腦栓通膠囊作為單胺氧化酶b抑制劑在臨床治療疾病的應用的製作方法

2023-06-07 04:11:36

專利名稱：腦栓通膠囊作為單胺氧化酶b抑制劑在臨床治療疾病的應用的製作方法
技術領域：
本發明涉及一組中藥複方在臨床上的應用，由蒲黃，赤芍，鬱金，天麻，漏蘆五種中藥組成的中藥複方製劑腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑鬱症，老年性痴呆和帕金森氏綜合症的應用。
背景技術：
腦栓通膠囊是由蒲黃，赤芍，鬱金，天麻，漏蘆五種中藥組成的中藥複方製劑，已經獲得國家食品藥品管理局批文(國藥準字Z20040093)，由廣東華南藥業有限公司生產上市，該藥的功效主治為「活血通絡，祛風化痰.用於風痰瘀血痺阻脈絡引起的缺血性中風病中經絡急性期和恢復期.症見半身不遂，口舌不歪斜，脈沉細或弦細，弦沒.腦梗塞上見述表現者。」腦栓通膠囊的主要藥理作用有①有效降低甘油三酯和總膽固醇含量，顯著抗動脈粥樣硬化作用；②明顯降低血液粘度，抑制血小板聚集；③延長血栓形成時間，抑制血栓形成；④促進大腦血液循環，改善腦部供血不足，增加大腦血流量，降低腦血管通透性；⑤降低血壓作用；⑥清除自由基，抗氧化作用。腦栓通膠囊臨床常用於風痰瘀血痺阻脈絡引起的缺血性中風病中經絡急性期和恢復期；但對單胺氧化酶的活性是否有 影響，一直沒有見文獻報導，本課題組研究發現，腦栓通膠囊對單胺氧化酶有明顯的抑制作用，特別是對中樞神經系統的單胺氧化酶B有非常顯著的抑制作用，可用於治療單胺氧化酶B活性高導致的各組臨床疾病，如抑鬱症，老年性痴呆和帕金森氏綜合症等疾病。單胺氧化酶(monoamine oxidase, MAO),是一種線粒體膜複合酶,可在大腦和周圍神經組織中催化一些生物體產生的胺，氧化脫氨產生過氧化氫.根據底物選擇性和對抑制劑的靈敏度，單胺氧化酶被分為A和B兩種。單胺氧化酶A對底物血清素(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)和抑制劑clorgyline具有高親和性；而單胺氧化酶B則對苯乙基胺(PEA)、苯甲胺和抑制劑cbprenyl具有高親和性.單胺氧化酶B活力的變化則與帕金森氏綜合症有關，已證明在老年人神經組織內單胺氧化酶B水平升高3倍，阿爾採默茨病(AD)患者單胺氧化酶B活性比正常者高，患者腦組織內單胺氧化酶A和單胺氧化酶B的mRNA水平也明顯升高，單胺氧化酶抑制劑是一類由於單胺氧化酶活性過高導致的疾病如抑鬱症，帕金森病和老年性痴呆等疾病具有預防和治療作用的藥物，如治療抑鬱症的苯乙肼、異唑肼、異丙肼、苯壞丙胺、嗎氯貝胺、溴法羅明、尼亞拉胺、託洛沙酮、德弗羅沙酮，治療帕金森病藥司立吉蘭，治療高血壓的優降寧，抗菌藥物呋喃唑酮、灰黃黴素、異煙肼，抗腫瘤藥物甲基苄肼，複方藥物益康寧等。這些藥物在臨床應用多年，取得一定的療效，但對老年性神經元退行性疾病如阿爾採默茨病、帕金森病和抑鬱症的治療還是存在許多困難，主要是這些藥物長期服用均有一些較嚴重的不良反應，影響這些疾病的治療，目前急需尋找一些副作用少的，可以長期服用的保健食品，或藥品，解決這些疾病的治療難題。發明內容由廣東華南藥業有限公司生產，由蒲黃，赤芍，鬱金，天麻，漏蘆五種中藥組成的腦栓通膠囊(國藥準字Z20040093)，對單胺氧化酶B有明顯抑制的藥理學作用，可用於治療單胺氧化酶B活性高導致的各組臨床疾病，如抑鬱症，老年性痴呆和帕金森氏綜合症等疾病。實施例一腦栓通膠囊對痴呆小鼠腦組織單胺氧化酶B的影響
I材料和方法I. I實驗動物昆明小鼠36隻，雌雄各半，體重18 22g，由廣州穗北實驗動物技術有限公司提供，合格證號SCXK(京)2002-0003。動物適應性飼養I周后，開始正式實驗。I. 2藥品與試劑腦栓通膠囊(O. 4g/粒)，由廣東華南藥業集團有限公司提供(批准文號國藥準字Z20040093，產品批號100101)，由蒲黃、赤芍、鬱金、天麻、漏蘆五味中藥組成。吡拉西坦片(O. 4g)，由廣東華南藥業集團有限公司提供(批准文號國藥準字H44020779)。D-半乳糖(20100105349，Amresco公司)，單胺氧化酶B試劑盒(南京建成生物工程研究所)，HE染液試劑盒(南京建成生物工程研究所)，其它試劑為市售分析純(天津市大茂化學試劑廠提供)。
I. 3 儀器Leica 石臘切片機(Leica2I55, Ieica 公司)；顯微鏡(Nikon eclipse 80i,Japan) JJ500型電子分析天平(MC，江蘇常熟市雙傑測試儀器廠)；酶標儀(Biotek，USA);離心機(eppendorf, centrifuge 5810 R);遊潤混合器(Maxi mix II, Barnstead/Thermolyne);微量移液器；電熱恆溫鼓風乾燥箱(GZX-9070MBE，上海博迅實業有限公司醫療設備廠)；智能水浴鍋(ZKSY-6，鞏義市予華儀器有限責任公司)；微量Dounce手動勻漿器；超純水系統(MILLIPORE QB，美國)。I. 4 方法將36隻小鼠隨機均分為正常對照組(η = 10)、模型組(η = 10)、腦栓通膠囊組(η = 10)和陽性對照腦復康組(η = 6)。模型組、腦栓通膠囊組、腦復康組每天皮下注射D-半乳糖(120mg/kg)，連續注射6周，每周稱重一次。正常對照組每天皮下注射同等體積的生理鹽水。模型對照組與正常對照組每天灌胃生理鹽水，腦栓通膠囊組每天灌胃I. 35粒/kg-ld-Ι，腦復康組0.36g/kg*d-l。於造模給藥第42天，眼球取血處死動物。在4°C冰浴條件下迅速取腦，去除嗅球、小腦及腦幹，生理鹽水清洗後濾紙吸乾於電子分析天平稱重，記錄腦總重量。分開左右腦，右腦放置於密封袋中置冰箱中保存待測生化指標，左腦泡10 %中性福馬林固定待腦切片觀察海馬形態改變。稱右腦加9倍冰生理鹽水製成10%腦勻漿備用，並按照南京建成生物工程研究所單胺氧化酶B試劑盒說明用酶標儀測定腦組織的單胺氧化酶B活性。4d後取左腦海馬常規脫水、透明、浸蠟、石蠟包埋，冠狀切片，片厚5 μ m,制好片於60°C烘烤Ih後HE染色，染色方法按照南京建成生物工程研究所HE染液試劑盒說明書進行染色。染好色後顯微鏡觀察不同倍數下海馬的組織學改變，本實驗選取海馬CA1、CA2、CA3及齒狀回各區進行形態學觀察。I. 5統計學處理使用SPSS軟體進行分析，數據用均數土標準差(X土s)表示，組間比較用t檢驗，以P < O. 05為差異有統計學意義。2 結果2. I腦栓通膠囊對小鼠體重的影響腦栓通膠囊對小鼠體重的影響見表I :表I腦栓通膠囊對小鼠體重的影響組別第I周(g) 第2周(g) 第3周(g) 第4周(g)第5周(g)第6周(g)
止常組29. 43±3. 63 28. 46±2. 57 29. 24±3. 12 29. 5±3. 13 29. 69±3. 14 29. 69±3. 29
模型組28. 5±2. 59 27. 52±3. 17 27. 03±3. 62 27. 39±2. 95 27. 76±2. 66 28. 15±2. 39
腦栓通膠囊組 30. 99 + 4. 24 31. 46±4. IIa 30. 64土4. 31A 30. 04士3. 69 29. 49±3. 57 30. 58±3· 06腦復康組 31. 09±3. 77 30·51±3. 65 30. 03±3. 74 30. 17±3. 51 30. 72±4. 07 29. 51±4. 33注*與正常組比較，P < O. 05 ;厶與模型組比較，P < O. 05，；**與正常組比較，P
<O. 01，△△與模型組組比較，P < O. 01。由表I的結果可見，正常組前2周體重輕度下降，第3周開始體重有所回升並趨於平衡。模型組前3周體重下降較明顯，第4周開始體重有所回升但不明顯，整個給藥期間這 一組的體重都比其它組輕。腦栓通膠囊組前2周體重上升，第3周開始至第5周體重下降得較明顯，其間與模型組比較體重有增加的趨勢，第六周開始體重有所回升。腦復康組體重變化不大，整個實驗過程在Ig範圍內波動。2. 2腦栓通膠囊對小鼠腦總重量的影響腦栓通膠囊對小鼠腦總重量的影響表2 表2腦栓通膠囊對小鼠腦總重量的影響(x±S)
組別例數(只)劑量腦組織的總重量(g)
正常組10 —.O. 3±0.02
模型組10 -O, 28 士 0.017*
腦栓通膠囊組101.35 粒/Icg1Cl1O. 297土0·016Λ
腦復康組' 60.36g I kg*d-l0.29±0.018注*與正常組比較，P < O. 05 ;厶與模型組比較，P < O. 05，；**與正常組比較，P
<O. 01，ΛΛ與模型組組比較，P < O. 01。由表2可見，模型組腦重減輕，與正常組比較有顯著差異(P <0.05);經腦栓通膠囊治療後腦重增加，與模型組比較有顯著差異(P <0.05);腦復康組與正常組、模型組比較未見顯著差異。2. 3腦栓通膠囊對實驗小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響腦栓通膠囊對實驗小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響表3 表3腦栓通膠囊對實驗小鼠腦勻漿單胺氧化酶B的影響(X土S)
權利要求
1.腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑鬱症，老年性痴呆和帕金森氏綜合症的應用。
全文摘要
本發明涉及一組中藥複方在臨床上的應用，該中藥複方是由蒲黃，赤芍，鬱金，天麻，漏蘆五種中藥組成的腦栓通膠囊，該中藥複方腦栓通膠囊作為單胺氧化酶B抑制劑在臨床治療抑鬱症，老年性痴呆和帕金森氏綜合症的應用。實驗研究證明腦栓通膠囊對單胺氧化酶B的活性有明顯的抑制作用，可以作為單胺氧化酶B抑制劑用於預防和治療憂鬱症，帕金森氏病和老年性痴呆等疾病。
文檔編號A61P25/24GK102824597SQ20121018336
公開日2012年12月19日 申請日期2012年5月24日 優先權日2012年5月24日
發明者吳鐵, 盧旱雲, 崔燎, 鄭志明 申請人:廣東醫學院, 湛江廣醫醫藥科技開發有限公司