細菌、病毒引起的感染性疾病的藥物；或者用來製備治療鉤端螺旋體病的藥物。以上所述的敏感細菌、病毒引起的感染性疾病包括以下疾病急性扁桃體炎、咽喉炎、上呼吸道感染、支氣管炎、肺炎、結膜炎、麥粒腫、牙周膿腫、中耳炎、燒傷感染、泌尿系統感染或手術後預防感染。鉤端螺旋體病簡稱鉤體病，是由致病性鉤端螺旋體引起的自然疫源性急性傳染病，其臨床特點為高熱、全身酸痛、乏力、球結合膜充血、淋巴結腫大和明顯的腓腸肌疼痛，重者可並發肺出血、黃疸、腦膜腦炎和腎功能衰竭等。現有技術中對鉤端螺旋體病一般採取以下方法進行治療1、一般治療與對症治療早期臥床休息，給予易消化飲食，保持體液與電解質平衡。2、病原治療鉤體對多種抗菌藥物敏感，如青黴素、鏈黴素、慶大黴素、四環素、氯黴素、頭孢噻吩等以及合成的鹽酸甲唑醇(methimidol)和咪唑酸酯。國內首選青黴素G。3、肺瀰漫性出血型的治療採取抗菌、解毒、鎮靜、止血、強心為主的綜合措施。本發明所述用途的喜樹果提取物喜果苷，可以選用現有技術中所公開的任何一種製備方法製得的喜果苷，也可以選用以下方法製得的喜果苷。一種如以上所述用途的喜樹果提取物喜果苷的製備方法取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或65%-75%乙醇回流提取2-4次，每次用量8-12倍，分別提取l-2小時，合併提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至8-12L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。上述製備方法的優選技術方案是取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或70%乙醇回流提取三次，每次用量10倍，分別提取1.5小時、l小時、l小時，合併三次提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至10L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。本發明所要解決的技術問題還可以通過以下的技術方案來進一步實現。本發明還公開了一種如以上所述用途的喜果苷製劑，其特點是，取喜果苷，加入藥學上可以接受的藥物載體，製成臨床上可接受的任何一種劑型的藥劑。以上所述的喜果苷製劑劑型可以是口服製劑，優選劑型為注射劑。製備注射劑時，所用的助溶劑為鹼性物質或者醇類物質，選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、精氨酸、賴氨酸、葡甲胺、尿素、乙醯胺、硫脲、苯甲醯胺、乙醇、丙二醇或者甘露醇。以下是發明人所做的藥效學研究實驗1、體外抗菌作用精密定量稱取受試樣品喜果苷(縮寫為XG，下同)，用無菌水配製成50mg/ml的溶液。然後將配製的藥液分別用適量無菌水進行倍比稀釋，使各藥液成一系列濃度梯度，依次是50，25，12.5，6.25，3.13，1.57，0.79，0.40，0.20，0.10(mg/ml)。然後取各梯度藥液2ml，分別加入到無菌平皿(平皿直徑9cm)中，再加入已滅菌融化的保溫於55。C水浴中的MH培養基18ml，立即充分混勻，冷凝後待用。這樣，各含藥平板中藥物的最終濃度依次為5,2.5,61.25,0.625,0.313,0.157，0.079,0.04,0.02,0.01(mg/ml)。同時設空白對照，只加入20ml的瓊脂培養基。將己預先活化的各試驗菌株分別接種到2ml培養液中，37"培養過夜，再用相應的培養液作適當的稀釋，使菌液濃度約為1071S(CFU/ml)(控制菌液濃度方法用分光光度計測定培養液的光密度，然後作適當的稀釋)。然後用多點接種儀點種各試驗菌於各含藥的MH培養基平板上，空白對照同時進行。每點含菌量約為104105(CFU)。37°C，培養24小時，觀察並記錄各菌的最低抑菌濃度MIC值，並計算MIC。體外抗菌試驗結果表明XG對各試驗菌株均具有抗菌活性。結果見表1。表lXG體外對致病性細菌的MIC值的測定(MIC:mg/ml)菌種MIC菌種MIC金黃色葡萄球菌0.079克氏肺炎桿菌0.040肺炎雙球菌0.040沙雷氏菌0.157大腸桿菌0.079沙門桿菌0.157人葡萄球菌0.040產氣桿菌0.157綠膿桿菌0.157枸櫞酸桿菌0.157科代葡萄球菌0.040綠膿桿菌0.040溶血性鏈球菌0.079志賀氏菌0.079表皮葡萄球菌0.313不動桿菌0.079變形桿菌1.250嗜血流感桿菌0.079奇異變形桿菌0.079肺炎鏈球菌0.313陰溝腸桿菌0.313乙型鏈球菌0.079洋蔥假單孢桿菌0.040枯草芽孢桿菌(標準)0.0402.體內抗菌作用2.1對金黃色葡萄球菌感染小鼠的保護作用菌液製備:取臨床分離金黃色葡萄球菌接種於營養肉湯培養基中，置37°C孵箱培養18h。取出，劃線於血平板上(10%羊紅細胞營養瓊脂平板)，37°C孵箱培養20h。取出，用6ml5。/。的胃膜素(PH7.2)洗脫菌落，並用4ml生理鹽水溶液將血平板衝洗乾淨，合併後吹打，使菌落分散並分別用生理鹽水配成0.33ml/ml、0.20ml/ml、0.11ml/ml、0.06ml/ml濃度菌液備用。選擇合適的菌液濃度取ICR小鼠40隻，$3各半，體重1822g。隨機分組，每組1個濃度，腹腔注射金黃色葡萄球菌菌液，每鼠0.5ml，觀察感染小鼠死亡數，結果感染小鼠死亡率分別為100%、100%、90%、40%。故實驗選用0.11ml/ml濃度菌液。正式試驗取ICR小鼠240隻，體重1822g，3$各半。取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、雙黃連口服液組(10ml/kg)禾卩XGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥，1次/天x5天。另取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、雙黃連注射液組(10ml/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥，1次/天x5天。第3天給藥後，除空白對照組以外，其餘各組均腹腔注射金黃色葡萄球菌培養液0.5ml/鼠(菌液濃度0.11ml/ml)。然後繼續給藥2天。觀察各組動物7日內死亡情況。實驗結果顯示XG對金黃色葡萄球菌感染小鼠具有明顯的保護作用。見表2、表3。表2XG灌胃給藥對金黃色葡萄球菌感染小數死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage8##p<0.01與正常對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較表3XG注射給藥對金黃色葡萄球菌感染小數死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage8模型組—17##3.14±1.76##雙黃連注射液組10ml/kg9*5.33±2.45XGI組46**5.78±2.32**XGII組204"5.96±2.34**XGin組1003"6.12±2.64**##p<0.01與正常對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較2.2對肺炎雙球菌感染小鼠的保護作用菌液製備取臨床分離肺炎雙球菌接種入營養肉湯培養基中，置37°C孵箱培養18h。取出，劃線於血平板上(1%羊紅細胞營養瓊脂平板)，37°C孵箱培養24h，取出。用6ml5。/。的胃膜素(PH7.2)洗脫菌落，並用4ml生理鹽水溶液將血平板衝洗乾淨，合併後吹打，使菌落分散。用生理鹽水配成lml/ml、0.5ml/ml、0.33ml/ml、0.25ml/ml濃度菌液備用。選擇合適的菌液濃度取ICR小鼠40隻,？^各半，體重1822g隨機分組，每組1個濃度，腹腔注射肺炎雙球菌菌液0.5ml/鼠，觀察感染小鼠死亡數，結果感染小鼠死亡率分別為100.0%，100.0%，60.0%，30,0%。故實驗選用0.45ml/ml濃度菌液(小鼠死亡率估計8090%之間)。正式試驗取ICR小鼠240隻，體重1822g，c^各半。取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、雙黃連口服液組(10ml/kg)禾nXGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥，1次/天x5天。另取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、雙黃連注射液組(10ml/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥，1次/天x5天。第3天給藥1小時後，除正常對照組外，其餘各組均腹腔注射肺炎雙球菌培養液0.5ml/鼠(菌液濃度0.45ml/ml)。然後繼續給藥2天。觀察各組動物7日內死亡情況。實驗結果顯示XG灌胃(口服)及注射對肺炎雙球菌感染小鼠都具有保護作用。見表4、表5。表4XG灌胃對肺炎雙球菌感染小鼠死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage10表5XG注射對肺炎雙球菌感染小鼠死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage103、體外抗病毒作用XG對甲型流感病毒和乙型流感病毒致細胞病變的抑制作用在長成單層細胞的MDCK培養板中，每孔感染甲型流感病毒或乙型流感病毒100TCIDso。吸附lh後傾去病毒液，分別加入不同濃度的XG藥液，37"5%(302培養箱中培養，觀察細胞病變。同時設細胞對照組，利巴韋林組(10mg/ml)和病毒對照組。實驗結果顯示XG能夠抑制甲型流感病毒對MDCK細胞的毒性作用；也能夠抑制乙型流感病毒對MDCK細胞的毒性作用。表明XG具有體外抗病毒的作用。見表6、表7。表6XG對甲型流感病毒的抑制作用tableseeoriginaldocumentpage11_注-無細胞病變；+25%細胞病變；++50%細胞病變；—75%細胞病變；卄++100。/。細胞病變。表7XG對乙型流感病毒的抑制作用tableseeoriginaldocumentpage11注-無細胞病變；+25。/。細胞病變；++50%細胞病變；+++75%細胞病變；++++100%細胞病變。4、體內抗病毒作用4.1對甲型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用取ICR小鼠240隻，體重1822g，^$各半。取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、雙黃連口服液組(10ml/kg)禾BXGI、II、m組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥。另取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、雙黃連注射液組(10ml/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥。給藥lh後除空白對照組外，其餘各組在乙醚淺麻醉下，以血凝試驗640以上的尿囊液給小鼠滴鼻感染，每鼠30pl(20個LDso致死量)，觀察14天內動物感染後發病及死亡情況。實驗結果顯示XG灌胃(口服)及注射均可明顯延長甲型流感病毒感染小鼠的存活天數，顯著降低甲型流感病毒感染小鼠死亡數。表明XG對甲型流感病毒感染小鼠具有明顯的保護作用。見表8、表9。表8XG灌胃對甲型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用組別劑量死亡數存活天數(mg/kg)(只)(x±S)正常對照組—014±0模型組—l鵬5.22±2.48##雙黃連口服液組lOml/kg139.57±2.79XGI組2010*10.02±3.12XGII組1009頭10.48±2.43*xgm組5008a11.77±2.68"表9XG注射對甲型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用組別劑量死亡數存活天數(mg/kg)(只)(x±S)正常對照組一014±0模型組一17##6.75±3.69##雙黃連注射液組lOml/kg129.80±3.95**XGI組410.6±3.92**xgii組2011.2±3.40**xgin組1005"12.0±3.26**##p<0.01與空白對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較4.2對甲型流感病毒感染小鼠肺病變的影響取ICR小鼠120隻，體重1316g，(？？各半。取ICR小鼠60隻，隨機分6組，每組10隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、利巴韋林組(0.5g/kg)和XGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥，l次/天x5天。另取ICR小鼠60隻，隨機分6組，每組10隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、穿琥寧注射液組(133mg/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥，1次/天x5天。除空白對照組外，其餘各組於給藥第1天，在乙醚淺麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠3(^1(15個LDso攻擊量)。然後繼續給藥4天。末次給藥後將小鼠禁食(不禁水)，次日進行下列實驗取肺，用1%甲醛溶液固定後，常規取材，脫水，石蠟包埋，製片，HE染色後作病理組織學檢査，觀察肺部病變程度。實驗結果如下見表IO、表ll。表10xg灌胃對甲型流感病毒感染小鼠肺病變的影響病變積分平均積組另ljtableseeoriginaldocumentpage13表11xg注射對甲型流感病毒感染小鼠肺病變的影響tableseeoriginaldocumentpage13#p<0.01與正常對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較注1.病變積分根據病變程度不同，依次標記為"-"、"+"、"++"、"+++"、"++++"。"-"為無明顯改變，記為o分；"+"為輕度病變改變，記為l分；"++"為中度病理改變，記為2分；"+++"為重度病理改變，記為3分；"++++"為極重度病理改變，記為4分。積分值越高，表示病變程度越重。.2.統計採用秩和檢驗。上述結果顯示XG能減輕甲型流感病毒所致小鼠的肺部感染，具有抗甲型流感病毒的作用。4.3對乙型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用取ICR小鼠240隻，體重1822g，3各半。取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、雙黃連口服液組(10ml/kg)禾PXGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥。另取ICR小鼠120隻，隨機分6組，每組20隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、雙黃連注射液組(10ml/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥。給藥lh後除空白對照組外，其餘各組在乙醚淺麻醉下，以血凝試驗640以上的尿囊液給小鼠滴鼻感染，每鼠40pl(20個LD5o致死量)，觀察14天內動物感染後發病及死亡情況。實驗結果見表12、表13。實驗結果顯示XG可明顯延長乙型流感病毒感染小鼠的存活天數,也可降低甲型流感病毒感染小鼠死亡數。表明XG對甲型流感病毒感染小鼠具有一定的保護作用。表12XG灌胃對乙型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage14表13XG注射對乙型流感病毒感染小鼠死亡的保護作用tableseeoriginaldocumentpage14tableseeoriginaldocumentpage15##p<0.01與空白對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較4.4對乙型流感病毒感染小鼠肺病變的影響取ICR小鼠120隻，體重1316g，c^各半。取ICR小鼠60隻，隨機分6組，每組10隻。正常對照組(灌胃)、模型組(灌胃)、利巴韋林組(0.5g/kg)和XGI、II、III組(20mg/kg、腦mg/kg、500mg/kg)。以上各組小鼠均灌胃給藥，l次/天x5天。另取ICR小鼠60隻，隨機分6組，每組10隻。即正常對照組(注射)、模型組(注射)、穿琥寧注射液組(133mg/kg)和XGI、II、m組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)。以上各組小鼠均注射給藥，1次/天x5天。除空白對照組外，其餘各組於給藥第1天，在乙醚淺麻醉下以病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每鼠3(^1(20個LDsQ攻擊量)。然後繼續給藥5天。末次給藥後將小鼠禁食(不禁水)，次日進行下列實驗取肺，用1%甲醛溶液固定後，常規取材，脫水，石蠟包埋，製片，HE染色後作病理組織學檢查，觀察肺部病變程度。實驗結果如下見表14、表15。XG灌胃給藥及注射給藥均能減輕乙型流感病毒所致小鼠的肺部感染，具有抗乙型流感病毒的作用。表14xg灌胃對乙型流感病毒感染小鼠肺病變的影響tableseeoriginaldocumentpage15#p<0.01與正常對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較頁表15xg注射對乙型流感病毒感染小鼠肺病變的影響tableseeoriginaldocumentpage16#p<0.01與正常對照組比較；*p<0.05**p<0.01與模型組比較注1.病變積分根據病變程度不同，依次標記為"-"、"+"、"++"、"+++"、"++++"。"-"為無明顯改變，記為0分；"+"為輕度病變改變，記為l分；"++"為中度病理改變，記為2分；"+++"為重度病理改變，記為3分；"++++"為極重度病理改變，記為4分。積分值越高，表示病變程度越重。2.統計採用秩和檢驗。5、抗炎鎮痛作用5.1對小鼠耳廓腫脹的影響取正常ICR小鼠100隻，體重2530g，雄性。取50隻隨機分為5組，每組10隻小鼠，即正常對照組(灌胃)、乙醯水楊酸組(0.11g/kg)和XGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)，分別灌胃給予相應藥物(正常對照組灌胃給予等容積蒸餾水)，每日一次，連續3曰。另取50隻隨機分為5組，每組10隻小鼠，即正常對照組(注射)、醋酸地塞米松注射液組(4mg/kg)和XGI、II、m組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)，分別注射給予相應藥物(正常對照組注射給予等容積生理鹽水)，每日一次，連續3日。第3日各灌胃組給藥40min、各注射組給藥5min後，分別用2%巴豆油0.05ml塗於小鼠左耳前後兩面，在致炎4h後處死小鼠，沿耳廓基線剪下左右兩耳，用打孔器(直徑9mm)分別在同一部位取下圓耳片，電子天平稱重，以小鼠左右耳殼重量之差值作為耳殼腫脹度，並計算腫脹百分率。formulaseeoriginaldocumentpage16XG灌胃、注射給藥組均能減輕巴豆油致小鼠耳腫脹度，降低腫脹率，與對照組相比有顯著性差異(p0.05，pO.Ol)。表明XG具有顯著的抗炎作用，結果見表16。表16XG灌胃及注射對巴豆油所致小鼠耳腫脹的影響(f±S)組另!i劑量(mg/kg)動物數(只)耳殼腫脹度(mg)腫脹率(％)正常對照組(灌胃)—1016.8±4.699.5±30.1乙醯水楊酸組1101013.0±4.3*74.7±21.8*XG灌胃I劑量組201013.1±3.8*76.7±23.6*XG灌胃II劑量組1001012.2±4.1*71.5±27.3AXG灌胃in劑量組5001010.1±4.5**59.4±28.7**正常對照組(注射)_1017.8±2.594.5±16.5醋酸地塞米松注射液組41011.3±4.5AA61.0±31.5AAXG注射I劑量組41013.4±4.1AA71.4±30.5Axg注射ii劑量組20109.1±5.5AA51.2±33.4Mxg注射in劑量組100104.7±2.8AA24.1±15.3M注與正常對照組(灌胃)相比，*p<0.05,**p<0.01;與正常對照組(注射)相比，Ap<0.05,AAp<0.015.2對乙酸腹腔刺激致小鼠疼痛反應的影響取正常ICR小鼠100隻，體重2530g，雄性。取50隻隨機分為5組，每組10隻小鼠，即正常對照組(灌胃)、乙醯水楊酸組(O.llg/kg)和XGI、II、III組(20mg/kg、100mg/kg、500mg/kg)，分別灌胃給予相應藥物(正常對照組灌胃給予等容積蒸餾水)，每日一次，連續3曰。另取50隻隨機分為5組，每組10隻小鼠，即正常對照組(注射)、嗎啡組(10mg/kg)和XGI、II、III組(4mg/kg、20mg/kg、100mg/kg)，分別注射給予相應藥物(正常對照組注射給予等容積生理鹽水)，每日一次，連續3日。第3日各灌胃組給藥40min、各注射組給藥5min後，各組小鼠腹腔注射0.6%乙酸0.2ml/只，觀察注射乙酸後15min內各組小鼠出現的扭體反應動物數和扭體反應次數。XG灌胃、注射給藥組均能減少小鼠扭體次數，與正常對照組相比有顯著性差異(p0.05，pO.Ol)。表明XG具有鎮痛作用，結果見表17。表17XG灌胃及注射對乙酸腹腔剌激致小鼠疼痛反應的影響(f±S)tableseeoriginaldocumentpage18注與正常對照組(灌胃)相比，*p<0.05,**p<0.01;與正常對照組(注射)相比，、<0.05，AAp<0.016、解熱作用對乾酵母所致大鼠發熱的解熱作用取雄性SD大鼠180隻，體重160180g。測正常體溫，每日2次，連續3日。實驗日每小時測體溫l次，連續3次，選取體溫變動不高於0.3"C的大鼠用於實驗。取合格大鼠，每鼠於背部皮下注射20n/。乾酵母溶液15ml/kg。4小時後若大鼠體溫升高〉rc者進行分組給藥。選取發熱合格大鼠IOO只，隨機分為10組(1)空白對照I組生理鹽水5ml/kg;(2)雙黃連注射液組5ml/kg;(3)XG注射I組2mg/kg;(4)XG注射II組:10mg/kg;(5)XG注射m組:50mg/kg;(6)空白對照II組生理鹽水5ml/kg;(7)雙黃連口服液組5ml/kg;(8)XG灌胃I組10mg/kg;(9)XG灌胃II組:50mg/kg;(10)XG灌胃III組:250mg/kg。(1)、(2)、(3)、(4)、(5)組均按5ml/kg靜脈注射給藥;(6)、(7)、(8)、(9)、(10)均按5ml/kg灌胃給藥。於給藥後15、30、45、60、90、120、180、240min觀察大鼠體溫變化。結果進行組間比較。顯示，XG注射各給藥組在注射給藥後能明顯降低幹18酵母所致大鼠體溫，與空白對照組比較具有顯著性差異(PO.05,0.01);XG在灌胃給藥後對亦有一定的降低乾酵母所致大鼠體溫升高的作用的，表明XG具有抗高熱的作用，XG靜脈給藥的降溫作用比灌胃給藥作用強。見表18、表19。表18XG對乾酵母所致大鼠發熱的影響(靜脈注射給藥)(x土s)tableseeoriginaldocumentpage19*p<0.05，**p<0.01與空白對照II組比較7、抗鉤端螺旋體病作用取健康豚鼠200隻.體重150250g，雄性。取100隻隨機分為5組，每組20隻，即模型對照組(灌胃)、利巴韋林組(250mg/kg)和XGI、II、m組(10mg/kg、50mg/kg、250mg/kg)，分別灌胃給予相應藥物(模型對照組灌胃給予等容積蒸餾水)，每日一次，連續3曰。另取100隻隨機分為5組，每組20隻，即模型對照組(注射)、地塞米松組(5mg/kg)和XGI、II、III組(2mg/kg、10mg/kg、50mg/kg)，分別注射給予相應藥物(模型對照組注射給予等容積生理鹽水)，每日一次，連續3日。第3日各灌胃組給藥40min、各注射組給藥5min後，各組動物靜脈注入強毒力黃疸出血群賴型017株鉤體濃縮菌液(2.5X109條/ml菌液)2ml/只，觀察注射鉤體濃縮菌液後48小時內各組動物出現的死亡動物數。48小時後其餘未死亡動物一起處死，連同48小時內死亡動物做病理觀察。XG灌胃、注射給藥組均能減少鉤體濃縮菌液注射致豚鼠肺出血模型48小時內的死亡動物數，與模型對照組相比有顯著性差異(pO.Ol)。表明XG具有抗鉤體病作用，結果見表20。表20XG灌胃及注射對鉤體濃縮菌液注射致豚鼠肺出血模型48小時內的死亡動物數的影響(^±S)tableseeoriginaldocumentpage20注與模型對照組(灌胃)相比，**p<0.01;與模型對照組(注射)相比，AAp<0.01病理檢査模型對照組動物肺組織明顯腫脹，廣泛出血達肺總面積的3/4以上；月幹、腎組織輕度腫脹，未見出血。XG灌胃、注射給藥組動物除48小時內死亡的動物口鼻湧血表現類同模型對照組外，其餘動物肝、腎組織腫脹不顯，且未見出血；肺組織均有不同程度的腫脹和出血，出血為散在.電狀或達一側肺的1/2。相比較模型對照組明顯減輕。實驗結論綜上所述，喜果苷具有一定的抗菌、抗病毒、抗高熱、抗炎、鎮痛等藥理作用，它可以作為有效成份用來製備抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物。而且根據治療敏感細菌、病毒引起的感染性疾病和鉤端螺旋體病的病理及臨床症狀表現，結合喜果苷的藥理作用，它也可以用來製備治療敏感細菌、病毒引起的感染性疾病的藥物，以及用來製備治療鉤端螺旋體病的藥物。具體實施例方式實施例l。一種喜果苷製劑，取現有技術工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成片劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例2。一種喜果苷製劑，取現有技術工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成顆粒劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例3。一種喜果苷製劑，取現有技術工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成膠囊劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例4。一種喜果苷製劑，取現有技術工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成丸劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例5。一種喜果苷製劑，取現有技術工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成滴丸劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例6。一種喜果苷製劑，取下述方法所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成軟膠囊劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。喜果苷的製備方法取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或65%乙醇回流提取2次，每次用量12倍，分別提取l小時，合併提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至8L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。實施例7。一種喜果苷製劑，取下述方法所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成注射劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。喜果苷製備方法取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或75%乙醇回流提取4次，每次用量8倍，分別提取2小時，合併提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至12L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。實施例8。一種喜果苷製劑，取下述方法所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成輸液劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。喜果苷的製備方法取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或70%乙醇回流提取三次，每次用量10倍，分別提取1.5小時、l小時、l小時，合併三次提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至10L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。實施例9。一種喜果苷製劑，取實施例1所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成口服液，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例10。一種喜果苷製劑，取實施例8中所述製備方法製得的喜果苷，加入藥物載體，製成注射劑，製備時，所用的助溶劑為氫氧化鈉、氫氧化鉀、精氨酸、賴氨酸、葡甲胺、尿素、乙醯胺、硫脲、苯甲醯胺、乙醇、丙二醇或者甘露醇，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例11。一種喜果苷製劑，取實施例7中所述製備方法製得的喜果苷，加入藥物載體，製成合劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例12。一種喜果苷製劑，取實施例6中所述製備方法所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成混懸劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例13。一種喜果苷製劑，取現有技術中的製備工藝所製得的喜果苷，加入藥物載體，製成靶向製劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例14。一種喜果苷製劑，取實施例6中所述方法製得的喜果苷，加入藥物載體，製成緩釋製劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例15。一種喜果苷製劑，取實施例7中所述方法製得的喜果苷，加入藥物載體，製成控釋製劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。實施例16。一種喜果苷製劑，取實施例8中所述方法製得的喜果苷，加入藥物載體，製成凍乾粉針劑，用於作為抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物，或者用於敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的治療。權利要求1、喜樹果提取物喜果苷在製備抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物中的用途，或者在製備治療敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的藥物中的用途。2、根據權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述的敏感細菌、病毒引起的感染性疾病包括急性扁桃體炎、咽喉炎、上呼吸道感染、支氣管炎、肺炎、結膜炎、麥粒腫、牙周膿腫、中耳炎、燒傷感染、泌尿系統感染或手術後預防感染。3、根據權利要求1或2所述的用途，其特徵在於，所述的喜樹果提取物喜果苷的製備方法是如下取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或65-75%乙醇回流提取2-4次，每次用量8-12倍，分別提取l-2小時，合併提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至8-12L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。4、根據權利要求3所述的用途，其特徵在於，所述的喜樹果提取物喜果苷的製備方法是如下取喜樹果藥材，打碎，用水煎煮，或70%乙醇回流提取三次，每次用量10倍，分別提取1.5小時、l小時、l小時，合併三次提取液，過濾，回收乙醇至無醇味，加水至10L/1KG藥材，靜置，冷藏過夜，離心除去沉澱，澄清液上HPD100或AB-8等弱極性大孔樹脂，藥材/樹脂l:1，先用水洗脫5個柱體積，然後用25%乙醇洗脫5個柱體積，再用35%乙醇洗脫15個柱體積，最後用55%乙醇洗脫15個柱體積，收集55%乙醇部分，回收乙醇至瓶內有黑色粘附物出現，趁熱過濾，濾液冷卻，析出沉澱，過濾，沉澱再次重結晶，即得純度達90%以上的喜果苷。5、一種如權利要求1或2所述用途的喜果苷製劑，其特徵在於，取喜果苷，加入藥學上可以接受的藥物載體，製成臨床上可接受的任何一種劑型的藥劑。6、根據權利要求5所述的一種喜果苷製劑，其特徵在於，所述藥劑的劑型為注射劑，製備時，所用的助溶劑為鹼性物質或者醇類物質，選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、精氨酸、賴氨酸、葡甲胺、尿素、乙醯胺、硫脲、苯甲醯胺、乙醇、丙二醇或者甘露醇。全文摘要喜樹果提取物喜果苷在製備抗菌或抗病毒或抗高熱或抗炎或鎮痛藥物中的用途，或者在製備治療敏感細菌、病毒引起的感染性疾病或者鉤端螺旋體病的藥物中的用途。所述的敏感細菌、病毒引起的感染性疾病包括急性扁桃體炎、咽喉炎、上呼吸道感染、支氣管炎、肺炎、結膜炎、麥粒腫、牙周膿腫、中耳炎、燒傷感染、泌尿系統感染或手術後預防感染。本發明還公開了上述用途的一種喜果苷製劑。文檔編號A61K31/706GK101313914SQ200710022779公開日2008年12月3日申請日期2007年5月29日優先權日2007年5月29日發明者崗丁,婭凌,戴翔翎,亮曹,李明慧,王振中,偉肖申請人:江蘇康緣藥業股份有限公司