一種病毒滅活袋裝凍乾血漿及其應用的製作方法

2023-06-07 12:02:31 1

專利名稱：一種病毒滅活袋裝凍乾血漿及其應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及生物製品領域，具體說是涉及一種經病毒滅活的袋裝凍乾血漿。
背景技術：
血漿對於失血性休克的擴容、燒傷的搶救以及由於輸用庫存血或代用品導致 的滲血等都是主要的治療措施。
目前，國內外臨床上應用的血漿製品有io餘種，血漿分為新鮮血漿和普通
血漿兩種，新鮮血漿又分為新鮮冰凍血漿(又稱FFP)和新鮮液體血漿；普通血
漿分為普通冰凍血漿、保存的液體血漿。新鮮冰凍血漿和普通冰凍血槳都是將抗
凝全血在4。C條件下離心後分離，再經一3(TC冰箱速凍而得，需保存在一20。C冰 櫃或低溫冰箱中，且保存體積較大。新鮮液體血槳是將保存期內的抗凝全血在4 。C條件下經離心後分離得到，在fC保存條件下，24h之內必須輸注，保存時間 短。
相比之下，無需低溫保存設備的凍乾血漿保存更容易，但常用的凍千血漿主 要是玻璃瓶裝凍乾血漿，由大量混合血漿製備而成，傳播B型肝炎病毒、丙型肝 炎病毒和愛滋病毒的風險性較高。另外玻璃瓶易碎，不適於空投和顛簸運輸，為 防止玻璃瓶破裂，有的玻璃瓶外面套上一個金屬罐，但這種包裝的凍乾血漿分量 重，運輸攜帶也不方便。如果選用目前臨床輸血採用的PVC血袋進行凍乾血漿， 則存在不易凍乾等問題，無法達到生物製品規程的要求。

發明內容
本發明提供了一種經病毒滅活後製備的袋裝凍乾血漿，其製備方法是將新鮮
分離的血漿置於特製的凍乾血漿袋(已獲得國家實用新型專利授權，專利號
ZL2005 2 0001469.3)中經病毒滅活後冷凍乾燥而得。
本發明是通過以下技術方案實現的
(1) 血漿的分離
1) 新鮮血漿將採集時間在6h以內的抗凝全血4。C下離心，分離得到的血漿；
2) 新鮮冰凍血漿將新鮮血漿在一2(TC下凍存，冷凍狀態一直持續到使用之前， 有效期自採血日起l年；
3) 普通血漿來源於保存期內，或過期不滿5天的抗凝全血分離得到；
4) 普通冷凍血漿來源於保存期滿1年的新鮮冷凍血槳，或普通血漿在一20'C 以下凍存，冷凍狀態一直持續到使用之前，有效期自採血日起為5年。
(2) 血漿病毒滅活目前用於血漿病毒滅活的方法較多，常用的有有機溶劑/ 清潔劑法、光化學法、加熱法、紫外線(UVA) /光敏劑法等，各種方法對
血漿病毒的滅活效果不一，但選擇合適的條件，都能達到較好的滅活效果。
1) 有機溶劑/清潔劑法(S/D法)將分離得到的同種血型血漿置於容器中，加入
有機溶劑磷酸三丁酯(TNBP)和TritonX-lOO處理後，植物油萃取TOBP， 固相層析法去除TritonX-lOO，除菌後分裝入特製的凍乾血漿袋中；
2) 光化學法將分離得到的單袋血漿置於特製的凍乾血漿袋中，加入光敏劑亞 甲藍，病毒滅活裝置處理後，去除亞甲藍；
3) 加熱分離得到的同種血型血漿置於容器中，加入保護劑後邊攪拌邊加熱， 加熱處理後用超濾等方法除去保護劑，除菌後分裝入特製的凍乾血漿袋中；
4) 紫外線(UVA) /光敏物法將分離得到的血漿置於特製的凍乾血漿袋中，加 入光敏劑補骨脂類化合物S-59，然後用紫外線(UVA)進行照射處理，滅活 血漿中的病毒。
(3) 血漿預凍
經病毒滅活後的血漿置於特製的凍乾血漿袋中，放入一40'C以下的低溫冰箱 或冰櫃中預凍，使其成為固體。
(4) 病毒滅活凍乾血漿的製備
預凍後的血漿置於凍幹機中，剪開蒸發管，在阱底溫度一56"C，真空度10Pa 以下，經48h真空升華去水製成淡黃色疏鬆體，從凍幹機中取出後迅速封口。
本發明中應用的特製凍乾血漿袋是經中華人民共和國國家知識產權局授權 的實用新型(專利號ZL 2005 2 0001469.3)，結構簡單、重量輕、不易破碎、 便於運輸。由於該凍乾血漿袋在袋身上設置有多根蒸發管，使袋身形成貫通型多 通路，可使血漿在乾燥時增加水分蒸發渠道，縮短水分蒸發路徑和時間，從而達 到凍乾血漿的目的。
本發明的病毒滅活凍乾血漿直接凍存於特製凍乾血漿袋中，重量輕，便於攜 帶和運輸，耐摔、耐壓，避免了空投和顛簸運輸造成的玻璃瓶易碎問題，無需低 溫保存設備，保存容易，且復溶速度快， 一旦救治需要，可用滅菌注射用水迅速 溶解後立即使用，是一種快速、有效的抗休克藥物。病毒滅活袋裝凍幹血槳特別 適用於因突發情況下出現的大量傷員的及時救治，發揮擴容、抗休克、穩定血壓 等作用，可避免因大量失血引起的休克和循環衰竭等的發生，為後續治療爭取時 間。亦可用於燒傷的救治，也可用於交通事故、安全生產事故及其它突發傷毀事 件引起休克的救治，具有巨大的社會經濟價值，應用前景廣闊。


圖1專用凍乾血漿袋及外觀呈淡黃色疏鬆體的病毒滅活袋裝凍乾血漿 圖2復溶後的血漿呈黃色混濁液體，無異物
具體實施例方式
實施例1新鮮血漿的分離
新鮮釆集的200ml抗凝全血，4。C條件下，3800轉離心15min，小心分離得 到100ml血漿。
實施例2普通血漿的分離
全血採集後超過6h，保存期內的抗凝全血200ml， 4。C條件下，3800轉離心 15min，小心分離得到105ml血漿。
實施例3血漿病毒滅活
血漿病毒滅活的方法較多，現以亞甲藍/光化學法為例，說明血漿病毒的滅 活方法。在潔淨工作檯中取0.9%的靜脈注射用生理鹽水25.7ml，加入10mg/ml 的亞甲藍注射液(江蘇濟川製藥有限公司產品)lml，混勻得到lmmol/L的亞甲
藍工作液。取分離獲得的lOOml血漿分裝入特製的凍幹血槳袋(國家實用新型專 利授權，專利號ZL 2005 2 0001469.3)中，加入亞甲藍工作液10(^1使其終濃 度為lpmol/L，熱合封口後用波長為630nm的光源在光強度不低於40 000Lux條 件下照射處理30min以滅活血漿中的病毒。
實施例4病毒滅活袋裝凍乾血漿的製備
將經過病毒滅活的裝於特製凍乾血漿袋中的100ml血漿放入一4(TC以下的 低溫冰箱或冰櫃，預凍4h，待血漿凍成固體狀態後取出，放入LGJ-10型冷凍幹 燥機，剪丌封口，在阱底溫度一56°C，真空度10Pa以下，凍幹48h，得到淡黃 色疏鬆體，取出後快速封口，即為病毒滅活袋裝凍幹血槳。
實施例5病毒滅活袋裝凍乾血漿水分含量測定
將凍幹的病毒滅活血漿按照《生物製品規程》(1995版)中的費氏測定方法 進行水分檢測，水分含量在2.2%-2.5%間，符合《生物製品規程》(1995版)凍 乾血漿水分《3%的要求。
實施例6病毒滅活袋裝凍乾血漿的復溶及凝血因子活性檢測
將各100ml滅菌注射用水分別加入到室溫保存30、 60、 90及180天的病毒 滅活凍乾血漿中，迅速溶解得到的溶液為淡黃色混濁液，分別測定復溶血漿中的 凝血因子活性(測定方法參見國家《生物製品規程》，2000版)，結果顯示(表l)， 隨室溫存放時間的延長，病毒滅活凍乾血漿中凝血因子活性有所下降，但其活性 均保持在80%以上，符合《生物製品規程》(1995版)中對凍乾血漿的要求。
儲存條件
II
凝血因子活性(％)
V
V1D
IX
XT
新鮮冷凍血漿100100100100100
凍乾血漿(0d)10010010097,8訓
室溫30d98.898.510091.495.2
室溫60d92.594.298.883.592.7
室溫卯d91.7肌593.995.991.2
室溫180d85.983.4卯.290.886.權利要求
1、一種病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿是將分離的血漿經病毒滅活後，於專用的凍乾血漿袋中進行凍幹而得，其製備方法包括以下步驟(1)血漿的分離；(2)對分離出的血漿進行病毒滅活；(3)經病毒滅活後的血漿置於凍幹專用血漿袋中於-40℃以下預凍；(4)預凍後的血漿置於冷凍乾燥機中凍幹；(5)凍幹後快速封口。
2、 根據權利要求1所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於凍幹所用的血漿 袋為專用血漿袋，袋身上設置有蒸發管，與袋身形成貫通型多通路，可使血 漿在乾燥時增加水分蒸發渠道，縮短水分蒸發路徑和時間，從而達到凍幹血 漿的目的。
3、 根據權利要求1所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於所用的血漿是新 鮮血漿、新鮮冷凍血槳、普通血漿或普通冷凍血漿。 .
4、 根據權利要求1所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於所用的血漿是單 袋血漿或同種血型的混合血漿。
5、 根據權利要求1所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於對血漿進行病毒 滅活時的方法是有機溶劑/清潔劑法、光化學法、加熱法或照射法。
6、 根據權利要求5所述的病毒滅活方法，其特徵在於所述的光化學法所用的光 敏劑為亞甲藍。
7、 根據權利要求1所述的病毒滅活袋裝凍乾血漿，其特徵在於凍幹條件為阱底 溫度一56。C，真空度10Pa以下凍幹48h。
8、 病毒滅活袋裝凍乾血漿的應用，其特徵在於可作為一種抗休克藥物用於創傷 導致的失血性休克的擴容治療，交通事故、安全生產事故及其它突發傷毀事 件引起休克的院前處置。
9、 病毒滅活袋裝凍乾血漿的應用，其特徵在於作為一種藥物用於燒傷的治療。
10、 病毒滅活袋裝凍乾血漿的應用，其特徵在於作為一種藥物用於由於輸用庫 存血或代用品導致滲血的治療。
全文摘要
本發明涉及生物製品領域，具體說是涉及一種經病毒滅活的袋裝凍乾血漿。本發明的袋裝凍乾血漿與傳統的瓶裝凍乾血漿相比，特點是重量輕，便於攜帶和運輸，且不易碎、耐壓，無需低溫保存，是一種快速、有效的抗休克藥物。特別適用於因突發事件出現的大量傷員的及時救治，發揮擴容、抗休克、穩定血壓等作用，避免因大量失血引起的休克和循環衰竭等的發生，為後續治療爭取時間。亦可用於燒傷的搶救，也可用於交通事故、安全生產事故及其它突發傷毀事件引起休克的救治，具有巨大的社會經濟價值，應用前景廣闊。
文檔編號A61K35/16GK101190234SQ20061014549
公開日2008年6月4日 申請日期2006年11月20日 優先權日2006年11月20日
發明者呂麗萍, 周錫鵬, 張豔宇, 許金波, 舫 閆, 平 馬 申請人:中國人民解放軍軍事醫學科學院野戰輸血研究所