映山紅花總黃酮在製備心腦血管疾病藥物中的應用的製作方法
2023-06-09 03:44:01
專利名稱：映山紅花總黃酮在製備心腦血管疾病藥物中的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及映山紅花總黃酮的藥用價值，確切地說是在製藥領域中的用途。
背景技術：
映山紅又名杜鵑花、紅杜鵑、豔山紅、豔山花、清明花，為杜鵑花科杜鵑花屬植物。映山紅為落葉或半常綠灌木，高1～3米。莖分枝細而多，密被黃褐色平伏硬毛。葉互生，具短柄，柄上有毛；葉片卵狀橢圓形或倒卵形，長2～6釐米，寬1～3釐米，先端急尖，基部槭形，全緣，上面疏被硬毛，下面密被褐色細毛，脈上更多。春季開粉紅色花，2～6朵簇生於枝端；萼5裂，近橢圓形，長2～4釐米，表面密被褐色硬毛；花冠寬漏鬥狀，徑4～5釐米，裂片近倒卵形，稍不等大，上面3片，有深紅色斑點；雄蕊7～10，花絲中部以下有稀疏細毛，花葯頂孔裂；子房卵圓形，密被硬毛，柱頭頭狀。蒴果卵圓形，長5～8毫米，密被硬毛，有宿存花萼。
心、腦血管疾病是當前死亡率最高的疾病之一，如冠心病、腦梗塞等。
冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)是由於心肌的嚴重缺血而引起心肌的損傷和壞死，急性心肌梗死(Acute myocardial infarction，AMI)是其臨床的主要表現。AMI在歐美國家已成為嚴重的健康問題，美國每年大約有150萬人發生AMI，其中大約有1/3的人死亡。在我國AMI同樣也是一個引起關注的健康問題，流行病學調查結果顯示，心肌梗死患病率在我國平均為10/10萬，死亡率為患病率的10％。
腦梗塞為常見的腦血管疾病，在中醫為中風症，中風又名卒中。因本病起病急驟，證見多端，變化迅速，與風性善行數變的特徵相似，故以中風名之。中風大多發生在中年以上，是老年人的常見病、多發病。其發病率和死亡率隨年齡的增長而增高，特別是年齡在65歲以上者尤為明顯。在美國和其它工業化國家，中風是前三位死因的主要死因之一。其中美國每年約有50萬人患中風，約15萬人死亡，存活者中需要醫療照顧的有200餘萬人。人群中以男性和黑人的患病率較高。在亞洲，中風是第二號殺手，每年有超過200萬人死於中風。在中國，中風佔死亡原因的第一或第二位。故中風在我國是致殘、致死的主要疾病之一。
因此，尋找開發有效的防治心、腦血管疾病的藥物已日益受到國內外的廣泛重視，成為當前醫藥學界的主要研究課題之一。近年來，我國傳統中藥對心、腦缺血保護作用的研究亦日益受到重視，特別是多種植物的黃酮類化合物，如銀杏總黃酮、燈盞花素及葛根素等，經研究證實對心、腦缺血具有保護作用。
發明內容
本發明的目的在於提供映山紅花總黃酮的藥用價值，即在製藥中的應用。
實際上，本發明提供了映山紅花總黃酮在製備治療或預防心腦血管疾病的藥物中的應用。
映山紅花總黃酮是從杜鵑花科杜鵑花屬植物映山紅的花中提取的一個有效部位，實驗研究發現，映山紅花總黃酮具有抗心、腦缺血性損傷的作用，且毒性低，應用安全。
為了更好地理解本發明的實質，下面將用映山紅花總黃酮的實驗及結果來說明其在製藥領域中的藥用價值。
映山紅總黃酮藥效作用本申報的中藥·天然藥映山紅花總黃酮(TFR)，是從杜鵑花科杜鵑花屬植物杜鵑花中提取的一個有效部位。我們曾研究發現，金絲桃苷(hyperoside，Hyp)——TFR中的主要成分之一，能有效阻止Ca2+內流，濃度依賴性地抑制[Ca2+]i增高，產生類似鈣拮抗劑的作用。而鈣拮抗劑是臨床治療心、腦缺血性損傷的主要治療用藥。此外，TFR中另一主要成分——槲皮素，也有類似的報導。與該藥相似的黃酮類化合物如銀杏總黃酮、燈盞花素等已用於治療心、腦血管疾病。鑑於上述情況，我們認為TFR可能有治療缺血性心、腦損傷的作用，因此進行了該藥治療缺血性心、腦損傷的實驗研究。結果發現對缺血性腦損傷的保護作用1)TFR可明顯延長小鼠斷頭後張口喘氣時間；劑量依賴性地減輕MCAO大鼠腦梗塞組織重量；顯著抑制不完全腦缺血大鼠腦水腫的發生及缺血腦組織病理形態學的變化。表明TFR對缺血、缺氧性腦損傷有保護作用。
2)TFR能顯著增加狗頸內動脈的血流量，降低頸內動脈血管阻力，對心率、心電圖及全身動脈血壓無明顯影響。
3)TFR能顯著抑制膠原(Coll)誘發的血小板聚集反應，明顯降低大鼠頸總動脈一靜脈旁路血栓的溼重，表明TFR可明顯抑制血小板聚集和血栓形成。以上藥效學實驗結果表明，TFR對缺血性腦損傷有較好的保護作用，其作用與增加腦血流量、抗血小板聚集和抑制血栓形成等有關。
對心肌缺血損傷的保護作用1)TFR可顯著延長夾閉氣管小鼠ECG持續的時間；對垂體後葉素(Pit)誘導心肌缺血損傷的大鼠，TFR可顯著抑制iv Pit後ST段上移和T波的抬高，另外TFR可顯著減少缺血大鼠心肌組織和血清中MDA的含量，可使血清中LDH的活力明顯降低。
2)在異丙腎上腺素(Iso)誘導大鼠心肌缺血損傷的模型中，TFR可顯著減少缺血大鼠心肌組織中鈣離子濃度，同時升高ATP酶活力；病理組織學切片觀察發現TFR可減少Iso大鼠心肌組織中炎性細胞浸潤，點狀壞死灶或空泡變性，上述結果表明，TFR能使Iso誘導的大鼠心肌的損傷程度明顯減輕。
3)TFR能顯著增加狗冠狀動脈的血流量，降低冠狀動脈血管阻力，對心率、心電圖及全身動脈血壓無明顯影響。
4)TFR能顯著抑制ADP誘發的血小板聚集反應，明顯降低大鼠頸總動脈—靜脈旁路血栓的溼重，表明TFR可明顯抑制血小板聚集和血栓形成。
5)在結紮家兔冠狀動脈造成心肌缺血損傷的模型中，TFR能降低結紮冠脈後ECG中ST段的抬高，另外TFR能降低結紮冠脈24小時後血清中CK酶的活力，升高血清中ET和NO的含量，同時TFR能減少家兔冠狀動脈結紮後心肌的缺血面積和梗死重量。
毒理學研究映山紅總黃酮(TFR)小鼠急性毒性試驗試驗結果表明小鼠灌胃給藥映山紅花總黃酮20000mg.kg-1，2W內未見小鼠出現明顯的毒性反應，也未見死亡，表明映山紅花總黃酮小鼠灌胃給藥LD50大於20000mg.kg-1；映山紅花總黃酮小鼠腹腔注射1h後，開始出現毒性反應，死亡動物主要發生在用藥後1-2d內，死亡動物屍體解剖後，肉眼觀察未見心、肝、腎、肺、腦及胃腸有明顯的病變；小鼠腹腔注射映山紅花總黃酮LD50為2641.5±201.4mg.kg-1，95％可信區限為2396.5～2879.6mg.kg-1。
映山紅花總黃酮(TFR)大鼠長期毒性試驗大鼠連續13W灌胃映山紅花總黃酮150、300、600mg.kg-1。試驗給藥期間和停藥恢復觀察期均未見動物有明顯的中毒症狀出現，其攝食、體重增長與對照組比較無明顯差異，主要臟器的臟器係數和組織病理學檢查與對照組比較無明顯差異；血液學檢查和血液生化學檢查中只有用藥13W時大劑量組的AST和ALT升高以及大、小劑量組GLU有明顯的降低，其他指標無明顯的不利改變，停藥恢復觀察期未見其他新的毒性反應的產生。
以上藥效學及毒理學實驗結果表明，TFR對心肌缺血有較好的保護作用，其作用與增加冠脈血流量、抗氧化以及抑制血小板聚集等有關，並且毒性低，應用安全。
上述實驗研究結果可以得出本發明具有幾方面的優點1、本發明的映山紅花總黃酮有通竅，散瘀，消腫之功能，單用本品對缺血性心、腦損傷有治療作用。
2、本發明為映山紅花總黃酮發掘了藥用前景。
3、本發明的映山紅花總黃酮毒性低、療效好，應用安全，且其原料資源豐富，以本發明為基礎可進行進一步地新藥研究開發。
具體實施例方式
下面結合實施例對本發明作進一步地描述。
實施例本發明為映山紅花醇浸膏經聚醯胺柱層析得粗品總黃酮，後經溶劑處理所得的總黃酮粉末。
具體的製作方法如下
取映山紅花生藥，粉碎，加10倍量70％乙醇回流提取3次，每次2小時，合併提取液，放冷，過濾，減壓回收乙醇至無醇味，並濃縮至相對密度為1.3(70℃)的浸膏。加相當於生藥6倍量的沸水攪拌使溶解，過濾，濾液加於已處理好的聚醯胺柱(14-30目，相當於生藥7倍量，φ14×80cm)上，用水洗脫至流出液呈淡黃色後，用70％乙醇洗脫，收集洗脫乙醇至洗脫液呈淡黃色為止，用量為柱體積的7倍，減壓回收乙醇，80℃減壓乾燥至幹浸膏，粉碎，得粗品總黃酮。再用10倍量共沸點溶劑醋酸乙酯—乙醇(76.89∶38.79v/v)回流提取3次，每次2小時，合併提取液，減壓回收溶劑，80℃減壓乾燥得產品總黃酮(總黃酮含量為60.2％)。
權利要求
1.映山紅花總黃酮在製備心腦血管疾病藥物中的應用。
全文摘要
本發明涉及映山紅花總黃酮在製備心腦血管疾病的藥物中的應用。本發明的映山紅花總黃酮有通竅，散瘀，消腫之功能，單用本品對缺血性心、腦損傷有治療作用；本發明為映山紅花總黃酮發掘了藥用前景，由於映山紅花總黃酮療效好，毒性低、應用安全，其原料資源豐富，以本發明為基礎可進一步地進行新藥開發。
文檔編號A61K31/7042GK1569018SQ20041001482
公開日2005年1月26日 申請日期2004年4月29日 優先權日2004年4月29日
發明者陳志武, 方明, 董六一, 範麗 申請人:陳志武, 方明, 董六一, 範麗