用於傷口癒合的基質蛋白組合物的製作方法

2023-06-08 19:30:56 2

>03小時6小時24小時中間普雷沃氏菌1004000牙齦卟啉單胞菌1003000與僅使用載體或不添加EMD的對照相比，EMD的存在顯著抑制培養物的生長。實施例6對EMODGAIN在牙周手術後改善軟組織傷口癒合效應的研究本實施例的目的是顯示在牙周手術後釉基質衍生物和/或釉基質蛋白對改善軟組織傷口癒合的影響。50個以上獼猴牙齒的牙周邊緣的實驗損傷是通過除去牙骨質，牙周膜和邊緣牙槽骨後造成一個頸-尖距離大約5mm的牙齒毛刺。將釉基質衍生物(購自EMODGAIN，未重配的凍乾粉末或重配的組合物)加入實驗損傷處，或不加任何物質(對照)。在重配的組合物中蛋白質的含量大約是5-30mg/ml，每個實驗損傷所加的體積介於大約0.1到0.2毫升。傷口癒合在接下來的8周內通過目測進行評價。在給藥EMODGAIN的損傷處，可觀察到很好的癒合效果(無紅色和腫脹)，給藥2周後拆線時幾乎看不到斑，5周後可見良好的癒合，幾乎無牙齦炎，8周即實驗終止時完全癒合無任何併發症。相比之下，對照傷口2周後出現炎症，並伴有收縮和明顯斑，5周和8周後出現明顯的收縮和牙齦炎。實施例7對牙周手術後釉基質衍生物和釉基質蛋白的傷口癒合效應的研究本發明的目的是顯示牙周手術後釉基質衍生物和釉基質蛋白對病人的快速傷口癒合的影響。需要進行牙周手術的55個病人被分成兩組，一種進行常規的手術並使用改進過的Widman牙周翻瓣術(20個病人)，另一組使用相同的步驟但附加使用EMODGAIN(35個病人)(濃度為30mg蛋白/ml，每個牙齒大約使用0.3ml)。在手術時沒有病人使用抗生素，但所有人均被指導每天使用無菌(洗必太)漱口水。在拆線時(手術後1-3周)每個病人被詢問問題。儘管3個對照組病人(15％)出現術後問題需要使用抗生素，但僅有一個使用EMODGAIN處理的病人需要此種治療。實施例8拔牙後釉基質衍生物和釉基質蛋白的傷口癒合效應的研究本實施例的目的是為了證明在第三磨牙摘除後釉基質衍生物和釉基質蛋白對傷口癒合的影響。30歲或大於30歲的需要摘除對稱阻生或半阻生下頜第三磨牙的病人採用傳統方法進行一個第三磨牙的摘除，該方法涉及垂直向翻瓣術以進行必要的骨切除術和切開，而另一個磨牙摘除後牙槽在縫合前添滿EMODGAIN。所有的病人在手術前1-2小時使用抗生素(3g羥氨苄青黴素或1g紅黴素)，手術後使用lbuprofen(600mg×3)。然後他們被指導使用洗必太漱口(0-1％，10ml×2)4周。2周後拆線。用EMODGAIN處理和對照位置的癒合情況由病人和牙科醫生共同評價。在一個中心，9個病人對側摘除後使用/不使用EMODGAIN處理。一個病人在兩個位置的縫合處均有輕微疼痛，而其它病人僅在對照位置有嚴重痛覺，而在EMODGAIN處理的位置無任何問題。在第二個中心，6個病人中的3個僅在對照位置有疼痛。最終在第三個中心，一個病人被診斷為對照位置的牙槽有嚴重問題，即牙槽炎，EMODGAIN處理的位置無問題。另一個病人在兩個摘除的縫合處均有輕微疼痛，但只有對照處出現炎症和明顯疼痛，需要反覆用鹽水衝洗並攝入止痛劑。這些臨床結果顯示出在智齒被摘除後採用EMODGAIN處理牙槽可以改善癒合並緩解其它情況下經常出現的疼痛性腫脹。實施例9釉基質衍生物和釉基質蛋白對幹痛牙槽炎癒合效應的研究本實施例的目的是顯示釉基質衍生物和釉基質蛋白對幹痛牙槽炎(幹槽症)癒合的影響。在摘除一個70歲的男性患者的一個感染的35牙根殘餘物後，病人經歷了與摘除牙槽有關的劇烈疼痛和腫脹。當他的牙科醫生為他檢查時發現他已經發展成幹痛牙槽炎，即最初的凝結物已經分離，牙槽骨壁壞死。鄰接的牙槽骨和軟組織出現炎症。該病人有心臟病史，曾採用抗凝劑Marevan進行治療。作為其病況的結果，他的外周血循環降低。他還經常每天吸多支煙。病人的牙槽炎按照傳統方法除去壞死牙槽骨，導致新出血。而且病人的齒齦鬆動，採用縫合術封閉牙槽。而後對病人使用青黴素(apocillin660mg，早晚共2片，使用7天)以防止感染，同時建議病人使用洗必太每天漱口兩次。5天後停用抗生素時病人仍顯示出臨床症狀並抱怨有嚴重疼痛。對手術處進行肉眼觀察，觸摸和探測顯示出牙槽炎持續存在並出現更多的骨壞死。X-射線顯示骨破壞和壞死均出現在牙槽的頂點部分。手術處被再一次清理乾淨，所產生的骨損害處用EMODGAIN添滿(30mg/m1，最多使用0.5m1)，在齒齦處使用新的縫合以封閉牙槽。未再採用其它的治療方法，但病人被告知繼續用洗必太漱口。兩天後病人回到診所報告說疼痛和腫脹均消失。臨床檢查和在EMODGAIN處理一周後拆線顯示出良好的癒合效果，沒有炎症和壞死的跡象，沒有紅色和腫脹的完整的齒齦覆蓋傷口區域。當觸摸和探測時沒有流血和疼痛感。觀察不到惡臭或怪味或滲出液。病人沒有報告有任何痛覺和發現其它症狀。實施例10釉基質衍生物和釉基質蛋白對幹痛牙槽炎的預防效應的研究本實施例的目的是顯示釉基質衍生物和釉基質蛋白抗幹痛牙槽炎的預防效應。一個82歲的女性病人患有44號牙垂直根斷裂。該牙齒是跨越35號到46號牙的橋梁的支柱，病人曾在很多年以前接受牙髓治療。臨床上，牙齒周圍的牙齦出現炎症，有一個牙齦袋沿著垂直方向直至牙齒的頂端。X-射線顯示44號牙的嚴重局部牙周炎。該病人有很好的口腔衛生，但由於使用Marevan(抗凝劑)治療心臟病，牙槽在觸探時很容易造成流血。6個月以前，病人由於嚴重的牙周炎通過手術摘除了第35號牙。那次手術後她經歷了長時間的幹痛牙槽炎。她非常關心的是44號牙的摘除會不會導致她曾經經歷的相同的術後併發症。她被告知由於年齡大，使用過Marevan進行治療和感染的牙根和牙齦袋的合併作用將使得她遭受術後綜合症例如牙槽炎的危險性大大增加，而除了手術除去牙根碎片外無其它辦法。該病人同意將44號牙摘除並且作為實驗使用EMODGAIN進行預防治療以阻止幹痛牙槽炎的發生。病人在麻醉後被實施切口和摘除面頰骨，以使在不鬆動(牙齒)間橋的情況下摘除牙根碎片。摘除後牙槽經機械清洗後添滿EMODGAIN(30mg/ml，最多使用0.5ml)，通過縫合使瓣重新復位。當天晚上病人報告(通過電話)在手術區域有長時間流血(手術前未停止使用Marevan)，但無其它症狀。當手術5天後拆線時，手術過的軟組織損傷完全癒合。病人沒有報告有任何例如疼痛或腫脹的症狀，對此治療大體上非常滿意。實施例11釉基質衍生物和釉基質蛋白對外傷後併發症的癒合效應本實施例的目的是為了顯示釉質蛋白/釉基質衍生物對病人外傷後併發症癒合的影響。在一次意外事故後，病人在一個急診所將受傷的上前牙進行連接。牙科醫生發現11和21號牙齒死亡，12和22號牙齒有Ⅰ或Ⅱ類近中切骨折。邊緣齦出現嚴重的炎症，與牙齒表面的附著非常差。病人有疼痛和麻木，腫脹和味嗅覺不好的併發症。在11和21號牙的根尖區還出現牙周膜損傷。兩個中切牙被清潔，將新鮮混合的Ca(OH)2添滿牙根。4個星期後，傷口的癒合仍被判斷為不理想。情況發展成一種慢性炎症，牙齒被視作失去。對於此種情形的標準的治療方法是取出全部4個切牙並用間橋或植入物代替。然而，病人強烈反對這種治療方法，作為保存牙齒的最後努力，對所有四個受傷的牙齒(11,12,21,22)進行齦翻瓣術。使用了兩瓶EMODGAIN(60mg在3ml溶液中)。在瓣用7針縫合以前，用注射器向每個牙齒內注入至多0.2ml的EMODGAIN(30mg/ml)。手術5天後拆除4針縫合線。在主觀和臨床條件下均有顯著改善。病人不再抱怨疼痛，麻痺的感覺消失，傷口區域不再有惡臭味。兩周後拆除剩餘的縫合線，齒齦不顯示任何炎症，病人沒有任何抱怨。齒齦完好無任何炎症，它牢牢的與牙齒和/或牙槽骨附著，顏色為粉色(沒有炎症區域內存在的鮮紅色)，存在正常的牙齒間突起(非腫脹)。而且觀察到牙齒受傷部分的牙周膜重新出現，顯示出很好的改善效果，通過X-射線檢查可以觀察到新的牙槽骨沉積。實施例12相鄰牙齒和神經的外傷癒合病例報告一個39歲的女性病人其下方左側的智齒(38)的周圍患有嚴重的冠周炎。在公共牙科診所其牙齒被部分摘除，在下顎留有牙齒的根尖部分，並伴有手術造成的根部骨折。由於疼痛，第二天，該病人給推薦到一個牙科手術的專家處以除去牙根碎片。手術後兩天，病人去見她的常務牙科醫生進行處置。她的面頰左側腫脹，並且其左側下頜骨神經顯示出持續的和完全的阻滯。臨床檢查和X-射線照片顯示手術時對下頜骨、37號牙齒的牙根末梢的三分之一根尖和下頜神經槽造成嚴重的鑽開損害(見X-射線照片，圖1A)。對37號牙齒的探洞深度穿越末梢根部至牙冠頂端為25mm。為了誘導37號牙齒的骨骼和神經的癒合和失去的牙周膜的再生，手術傷口被打開並仔細清理乾淨。當用鹽水去除殘餘碎片後，37號牙齒暴露的骨頭，末梢根部的表面和下頜神經使用EMODGAIN(30mg/ml，過量提供，約1ml)覆蓋，然後將傷口使用三針縫合在一起。病人被指導使用洗必太溶液(Corsodyl)在接下來的5天裡每天漱口兩次，並開始使用青黴素(氨卞青黴素，660mg×4)進行為期5天的預防治療。10天後，病人返回，拆除縫合線。此時腫脹消失，軟組織的癒合良好。然而下頜神經的完全麻痺仍然存在，病人被告知其受損傷的神經的前景至多是難以預料的。此時麻痺使得37號牙齒的存活難以預料。通常情況下，象這個病人呈現出來的根部損傷會導致牙髓壞死和牙齒僵硬。為了阻止這種併發症，需要進行牙髓治療。然而為了看到所使用的實驗治療是否可以促進牙周膜的癒合，病人同意此時不對牙齒進行治療。此後病人被安排每月接受一次處置。上述處置兩個月後，病人左側下嘴唇出現過敏感覺，顯示出神經癒合的跡象。37-38號牙之間區域的軟組織完全癒合無任何傷疤。X-射線也顯示出在摘除位置的牙槽出現新骨的形成。但37號牙齒和其周圍組織仍處於麻痺狀態。治療後四個月，麻痺消失，牙齒被證實存活，但處於過敏狀態，對溫度和電刺激均敏感。X-射線顯示摘除位置的牙槽明顯被骨填充，37號牙齒的根部末梢顯示出牙周再生的跡象。在使用EMODGAIN治療後5個月，37號牙齒的存活經檢測正常。此時通過X-射線可以證實有功能的牙周膜的完全再生(圖1B)和正常外觀的新形成的牙槽骨已經添滿骨骼缺損和摘除位置的牙槽。沒有僵硬的跡象。37號牙末梢的孔洞探測深度現僅約10mm，在釉質牙骨質界之下約1mm。經過這種處置後，病人被認為完全康復，只安排每一年一次的常規複診。評價在手術去除智齒後相鄰牙齒和神經外傷的完全和快速癒合是很少見的。經常出現的嚴重程度如上所述的併發症往往以被損傷牙齒的完全摘除而結束，或者至少也是牙髓的去除和牙根填充，隨後出現伴有僵硬的骨癒合。受損傷的神經一般需要8到12個月才能癒合，即使如此經常在一些區域會出現麻痺現象，而且維持數年。上文報導的良好和快速的癒合是非常少見的，應被認為是EMODGAIN傷口癒合能力的一個體現。X-射線A38號牙摘除後兩天的病人。注意到存在於牙齒37遠中端的大的缺損並累及下頜管。而且37號牙齒遠中頰的牙槽骨在手術中被摘除。B手術後5個月的病人。注意到在37號牙齒遠在中根損傷處完全的、有功能的牙周膜(laminadura)跡象。沒有僵硬的跡象。此時可以看到下頜管的輪廓，並且摘除位置的牙槽完全被骨添滿。同時也觀察到37號牙周圍有新的遠中頰牙槽骨的形成。實施例13釉基質衍生物和釉基質蛋白對小腿部潰瘍(靜脈潰瘍)癒合效應的研究病人1病人為男性，生於1926年，有血栓病史和很嚴重的血栓後遺症和反覆發作的靜脈潰瘍。他採用過抗凝集香豆素衍生物的系統治療，潰瘍在局部使用Crupodex(右旋糖單體)和3％的硼酸溶液治療。在開始啟動EMODGAIN治療以前他的靜脈潰瘍為一個橢圓形，大小5×4cm，深度為0.5mm，病程處於肉芽化階段，有很差的上皮化。傷口用3％的雙氧水消毒後，將500微升的EMODGAIN滴加施用並用無菌的拭子均勻鋪開。EMODGAIN在空氣中暴露10分鐘，然後傷口用10％的Prvidone碘藥膏浸溼的Inadine(JohnsonJohnson)Rayon敷料覆蓋。5天後，在最接近潰瘍的位置出現上皮形成，潰瘍面減少至1.8×2.2cm，無任何副反應(炎症)。不再加EMODGAIN。12天後在最接近潰瘍的位置出現進一步的上皮化，並且側部出現新的上皮化，面積大約為2×2cm。大約一半的潰瘍得到癒合。使用400微升的EMODGAIN。19天後在最接近潰瘍的位置和其側面出現進一步的上皮化，但在遠端部分未上皮化，潰瘍很深(大約1mm)。一半以上的潰瘍得到癒合。繼續使用300微升的EMODGAIN。自從啟動了EMODGAIN的治療，病人與這種治療開始以前相比不再感覺潰瘍處有疼痛感。EMODGAIN再繼續每周使用一次至第40天(200微升)，在47天後潰瘍被認為全部癒合。病人2該病人為女性，生於1949年，患有血管曲張，長期靜脈供血不全和反覆發作的靜脈潰瘍。她對於藥物(藥物，藥劑)多價過敏並靜脈曲張(excemavaricosum)。該病人曾使用Otosporin滴劑(硫酸多粘菌素B+硫酸新黴素+氫化可的松)和氫化可的松敷布接受過局部治療。在啟動使用EMODGAIN治療時，她的靜脈潰瘍是直徑1cm，深度2mm。使用300微升的EMODGAIN。5天後，在傷口周圍(周長)2mm的範圍內出現上皮化，無任何副反應(炎症)。此時不再使用EMODGAIN。12天後，潰瘍縮小到直徑大約2mm，此時再使用100微升的EMODGAIN。19天後潰瘍仍為直徑2mm，但底部很好地肉芽化，潰瘍不再很深(僅大約0.2mm)。使用100微升的EMODGAIN。同樣是該病人在另一條腿出現一個大約0.3×1cm的潰瘍。此時使用200微升的EMODGAIN。7天後，出現新的上皮化，底部出現良好的肉芽化，潰瘍面積縮小到大約0.2×0.5cm。隨後針對每一個潰瘍每周使用100微升EMODGAIN直至第40天。47天後，潰瘍被認為全部癒合。沒有發現對EMODGAIN的過敏反應。在同一條腿上又形成另一個潰瘍，面積為0.5×0.3cm，使用了100微升EMODGAIN進行治療。病人3該病人為女性，1929年生，患有丹毒後出現的嚴重靜脈血栓，在啟動EMODGAIN治療前有15×19cm的大面積小腿潰瘍，並且由於使用了各種治療方法後幾乎沒有效果，病程處於發展中。700微升的EMODGAIN作用於從上邊開始3cm的面積。7天後沒有出現上皮生成，但治療區域變得更透明(更結構類似)，並伴有小的分散區域的肉芽化，在這一區域無疼痛感和進展現象。再使用700微升的EMODGAIN作用於同一區域。4周後，病人在未使用EMODGAIN治療的潰瘍遠端出現感染，被確認為假單胞菌所致。加入700微升的EMODGAIN。感染7天後消失。病人4該病人為女性，1947年出生，患有血管曲張和丹毒後引起的血栓性靜脈炎，在啟動EMODGAIN治療時，她有一個面積為2×0.8cm的小腿潰瘍，潰瘍底部清潔但沒有肉芽化。先使用300微升的EMODGAIN。7天後，潰瘍面積減少至0.3×0.7cm，表皮生成開始出現，底部開始出現肉芽化。再使用200微升的EMODGAIN，隨後每周使用100微升EMODGAIN，共五周。潰瘍在5周後被認定全部癒合。實施例14EMODGAIN作為一種輔助物對平坦表面位置上的非手術牙周治療目的本研究的目的是評價EMODGAIN是否可以用於改善非手術牙周治療的癒合結果。本研究的特殊目的是評價在平表面位置上的效應。研究設計本研究是針對一個個體在6個月的時間裡的垂直試驗進行的。本研究採取雙盲，分說(split-mouth)，安慰劑對照和隨機的設計。受檢者Goteborg大學的牙科學系中的14個病人被視做牙科臨床病人，需要對他們的中等嚴重程度的牙周疾病進行治療。包括的標準在探測袋深度≥5mm的2個對側四分體的每一個，至少有3個平坦的牙齒表面部位，其中至少一對部位的探測袋深度≥6mm所選擇的牙齒必須有通過熱或電刺激確定為存活的牙髓，或者，如果進行牙根管治療，必須是無症狀的和沒有技術remars的。治療在進行完基本檢查後，所有病人被告知疾病情況並被指導使用恰當的齦上斑控制措施。進行定位和牙根設計。當袋流血停止時，24％的EDTA(購自BioraAB，瑞典)作用於袋2分鐘。待用鹽水仔細清洗後加入測試物質(EMODGAIN)或者對照物質(PGA凝膠)。評估基線測定，1,2,3,8和24周跟蹤檢查包括以下變量1．口腔衛生情況-出現或/沒有牙斑2．牙齦情況-(牙齦指數；Loe1967)3．探測袋深度4．探測附著水平5．探測出血-出現/未出現(15秒)6．牙質超敏-鼓風機刺激7．不舒適程度-在1,2和3周跟蹤檢查記錄，使用一個10cm＜＜視覺類似水平(VAS)牙斑平均值(sd)牙齦指數；平均值(sd)探測出血；％病人主觀評價；VAS得分第一周第三周結論病人僅有很輕的術後問題，流血少，牙斑少，並有改進的牙齦指數。這一結果支持了EMODGAIN對傷口癒合的效應。實施例15豬中先導傷口癒合研究介紹目的該先導研究的目的是評價豬中深度裂口傷口的癒合和EMD對這些傷口的效應選擇該種動物物種的原因豬作為實驗模型被選出是因為該種動物已被證實是評價人的傷口癒合的一個良好模型。材料和方法動物本實驗將在4個雌性SPF豬(丹麥鄉村雜交種，Yorkshire和Duroc)上進行。在觀察初期動物的體重大約35kg。觀察期需要1周，其間每天對動物進行觀察以淘汰身體狀況不好的個體。所有的觀察需要記錄。飼養舍本研究在有濾過空氣供給，溫度21℃±3℃，溼度55％±15％和空氣變化10次/小時的動物舍中進行。室內提供一個每天12小時照明和12小時黑暗的循環的條件。照明時間是從6點到18點。動物在隔離欄中分開飼養。草墊草墊為軟木鋸屑」LIGNOCELH3/4」，購自HahnCo，D-24796Bredenbek-Kronsburg。對相關的可能汙染物需要進行定期分析。食物一種商購豬食「Altromin」購自Chr.PetersonA/S，DK-4100。食物按份提供(大約800g，每天2次)。對食物中主要的營養成分和相關的可能性汙染物的分析定期進行。飲用水動物每天被提供2次家庭質量的飲用水。對相關的可能性的汙染物的分析定期進行。傷口傷口在第一天建立。動物用StresnilVet.Janssen，比利時(40mgazaperone/ml，1ml/10kg)，和AtropinDAK，丹麥(1mg阿託品/ml，0.5mg/10kg)進行一次肌肉內注射而麻醉，，緊接著靜脈注射HypnodilJanssen，比利時(50mgmetomidate/ml，大約2ml)。動物背部任何一面的一個側面區域被切開，用肥皂和清水洗滌，70％的乙醇消毒，無菌鹽水衝洗，最後用滅菌紗布敷幹。使用ACCU-Dermatom(GA630，Aesculap)在製備區域獲得8個深度裂口傷口(25×25×0.4mm)，其中每四個位於脊柱的一側。動物左側的傷口被編號為1(從頭部開始)至4(尾部)號，動物右側的傷口被編號為4(從頭部開始)至8(尾部)號。凝集的血液用滅菌紗布除去。在即將手術前，手術停止後約8小時，和其後必要時的任何時間給動物肌內注射AnorfinA/SGEA，丹麥(0.3mg丁丙諾啡叔丁啡/ml，0.04ml/kg)。劑量受傷後傷口將按以下方式處理A=對照B=EMD在用藥前大約15分鐘，EMD配製品按照生產商的指導進行製備。EMD配製品在製備後2小時使用。對於傷口的B治療，EMD將作為一個薄層作用於傷口表面。每4個傷口使用1瓶EMD。傷口敷料傷口用Tegaderm覆蓋。該敷料用無菌紗布覆蓋，Fixomul固定。敷料，紗布和Fixomul被網狀襪Bend-a-rete(Tesval，義大利)保持。每天觀察敷料的情況。敷料將在第二天(所有動物)和第3天(動物編號3和4)更換。在每次更換以前在動物頸部肌肉注射Zoletil50Vet.，Virbac，法國(125mg替來他明和125mgzolazepam，溶解在5ml溶劑中，5ml)，RompunVet.，Bayer，德國(20mg甲苯噻嗪/ml，6.5ml)和MethadonDAK，丹麥(10mg美沙酮/ml，2.5ml)的混合物(1.0ml/10kg體重)而麻醉。傷口的觀察所有傷口分別在第二天(所用動物)，第三天(所有動物)和第四天(動物編號3和4)進行觀察和照相。滲出液和炎症的水平將被評估。移植表皮的出現將被詳細記錄。臨床跡象所有可以觀察到的疾病健康和行為變化每天都被記錄。一些與正常情況的背離將按照出現的時間，持續的時間和強度進行記錄。體重所有動物在到來，傷口的出現日和研究結束時都要被稱重。終期觀察在第三天(大約傷口出現後56小時)，1和2號動物使用栓槍擊昏後，由鎖骨下靜脈和動脈刺入致死。在第四天(大約傷口出現時72小時)，3和4號動物使用栓槍擊昏後，由鎖骨下靜脈和動脈刺入致死。組織取樣每一個傷口分塊從骨骼肌肉組織切割下來。如果傷口與下層的骨骼肌肉組織發生一些粘連，部分肌肉將被包含在用於固定的材料中。每一個傷口切塊用含4％甲醛的中性磷酸緩衝液固定。組織學製備固定後從所有傷口中選擇4個有代表性的樣品包被在石蠟中，切成一般5μm的厚度，使用蘇木素和曙紅進行染色。染色後使用柵欄在光學顯微鏡下進行觀察。這種觀察可以對傷口的總長度和表層面積進行測定。取每個傷口的平均值，然後用於計算群平均值。統計學數據經加工後計算出群平均值和適當的標準方差。可能的出入也被鑑定出來。此後每一個連續的變化將用Bartllet′s實驗測定變化的同質性，如果這些差異是同質的，即可對變化進行差異的分析。如果檢測到一些有意義的差異，可能的群內差異將用Dunnett’s實驗評估。如果變化是異質的，每一個變化將按通常的Shopiro-Wilk方法測定。在正常分布的情況下，可能的群內差異將用Student′st-檢驗鑑定，否則其它可能的群內差異將用Kruskal-Wallis′s檢驗評估。如果檢測到一些有意義的群內差異，將使用WilcoxonRank-Sum檢驗對這些群作隨後的鑑定。統計學的分析將使用「SAS/STAT使用者指導，第6版，第4次編輯，Vol.1+2」，SASInstituteInc.，NorhtCarolina27513，美國」中介紹的SAS程序(版本6.12)進行。序列表110拜奧拉公司120用於傷口愈口的基質蛋白組合物13020542PCl1602170FastSEQ軟體，Windows3.0版2101211407212PRT213未知4001MetSerAlaSerLysIleProLeuPheLysMetLysGlyLeuLeuLeu151015PheLeuSerLeuValLysMetSerLeuAlaValProAlaPheProGln202530ArgProGlyGlyGlnGlyMetAlaProProGlyMetAlaSerLeuSer354045LeuGluThrMetArgGlnLeuGlySerLeuGlnGlyLeuAsnAlaLeu505560SerGlnTyrSerArgLeuGlyPheGlyLysAlaLeuAsnSerLeuTrp65707580LeuHisGlyLeuLeuProProHisAsnSerPheProTrpIleGlyPro859095ArgGluHisGluThrGlnGlnProSerLeuGlnProHisGlnProGly100105110LeuLysProPheLeuGlnProThrAlaAlaThrGlyValGlnValThr115120125ProGlnLysProGlyProHisProProMetHisProGlyGlnLeuPro130135140LeuGlnGluGlyGluLeuIleAlaProAspGluProGlnValAlaPro145150155160SerGluAsnProProThrProGluValProIleMetAspPheGlyAsp165170175ProGlnPheProThrValPheGlnIleAlaHisSerLeuSerArgGly180185190ProMetAlaHisAsnLysValProThrPheTyrProGlyMetPheTyr195200205MetSerTyrGlyAlaAsnGlnLeuAsnAlaProGlyArgIleGlyPhe210215220MetSerSerGluGluMetProGlyGluArgGlySerProMetGlyTyr225230235240GlyThrLeuPheProGlyTyrGlyGlyPheArgGlnThrLeuArgGly245250255LeuAsnGlnAsnSerProLysGlyGlyAspPheThrValGluValAsp260265270SerProValSerValThrLysGlyProGluLysGlyGluGlyProGlu275280285GlySerProLeuGlnGluProSerProAspLysGlyGluAsnProAla290295300LeuLeuSerGlnIleAlaProGlyAlaHisAlaGlyLeuLeuAlaPhe305310315320ProAsnAspHisIleProAsnMetAlaArgGlyProAlaGlyGlnArg325330335LeuLeuGlyValThrProAlaAlaAlaAspProLeuIleThrProGlu340345350LeuAlaGluValTyrGluThrTyrGlyAlaAspValThrThrProLeu355360365GlyAspGlyGluAlaThrMetAspIleThrMetSerProAspThrGln370375380GlnProProMetProGlyAsnLysValHisGlnProGlnValHisAsn385390395400AlaTrpArgPheGlnGluPro4052102211324212PRT213未知4002MetLysProAsnSerMetGluAsnSerLeuProValHisProProPro151015LeuProSerGlnProSerLeuGlnProHisGlnProGlyLeuLysPro202530PheLeuGlnProThrAlaAlaThrGlyValGlnValThrProGlnLys354045ProGlyProHisProProMetHisProGlyGlnLeuProLeuGlnGlu505560GlyGluLeuIleAlaProAspGluProGlnValAlaProSerGluAsn65707580ProProThrProGluValProIleMetAspPheGlyAspProGlnPhe859095ProThrValPheGlnIleAlaHisSerLeuSerArgGlyProMetAla100105110HisAsnLysValProThrPheTyrProGlyMetPheTyrMetSerTyr115120125GlyAlaAsnGlnLeuAsnAlaProGlyAr9IleGlyPheMetSerSer130135140GluGluMetProGlyGluArgGlySerProMetGlyTyrGlyThrLeu145150155160PheProGlyTyrGlyGlyPheArgGlnThrLeuArgGlyLeuAsnGln165170175AsnSerProLysGlyGlyAspPheThrValGluValAspSerProVal180185190SerValThrLysGlyProGluLysGlyGluGlyProGluGlySerPro195200205LeuGlnGluProSerProAspLysGlyGluAsnProAlaLeuLeuSer210215220GlnIleAlaProGlyAlaHisAlaGlyLeuLeuAlaPheProAsnAsp225230235240HisIleProAsnMetAlaArgGlyProAlaGlyGlnArgLeuLeuGly245250255ValThrProAlaAlaAlaAspProLeuIleThrProGluLeuAlaGlu260265270ValTyrGluThrTyrGlyAlaAspValThrThrProLeuGlyAspGly275280285GluAlaThrMetAspIleThrMetSerProAspThrGlnGlnProPro290295300MetProGlyAsnLysValHisGlnProGlnValHisAsnAlaTrpArg305310315320PheGlnGluPro權利要求1．一種活性釉質物質在製備用於傷口癒合的藥物或化妝品組合物中的應用。2．一種活性釉質物質在製備用於改善傷口癒合的藥物或化妝品組合物中的應用。3．一種活性釉質物質在製備用於軟組織再生或修復的藥物或化妝品組合物中的應用。4．根據權利要求1-3任一項的應用，其中傷口存在於口腔中。5．根據權利要求1-3任一項的應用，其中傷口是身體損傷或與口腔手術包括牙周手術，拔牙術，牙髓治療，牙植入物的插入，假牙應用相關的外傷。6．根據權利要求1-3任一項的應用，其中傷口選自無菌傷口，挫傷傷口，切割傷口，撕裂傷口，非穿透傷口，開放傷口，穿透傷口，穿孔傷口，刺破傷口，膿毒傷口，梗死和皮下傷口。7．根據權利要求1-3任一項的應用，其中傷口選自缺血性潰瘍，褥瘡，瘻，嚴重咬傷，熱灼傷和供體部位傷口。8．根據權利要求1-4中任一項的應用，其中傷口是口瘡傷口，外傷傷口或與皰疹相關的傷口。9．一種活性釉質物質製劑在製備用於預防和/或治療感染的藥物組合物中的應用。10．根據權利要求9的應用，其中感染由微生物引起。11．根據權利要求9或10的應用，用於預防或治療黏膜表面的微生物生長。12．根據權利要求9或10的應用，用於預防或治療指甲或牙齒表面的微生物生長。13．根據權利要求9或10的應用，其中感染存在於口腔中。14．根據權利要求13的應用，用於預防和/或治療口腔中的微生物症狀。15．根據權利要求9-14任一項的應用，其中感染由如下細菌導致，即引起齲齒的細菌，例如突變鏈球菌；引起牙周疾病的細菌，例如伴放線放線桿菌，牙齦卟啉單胞菌，中間普雷沃氏菌，微小消化微鏈球菌，彎曲桿菌(梭桿菌，葡萄球菌)，B.forsythus；引起牙槽炎的細菌，例如葡萄球菌，放線菌和芽孢桿菌；和引起尖周損害的細菌，例如螺旋體。16．根據權利要求9-11任一項的應用，其中細菌存在於皮膚上。17．一種活性釉質物質製劑在製備用於治療和/或預防炎症的藥物組合物中的應用。18．根據權利要求17的應用，其中炎症存在於口腔。19．根據權利要求17的應用，其中炎症存在於骨供體部位。20．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中所述活性釉質物質是釉基質，釉基質衍生物和/或釉基質蛋白。21．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質選自釉質蛋白(enamelin)，琺瑯蛋白，非琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，成釉質蛋白(amelin)(成釉細胞蛋白(ameloblastin)，鞘質蛋白(sheathlin))，簇質蛋白(tuftelin)和其衍生物和混合物。22．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質的分子量多數為大約120kDa，例如通過SDS-PAGE電泳確定多數為100kDa，90kDa，70kDa，或60kDa。23．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質製劑包含不同分子量的活性釉質物質的混合物。24．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質製劑包含選自琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，簇質蛋白，簇蛋白(tuftprotein)，血清蛋白，唾液蛋白，成釉質蛋白，成釉質細胞蛋白，鞘質蛋白，和它們的衍生物的至少兩種物質。25．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質的分子量高至大約40,000。26．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質的分子量在大約5,000到25,000之間。27．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質的主要部分的分子量大約20kDa。28．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質中至少有一部分呈聚集體形式或在體內使用後可以形成聚集體。29．根據權利要求26的應用，其中聚集體的顆粒大小從大約20nm至1μm。30．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中活性釉質物質製劑中的蛋白質含量從大約0.05％w/w到100％w/w，例如大約5-99％w/w，大約10-95％w/w，大約15-90％w/w，大約20-90％w/w，大約30-90％w/w，大約40-85％w/w，大約50-80％w/w，大約60-70％w/w，大約70-90％w/w或大約80-90％w/w。31．根據前述任一項權利要求所述的應用，其中藥物組合物進一步包含藥物學上可接受的賦形劑。32．根據權利要求31的應用，其中藥物學上可接受的賦形劑是丙二醇藻酸鹽。33．根據權利要求31的應用，其中藥物學上可接受的賦形劑是透明質酸或其鹽或衍生物。34．EMDOGAIN或其包含的任何蛋白質或肽根據權利要求1-31任一項的用於傷口治療的應用。35．一種用於改善傷口癒合的方法，該方法包括給予有相應需要的哺乳動物治療和預防有效量的一種活性釉質物質。36．根據權利要求35所述的方法，其中傷口是身體損傷或與口腔手術包括牙周手術，拔牙術，牙髓治療，牙植入物的插入，假牙應用相關的外傷；或者其中傷口選自無菌傷口，挫傷傷口，切割傷口，撕裂傷口，非穿透傷口，開放傷口，穿透傷口，穿孔傷口，刺破傷口，膿毒傷口，梗死和皮下傷口；或者其中傷口選自缺血性潰瘍，褥瘡，瘻，嚴重咬傷，熱灼傷和供體部位傷口；或者其中傷口是口瘡傷口，外傷傷口或與皰疹有關的傷口。37．根據權利要求36所述的方法，其中活性釉質物質選自釉質蛋白(enamelin)，琺瑯蛋白，非琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，成釉質蛋白(amelin)(成釉細胞蛋白(ameloblastin)，鞘質蛋白(sheathlin))，簇質蛋白(tuftelin)和其衍生物和混合物。38．根據權利要求36所述的方法，其中活性釉質物質的分子量多數為大約120kDa，例如通過SDS-PAGE電泳確定多數為100kDa，90kDa，70kDa，或60kDa。39．根據權利要求36所述的方法，其中應用於傷口上的活性釉質物質的量是相應於每平方釐米的總蛋白從大約0.01mg到大約20mg，例如每平方釐米大約0.1mg到15mg。40．一種促進軟組織再生和/或修復的方法，該方法包括給予有相應需要的哺乳動物預防或治療有效量的一種活性釉質物質。41．根據權利要求40所述的方法，其中活性釉質物質選自釉質蛋白(enamelin)，琺瑯蛋白，非琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，成釉質蛋白(amelin)(成釉細胞蛋白(ameloblastin)，鞘質蛋白(sheathlin))，簇質蛋白(tuftelin)和其衍生物和混合物。42．根據權利要求40所述的方法，其中活性釉質物質的分子量多數為大約120kDa，例如通過SDS-PAGE電泳確定多數為100kDa，90kDa，70kDa，或60kDa。43．根據權利要求40所述的方法，其中應用於傷口上的活性釉質物質的量是相應於每平方釐米的總蛋白從大約0.01mg到大約20mg，例如每平方釐米大約0.1mg到15mg。44．一種預防或治療感染的方法，該方法包括給予有相應需要的哺乳動物預防或治療有效量的一種活性釉質物質。45．根據權利要求44所述的方法，其中活性釉質物質選自釉質蛋白(enamelin)，琺瑯蛋白，非琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，成釉質蛋白(amelin)(成釉細胞蛋白(ameloblastin)，鞘質蛋白(sheathlin))，簇質蛋白(tuftelin)和其衍生物和混合物。46．根據權利要求44所述的方法，其中活性釉質物質的分子量多數為大約120kDa，例如通過SDS-PAGE電泳確定多數為100kDa，90kDa，70kDa，或60kDa。47．根據權利要求44所述的方法，其中感染是皮膚或黏膜表面的細菌感染。48．根據權利要求44所述的方法，其中細菌感染是發生在口腔的感染。49．根據權利要求48所述的方法，其中感染由如下細菌導致，即引起齲齒的細菌，例如突變鏈球菌；引起牙周疾病的細菌，例如伴放線放線桿菌，牙齦卟啉單胞菌，中間普雷沃氏菌，微小消化微鏈球菌，彎曲桿菌(梭桿菌，葡萄球菌)，B.forsythus；引起牙槽炎的細菌，例如葡萄球菌，放線菌和芽孢桿菌；和引起尖周損害的細菌，例如螺旋體。50．一種預防或治療炎症的方法，該方法包括給予有相應需要的哺乳動物預防或治療有效量的一種活性釉質物質。51．根據權利要求50所述的方法，其中活性釉質物質選自釉質蛋白(enamelin)，琺瑯蛋白，非琺瑯蛋白，富含脯氨酸的非琺瑯蛋白，成釉質蛋白(amelin)(成釉細胞蛋白(ameloblastin)，鞘質蛋白(sheathlin))，簇質蛋白(tuftelin)和其衍生物和混合物。52．根據權利要求50所述的方法，其中活性釉質物質的分子量多數為大約120kDa，例如通過SDS-PAGE電泳確定多數為100kDa，90kDa，70kDa，或60kDa。53．根據權利要求50所述的方法，其中應用於傷口上的活性釉質物質的量是相應於每平方釐米的總蛋白從大約0.01mg到大約20mg，例如每平方釐米大約0.1mg到15mg。全文摘要活性釉質物質可以用來製備用於傷口癒合,改善傷口癒合、軟組織再生或修復,或預防或治療炎症感染的藥物組合物或化妝品組合物。文檔編號A61P17/02GK1297356SQ99805220公開日2001年5月30日申請日期1999年2月26日優先權日1998年2月27日發明者斯蒂納·格斯特瑞裡埃斯,拉爾斯·哈馬斯特倫,彼得·林斯塔多斯,克裡斯特·安德松,伊萬·斯拉比,託馬斯·哈馬爾格倫申請人:拜奧拉拜奧愛克斯公司