酶法測定β－羥丁酸試劑盒的製作方法

2023-06-09 04:00:21 3

專利名稱：酶法測定β－羥丁酸試劑盒的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種酶法測定β-羥丁酸試劑盒。
測定血尿β-羥丁酸對糖尿病酮症酸中毒早期診斷、指導療效、判定預防有重要意義，對酒精、飢餓、子癇引起的酮症酸中毒也有重要意義。測定β-羥丁酸有滴定法、比重法、比色法，這些測定方法是半定量的，用氣相色譜法無特異性，毛細管等速電泳法不適於臨床大批量化驗。有關文獻介紹了酶法測定β-羥丁酸的方法，但這種試劑只能現配現用，不能長期保存。
本發明的目的在於提供一種測定速度快，並能長期保存的酶法測定β-羥丁酸試劑盒。
本發明的技術方案一種酶法測定β-羥丁酸試劑盒，其特徵在於含有三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖。
本發明的有益效果本發明配方中乙二胺四乙酸二鈉可有效洛合重金屬離子避免對酶的破壞，氯化鎂可做為酶的激活劑，疊氮鈉可防腐，蔗糖對酶有保護作用。試劑盒使用了酶做催化劑，所以本發明抗幹擾能力強，中等程度溶血，乳糜血，血糖20毫摩爾/升以下，膽紅素100微毫摩爾/升以下對測定不產生幹擾。凍幹試劑冷藏一年，試劑盒中酶活力下降小於5％，煙醯胺腺嘌呤二核苷酸破壞小於10％。測β-羥丁酸線性範圍，達5.0毫摩爾/升，回收率97.1-104.2％，X＝0.24毫摩爾/升，n＝20，CV＝6.3％，SD＝0.015，復溶後穩定72小時(室溫)，冷藏穩定二周。
下面詳述本發明的實施例。
取超純蒸餾水，用前將水加熱至沸，密封備用。將三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖加入前述的蒸餾水溶解，調PH值於8.0，然後加入β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸，此時，乙二胺四乙酸二鈉含量21毫摩爾/升，氯化鎂2毫摩爾/升、疊氮鈉0.01毫摩爾/升，β-羥丁酸脫氧酶30國際單位/升、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸2.0毫摩爾/升，三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑65毫摩爾/升，蔗糖濃度40毫摩爾/升，將該試劑溶液分裝為5-10毫升/瓶，經低溫冷凍乾燥後冷藏，冷凍乾燥後水份小於3％，可保存一年以上。使用時，加5-10毫升蒸餾水溶解10分鐘即可使用。
權利要求
1.一種酶法測定β-羥丁酸試劑盒，其特徵在於含有三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β-羥丁酸脫氫酶、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸、氯化鎂、疊氮鈉、蔗糖。
2.根據權利要求1所述的酶法測定β-羥丁酸試劑盒，其特徵在於各組分的含量的摩爾比為三羥甲基氨基甲烷-鹽酸緩劑60-100、乙二胺四乙酸二鈉20-30、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸1.8-4.0、氯化鎂1.0-5.0、疊氮鈉0.009-0.015、蔗糖14.6-43.8。
全文摘要
本發明涉及一種酶法測定β－羥丁酸試劑盒,解決了現有測定試劑不易保存的問題。本發明技術方案:一種酶法測定β－羥丁酸試劑盒,其特徵在於:含有三羥甲基氨基甲烷—鹽酸緩劑、乙二胺四乙酸二鈉、β－羥丁酸脫氫酶、氧化型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸、氧化鎂、疊氮鈉、蔗糖,本發明保存時間長,測定速度快,使用方便。
文檔編號C12Q1/32GK1277264SQ9911296
公開日2000年12月20日 申請日期1999年5月28日 優先權日1999年5月28日
發明者於永光, 辛曉敏, 馮磊光 申請人:哈爾濱醫科大學第一臨床醫學院