用於用酶處理增強汙泥的脫水性能的方法與流程

2023-06-05 12:13:12 3

本申請包括計算機可讀形式的序列表，將其通過引用結合在此。

發明領域

本發明涉及用於增強由常規廢水處理操作產生的殘餘物(即汙泥)的脫水性能(dewaterability)的方法。

發明背景

常規廢水處理過程期間產生的汙泥，通常是在通過焚燒，土地利用，填埋，堆肥、等的處理之前脫水或濃縮。基本脫水方案涉及通過添加調節劑，如硫酸鐵和/或絮凝劑(如聚合電解質)，隨後是跨越重力帶式增稠器、帶式壓濾機或離心機的機械固體/液體分離，形成強的、抗剪的汙泥絮凝物。通過將汙泥脫水，廢水處理廠(WWTP)提高了最終必需處理掉的汙泥(即餅固體(cake solids))的每體積單位的固體的量。更高的餅固體的益處包括：減少脫水汙泥體積(要被被工廠「管理」的更少的汙泥)；降低每年運輸成本(運送汙泥至填埋或土地利用地)；在汙泥可以被焚燒前待蒸發的更少的水(當焚燒用於廢熱發電的目的時增加汙泥的淨能量值)；至沼氣池的更濃縮的進料；和/或減少要被填埋或被土地利用的汙泥的體積。

汙泥的一般組成通常是約90％-99％的水，剩餘的部分是總固體，其中實際的細胞團塊(即細菌細胞)佔總固體的大約10％。剩餘90％的總固體由胞外聚合物質(EPS)組成，它形成水合基質，細菌細胞分散在所述水合基質內。無論用於產生汙泥的方式，汙泥脫水性能已經很大程度上與全部汙泥中的EPS部分有關。EPS由來自細胞溶解的碎片(例如核酸、脂質/磷脂、蛋白質、等)、活性分泌的胞外產物(例如多糖和蛋白質)、胞外產物、EPS結合的酶活性(例如多糖)、從廢水吸收的材料(例如腐殖質、多價陽離子)組成。由於EPS這種複雜的性質和多糖及蛋白質的突出的存在，傳統上按碳水化合物和蛋白質的比率(EPS碳水化合物:蛋白質)來表徵EPS。儘管取決於WWTP的許多操作參數，初沉汙泥和初沉汙泥的EPS碳水化合物:蛋白質可以不同。但是二沉汙泥內的EPS組合物有點是更消化特異性：厭氧消化汙泥的EPS碳水化合物:蛋白質傾向於小於整體而好氧消化汙泥EPS碳水化合物:蛋白質大於整體。在任何情況下，這些初沉組分被認為是有效地結合水並且抵抗脫水的汙泥絮凝物內的關鍵可水合物質。

破壞汙泥絮凝物的水結合能力和/或機械完整性的方法被認為在聚合絮凝時增強了全部汙泥的脫水性能。大多數此類方法已經集中於破壞EPS組分和改進脫水性能的新穎化學反應(例如酸預處理、多價陽離子調節劑)和工藝(高溫預處理、放電、超聲處理)的能力。已有的多篇論文描述了將酶用於EPS內的選擇性水解以減少汙泥體積，具有不同結果。參見DE 10249081、US 2003014125、WO 9110723和DE 3713739。

感興趣的現有技術包括美國專利公開號US-2008-0190845(通過引用以其全文結合在此)，迪路西亞(DeLozier)等人，涉及用於增強由常規廢水處理操作產生的殘餘物(即汙泥)的脫水性能方法。美國專利號4266031(通過引用以其全文結合在此)，唐(Tang)等人也是感興趣的，因為它涉及來自地衣芽孢桿菌的蛋白酶。

由於汙泥仍存在問題和脫水困難，對改進用於增強由常規廢水處理操作產生的殘餘物(即汙泥)的脫水性能的方法存在持續的需求。

技術實現要素：

本披露涉及用於增強汙泥的脫水性能的方法，包括用酶及其包括a-澱粉酶和蛋白酶的組合物接觸或處理汙泥。在一個優選的實施例中，本披露涉及用於增強汙泥的脫水性能的方法，包括用酶組合物處理汙泥，該酶組合物包括來自諾維信公司(Novozymes A/S)(巴格斯維爾德，丹麥)的AQUAZYME ULTRA1200品牌的酶組合物。在實施例中，本披露涉及用於增強汙泥的脫水性能的方法，包括用酶組合物接觸汙泥，該酶組合物包括有效量的來自諾維信公司(Novozymes A/S)(巴格斯維爾德，丹麥)的AQUAZYME ULTRA 1200品牌的酶組合物和有效量/補充量的蛋白酶。蛋白酶的非限制性實例包括穀氨酸特異性蛋白酶。

仍在另一個實施例中，處理包括酶組合物，該酶組合物包括a-澱粉酶、蛋白酶，例如穀氨酸特異性蛋白酶，和至少一種另外的酶，例如，脂肪酶、纖維素酶、半纖維素酶、其他蛋白酶、氧化還原酶、漆酶、糖基水解酶和/或酯酶。

優選在汙泥調節(即，在凝固和/或絮凝之前)和機械脫水之前添加酶處理。在實施例中，根據本披露的酶及其組合物被施用到城市汙泥以幫助隨後的機械脫水，導致降低了汙泥體積，和/或減少用於脫水過程中的聚合物的使用。

在實施例中，在本披露的組合物中的活性酶包括來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的α-澱粉酶和穀氨酸特異性蛋白酶組分。與類似的條件下單獨施用α-澱粉酶相比，本披露的組合物人意料地增強了殘餘物的脫水性能。在實施例中，披露了用於增強汙泥的脫水性能的方法，包括用α-澱粉酶和蛋白酶接觸汙泥或添加它們至汙泥的步驟，其中該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的嗜熱脂肪土芽胞桿菌α-澱粉酶具有至少90％序列一致性，並且該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少90％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少96％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少97％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少99％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶包括SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶或由其組成。在實施例中，該α-澱粉酶是SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶的成熟形式或其功能片段。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少95％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少96％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少97％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少98％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2具有至少99％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶包括SEQ ID NO:2中所示的蛋白酶或由其組成。在實施例中，該蛋白酶是SEQ ID NO:2中所示的蛋白酶的成熟形式或其功能片段。

在實施例中，α-澱粉酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和140g之間，並且蛋白酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和140g之間。在實施例中，α-澱粉酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和70g之間，並且蛋白酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和70g之間。在實施例中，α-澱粉酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和35g之間，並且蛋白酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和35g之間。在實施例中，α-澱粉酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和8g之間。在實施例中，α-澱粉酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和5g之間，並且蛋白酶的劑量在每幹噸的總懸浮固體2和5g之間。在實施例中，允許α-澱粉酶和蛋白酶與汙泥一起孵育1分鐘至24小時。

在實施例中，允許α-澱粉酶和蛋白酶與汙泥一起孵育30分鐘至12小時。在實施例中，允許α-澱粉酶和蛋白酶與汙泥一起孵育1小時至2小時。在實施例中，汙泥是在常規城市和工業廢水處理操作期間產生的。

在實施例中，本披露涉及處理汙泥的方法，包括：

(a)用與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少90％序列一致性的α-澱粉酶和與SEQ ID NO:2具有至少90％序列一致性的蛋白酶接觸汙泥；並且

(b)從該汙泥中去除水。在實施例中，該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少98％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶與SEQ ID NO:1中所示的α-澱粉酶具有至少99％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2中所示的蛋白酶具有至少98％序列一致性。在實施例中，該蛋白酶與SEQ ID NO:2中所示的蛋白酶具有至少99％序列一致性。在實施例中，該α-澱粉酶是SEQ ID NO:1的α-澱粉酶的成熟形式或其功能片段，並且該蛋白酶是SEQ ID NO:2的蛋白酶的成熟形式。

術語「片段」意指具有在成熟多肽的氨基和/或羧基末端不存在的一個或多個(例如若干個)胺基酸的多肽；其中該片段具有活性。

附圖簡要說明

圖1是根據本披露的廢水處理的示意圖。

優選實施例的詳細說明

本披露涉及促進和/或改進汙泥脫水過程的酶方法，該汙泥例如是常規廢水處理期間產生的汙泥。

用來處理工業和城市廢水的不同過程通常產生汙泥作為適當操作的副產物。對廢水處理工業產生的汙泥的分類不僅根據廢水的來源(即城市的或工業的)，而且還根據廢水處理過程中的具體階段。在最廣泛的分類中，認為汙泥有初沉(primary)、二沉(secondary)或三沉(tertiary)之分。通常將初沉汙泥認為是「原汙泥」(raw)，因為它們通常是來自原料廢水流經過初級沉澱池(primary clarifiers)，固體沉降的結果。在大多數情況下，然後將經澄清的水發送至活性汙泥池(activated sludge basins；ASBs)，其中懸浮的微生物絮凝物將可溶性汙染物從水中去除。由於微生物的複製，必需定期將它們從ASB中去除以避免生長過度。它們的去除發生在從ASB接收流入物的二級沉澱池中行。這種「二次汙泥」被認為是「廢活性汙泥」(WAS)並且在採用生物養分去除(BNR)系統的WWTP中具有相對普遍的存在。為了減少這種二沉汙泥的體積(並且將其穩定化)，可以將汙泥發送至好氧(環境通氣(ambient aeration)或純氧)或厭氧消化器，該消化器可以在中溫抑或高溫條件下運行。然後所得「三沉」汙泥被稱為「消化汙泥」(digested sludge)，並且可以根據消化的特性進一步分類(例如高溫好氧消化汙泥)。因此能夠看出，在廢水處理期間產生了無數的汙泥類型。然而，它們可以被鬆散地分組為：

1.初沉或原汙泥(raw sludge)；

2.二沉或廢活性汙泥；和

3.三沉、穩定化的或消化的汙泥

無論由哪種採用方式產生，通常採用一些生物養分去除的方式，使廢水處理操作期間產生的汙泥將包含用作酶水解底物的物質。在大多數情況下，這種底物作為包括汙泥固體的主要部分的胞外聚合物質(EPS)的組分存在。汙泥之間不同的EPS的組成取決於多種變量，這些變量包括待處理的廢水的性質、採用的處理過程和處理條件。特定的單糖(例如葡萄糖、甘露糖、半乳糖、等)傾向於普遍地存在於汙泥EPS內。考慮到這點，儘管一種或多種汙泥的EPS的總體組成可以差異巨大，但是在汙泥組分中存在的糖苷鍵類型上存在一些程度的相似性。

根據本披露，在此描述的a-澱粉酶和蛋白酶組合物可以施用到所有與常規廢水處理有關的所有一種或多種汙泥，以特異性地改進脫水性能。在一個優選的實施例中，該α-澱粉酶和蛋白酶及其組合物被施用到處理工業和城市廢水期間產生的一種或多種初沉和二沉汙泥。在實施例中，該α-澱粉酶和蛋白酶和其組合物被施用到來自初級沉澱池的初沉汙泥，廢活性汙泥，回流活性汙泥，需氧消化汙泥和/或厭氧消化汙泥。本披露的目的是為了促進或改進汙泥脫水的過程，包括在常規汙泥調節和脫水操作之前用α-澱粉酶和蛋白酶處理汙泥。

根據本披露，增強汙泥的脫水性能的過程包括以下步驟或由其組成：

a)產生汙泥，例如，在常規廢水處理期間；

b)根據本披露，用α-澱粉酶和蛋白酶處理該汙泥；

c)任選地，用凝結添加劑和/或絮凝添加劑調節該汙泥；

d)用常規設備將酶處理過的汙泥脫水。

除了上述步驟，可以包括另外的任選步驟，例如，在消化/穩定化階段之前和之後均用酶處理汙泥。在實施例中，在濃縮廢水加工流中的汙泥之前，本披露的酶組合物與汙泥接觸。在實施例中，在將廢水加工流中的汙泥機械脫水之前，本披露的酶組合物與汙泥接觸。

用於本披露的酶處理的適合的α-澱粉酶的實例是源自土芽孢桿菌屬(Geobacillus)(先前為芽孢桿菌屬(Bacillus))的菌株(例如源自嗜熱脂肪土芽孢桿菌)的那些α-澱粉酶。如在此使用，如例如在「源自嗜熱脂肪土芽孢桿菌」中時，「源自」的意指野生型a-澱粉酶及其變體。此類酶也可以合成製備，如本領域中熟知的。

在實施例中，該α-澱粉酶源自嗜熱脂肪土芽孢桿菌的菌株。在實施例中，該α-澱粉酶是商業α-澱粉酶組合物AQUAZYM ULTRATM1200(從諾維信北美公司(Novozymes North America,Inc.)或諾維信公司(Novozymes A/S)可得)。適合的α-澱粉酶描述於PCT申請號WO 96/23873和WO 99/19467，這二者都通過引用以其全文結合在此。在實施例中，該α-澱粉酶包括與如SEQ ID NO：1中所示的嗜熱脂肪土芽胞桿菌α-澱粉酶具有至少50％序列一致性，至少60％序列一致性，至少70％序列一致性，至少75％序列一致性，至少80％序列一致性，至少85％序列一致性，至少90％序列一致性，至少95％序列一致性，至少96％序列一致性，至少97％序列一致性，至少98％序列一致性，或至少99％序列一致性的α-澱粉酶。出於本披露的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：歐洲分子生物學開放軟體套件(The European Molecular Biology Open Software Suite)，賴斯(Rice)等人，2000，遺傳學趨勢(Trends Genet.)16:276-277)(優選5.0.0版或更新版本)的尼德爾(Needle)程序中所實施的尼德爾曼-翁施算法(尼德爾曼(Needleman)和翁施(Wunsch)，1970，分子生物學雜誌(J.Mol.Biol.)48:443-453)來確定兩個胺基酸序列之間的序列一致性。所使用的參數是空位開放罰分10、空位延伸罰分0.5，和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩陣。將標記為「最長同一性」的Needle輸出(使用-nobrief選項獲得)用作百分比同一性並且是如下計算的：

(相同殘基x 100)/(比對的長度-在比對中的空位總數)

在實施例中，將該a-澱粉酶以有效量施用以促進或改進汙泥脫水的過程，該過程包括用a-澱粉酶接觸或處理汙泥，優選地，在常規汙泥調節和脫水操作(例如濃縮和機械脫水步驟)之前進行。適合量的實例包括每kg的總懸浮固體2至140g蛋白，每kg的總懸浮固體2至70g蛋白，每kg的總懸浮固體2至35g蛋白，每kg的總懸浮固體2至15g蛋白，每kg的總懸浮固體2至8g蛋白，和每kg的總懸浮固體2至5g蛋白。在實施例中，Ultra 1200品牌α-澱粉酶以每幹噸的汙泥固體0.1-5kg施用。在實施例中，Ultra 1200品牌α-澱粉酶以每幹噸的汙泥固體0.5-2kg施用。在實施例中，Ultra 1200品牌α-澱粉酶以每幹噸的汙泥固體0.5kg施用。

可以在適合汙泥加工條件的條件下施用該a-澱粉酶，例如，溫度從5℃至40℃，pH條件從4至10，並且持續0.5至30小時的處理時間，例如1min至24小時、30min至12小時、和1小時至2小時。

在實施例中，將該a-澱粉酶與蛋白酶組合以有效促進或改進汙泥脫水的過程的量施用，該方法包括用a-澱粉酶和蛋白酶處理汙泥，優選地，在常規汙泥調節和脫水操作之前進行。與α-澱粉酶組合的蛋白酶的適合的量的實例包括每kg的總懸浮固體2至140g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至70g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至35g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至15g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至8g的蛋白，和每kg的總懸浮固體2-5g的蛋白。在實施例中，穀氨酸特異性蛋白酶以0.1-5g EP/DT給予。在實施例中，穀氨酸特異性蛋白酶以1g EP/DT(～31ppm)給予。

在實施例中，該蛋白酶源自地衣芽孢桿菌的菌株。在實施例中，該蛋白酶是商業蛋白酶組合物穀氨酸特異性蛋白酶(從諾維信北美公司(Novozymes North America,Inc.)或諾維信公司(Novozymes A/S)可得)。在實施例中，適合的蛋白酶描述於US 4266031、WO 1991/13554、WO 01/16285和UniProt登錄號P0C1U8。在實施例中，該酶組合物包括與如SEQ ID NO：2中所示的蛋白酶具有至少50％序列一致性，至少60％序列一致性，至少70％序列一致性，至少75％序列一致性，至少80％序列一致性，至少85％序列一致性，至少90％序列一致性，至少95％序列一致性，至少96％序列一致性，至少97％序列一致性，至少98％序列一致性，或至少99％序列一致性的蛋白酶。出於本披露的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：歐洲分子生物學開放軟體套件(The European Molecular Biology Open Software Suite)，賴斯(Rice)等人，2000，遺傳學趨勢(Trends Genet.)16:276-277)(優選5.0.0版或更新版本)的尼德爾(Needle)程序中所實施的尼德爾曼-翁施算法(尼德爾曼(Needleman)和翁施(Wunsch)，1970，分子生物學雜誌(J.Mol.Biol.)48:443-453)來確定兩個胺基酸序列之間的序列一致性。所使用的參數是空位開放罰分10、空位延伸罰分0.5，和EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩陣。將標記為「最長同一性」的Needle輸出(使用-nobrief選項獲得)用作百分比同一性並且是如下計算的：

(相同殘基x 100)/(比對的長度-在比對中的空位總數)。

在實施例中，該蛋白酶例如穀氨酸特異性蛋白酶以有效促進或改進汙泥脫水的過程的量施用，包括用α-澱粉酶和蛋白酶處理汙泥，優選地，在常規汙泥調節和脫水操作(包括但不僅限於濃縮和機械脫水)之前進行。蛋白酶的適合的量的實例包括每kg的總懸浮固體2至140g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至70g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至35g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至15g的蛋白，每kg的總懸浮固體2至8g的蛋白，和每kg的總懸浮固體2-5g的蛋白。在實施例中，穀氨酸特異性蛋白酶以0.1-5g EP/DT給予。在實施例中，穀氨酸特異性蛋白酶以1g EP/DT(～31ppm)給予。

可以在適合汙泥加工條件的條件下施用該蛋白酶，例如穀氨酸特異性蛋白酶，例如像，溫度從5℃至40℃，pH條件從4至10，並且持續0.5至30小時的處理時間，例如1min至24小時、30min至12小時、和1小時至2小時。根據本披露的α-澱粉酶/蛋白酶處理還可以設計添加一種或多種另外的酶。優選的另外的酶包括脂肪酶、纖維素酶、半纖維素酶、氧化還原酶、漆酶、另一種蛋白酶、糖基水解酶和/或酯酶。

在實施例中，根據本披露的處理還可以施用在汙泥調節步驟，其中聚合物是當前正在使用的。酶產品是消耗品，除了汙水處理廠適當地分散它的能力外，將不需要任何硬體與它一起。在實施例中，根據本披露的處理將完全替代廢水處理中使用的聚合物。在實施例中，根據本披露的處理將減少廢水處理中的使用的聚合物。在實施例中，酶的使用將是系統/構型不可知論的。只要具體工廠在脫水之前調節汙泥，就可以使用根據本披露提出的α-澱粉酶/蛋白酶組合物。

參考圖1，示出本披露的實施例的非限制性的示意圖。此處，示出了廢水處理(10)，其中原始廢水(20)進入處理，並且形成加工流(22)。在一個非限制性的實例中，在再循環、退出抑或向下推進加工流之前，加工流22流經沉砂池(24)、沉澱池(26)、生物處理(28)和沉澱池(30)。初沉汙泥(32)和二沉汙泥(34)示出朝向濃縮(36)推進。汙泥被示出在機械脫水(42)、接觸絮凝劑(44)和汙泥輸出(46)之前，進入消化(38)和形成三沉汙泥(40)。圖1示出了本披露的酶(48)，在濃縮(36)和機械脫水(42)之前接觸加工流。圖1是非限制性的，其中根據本披露的酶(48)可以在濃縮之前和/或脫水之前接觸加工流。儘管未在圖1中示出，本披露的酶可以在過程中任一點和在貫穿過程的不同(多個)點接觸或被添加至加工流中。

在實施例中，並且如圖1中所示，優選在汙泥調節(即凝結和/或絮凝之前)和機械脫水之前添加酶處理。

實例

材料

城市汙泥

Ultra 1200品牌α-澱粉酶(從諾維信公司(Novozymes A/S)可得)(SEQ ID NO：1)。

穀氨酸特異性蛋白酶(SEQ ID NO：2)。

方法

建立了具有300-5000ml規模的實驗室測定，其中使用正壓濾機用於固/液分離。分析城市汙泥，發現具有42％w/w蛋白質，3.6％w/w葡聚糖，2.3％w/w木聚糖和15.1％w/w酸不溶物質。

以每幹噸的汙泥固體0.5kg施用Ultra 1200品牌α-澱粉酶。穀氨酸特異性蛋白酶以1g EP/DT(大約31ppm)給予。

材料和方法的概述如下所示：

通過添加與汙泥組合的本披露的酶，在室溫下在燒瓶中進行孵育2hr。

如下進行絮凝：絮凝劑(CPAM，0.3％-0.5％g/g，DM)

脫水：用壓濾機或快速混合離心機進行

結果(澱粉酶和蛋白酶改進了汙泥的脫水性能)。

通過使用每幹噸的汙泥固體0.5kg，Aquazyme-α澱粉酶將脫水餅固體增加了3.2％，並且將脫水餅的重量減少了9.6％。

穀氨酸特異性蛋白酶以1g EP/DT(大約31ppm)給予，將脫水餅固體增加了2.5％，並且將脫水餅的重量減少了7.4％。

表1--脫水餅特徵

在按0.2-2ppm的穀氨酸特異性蛋白酶(NZ45001)添加後，絮凝物的抗剪能力增加。

當穀氨酸特異性蛋白酶(NZ45001)劑量大於10g EP/DT時，汙泥的脫水性能很差。

應理解的是，可以對本文披露的實施例進行各種修改。因此，不應將上述描述理解為限制，他們僅作為對實施例的示例說明。本領域那些技術人員將會預見到本文所附權利要求範圍和宗旨內的其他修改。此外，除非並且除了當明確描述了各個步驟的順序，否則不應將術語解釋為暗示本文披露的各種步驟之間或其中的任何具體順序。

序列表

諾維信公司(Novozymes A/S)

吳文萍（Wu, Wenping）

張明佳（Zhang, Mingjia）

許王輝（Xu, Wanghui）

迪路西亞 格雷戈裡（DeLozier, Gregory）

用於用酶處理增強汙泥的脫水性能的方法

13039-WO-PCT

2

PatentIn版本3.5

1

515

PRT

嗜熱脂肪芽孢桿菌

1

Ala Ala Pro Phe Asn Gly Thr Met Met Gln Tyr Phe Glu Trp Tyr Leu

1 5 10 15

Pro Asp Asp Gly Thr Leu Trp Thr Lys Val Ala Asn Glu Ala Asn Asn

20 25 30

Leu Ser Ser Leu Gly Ile Thr Ala Leu Trp Leu Pro Pro Ala Tyr Lys

35 40 45

Gly Thr Ser Arg Ser Asp Val Gly Tyr Gly Val Tyr Asp Leu Tyr Asp

50 55 60

Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly Thr

65 70 75 80

Lys Ala Gln Tyr Leu Gln Ala Ile Gln Ala Ala His Ala Ala Gly Met

85 90 95

Gln Val Tyr Ala Asp Val Val Phe Asp His Lys Gly Gly Ala Asp Gly

100 105 110

Thr Glu Trp Val Asp Ala Val Glu Val Asn Pro Ser Asp Arg Asn Gln

115 120 125

Glu Ile Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Gln Ala Trp Thr Lys Phe Asp Phe

130 135 140

Pro Gly Arg Gly Asn Thr Tyr Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr His

145 150 155 160

Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Glu Ser Arg Lys Leu Ser Arg Ile Tyr

165 170 175

Lys Phe Arg Gly Ile Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu

180 185 190

Asn Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Met Tyr Ala Asp Leu Asp Met Asp His

195 200 205

Pro Glu Val Val Thr Glu Leu Lys Asn Trp Gly Lys Trp Tyr Val Asn

210 215 220

Thr Thr Asn Ile Asp Gly Phe Arg Leu Asp Ala Val Lys His Ile Lys

225 230 235 240

Phe Ser Phe Phe Pro Asp Trp Leu Ser Tyr Val Arg Ser Gln Thr Gly

245 250 255

Lys Pro Leu Phe Thr Val Gly Glu Tyr Trp Ser Tyr Asp Ile Asn Lys

260 265 270

Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Thr Met Ser Leu Phe Asp

275 280 285

Ala Pro Leu His Asn Lys Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Gly Gly Ala

290 295 300

Phe Asp Met Arg Thr Leu Met Thr Asn Thr Leu Met Lys Asp Gln Pro

305 310 315 320

Thr Leu Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Thr Glu Pro Gly Gln

325 330 335

Ala Leu Gln Ser Trp Val Asp Pro Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala

340 345 350

Phe Ile Leu Thr Arg Gln Glu Gly Tyr Pro Cys Val Phe Tyr Gly Asp

355 360 365

Tyr Tyr Gly Ile Pro Gln Tyr Asn Ile Pro Ser Leu Lys Ser Lys Ile

370 375 380

Asp Pro Leu Leu Ile Ala Arg Arg Asp Tyr Ala Tyr Gly Thr Gln His

385 390 395 400

Asp Tyr Leu Asp His Ser Asp Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Val

405 410 415

Thr Glu Lys Pro Gly Ser Gly Leu Ala Ala Leu Ile Thr Asp Gly Pro

420 425 430

Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Lys Gln His Ala Gly Lys Val

435 440 445

Phe Tyr Asp Leu Thr Gly Asn Arg Ser Asp Thr Val Thr Ile Asn Ser

450 455 460

Asp Gly Trp Gly Glu Phe Lys Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Val Trp

465 470 475 480

Val Pro Arg Lys Thr Thr Val Ser Thr Ile Ala Arg Pro Ile Thr Thr

485 490 495

Arg Pro Trp Thr Gly Glu Phe Val Arg Trp Thr Glu Pro Arg Leu Val

500 505 510

Ala Trp Pro

515

2

316

PRT

地衣芽孢桿菌

2

Met Val Ser Lys Lys Ser Val Lys Arg Gly Leu Ile Thr Gly Leu Ile

1 5 10 15

Gly Ile Ser Ile Tyr Ser Leu Gly Met His Pro Ala Gln Ala Ala Pro

20 25 30

Ser Pro His Thr Pro Val Ser Ser Asp Pro Ser Tyr Lys Ala Glu Thr

35 40 45

Ser Val Thr Tyr Asp Pro Asn Ile Lys Ser Asp Gln Tyr Gly Leu Tyr

50 55 60

Ser Lys Ala Phe Thr Gly Thr Gly Lys Val Asn Glu Thr Lys Glu Lys

65 70 75 80

Ala Glu Lys Lys Ser Pro Ala Lys Ala Pro Tyr Ser Ile Lys Ser Val

85 90 95

Ile Gly Ser Asp Asp Arg Thr Arg Val Thr Asn Thr Thr Ala Tyr Pro

100 105 110

Tyr Arg Ala Ile Val His Ile Ser Ser Ser Ile Gly Ser Cys Thr Gly

115 120 125

Trp Met Ile Gly Pro Lys Thr Val Ala Thr Ala Gly His Cys Ile Tyr

130 135 140

Asp Thr Ser Ser Gly Ser Phe Ala Gly Thr Ala Thr Val Ser Pro Gly

145 150 155 160

Arg Asn Gly Thr Ser Tyr Pro Tyr Gly Ser Val Lys Ser Thr Arg Tyr

165 170 175

Phe Ile Pro Ser Gly Trp Arg Ser Gly Asn Thr Asn Tyr Asp Tyr Gly

180 185 190

Ala Ile Glu Leu Ser Glu Pro Ile Gly Asn Thr Val Gly Tyr Phe Gly

195 200 205

Tyr Ser Tyr Thr Thr Ser Ser Leu Val Gly Thr Thr Val Thr Ile Ser

210 215 220

Gly Tyr Pro Gly Asp Lys Thr Ala Gly Thr Gln Trp Gln His Ser Gly

225 230 235 240

Pro Ile Ala Ile Ser Glu Thr Tyr Lys Leu Gln Tyr Ala Met Asp Thr

245 250 255

Tyr Gly Gly Gln Ser Gly Ser Pro Val Phe Glu Gln Ser Ser Ser Arg

260 265 270

Thr Asn Cys Ser Gly Pro Cys Ser Leu Ala Val His Thr Asn Gly Val

275 280 285

Tyr Gly Gly Ser Ser Tyr Asn Arg Gly Thr Arg Ile Thr Lys Glu Val

290 295 300

Phe Asp Asn Leu Thr Asn Trp Lys Asn Ser Ala Gln

305 310 315