一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌dy3菌株漚麻製備黃麻纖維的方法
2023-06-06 18:59:31
一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌dy3菌株漚麻製備黃麻纖維的方法
【專利摘要】本發明涉及一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株漚麻製備黃麻纖維的方法，包括：(1)將保存的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株於牛肉膏蛋白腖培養基中培養，添加凍存緩衝液；(2)在黃麻麩皮培養基中接入步驟(1)所得的菌一環，搖瓶培養；(3)將步驟(2)所得的培養基接種入黃麻麩皮發酵培養基，搖瓶培養得到發酵菌液；(4)製作漚麻池；(5)將步驟(3)中製備的發酵菌液使用噴淋法送入漚麻池做漚麻處理，漚麻後製得黃麻纖維。本發明工藝簡單、生產流程短、適合大規模工業化生產。
CGMCC No.9121
2014.05.04
【專利說明】一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株漚麻製備黃麻纖維 的方法
【技術領域】
[0001] 本發明屬於慪麻領域，特別涉及一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備 黃麻纖維的方法。
【背景技術】
[0002] 麻是紡織原料之一，其品種主要有亞麻、薴麻、大麻、紅麻、黃麻、羅布麻、劍麻、蕉 麻、蕁麻和苘麻等。麻纖維是從各種麻植物取得的纖維的統稱，具有吸溼、透氣、散熱和抗菌 等其他天然纖維無法比擬的優點。我國作為世界上麻類資源最豐富的國家之一，每年生產 的麻纖維及其製品除滿足國內市場的需求，還作為大宗商品出口美國、西歐及東南亞國家， 年均創匯近百億美元。在國家節能減排政策和消費者回歸自然、追求綠色的消費觀念推動 下，麻類纖維綠色加工技術已經成為紡織領域的研究熱點。
[0003] 慪麻利用細菌和水分對植物的作用，溶解或腐蝕包圍在韌皮纖維束外面的大部分 蜂窩狀結締組織和膠質，從而促使纖維與麻莖分離的加工過程。在廣泛應用的水慪法中，麻 莖浸沒在水中，水滲透到麻莖的中央部分，使內部細胞膨脹，脹破最外層，從而增加對水分 和細菌的吸收。慪麻法是生產優質纖維的加工工藝，慪麻過程的菌種選擇是慪麻的關鍵。
【發明內容】
[0004] 本發明所要解決的技術問題是提供一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻 製備黃麻纖維的方法，該方法簡單、生產流程短、適合大規模工業化生產。
[0005] 本發明的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的方法，包 括：
[0006] (1)將保存的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株於牛肉膏蛋白腖培養基中培養，添加 凍存緩衝液；
[0007] (2)在黃麻麩皮培養基中接入步驟（1)所得的菌一環，搖瓶培養；菌一環的加入量 為每IOOOml菌液加入200mg ;
[0008] (3)將步驟（2)所得的培養基接種入黃麻麩皮發酵培養基，搖瓶培養得到發酵菌 液；
[0009] (4)製作慪麻池；
[0010] (5)將步驟（3)中製備的發酵菌液使用噴淋法送入慪麻池做慪麻處理，慪麻後制 得黃麻纖維。
[0011] 所述步驟⑴中的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株的16Sr DNA序列如SEQ ID NO: 1 所示。
[0012] 所述步驟⑴中的牛肉膏蛋白腖培養基的組成為：每IOOOml培養基包括牛肉膏 3g、蛋白腖10g、氯化鈉5g和水1000ml。
[0013] 所述步驟（1)中的凍存緩衝液的組成為：每IOOml凍存緩衝液包括甘油50ml和水 50ml ;加入量為每IOOOml菌液加入lml。
[0014] 所述步驟（1)中的菌株保存條件為-80°c，pH自然；培養條件為37°C，pH自然，培 養時間12小時。
[0015] 所述步驟（2)中的黃麻麩皮培養基的組成為：每IOOOml培養基包括黃麻皮200g， 麩皮50g，麥芽汁50ml和水950ml ;步驟（3)中的黃麻麩皮發酵培養基的組成為：每1000ml 培養基包括黃麻皮l〇〇g，麩皮l〇〇g，麥芽汁200ml和水800ml，接種量為每IOOOml菌液接種 入30L黃麻麩皮發酵培養基。
[0016] 所述步驟⑵和（3)中的培養條件為37°C，pH自然，培養時間24小時。
[0017] 所述步驟（4)中的慪麻池的麻趟間距為15-20釐米，麻層厚度為2-2. 5釐米。
[0018] 所述步驟（5)中的慪麻條件為自然溫度（約20-30攝氏度），pH自然，慪麻時間 10-20天；噴淋法的工藝具體為每48小時向慪麻區域噴灑菌液6?10ml。
[0019] 所述步驟（5)中的製得的黃麻纖維應用於製作麻袋、麻布、造紙、繩索、織地毯或 窗簾。
[0020] 本發明所採用的米氏硫胺素芽孢桿菌（Aneurinibacillus migulanus)DY3菌株的 保藏號為CGMCC No. 9121，保藏日為2014年5月4日，建議分類命名為：米氏硫胺素芽孢杆 菌（Aneurinibacillus migulanus),保藏單位名稱：CGMCC中國微生物菌種保藏管理委員 會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究 所。
[0021] 根據16sR DNA測序Blast及聚類分析結果，該菌與米氏硫胺素芽孢桿菌相似性為 99%，結合鏡檢分析，命名此菌株為米氏硫胺素芽孢桿菌（Aneurinibacillus migulanus) DY3菌株。16S rDNA測序中，所採用的正向引物27F，反向引物1492R，均為國際通用引物， 由上海生工生物工程技術服務有限公司合成。
[0022] 該菌株培養條件粗放，耐熱性好，生長繁殖快，可以有效去除黃麻纖維中的非纖維 素膠質，且酶活穩定，菌、酶均無毒性。該菌株及培養系統能夠直接用於黃麻慪麻。
[0023] 有益效果
[0024] (1)本發明所採用的菌株及培養系統，經檢測能夠直接用於黃麻慪麻，具有慪麻周 期短，慪麻效果良好等特點，菌種不易被汙染，處理成本低，纖維質量好，慪麻條件溫和，抗 汙染能力強，耐熱性能好，無環境汙染等優點；
[0025] (2)本發明的製備方法具有工藝簡單、適合大規模工業化生產等特點；利用該體 系進行亞麻脫膠具有慪麻時間短視天氣情況，一般可縮短2-3天（正常收穫季節）等特點。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0026] 圖1為本發明所用菌株顯微鏡染色照片（油鏡）；
[0027] 圖2a_j為本發明採用引物27F產生的細菌DNA圖譜；
[0028] 圖3a_k為本發明採用引物1492R產生的細菌DNA圖譜。
【具體實施方式】
[0029] 下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明 而不用於限制本發明的範圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之後，本領域技術人 員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附權利要求書所限定 的範圍。
[0030] 實施例1
[0031] 慪麻時間據黃麻收穫時間定，一般為9月中下旬至10月中下旬。
[0032] 慪麻方法：
[0033] (1)將保存的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株於牛肉膏蛋白腖培養基（每IOOOml培 養基包括牛肉膏3g、蛋白腖10g、氯化鈉5g和水1000ml)中培養，添加凍存緩衝液（每IOOml 凍存緩衝液包括甘油50ml和水50ml)，培養條件為37°C，pH自然，培養時間12小時；
[0034] (2)在黃麻麩皮培養基（每IOOOml培養基包括黃麻皮200g，麩皮50g，麥芽汁50ml 和水950ml) 1000ml中接入菌一環，搖瓶培養，培養條件為37°C，pH自然，培養時間24小時；
[0035] (3)將培養基接種入黃麻麩皮發酵培養基（每IOOOml培養基包括黃麻皮100g，麩 皮l〇〇g，麥芽汁200ml和水800ml)，搖瓶培養得到發酵菌液，培養條件為37°C，pH自然，培 養時間24小時；
[0036] (4)慪麻池的準備：用4HB-800型黃麻剝皮機將鮮皮從黃麻全杆中分離出來（韌 皮部因機械擠壓、打板擊打已造成許多傷口，利於脫膠菌入侵，但不破壞纖維）；尾部端齊 (以洗麻時能甩得動為度，20根左右為一把），稍部攏齊、直，順折成三至四層（慪麻池深度 相仿，浸水時正好淹沒麻把）或對摺，每把麻中部靠尾處用鮮皮扎把，把與把之間用扎把的 鮮皮連接，按順序排列、排緊；一般每個慪麻池均分批投放，便於分批洗麻；投放好麻把後 然後將麻把全部壓入水中，基本上不露出水面為宜。最後用厚型塑料薄膜（透明）將全部 麻把蓋住，再壓緊塑料薄膜，以防麻皮離水。麻趟間距15-20釐米。麻層厚度一般在2-2. 5 釐米為宜。
[0037] (5)將製備的發酵菌液使用噴淋法入慪麻池做慪麻處理，慪麻後製得可供紡織制 品用黃麻纖維，慪麻條件為自然溫度，pH自然；噴淋法的工藝具體為每48小時向慪麻區域 噴灑菌液8ml。
[0038] 完成慪制時間：視氣溫定，一般9月中下旬至10月中下旬，慪制時間逐漸延長，若 氣溫變化不大，則慪制時間基本相同。在黃麻正常收穫季節約為10-20天。
【權利要求】
1. 一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的方法，包括： (1) 將保存的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株於牛肉膏蛋白腖培養基中培養，添加凍存 緩衝液； (2) 在黃麻麩皮培養基中接入步驟（1)所得的菌一環，搖瓶培養； (3) 將步驟（2)所得的培養基接種入黃麻麩皮發酵培養基，搖瓶培養得到發酵菌液； (4) 製作慪麻池； (5) 將步驟（3)中製備的發酵菌液使用噴淋法送入慪麻池做慪麻處理，慪麻後製得黃 麻纖維。
2. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維 的方法，其特徵在於：所述步驟（1)中的米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株的16Sr DNA序列如 SEQ ID N0:1 所示。
3. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的 方法，其特徵在於：所述步驟（1)中的牛肉膏蛋白腖培養基的組成為：每1000ml培養基包 括牛肉膏3g、蛋白腖10g、氯化鈉5g和水1000ml。
4. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的 方法，其特徵在於：所述步驟（1)中的凍存緩衝液的組成為：每l〇〇ml凍存緩衝液包括甘油 50ml和水50ml ;加入量為每1000ml菌液加入lml。
5. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維 的方法，其特徵在於：所述步驟（1)中的菌株保存條件為_80°C，pH自然；培養條件為37°C， pH自然，培養時間12小時。
6. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的 方法，其特徵在於：所述步驟（2)中的黃麻麩皮培養基的組成為：每1000ml培養基包括黃 麻皮200g，麩皮50g，麥芽汁50ml和水950ml ;步驟（3)中的黃麻麩皮發酵培養基的組成為： 每1000ml培養基包括黃麻皮100g，麩皮100g，麥芽汁200ml和水800ml，接種量為每1000ml 菌液接種入30L黃麻麩皮發酵培養基。
7. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的 方法，其特徵在於：所述步驟（2)和（3)中的培養條件為37°C，pH自然，培養時間24小時。
8. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維的 方法，其特徵在於：所述步驟（4)中的慪麻池的麻趟間距為15-20釐米，麻層厚度為2-2. 5 釐米。
9. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖維 的方法，其特徵在於：所述步驟（5)中的慪麻條件為自然溫度，pH自然，慪麻時間10-20天； 噴淋法的工藝具體為每48小時向慪麻區域噴灑菌液6?10ml。
10. 根據權利要求1所述的一種利用米氏硫胺素芽孢桿菌DY3菌株慪麻製備黃麻纖 維的方法，其特徵在於：所述步驟（5)中的製得的黃麻纖維應用於製作麻袋、麻布、造紙、繩 索、織地毯或窗簾。
【文檔編號】C12R1/01GK104293693SQ201410333923
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年7月14日 優先權日:2014年7月14日
【發明者】丁若垚, 郭營, 鬱崇文, 張興群 申請人:東華大學