一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法
2023-06-05 07:16:36 2
專利名稱：一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法
技術領域：
本發明屬於天然藥物領域，具體涉及一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法。
背景技術：
柄果脂素(Adenostemmoic acid B),分子式為C25H28O6,分子量為424. 49，是一種木脂素類化合物，為白色顆粒狀結晶，mp. 102°C (甲醇)。藥理研究表明，柄果脂素具有中樞神經抑制作用。刺花椒，別名野花椒、巖椒，來源於芸香科刺花椒(Janthoxylum acanthopodium DC.)，以根、果入藥。主要分布於雲南，性味辛、麻，溫。功能主治溫中散寒，止痛，殺蟲，避孕；主治胃痛，風溼關節痛，避孕，蟲積腹痛。但刺花椒化學成分研究較少，現有文獻中還沒有檢索到從刺花椒中提取製備高純度柄果脂素的工藝報導。
發明內容
本發明的目的就是提供一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，以填補目前高純度柄果脂素提取製備技術的空白。本發明的目的是通過以下技術方案實現的
1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，投入提取罐，加入含有0.5 5%表面活性劑的60%-95% 的乙醇，採用回流提取2-4小時，收集提取液濃縮至無醇味；
2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至流出液無色，再用水醇梯度洗脫，洗脫梯度依次為10%-20%乙醇、55%-80%乙醇，收集洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；
3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進一步純化，採用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統，得到純度95%以上的柄果脂素。步驟1)中表面活性劑親水親油平衡值(HLB)在14. (Tl8. O之間。步驟2)所述大孔吸附樹脂可選AB-8、DlOU HPD100等極性或非極性大孔吸附樹脂。步驟3)所述洗脫系統正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其體積比為(12-17) (15-25)(8-15):(7-15)。本發明的有益效果是
本發明加入表明活性劑參與提取，能夠增加提取率，減少提取次數，工業操作可採用一次或最多兩次提取，以價格便宜的大孔吸附樹脂為載體，以乙醇為溶劑梯度洗脫，再通過高速逆流色譜進一步分離純化，得到純度大於95%的柄果脂素產品，本發明方法工序簡單、快速、綠色環保，產品純度高。
具體實施方式
實施例1
將刺花椒根莖粉碎，取5kg加入30L80%乙醇溶液(含0. 5%Tween 20)加熱回流提取2 次，每次4小時，過濾，合併兩次提取液，減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過預處理好的DlOl 大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再依次用20%乙醇、55%乙醇洗脫，收集 55%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物採用高速逆流色譜法進行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(12:18:8:15)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經HPLC法測定，其純度為95. 4%。實施例2:
將刺花椒根莖粉碎，取5kg加入50L65%乙醇溶液(含P/oTween 80)加熱回流提取2次， 每次3小時，合併兩次提取液，減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過預處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再依次用10%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物採用高速逆流色譜法進行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15:20:15:7)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經HPLC法測定，其純度為94. 6%。實施例3:
將刺花椒根莖粉碎，取IOkg加入80L7^)乙醇溶液(含2%Tween 80)加熱回流提取2 次，每次提取3小時，收集提取液，減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過預處理好的HPD100大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再依次用15%乙醇、75%乙醇洗脫，收集 75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物採用高速逆流色譜法進行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(14:23:12:10)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經HPLC法測定，其純度為96. 8%。實施例4:
將刺花椒根莖粉碎，取20kg加入100L95%乙醇溶液(含3%Tween 20)加熱回流提取 4小時，過濾，濾渣再加入8L95%乙醇溶液回流提取2小時，過濾，合併兩次提取液，減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過預處理好的AB-8大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再依次用20%乙醇、80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物採用高速逆流色譜法進行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水 (17:25:13:9)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經HPLC法測定，其純度為95. m。實施例5:
將刺花椒根莖粉碎，取50kg加入300L60%乙醇溶液(含0. 8%Tween 20)索氏提取4小時，收集提取液，減壓濃縮至無醇味，將濃縮液通過預處理好的DlOl大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至洗脫液無色，再依次用15%乙醇、75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得到刺花椒提取物。將刺花椒提取物採用高速逆流色譜法進行純化，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(13:15:10:15)為溶劑系統，下相為流動相，上相為固定相，收集柄果脂素流分，回收溶劑得到柄果脂素，經HPLC法測定，其純度為96. 1%。
權利要求
1.一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，其特徵在於包括以下步驟1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，投入提取罐，加入含有0.5 5%表面活性劑的60%-95% 的乙醇，採用回流提取2-4小時，收集提取液濃縮至無醇味；2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂柱，先用去離子水洗脫至流出液無色，再用水醇梯度洗脫，洗脫梯度依次為10%-20%乙醇、55%-80%乙醇，收集洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進一步純化，採用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統，得到純度95%以上的柄果脂素。
2.根據權利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特徵在於步驟1)中表面活性劑親水親油平衡值(HLB)在14. (Γ18. 0之間。
3.根據權利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特徵在於步驟2)所述大孔吸附樹脂可選AB-8、DlOU HPD100等極性或非極性大孔吸附樹脂。
4.根據權利要求1所述的提取高純度柄果脂素的方法，其特徵在於步驟3)所述洗脫系統正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其體積比為(12-17) :(15-25) :(8-15) (7-15)。
全文摘要
本發明涉及一種從刺花椒中提取高純度柄果脂素的方法，包括以下三個步驟1)乙醇提取將刺花椒根莖粉碎，加入0.5~5%表面活性劑，採用乙醇回流提取，提取液濃縮至無醇味；2)大孔樹脂吸附將所得濃縮液通過大孔吸附樹脂分離，水醇梯度洗脫，洗脫液減壓回收乙醇，得到提取物；3)高速逆流色譜純化將所得提取物用高速逆流色譜法進一步純化，得到純度95%以上的柄果脂素。本發明與傳統提取工藝相比，加入表面活性劑後能提高提取率，減少提取次數，還可以得到澄清的溶液，上柱不會存在堵塞吸附柱的現象，具有簡便、快速、製備量大、產品純度高等優點，易於推廣使用。
文檔編號C07D493/04GK102391276SQ20111030360
公開日2012年3月28日 申請日期2011年10月10日 優先權日2011年10月10日
發明者劉東鋒, 吳豔波 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司